检索结果-南通市图书馆

野鸢尾黄素通过YAP/β-catenin通路抑制胶质母细胞瘤的进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

野鸢尾黄素通过YAP/β-catenin通路抑制胶质母细胞瘤的进展

作者：徐佳韵杭州师范大学

学位级别：硕士

背景:胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是大脑中最常见的原发性恶性肿瘤,具有极强的侵袭性和多样性,5年生存期仅约5%。目前,对GBM的研究非常有限。由于血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的存在和免疫系统的抑制,使得GBM的治... 详细信息

背景:胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是大脑中最常见的原发性恶性肿瘤,具有极强的侵袭性和多样性,5年生存期仅约5%。目前,对GBM的研究非常有限。由于血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的存在和免疫系统的抑制,使得GBM的治疗也严重受限。患者通常需要包括手术、放疗和化疗在内的多种方法的组合治疗,但疗效不佳。替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)作为治疗GBM的一线化疗药物,因其耐药性引起的高复发率使得治疗效果有限。此外,针对GBM热门靶点开发的药物进展受阻。因此,探索高效和低毒的药物来治疗GBM将是提高患者生存期和改善预后的迫切需要。野鸢尾黄素作为一种异黄酮类化合物,具有潜在的抗GBM活性,但具体的药效和作用机制还需进一步研究。目的:迄今,野鸢尾黄素在GBM中的作用及其机制尚不清楚,本课题旨在探讨野鸢尾黄素对GBM的作用及YAP/β-catenin对GBM的调控机制。方法:(1)以C6和DBTRG细胞系为实验对象,通过细胞活力检测试剂盒(CCK8)检测GBM细胞的活性,采用平皿克隆、PH3细胞免疫荧光染色检测野鸢尾黄素对GBM细胞的增殖作用影响。(2)通过划痕实验和transwell实验检测野鸢尾黄素对GBM细胞的迁移作用的影响;采用q PCR检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9 m RNA表达水平的变化。(3)荧光染料碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色、流式细胞术、Cleaved-Caspase3细胞免疫荧光染色分别检测野鸢尾黄素对GBM细胞的周期和凋亡作用的影响,WB用于检测野鸢尾黄素对GBM细胞凋亡相关因子以及细胞周期蛋白的表达水平变化。(4)通过WB和免疫荧光检测野鸢尾黄素对YAP/β-catenin通路相关因子的蛋白表达水平影响。(5)通过分子对接技术研究野鸢尾黄素与YAP和β-catenin的相互作用,并分析它们之间的作用方式。(6)在GBM细胞系C6中构建YAP过表达细胞株,通过CCK8实验、划痕实验、transwell实验等研究YAP在野鸢尾黄素抑制GBM上发挥的重要作用。(7)在胶质瘤原位移植模型中采用小动物肿瘤成像,通过免疫组织化学染色等研究野鸢尾黄素在体内对GBM发挥的作用。结果:(1)设置不同药物浓度梯度,通过CCK8实验检测作用24 h和48 h的IC值。结果显示,野鸢尾黄素能呈剂量、时间依赖性地抑制GBM细胞增殖。PH3细胞免疫荧光染色,细胞克隆实验也表明IC浓度下野鸢尾黄素对GBM细胞增殖起显著的抑制作用。(2)流式细胞术和Western blot结果表明,野鸢尾黄素能够将GBM细胞阻滞在G2/M期。(3)流式细胞术,Western blot,C-C3细胞免疫荧光染色,PI染色结果显示野鸢尾黄素可以诱导GBM细胞凋亡。(4)划痕实验和transwell实验表明GBM细胞在IC浓度作用下,与对照组相比迁移能力降低。q-PCR实验结果表明MMP-2和MMP-9的m RNA表达水平下调,这也与迁移能力降低有关。(5)YAP细胞免疫荧光染色和Western blot结果表明野鸢尾黄素能够下调GBM中YAP信号的表达。同时Western blot结果也表明YAP通路相关信号分子的蛋白表达水平也发生了变化。(6)β-catenin细胞免疫荧光染色和Western blot结果表明野鸢尾黄素能够下调GBM细胞中β-catenin信号的表达。(7)CCK8实验、划痕、transwell、PH3染色和Western blot结果显示过表达YAP可以部分逆转野鸢尾黄素的抗GBM作用,证实YAP是野鸢尾黄素诱导GBM细胞死亡的关键靶点,且会引起下游β-catenin蛋白表达水平的变化。(8)分子对接结果也进一步证明了野鸢尾黄素与YAP和β-catenin具有很强的亲和力。(9)脑立体原位造模后小动物成像和免疫组织化学染色表明野鸢尾黄素可以通过抑制YAP/β-catenin信号在体内发挥抗GBM的作用。结论:我们的研究结果表明,野鸢尾黄素以时间、剂量依赖的方式抑制GBM细胞的增殖和迁移,将细胞周期阻滞在G2/M期,并诱导GBM细胞的凋亡。进一步研究发现,野鸢尾黄素处理降低了GBM细胞中YAP的表达,抑制了β-catenin信号传导。过表达YAP部分逆转了野鸢尾黄素对体外GBM细胞的抗肿瘤作用。最后,异种移植小鼠模型结果显示野鸢尾黄素通过拮抗YAP影响β-catenin的表达水平抑制GBM生长。以上结果表明,野鸢尾黄素通过抑制YAP/β-catenin信号传导发挥抗GBM的作用,为GBM的治疗提供了一种新的靶点。

关键词： GBM 野鸢尾黄素增殖迁移凋亡细胞周期阻滞 YAP β-catenin

RP-HPLC测定射干抗病毒注射液中野鸢尾黄素

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中成药 2005年第4期27卷 416-418页

作者：孙国祥万月生邓湘昱沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

目的:建立射干抗病毒注射液(射干、金银花、柴胡,等)中野鸢尾黄素的反相高效液相色谱分析方法.方法:色谱柱:Kromasil ODS(5μm,4.6mm×200mm),水-甲醇-乙腈(50:46,4,v/v)以磷酸调pH3.0为流动相,流速0.80mL·min-1,柱温(30.5±1)℃,于26... 详细信息

目的:建立射干抗病毒注射液(射干、金银花、柴胡,等)中野鸢尾黄素的反相高效液相色谱分析方法.方法:色谱柱:Kromasil ODS(5μm,4.6mm×200mm),水-甲醇-乙腈(50:46,4,v/v)以磷酸调pH3.0为流动相,流速0.80mL·min-1,柱温(30.5±1)℃,于265nm测定射干抗病毒注射液中野鸢尾黄素的含量.结果:野鸢尾黄素线性范围:0.0282～9.4μg(r=0.999 9),野鸢尾黄素对照品的进样精密度RSD为1.2%,对照品溶液在18 h内峰面积的RSD为0.72%,检测限(S/N=3)为3.2ng,定量限(S/N=10)为10.6ng,回收率为99.7%.结论:该方法简便、准确、无干扰,可用于测定射干抗病毒注射液中野鸢尾黄素的含量.

关键词：反相高效液相色谱法射干抗病毒注射液野鸢尾黄素

小儿咽扁颗粒中野鸢尾黄素和白射干素含量测定方法研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辽宁中医杂志 2015年第9期42卷 1733-1735页

作者：李锁张晓瑞尤献民邸子真李国信辽宁中医药大学辽宁沈阳110032 辽宁省中医药研究院辽宁沈阳110034

目的：建立小儿咽扁颗粒中野鸢尾黄素、白射干素含量的测定方法。方法：L9（34）正交设计优选供试液制备方法，采用XB—C19色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈（B）－0．1％磷酸水溶液（A）梯度洗脱，检测波长为265nm，流速为... 详细信息

目的：建立小儿咽扁颗粒中野鸢尾黄素、白射干素含量的测定方法。方法：L9（34）正交设计优选供试液制备方法，采用XB—C19色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈（B）－0．1％磷酸水溶液（A）梯度洗脱，检测波长为265nm，流速为1．0mL·min^-1，柱温为30℃。结果：野鸢尾黄素、白射干素分别在2．560×10^-2～0．6400μg（r=0．9995）和5．240×10^-3～0．130μg（r=1．0000）范围内线性关系良好。精密度、重现性、稳定性的RSD均小于2％，野鸢尾黄黄素及白射干素的平均加样回收率分别为95．93％和96．19％。结论：所采用方法可靠、准确、重现性好，可用于该制剂的含量测定及质量控制。

关键词：小儿咽扁颗粒野鸢尾黄素白射干素含量测定

浊点萃取结合LC-MS/MS法测定野鸢尾黄素对气道炎症模型豚鼠体内花生四烯酸的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辽宁中医杂志 2017年第9期44卷 1932-1935页

作者：邸子真杨瑞吴怡陶弘武辽宁省中医药研究院辽宁沈阳110034

目的:建立气道炎症模型豚鼠血浆中花生四烯酸(AA)的测定方法,考察野鸢尾黄素降低气道炎性反应的作用。方法:以烟熏配合合胞病毒滴鼻制造气道炎症豚鼠模型,以AA-d8为内标,采用Triton-14对血浆样品进行浊点萃取,并采用LC-MS/MS法MRM监测... 详细信息

目的:建立气道炎症模型豚鼠血浆中花生四烯酸(AA)的测定方法,考察野鸢尾黄素降低气道炎性反应的作用。方法:以烟熏配合合胞病毒滴鼻制造气道炎症豚鼠模型,以AA-d8为内标,采用Triton-14对血浆样品进行浊点萃取,并采用LC-MS/MS法MRM监测模式测定豚鼠血浆中AA的浓度。结果:血浆中AA在0.1~100μg·m L-1范围内线性关系良好,日内精密度为2.53%~7.82%,日间精密度为10.51%~13.41%,提取回收率81.20%~90.77%。结论:该方法环保、准确、稳定,可用于豚鼠血浆中AA的测定。

关键词：花生四烯酸气道炎症模型豚鼠野鸢尾黄素

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

气管炎丸中野鸢尾黄素含量测定

辽宁中医杂志 2016年第7期43卷 1450-1452页

作者：李欣妍邹桂欣尤献民李国信辽宁中医药大学辽宁沈阳110032 辽宁省中医药研究院辽宁沈阳110034

目的:建立HPLC法测定气管炎丸中野鸢尾黄素的含量。方法:色谱柱:DiamosilTMC_(18)色谱柱(New Column250 mm×4.6 mm,5μm);以0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)-0.1%磷酸-0.5%甲基-β环糊精水溶液(C)为流动相;梯度洗脱;流速:1 m L·min^(-1);柱温:40℃;检测波长:265 nm;进样量:10μL。结果:野鸢尾黄素的进样量在12.8~76.8μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为99.79%,RSD为1.1%(n=9)。结论:此方法简便、灵敏、重现性好,可用于气管炎丸中野鸢尾黄素的含量测定。

关键词：气管炎丸 HPLC 野鸢尾黄素含量测定

野鸢尾黄素对人乳腺癌细胞MCF7增殖、迁移和侵袭的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海南医学 2023年第5期34卷 609-613页

作者：毕彩云韩碧洁西安市北方医院妇科陕西西安710000

目的探讨野鸢尾黄素对人乳腺癌细胞MCF7增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的作用机制。方法将MCF7细胞分为低剂量组、高剂量组和对照组。低、高剂量组分别加入40μmol/L和80μmol/L野鸢尾黄素,对照组不加任何药物。用CCK-8实验检测细胞增... 详细信息

目的探讨野鸢尾黄素对人乳腺癌细胞MCF7增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的作用机制。方法将MCF7细胞分为低剂量组、高剂量组和对照组。低、高剂量组分别加入40μmol/L和80μmol/L野鸢尾黄素,对照组不加任何药物。用CCK-8实验检测细胞增殖能力,用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,用Tranwell小室实验检测细胞的侵袭能力,用蛋白质印迹法检测β-catenin蛋白及p-GSK-3β-ser9的表达水平。结果干预48 h后,对照组和低、高剂量组的细胞增殖率分别为(100±4.00)%、(62.9±2.60)%、(32.2±6.25)%,迁移的距离分别为(392±7.32)μm、(272±17.45)μm和(92±5.36)μm,侵袭细胞数量分别为(130±3.33)个、(96±3.33)个和(66±2.66)个,β-catenin相对GAPDH的相对表达量分别为0.567±0.06、0.312±0.06和0.243±0.05,p-GSK-3β-ser9相对GAPDH的相对表达量分别为0.501±0.06、0.236±0.04和0.166±0.03。低、高剂量组的上述指标分别与对照组比较,以及高剂量组与低剂量组间比较,差异均有统计学意义(P野鸢尾黄素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制MCF7细胞的增殖、迁移及侵袭。

关键词：野鸢尾黄素人乳腺癌细胞MCF7 增殖迁移侵袭

野鸢尾黄素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭的影响

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

检验医学与临床 2022年第18期19卷 2520-2523页

作者：毕彩云夏岩陕西省西安市北方医院妇科陕西西安710000

目的观察野鸢尾黄素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以及可能的作用机制。方法经不同水平(0、10、25、50、100、200μmol/L)的野鸢尾黄素处理48 h后,用CCK-8实验检测不同野鸢尾黄素水平处理组SKOV3细胞的活力。根据上述... 详细信息

目的观察野鸢尾黄素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以及可能的作用机制。方法经不同水平(0、10、25、50、100、200μmol/L)的野鸢尾黄素处理48 h后,用CCK-8实验检测不同野鸢尾黄素水平处理组SKOV3细胞的活力。根据上述CCK-8实验结果,将实验分为对照组、低剂量组、高剂量组。对照组不加任何药物,选择加野鸢尾黄素后使SKOV3细胞的增殖能力下降1/3、2/3左右的两个浓度作为低剂量组、高剂量组浓度,处理48 h。用Transwell小室实验检测SKOV3细胞的侵袭能力,用细胞划痕实验检测SKOV3细胞的迁移能力,免疫印迹实验检测各组SKOV3细胞E-cadherin、N-cadherin及β-catenin蛋白的表达。结果低剂量组、高剂量组的野鸢尾黄素浓度分别为50μmol/L和100μmol/L。干预48 h后,与对照组相比,低剂量组、高剂量组的SKOV3细胞增殖率、侵袭细胞数量、迁移距离均下降,E-cadherin蛋白水平均上升,N-cadherin、β-catenin蛋白水平均下降,差异均有统计学意义(P野鸢尾黄素可能通过抑制β-catenin的表达,从而抑制SKOV3细胞的增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化。

关键词：野鸢尾黄素 SKOV3细胞增殖迁移侵袭上皮-间质转化

野鸢尾黄素对气道炎性反应豚鼠5-LOX下游炎性反应代谢物的影响

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实用中医内科杂志 2022年第6期36卷 30-32,I0004,I0005页

作者：高小明陆超邸子真辽宁中医药大学附属第二医院辽宁沈阳110034 沈阳红药集团股份有限公司辽宁沈阳110013 辽宁省中医药研究院辽宁沈阳110034

目的建立气道炎性反应模型豚鼠血浆中羟基廿碳四烯酸(HETEs)的测定方法,以此研究野鸢尾黄素降低气道炎性反应的作用机制。方法以格列苯脲为内标,采用Triton X-114对血浆样品进行浊点萃取,结合LC-MS/MS法MRM监测模式测定气道炎性反应模... 详细信息

目的建立气道炎性反应模型豚鼠血浆中羟基廿碳四烯酸(HETEs)的测定方法,以此研究野鸢尾黄素降低气道炎性反应的作用机制。方法以格列苯脲为内标,采用Triton X-114对血浆样品进行浊点萃取,结合LC-MS/MS法MRM监测模式测定气道炎性反应模型豚鼠血浆中HETEs的浓度。结果血浆中(±)5-HETE、(±)15-HETE在1~100 ng·mL^(-1)内,(±)12-HETE在25~2.5×10^(3)ng·mL^(-1)内线性关系良好,日内精密度为5.01%~12.24%,日间精密度为5.19%~12.59%,批内准确度89.39%~107.38%,批间准确度88.09%~104.84%。结论该方法环保、准确、稳定,可用于豚鼠血浆中HETEs的测定。

关键词： HETEs 炎性反应通路野鸢尾黄素

射干中野鸢尾黄素对合胞病毒感染豚鼠感染后咳嗽及气道炎症的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辽宁中医杂志 2019年第9期46卷 1967-1971,2016页

作者：左芳王光函姜鸿汪天青辽宁中医药大学辽宁沈阳110032 辽宁省中医药研究院辽宁沈阳110034

目的:研究射干野鸢尾黄素对呼吸道合胞病毒(RSV)感染豚鼠咳嗽模型气道炎症的治疗作用。方法:采用烟熏配合RSV滴鼻建立豚鼠咳嗽后模型,造模结束后给予野鸢尾黄素治疗,中药阳性组给与肺宁片治疗。通过枸橼酸雾化诱咳比较各组豚鼠的咳嗽次... 详细信息

目的:研究射干野鸢尾黄素对呼吸道合胞病毒(RSV)感染豚鼠咳嗽模型气道炎症的治疗作用。方法:采用烟熏配合RSV滴鼻建立豚鼠咳嗽后模型,造模结束后给予野鸢尾黄素治疗,中药阳性组给与肺宁片治疗。通过枸橼酸雾化诱咳比较各组豚鼠的咳嗽次数;采用HE染色法对肺组织形态学检测;血液体液分析仪检测肺泡灌洗液中白细胞总数及分类计数;采用ELISA试剂盒法检测肺泡灌洗液中细胞因子,采用Western Blot法检测肺组织中T-bet和GATA-3蛋白的表达。结果:豚鼠肺组织病毒培养液中显示RSV感染成功,模型组豚鼠与空白组相比,在5 min内咳嗽次数显著升高(P野鸢尾黄素组豚鼠5min内咳嗽次数和肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞显著下降(P野鸢尾黄素对RSV感染后咳嗽模型豚鼠具有较好的镇咳作用,具有抗气道炎症作用。

关键词：射干野鸢尾黄素呼吸道合胞病毒炎症