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鳕鱼源金属螯合肽体外模拟胃肠消化稳定性研究

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现代食品科技 2016年第7期32卷 33-38页

作者：杜芬侯虎赵玉然赵雪张朝辉李八方中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266003 山东出入境检验检疫局山东青岛266003

为了评价鳕鱼皮胶原蛋白源金属螯合肽,Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg(多肽M),的胃肠消化耐受性,建立体外模拟胃肠消化模型(SGID),该模型包括模拟人体中胃消化环境和肠消化环境两个阶段。多肽M的钙螯合率为0.88±0.02μg/mg,铁螯合率为33.... 详细信息

为了评价鳕鱼皮胶原蛋白源金属螯合肽,Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg(多肽M),的胃肠消化耐受性,建立体外模拟胃肠消化模型(SGID),该模型包括模拟人体中胃消化环境和肠消化环境两个阶段。多肽M的钙螯合率为0.88±0.02μg/mg,铁螯合率为33.67%。胃消化产物S,钙螯合率为0.87±0.03μg/mg,与纯肽相比钙螯合率下降1.14%;铁螯合率为33.72%,与纯肽相比反而上升0.05%。肠消化产物D,钙螯合率为0.85±0.01μg/mg,与纯肽相比下降3.40%;铁螯合率为34.13%,与纯肽相比上升0.46%。利用反相高效液相色谱、质谱和圆二色谱技术,发现经过两个阶段多肽M分子量未发生变化,肽键未发生断裂,构象发生变化,其中无规卷曲减少,β折叠和β转角构象增加。因此,多肽M在体外模拟胃肠消化过程中其多肽链氨基酸组成不变,空间构象发生改变,钙铁离子螯合能力变化不大,体外模拟胃肠消化耐受性高。

关键词：鳕鱼金属螯合肽体外模拟胃肠消化稳定性

南极磷虾金属螯合肽蛋白基料的酶解制备工艺优化

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食品科技 2020年第7期45卷 159-165页

作者：孙如男冷凯良高华刘小芳中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部极地渔业开发重点实验室山东青岛266071 青岛大学药学院山东青岛266021 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266200

建立南极磷虾金属螯合肽蛋白基料制备工艺,拓展南极磷虾蛋白资源应用领域。以脱脂南极磷虾粉为底物,以酶解产物的水解度及Zeta电位为指标,从5种蛋白酶中筛选确定制备南极磷虾金属螯合肽蛋白基料的最优酶为胰蛋白酶;通过单因素试验和响... 详细信息

建立南极磷虾金属螯合肽蛋白基料制备工艺,拓展南极磷虾蛋白资源应用领域。以脱脂南极磷虾粉为底物,以酶解产物的水解度及Zeta电位为指标,从5种蛋白酶中筛选确定制备南极磷虾金属螯合肽蛋白基料的最优酶为胰蛋白酶;通过单因素试验和响应面试验优化确定最佳工艺条件为:酶解时间2.75 h、加酶量2.50%、料液比为1:3,该条件下蛋白水解度(14.16±0.43)%,与理论值基本一致。酶解产物的Zeta电位(—29.83±0.66)mV,相对分子质量主要分布于3000 u以下,具有金属离子结合能力的氨基酸占总氨基酸的(31.91±0.45)%,是制备南极磷虾金属螯合肽的良好蛋白基料。研究将为南极磷虾蛋白资源的高效精准利用提供科学指导。

关键词：南极磷虾金属螯合肽蛋白基料 Zeta电位响应面优化

乌骨鸡金属螯合肽的分离纯化及其金属螯合、抗氧化活性研究

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乌骨鸡金属螯合肽的分离纯化及其金属螯合、抗氧化活性研究

作者：沈刚南昌大学

学位级别：硕士

泰和乌骨鸡是我国传统滋补鸡种,其药用价值已经被前人所证实,如人们熟知的“乌鸡白凤丸”就是以乌骨鸡作为主要成分。乌骨鸡有补血、益阴的功效,作为食品安全性高,易被人们接受。目前乌骨鸡大多用于日常简单烹食,其工业化产品较单一,其... 详细信息

泰和乌骨鸡是我国传统滋补鸡种,其药用价值已经被前人所证实,如人们熟知的“乌鸡白凤丸”就是以乌骨鸡作为主要成分。乌骨鸡有补血、益阴的功效,作为食品安全性高,易被人们接受。目前乌骨鸡大多用于日常简单烹食,其工业化产品较单一,其营养和补益价值有待更进一步地研究和开发。矿物元素在自然界机体中的过载与缺乏均对机体有较大的影响。Fe2+是人体合成血红蛋白必不可少的矿物元素;Cu2+作为生物体中重要微量元素之一,是许多活性酶的组成成分。金属螯合肽是一类可以与金属离子发生螯合反应的多肽物质,金属螯合肽在肠道内可借助多肽吸收转运途径,起到促进矿物元素吸收的作用,还有调节免疫、抗氧化、抑菌性、降血糖、血脂等多种生物活性。本文综合应用现代食品分离技术、现代仪器分析等方法,以Fe2+螯合活性为导向对乌骨鸡多肽FBP35进行分离、纯化研究,优化分离条件,并对各分离组分的基本理化性质及其体外金属螯合、抗氧化活性进行研究,为乌骨鸡深度开发提供理论基础和科学依据,有助于促进乌骨鸡产业的发展,提高乌骨鸡产品附加值。本文主要研究结果概括如下:1.通过树脂静态吸附实验,考察了 5种型号树脂对乌骨鸡多肽FBP35吸附能力、解吸率及未吸附组分Fe2+螯合能力,优选出003号树脂为最佳分离介质、其对FBP35单位吸附能力达到55.88 mg/g,单位解吸能力达到54.22 mg/g,003号树脂未吸附组分Fe2+半数螯合浓度（IC50）为4.89 mg/mL,其综合吸附性能明显强于其他4种树脂,则确定003号树脂为FBP35动态洗脱树脂;2.研究003号树脂对乌骨鸡多肽FBP35的动态洗脱:分别以1号溶剂、25%、50%、75%含量的2号溶剂洗脱液对FBP35进行依次洗脱,确定1号溶剂洗脱组分FBP358收率达到67.3%;FBP358Fe2+半数螯合浓度（IC50）为4.00 mg/mL,较原液FBP35的Fe2+螯合活性提高了 1.8倍;3.通过2号溶剂对FBP358进行分级纯化,并获得7个分离组分,各组分收率依次为 FBP3584（2.03%）、FBP3585（19.08%）、FBP3586（24.51%）、FBP3587（19.62%）、FBP3588（7.94%）、FBP3589（5.97%）、FBPsQ（20.86%）,且各组分 Fe2+半数螯合浓度:FBP358（IC50=4.00 mg/mL）、FBP3584（IC50=0.59 mg/mL）,FBP3585（IC50=3.22 mg/mL）,FBP3586（IC50=3.72 mg/mL）,FBP3587（IC50=4.32mg/mL）,FBP3588（IC50=5.23 mg/mL）,FBP3589（IC50=7.21 mg/mL）,FBPsQ（IC50=6.56 mg/mL）,FBP3584组分的Fe2+螯合活性最佳,较FBP358的Fe2+螯合活性提高了 6.78倍;FBP3 5 84、FBP3585、FBP3586、FBP3587四个组分的总含量占比为65.25%,四个组分对FBP358的Fe2+螯合活性贡献率为82%,采用70%含量2号溶剂沉淀FBP358可以得到82%的Fe2+活性效能和65%多肽物质,分离产物的Fe2+螯合活性提高了1.4 倍;4.利用福林酚法测定FBP35、FBP358、FBP642蛋白质含量,结果表明:蛋白含量依次为 FBP35（812.62 mg/g）、FBP358（946.91 mg/g）、FBP642（702.06mg/g）,FBP35经003号树脂分离后,FBP358蛋白纯度较FBP35提高了 1.17倍,FBP642蛋白纯度较FBP35降低了 13.62%,表明003号树脂可以吸附FBP35中的非蛋白成分,从而提高FBP358的金属螯合肽纯度;5.通过对 FBP3584、FBP358、FBP642 氨基酸组成分析,发现:FBP3584、FBP358和FBP642均含有16种氨基酸,三种肽的必需氨基酸和鲜味氨基酸差异不显著;FBP642的芳香族氨基酸含量比较高;FBP358、FBP642、FBP3584疏水氨基酸含量占比分别为32.61%、40.05%、36.05%;亲水性氨基酸分别为59.56%、56.37%、60.07%;Fe2+螯合能力最强组分FBP3584中与Fe2+螯合能力呈正相关的谷氨酸、天冬氨酸百分比含量分别为18.26%、13.69%,显著高于FBP358和FBP642;6.通过高效液相凝胶色谱法考察乌骨鸡多肽FBP358及其各分离组分的分子量大小和分子量分布,结果表明:各分离组分中分子量1000 Da以下的低聚肽超过90%以上,均属于易被人体吸收的小分子肽;随着溶剂浓度的增加,分级沉淀组分中小分子肽含量显著增加,表明分级沉淀法可将FBP358根

关键词：乌骨鸡金属螯合肽分离纯化大孔树脂铁离子螯合活性抗氧化

金属螯合肽分离纯化及其抗氧化活性的研究进展

同方学位论文库评论

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中国食物与营养 2016年第3期22卷 35-39页

作者：李雪芬杜斌丁轲韩涛北京农学院食品科学与工程学院北京102206

综述了金属螯合肽的来源、分离纯化及构效关系,分析了金属螯合肽抗氧化活性的相关研究进展,并展望了金属螯合肽的发展前景。

关键词：金属螯合肽分离纯化构效关系抗氧化活性

基于Caco-2细胞模型评价鳕鱼源钙、铁螯合肽促钙、铁转运吸收特性

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中国食品学报 2018年第4期18卷 51-57页

作者：杜芬侯虎姜丹丹吴汶飞李八方中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266003

鳕鱼皮胶原蛋白源金属螯合肽Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg(多肽M)具有较高的钙、铁螯合活性,钙螯合率为(12.48±3.14)nmol/μmol,铁螯合率为33.67%±0.11%。为研究多肽M对钙、铁离子在人体肠道内转运吸收的影响,建立Caco-2细胞模型。设... 详细信息

鳕鱼皮胶原蛋白源金属螯合肽Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg(多肽M)具有较高的钙、铁螯合活性,钙螯合率为(12.48±3.14)nmol/μmol,铁螯合率为33.67%±0.11%。为研究多肽M对钙、铁离子在人体肠道内转运吸收的影响,建立Caco-2细胞模型。设定多肽M的质量浓度梯度为0.2,0.3,0.3,0.4,0.5,0.6 mg/m L,分别于0,30,60,90,120 min取样测定。结果表明,多肽M的质量浓度低于0.2 mg/m L,对钙、铁离子转运吸收量影响不大。多肽M的质量浓度为0.3~0.6 mg/m L,随着多肽质量浓度的增大,钙、铁离子转运吸收速率逐渐增大。多肽M的质量浓度从0.5 mg/m L增至0.6 mg/m L,钙、铁离子最终转运吸收量变化不显著。钙、铁离子浓度一定,0~90 min内钙、铁离子转运吸收速率较快,90~120 min内钙、铁离子转运吸收速率较慢。多肽M的质量浓度在0.3~0.5 mg/m L范围时,多肽M促钙、铁离子转运吸收呈浓度依赖性,且多肽M的质量浓度为0.5 mg/m L时,钙、铁离子转运吸收量达到峰值,其中钙离子转运量和吸收量分别为(8.12±0.26)μg/mg和(4.76±0.31)μg/mg,铁离子转运量和吸收量分别为(6.81±0.21)μg/mg,(2.24±0.23)μg/mg。

关键词： Caco-2细胞鳕鱼金属螯合肽转运吸收

细菌表面展示技术及其在环境重金属污染修复中的意义

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生态与农村环境学报 2006年第4期22卷 74-79页

作者：路延笃黄巧云陈雯莉李林华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

从细菌表面展示系统构成、载体蛋白的选择和细菌表面展示策略等方面综述了细菌表面展示技术及其发展,分析了它们的优缺点,指出了细菌表面展示技术用于重金属污染修复存在的问题,提出了解决问题的思路和方法。

关键词：细菌表面展示重金属修复金属螯合肽吸附

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乳清蛋白源铜螯合肽抗氧化活性评价

食品与发酵工业 2022年第12期48卷 220-225页

作者：周桐同郭皓欧艳曦张清华袁帅杨文钦丁琳藏传刚关宏佳木斯大学药学院黑龙江佳木斯154007 齐齐哈尔医学院微生态工程技术研究中心黑龙江齐齐哈尔161006

对以脱盐乳清蛋白粉为原料的乳杆菌A-2代谢产物中铜离子螯合活性多肽进行分离纯化并进行其抗氧化活性的评价。采用铜离子固定化金属离子亲和层析柱分离,筛选具有铜离子螯合活性多肽,得组分F1、F2、F3,分别经Sephadex G-15凝胶过滤柱层... 详细信息

对以脱盐乳清蛋白粉为原料的乳杆菌A-2代谢产物中铜离子螯合活性多肽进行分离纯化并进行其抗氧化活性的评价。采用铜离子固定化金属离子亲和层析柱分离,筛选具有铜离子螯合活性多肽,得组分F1、F2、F3,分别经Sephadex G-15凝胶过滤柱层析经进行脱盐分离,得到组分F1-1、F1-2、F2-1、F2-2、F3-1、F3-2,采用ABTS法与抗氧化指数(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)法进行抗氧化活性测定,组分F2-1的清除ABTS阳离子自由基能力IC_(50)值为(3.068±0.15)g/L,组分F3-1的清除ABTS阳离子自由基能力IC_(50)值为(5.510±1.56)g/L;组分F2-1的相对ORAC值为(1246.59±0.72)μmol TE/g,组分F3-1的相对ORAC值为(518.83±1.15)μmol TE/g。组分F2-1、F3-1与铜离子螯合率分别为(59±1.45)%和(6±0.32)%。结果表明,组分F2-1、F3-1具有铜螯合活性组分,具有良好的抗氧化活性。该实验为合理开发乳清蛋白,提供了有效依据。

关键词：乳清蛋白肽金属螯合肽分离纯化亲和层析抗氧化性

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硅藻指示水体金属污染研究进展

水生态学杂志 2016年第1期37卷 1-8页

作者：彭焘李杰广西天德环保咨询有限公司南宁541003 中南大学生命科学学院长沙410013

金属元素进入水体后,威胁水体安全,水生生态系统功能受损。常规的金属离子浓度测试,反应了金属污染强度,但不能反应金属污染对当地生态系统的影响,因此,建立金属污染生物指示系统至关重要。硅藻是水生生态系统中的重要初级生产者,因其... 详细信息

金属元素进入水体后,威胁水体安全,水生生态系统功能受损。常规的金属离子浓度测试,反应了金属污染强度,但不能反应金属污染对当地生态系统的影响,因此,建立金属污染生物指示系统至关重要。硅藻是水生生态系统中的重要初级生产者,因其种类多、代时短、对环境因子敏感,在发达国家已广泛应用于常规水质监测。在金属胁迫下,硅藻在单个细胞水平与群落结构水平产生应答,基于此发展了一系列指标如生物量、指示物种、群落结构多样性、硅藻畸形率、植物螯合肽等应用于指示金属污染。对近几年硅藻应用于金属污染指示取得的进展予以综述,并提出系统性整合各项指示技术,根据室内与野外模拟结果分配各项指标权重,将是应用硅藻指示水体金属污染的重要途径。

关键词：硅藻金属污染指示物种多样性金属螯合肽