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中国老年学杂志 2012年第19期32卷 4145-4147页

作者：颜伟荆州市中心医院胃肠外科湖北荆州434100

目的检测胃癌中PTEN和LC3B的表达,探讨其表达的临床意义及关系。方法本实验以70例胃癌标本作为观察组,56例正常胃黏膜组织作为对照组,应用量子点免疫荧光方法检测二组中PTEN和LC3B的表达,探讨其表达差别及相关性。结果观察组中PTEN的表... 详细信息

目的检测胃癌中PTEN和LC3B的表达,探讨其表达的临床意义及关系。方法本实验以70例胃癌标本作为观察组,56例正常胃黏膜组织作为对照组,应用量子点免疫荧光方法检测二组中PTEN和LC3B的表达,探讨其表达差别及相关性。结果观察组中PTEN的表达明显低于对照组,观察组中LC3B的表达明显高于对照组,观察组中PTEN和LC3B的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移和Ki67的表达有关。相关性分析显示观察组中PTEN和LC3B的表达不具有相关性。结论胃癌PTEN和LC3B异常表达,二者对病变进展具有重要作用。

关键词：胃癌 PTEN LC3B 量子点免疫荧光

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芝麻过敏原生物信息学分析与检测方法的建立

芝麻过敏原生物信息学分析与检测方法的建立

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作者：令狐晓盼天津科技大学

学位级别：硕士

食物过敏性疾病是当前全球重大公共卫生问题之一,受食物过敏疾病影响的人数呈上升趋势。所以关于芝麻过敏原的研究变得尤为重要,比如用生物学信息预测芝麻过敏原的结构,为理论研究提供依据,从而可以有效预防过敏,或者建立快速灵敏的检... 详细信息

食物过敏性疾病是当前全球重大公共卫生问题之一,受食物过敏疾病影响的人数呈上升趋势。所以关于芝麻过敏原的研究变得尤为重要,比如用生物学信息预测芝麻过敏原的结构,为理论研究提供依据,从而可以有效预防过敏,或者建立快速灵敏的检测方法来检测食品中的芝麻,这样可以起到监测作用。首先通过盐提法提取白芝麻中全蛋白,对芝麻过敏原的致敏性进行了研究,发现水煮处理可以降低芝麻蛋白的溶解度及抗原性,ELISA的检出率为70.67%,BCA试剂盒检出率为63.40%。而高温高压则对其没有影响。烘烤和微波可以适当降低芝麻蛋白的溶解度和抗原性。由于这些处理方式并不能有效降低芝麻过敏原的抗原性,所以经过深加工的含有芝麻蛋白的食品仍具有致敏风险,所以需要进一步对芝麻过敏原进行分析。然后通过计算机对芝麻过敏原(SA)的生物学信息进行分析。对芝麻过敏原和其他坚果类过敏原之间的同源性进行分析。之后对芝麻过敏原进行抗原表位预测,同时使用同源建模的方法预测芝麻蛋白的三维结构。拉式构图的结果表明三维结构的可信度较好,这为使用生物信息学方法模拟食物过敏原的抗原表位以及蛋白结构提供参考。最后建立了两种快速检测芝麻过敏原的免疫方法。一种是基于磁分离的胶体金免疫比色分析法。该方法的最佳检测条件为:磁球(MPMs)的最佳连接量为20μg,金标抗体(Au NPs-Ab)的添加量为6μL,最佳p H范围为5.5-7.4,优化的离子浓度在小于0.01 M时,均不会对实验造成影响。在此最优条件下,建立的标准曲线的体系吸光度变化值与芝麻过敏原浓度在50-800μg/L范围内呈良好的线性趋势,检测限(LOD)为45.529μg/L。之后建立了第二种基于磁分离荧光免疫分析法。经过优化,最佳工作条件为:磁球的最佳连接量为20μg,信号探针(QDs-Ab)的最佳添加量为60μL,样品的p H检测范围为5.5-8.5,优化的离子浓度均控制在小于0.01 M时,QDs不会发生衰变且不影响抗原抗体的结合。在此最优条件下,体系荧光强度变化值与芝麻浓度在80-640μg/L范围内呈良好的线性趋势,检测限(LOD)为75.426μg/L。

关键词：芝麻过敏原芝麻过敏原生物学信息芝麻过敏原单克隆抗体胶体金免疫比色量子点免疫荧光芝麻过敏原致敏性

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