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烟草野火病菌毒素研究进展

微生物学通报 1999年第5期26卷 358-360页

作者：吕军鸿张广民丁爱云李雪玲山东农业大学植保系泰安271018

烟草野火病是烟草生产上的主要病害之一,在我国云南等主要烟草栽培地区常年发生,危害十分严重。该病由PseudomonasSyr加gaepV.田bact引起。病菌侵染烟草后,在叶片上产生周围有一很宽黄绿晕圈的圆形褪色斑点[’]。Johnson和Mljnvin首次... 详细信息

烟草野火病是烟草生产上的主要病害之一,在我国云南等主要烟草栽培地区常年发生,危害十分严重。该病由PseudomonasSyr加gaepV.田bact引起。病菌侵染烟草后,在叶片上产生周围有一很宽黄绿晕圈的圆形褪色斑点[’]。Johnson和Mljnvin首次报道病菌的除细胞滤液接种叶片也能引起野火症状,表明野火病菌产生一种外毒素。二十世纪50年代,Woolley和Broun提出浓缩和分析毒素的方法以后,人们开始对野火病菌毒素进行系统的研究。l$素的提取毒素的提取是毒素得以详细研究的第一步,但由于…

关键词：烟草野火病菌毒素

烟草野火病菌(Pseudomonas syringae ***)诊断试剂盒的制备及应用

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植物病理学报 2003年第4期33卷 302-306页

作者：刘雅婷张世珖李永忠王绍坤云南农业大学云南省植物病理重点实验室昆明650201 云南省烟草公司曲靖分公司曲靖655001

本研究通过筛选致病力强的烟草野火病菌株作为抗原 ,制备了烟草野火病菌特异性的抗血清 ,研制出SPA ELISA、间接 ELISA 2种诊断试剂盒 ,使检测真正作到了简便、快速、灵敏、准确。同时 ,应用这 2种诊断试剂盒对从田间及温室中采集的土... 详细信息

本研究通过筛选致病力强的烟草野火病菌株作为抗原 ,制备了烟草野火病菌特异性的抗血清 ,研制出SPA ELISA、间接 ELISA 2种诊断试剂盒 ,使检测真正作到了简便、快速、灵敏、准确。同时 ,应用这 2种诊断试剂盒对从田间及温室中采集的土壤、烟株根围、田间杂草、种子进行检测 ,明确了云南烟草野火病的初侵染源主要为种子和根围。

关键词：烟草野火病菌抗原特异性抗血清诊断试剂盒研制技术

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烟草野火病菌初侵染源的研究

湖南农业大学学报（自然科学版） 2003年第1期29卷 43-44页

作者：刘雅婷张世珖李永忠云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201 云南省植物病理重点实验室云南昆明650201 云南农业大学烟草学院云南昆明650201

为探明烟草野火病菌的初侵染源,应用SPA-ELISA,间接-ELISA反应试剂盒对从田间及温室中采集的土壤、烟株根围、田间杂草、种子等进行了检测,明确云南烟草野火病的初侵染源主要为种子和根部残体.

关键词：烟草野火病野火病菌初侵染源种子根部残体

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云南烟草野火病菌遗传多样性分析

西南农业大学学报（自然科学版） 2001年第6期23卷 514-517页

作者：刘雅婷李永忠张世珖王绍坤姬广海云南农业大学云南省植物病理重点实验室云南昆明650201 云南农业大学烟草学院云南昆明650201 云南省烟草研究院农业研究所云南玉溪653100

应用Rep -PCR分子指纹技术结合传统植物病理学分析了 5 1个采自云南各大烟区的烟草野火病菌 (***)以及其他不同致病变种、不同种、不同属的植物病原菌的群体遗传多样性。用REP ,ERIC ,BOX ,IS1112和IS 1113等 5组专化性的引物对以上菌... 详细信息

应用Rep -PCR分子指纹技术结合传统植物病理学分析了 5 1个采自云南各大烟区的烟草野火病菌 (***)以及其他不同致病变种、不同种、不同属的植物病原菌的群体遗传多样性。用REP ,ERIC ,BOX ,IS1112和IS 1113等 5组专化性的引物对以上菌系基因组DNA进行PCR扩增 ,并对扩增指纹图谱综合进行UPGMA聚类分析 ,在相似水平 0 .92时 ,可将云南烟草野火病菌分为 3个群 ,即YN 1,YN 2 ,YN 3。

关键词：烟草野火病菌遗传多样性云南

烟草野火病菌hrpZ基因的克隆及蛋白的原核表达

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吉林农业大学学报 2009年第6期31卷 700-704页

作者：姜兆远邹晓威高洁吉林农业大学农学院长春130118

采用PCR方法从烟草野火病病原菌Psta218中扩增harpin编码基因hrpZ,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,获得重组表达质粒pGEX-hrpZPsta。将重组质粒pGEX-hrpZPsta转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,得到重组大肠杆菌BL21/pGEX-hrpZPsta。经IPTG诱导得到14.7 kD的蛋白质。该蛋白质与其他已发现的harpins一样,能够使烟草等植物产生过敏性坏死反应、富含甘氨酸、热稳定以及对蛋白酶K敏感。

关键词：烟草野火病菌 hrpZ harpin

质外体铵离子水平影响烟草—野火病菌互作的初步分析

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质外体铵离子水平影响烟草—野火病菌互作的初步分析

作者：李铭河南农业大学

学位级别：硕士

2015-2017年,通过室内试验及田间研究,模拟分析了烟草质外体铵离子水平对野火病菌生长繁殖、毒素产生以及病菌致病性的影响;比较测定了不同抗感品种烟草氮代谢途径相关酶活性,分析了其与抗病性、质外体铵离子水平的相关关系;从谷氨酰胺... 详细信息

2015-2017年,通过室内试验及田间研究,模拟分析了烟草质外体铵离子水平对野火病菌生长繁殖、毒素产生以及病菌致病性的影响;比较测定了不同抗感品种烟草氮代谢途径相关酶活性,分析了其与抗病性、质外体铵离子水平的相关关系;从谷氨酰胺合成酶活性角度,分析了生育期、施氮量、移栽期、天气等因素影响病害发生的理化机制。主要试验结果如下:1、利用叶片注射法,研究了盆栽烟草不同生育期、不同叶位的烟叶对氨溶液的敏感性。结果表明生育期不同其对氨的敏感性不同,团棵期和旺长期烟叶对氨有较强的忍耐性,成熟期烟叶对氨的忍耐性明显降低。对团棵期和旺长期烟叶安全的氨溶液浓度上限为10mol/L,对成熟期烟叶安全的氨溶液浓度上限为10mol/L。不同叶位的烟叶对氨的敏感性由高到低依次是:下部叶>中部叶>上部叶。2、通过添加氨溶液的KB摇菌试验,发现氨对野火菌繁殖的抑制作用在24hpi之后比较明显,氨浓度愈高其抑制作用愈大。高浓度氨溶液(10mol/L)对野火菌繁殖的抑制达到极显著水平,但低浓度氨溶液(10-10mol/L)却能够明显刺激病菌在8-12hpi的繁殖。进一步研究发现,被10-10mol/L氨刺激的细菌KB培养物(12hpi)经过除菌、除蛋白后的滤液,注射烟叶后造成的褪绿症状比对照(无氨刺激)提早12h出现,且能导致供试叶碟出现更严重的细胞损伤。说明病菌在铵离子的刺激下可能产生了更多的致病毒素。3、分别离心收集经10-10mol/L氨刺激6h、12h的野火菌菌体沉淀,制备再悬浮液并无针注射活体烟叶。结果发现刺激12h的病菌其导致褪绿及坏死症状的能力明显强于刺激6h的病菌,且不论是刺激6h还是12h的病菌,均以10、10mol/L这两个氨浓度刺激后的病菌具有更强的致病性,褪绿和坏死症状总是最先出现。为了更加说明氨对病菌侵染的激发作用,设计了氨与菌的混合接种试验,即接种前将10-10mol/L氨溶液混合至没有经过氨刺激的野火菌菌悬液,混合后立即无针注射接种活体烟叶。这个混合接种试验的结果再次表明,在铵离子的刺激下,病菌接种后48h便出现水渍状及褪绿症状,比无氨刺激的接菌对照早约24h,不接菌的氨溶液对照直至108hpi仍无症状出现。由此说明病菌的侵染能力得到了明显增强。综合考虑氨对病菌毒素产生以及病菌侵染的增强,初步认为一定浓度的铵离子能够引发野火病菌的致病性,这一结果尚属首次发现。4、通过比较烟草不同抗感品种的碳氮代谢相关理化指标:谷氨酰胺合成酶(GS)、硝酸还原酶(NR)、谷氨酸合成酶(GOGAT)、蔗糖酶(INV)、叶片氨态氮含量、质外体铵离子水平等,发现GS活性与品种的抗病性关系密切。抗病品种在旺长期具有较高的GS活性,但在叶片衰老过程中GS酶活性下降较慢,而感病品种在衰老过程中GS酶活性下降迅速。抗病品种因其GS活性高、氨同化能力强,其叶片的氨态氮含量往往也较高,质外体铵离子积累相对较少。此外还发现,野火菌接种后烟叶的GS活性在48hpi之前呈连续上升趋势,之后才下降。抗病品种的GS在48hpi之后下降较慢,而感病品种下降迅速。当抗病品种的叶片GS活性用草胺膦抑制后,接菌发病更快。因此,正反两个方向的证据均表明GS酶活性的变化可能与烟草感染野火病的内在机制具有重要关系。5、通过田间试验,比较测定了移栽期、施氮量、降雨、GS酶抑制剂等因素对成熟期烟叶GS活性的影响。结果表明,推迟移栽有降低GS活性的趋势,施氮量的增加可造成下部叶GS活性的增加,降雨则明显抑制烟叶GS活性。这一研究结果为进一步解析烟草野火病发生流行的理化机制奠定了基础。综合分析试验结果,初步认为一定水平的质外体铵离子可以激发病菌的致病性,很可能是影响烟草-野火病菌互作的重要因素之一。本研究是首次对环境铵离子影响植物寄主-病原细菌互作的系统性探索。

关键词：烟草野火病菌相互作用质外体铵离子

光能变价离子钛对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用

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浙江农业科学 2018年第5期59卷 783-787页

作者：余佳敏刘颖肖建华肖勇江鸿余祥文中国烟草总公司四川省公司四川成都610041 西南大学植物保护学院天然产物农药研究室重庆400715 湖北中烟工业有限责任公司湖北武汉430040

为探索光能变价离子钛(TIVL)对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用,本研究采用平板抑菌法、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)以及生长曲线测定等方法分析了TIVL对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑菌活性。结果表明,在平板上TIVL... 详细信息

为探索光能变价离子钛(TIVL)对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用,本研究采用平板抑菌法、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)以及生长曲线测定等方法分析了TIVL对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑菌活性。结果表明,在平板上TIVL对青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用具有显著的浓度效应,即随着琼脂平板中添加药剂浓度的升高,对青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用也随之增强。同时,TIVL对青枯雷尔氏菌的MIC和MBC分别为32 mg·L^(-1)和36 mg·L^(-1),对野火病菌的MIC和MBC均为36 mg·L^(-1),且2种病菌在含有32 mg·L^(-1)TIVL的液体培养基中生长基本受到抑制,说明光能变价离子钛对烟草青枯病菌和野火病菌均有较好抑菌效果。实验结果为探索离子钛防治烟草青枯病和野火病提供理论依据。

关键词：光能变价离子钛青枯病菌野火病菌抑菌活性

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烟草种子带菌分析及种子处理

中国烟草 1994年第4期15卷 40-42页

作者：华致甫袁美丽高洁马贵龙董立峰张佳环吉林农业大学

经分离、接种证实，烟草种子上带有烟草赤星病菌Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒｎａｔａ、烟草野火病菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｔａｂａｃｉ；带菌率随品种和发病程度而异。赤星病菌一般为１８％左右，野火病菌... 详细信息

经分离、接种证实，烟草种子上带有烟草赤星病菌Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒｎａｔａ、烟草野火病菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｔａｂａｃｉ；带菌率随品种和发病程度而异。赤星病菌一般为１８％左右，野火病菌为８％～１６％；此外，种子上还有镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐｐ．和一些杂菌。赤星病菌和野火病菌不仅种子表面带有，而且种皮内部和胚乳也带有，胚则无菌。对带有这两种病菌的种子进行处理，以温汤浸种５０℃１０分钟、５０℃１５分钟和５２℃１０分钟对赤星病和野火病菌的灭菌效果最好；链霉素浸种对烟草野火菌也有很好的灭菌作用。５０℃、５２℃温汤浸种及链霉素浸种对烟草种子发芽率均没有明显的影响。

关键词：赤星病菌野火病菌种子带菌种子处理烟草

应用生物技术提高烟草对野火病抗病性的研究进展

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云南农业大学学报 2000年第2期15卷 168-171页

作者：刘雅婷张世光云南农业大学

自 8 0年代中后期以来 ,在应用生物技术提高植物抗病性方面取得了重大进展。

关键词：基因工程细胞工程烟草野火病菌抗病性