检索结果-南通市图书馆

中国家禽 2018年第15期40卷 48-51页

作者：楚电峰张小荣丁园蒋叶林侯玉超刘秋云范根成杜元钊吴艳涛扬州大学兽医学院江苏扬州225009 青岛易邦生物工程有限公司动物基因工程疫苗国家重点实验室山东青岛266114 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为在SPF鸡和商品蛋鸡上评价一株表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素基因的重组hvt(r hvt-H9)活疫苗的免疫保护效力,试验将1日龄SPF鸡分为r hvt-H9疫苗组、灭活疫苗组和空白对照组,共3组(n=60,每组20只);1日龄商品蛋鸡除上述三组外另增加r ... 详细信息

为在SPF鸡和商品蛋鸡上评价一株表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素基因的重组hvt(r hvt-H9)活疫苗的免疫保护效力,试验将1日龄SPF鸡分为r hvt-H9疫苗组、灭活疫苗组和空白对照组,共3组(n=60,每组20只);1日龄商品蛋鸡除上述三组外另增加r hvt-H9疫苗与禽流感灭活疫苗(H9亚型,F株)联合免疫组,共4组(n=80,每组20只)。免疫后,通过血凝抑制试验检测血清中针对H9亚型AIV的抗体效价;并于免疫后28 d,将全部试验组及空白对照组以H9亚型AIV F株进行静脉注射攻毒。攻毒后第3、5天分别采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况;并于攻毒后第10天将全部试验鸡进行剖检。结果显示:SPF鸡r hvt-H9疫苗组能达到100%免疫保护,而灭活疫苗组仅能达到80%保护;商品蛋鸡r hvt-H9疫苗组保护率为40%,灭活疫苗组保护率为70%,但联合免疫组能达到100%的免疫保护。因此,该重组病毒r hvt-H9疫苗可作为H9亚型禽流感的有效疫苗候选株,与现有商品化禽流感H9亚型灭活疫苗联合使用,效果更佳,为其防控提供一定的技术支持。

关键词： H9亚型禽流感血凝素重组hvt 疫苗免疫效力

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

利用细菌人工染色体技术构建表达鹦鹉热衣原体PmpD基因的重组hvt

利用细菌人工染色体技术构建表达鹦鹉热衣原体PmpD基因的重组HVT

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧...

作者：刘杉杉黄秀芬姜良孙盈何诚李永清北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疾病防控技术北京市重点实验室中国农业大学动物医学院

家禽免疫的主要挑战来自于如何设计出只需接种单一剂量就可以防控多种疾病的疫苗。为了实现一针防两病(禽衣原体病和马立克氏病)的目的,本研究以火鸡疱疹病毒(hvt)为载体表达鹦鹉热衣原体多型外膜D蛋白(PmpD)抗原,构建同时抗禽衣原体病... 详细信息

家禽免疫的主要挑战来自于如何设计出只需接种单一剂量就可以防控多种疾病的疫苗。为了实现一针防两病(禽衣原体病和马立克氏病)的目的,本研究以火鸡疱疹病毒(hvt)为载体表达鹦鹉热衣原体多型外膜D蛋白(PmpD)抗原,构建同时抗禽衣原体病和马立克氏病的二价活载体疫苗。通过改造已经利用反向遗传技术构建的hvt感染性细菌人工染色体(BAC)克隆,使其表达PmpD基因,将重组的BAC转染鸡胚成纤维细胞(CEF)拯救病毒,获得hvt重组体(rhvt-PmpD)。通过Westernblotting分析感染rhvt-PmpD的CEF可知rhvt-PmpD表达了PmpD蛋白。

关键词：鹦鹉热衣原体马立克氏病毒多型外膜D蛋白活载体疫苗细菌人工染色体技术重组hvt

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

重组火鸡疱疹病毒rhvt-IFN-gB的构建

重组火鸡疱疹病毒rHVT-IFN-gB的构建

引用

作者：孙公军南京农业大学

学位级别：硕士

自行设计并合成引物，用PCR方法扩增出了分子量分别为519bp和2101bp的鸡γ干扰素基因(ChIFN-γ基因)和马立克的gB基因。然后将chIFN—γ基因克隆于穿梭质粒pEGFP—C中，构建的质粒命名为pC-chIFN—γ，经过双酶切鉴定证明已将ChIFN—γ... 详细信息

自行设计并合成引物，用PCR方法扩增出了分子量分别为519bp和2101bp的鸡γ干扰素基因(ChIFN-γ基因)和马立克的gB基因。然后将chIFN—γ基因克隆于穿梭质粒pEGFP—C中，构建的质粒命名为pC-chIFN—γ，经过双酶切鉴定证明已将ChIFN—γ基因插入到了pEGFP—C的多克隆位点中。gB基因的PCR产物克隆到pMD18-T载体中，构建的质粒命名为pT-gB，构建的质粒也用双酶切的方法进行鉴定。随后，我们从pT-gB中分离出gB基因，并将之连接到自行构建的载体pEGFP—C中，构建的质粒命名为pC-IFN-gB，经过双酶切鉴定证明将gB基因也插入到了pC-chIFN-γ中。从自行设计构建的基因表达盒载体pC-IFN-gB上，用Apal Ⅰ和Nae Ⅰ酶切并分离出分子量为4958bp的基因表达盒，然后应用平端连接反应将表达盒插入到pTKB载体的Nhe Ⅰ的单酶切位点位置，构建出含有chIFN-γ、gB和EGFP基因表达盒的转移质粒载体，并命名为pTKG-IFN-gB;从自行设计构建的基因表达盒载体pC-chIFN—γ上，分离出分子量为3480bp的基因表达盒，并平端插入到pTKB载体的Nhe Ⅰ酶切位点位置，构建出含有chIFN-γ和EGFP基因表达盒的转移质粒载体，并命名为pTKG-IFN-γ。将自行设计构建的pTKG-IFN-gB用Pvu Ⅱ酶切，电泳回收后用脂质体方法进行转染，并用有限稀释的方法筛选重组病毒，转染的病毒在荧光显微镜上进行观察。经过笔者的摸索，发现适合本试验的最佳转染条件是：细胞的接毒量为0.5ml，脂质体的用量为25ul，转染时间为细胞接毒吸附2小时后培养8小时。初步筛选到了较为理想的重组病毒。该重组火鸡疱疹病毒的获得，使得进一步研究它的生物学特性和预测它的应用前景变得切实可行。此外，本实验也为进一步研究ChIFN—γ对病毒活载体复制的影响提供了物质基础，并且可为阐释chIFN—γ做为基因工程活载体疫苗免疫佐剂的可能性提供实验依据。

关键词： chIFN-Y 基因表达盒转移质粒载体重组hvt

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

表达新城疫病毒HN基因的重组火鸡疱疹病毒的构建

引用

畜牧兽医学报 2000年第2期31卷 150-154页

作者：赵军张秀根陈溥言蔡宝祥中国预防医学科学院病毒所基因室北京100052 南京农业大学动物医学院南京210095

应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,用设计带有限制性酶切位点的特异地扩增了从起始密码子开始的 1 8kb新城疫病毒 (NDV)血凝素神经氨酸 (HN)基因开放式阅读框 (ORF) ,然后插入 pTK2 B的NheI位点 ,构建了含NDVHN基因的插入载体 pTKHN1和 pT... 详细信息

应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,用设计带有限制性酶切位点的特异地扩增了从起始密码子开始的 1 8kb新城疫病毒 (NDV)血凝素神经氨酸 (HN)基因开放式阅读框 (ORF) ,然后插入 pTK2 B的NheI位点 ,构建了含NDVHN基因的插入载体 pTKHN1和 pTKHN2 ,将其与感染火鸡疱疹病毒 (hvt)细胞的总DNA共转染鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,经有限稀释法和Dot blot筛选 ,得到含有HN基因的重组体rhvt1和rhvt2 。对重组体进行组织培养传代和Westernblot分析 ,表明重组体在感染细胞中表达了HN蛋白 ,重组体在CEF上的生长特性与亲本病毒相同 ,且在连续传代过程中保持稳定。

关键词：重组hvt HN基因 ND基因工程疫苗病毒载体禽用

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：