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日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白重组抗原的免疫保护性研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第2期23卷 97-99,105页

作者：干小仙曾肖芃王越丁建祖沈慧英沈丽英樊晋江浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013 澳大利亚昆士兰医学研究所昆士兰

目的探讨日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白(SVLBP)重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原,以镍-次氮基三乙酸琼脂糖树脂(Ni-NTA)亲和层析法纯化制备S... 详细信息

目的探讨日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白(SVLBP)重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原,以镍-次氮基三乙酸琼脂糖树脂(Ni-NTA)亲和层析法纯化制备SVLBP重组抗原;将纯化的重组抗原加福氏佐剂经皮下免疫C57BL/6小鼠,每隔2周免疫1次,在第3次免疫后10d,经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴35±1条,感染后45d剖杀,计数检获虫数和每克肝虫卵数(LEPG)。小鼠在免疫前和攻击感染后分别采眶窦血,用ELISA测定特异性IgG及其亚群抗体水平。结果相对于佐剂对照组,免疫组小鼠的减虫率为33.4%,减卵率为47.6%;免疫后小鼠产生高水平的特异性IgG(>1:6400);抗体亚类检测结果显示,免疫组小鼠IgG2a、IgG2b、IgG1明显高于免疫前和佐剂对照组。结论日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原能诱导小鼠产生一定的保护性免疫,是潜在的疫苗候选抗原分子。

关键词：极低密度脂蛋白重组抗原结合蛋白保护性研究 C57BL/6小鼠日本血吸虫尾蚴 ELISA测定次氮基三乙酸特异性IgG 免疫保护性亲和层析法 IgG2a IgG2b 保护性免疫潜在价值候选疫苗半乳糖苷皮下免疫福氏佐剂攻击感染

重组抗原在HSV-Ⅰ感染ELISA检测中的应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第2期19卷 159-161页

作者：王战勇王志玉温红玲陶泽新山东大学公共卫生学院病毒研究室

目的　用单纯疱疹病毒(HSV)重组蛋白作为包被抗原建立一种特异性和灵敏性较高的ELISA方法。方法　将重组糖蛋白D(gD)和HSV Ⅰ分别作为包被抗原,检测5 7份临床标本,同时用国产和德国试剂盒进行检测;将德国试剂盒作为金标准,另外三者检测... 详细信息

目的　用单纯疱疹病毒(HSV)重组蛋白作为包被抗原建立一种特异性和灵敏性较高的ELISA方法。方法　将重组糖蛋白D(gD)和HSV Ⅰ分别作为包被抗原,检测5 7份临床标本,同时用国产和德国试剂盒进行检测;将德国试剂盒作为金标准,另外三者检测结果在特异性、灵敏性和符合率等方面与其进行比较。结果　与德国试剂盒相比,在特异度、敏感度、符合率方面,重组抗原分别为5 7 1%、82 0 %、78 9%。病毒抗原分别为5 7 1%、78 0 %、75 4 % ;国产试剂盒分别为10 0 0 %、4 8 0 %、5 4 4 %。重组蛋白重复性实验结果经统计学处理差异无统计学意义(P >0 0 5 )。结论　用酵母菌表达的HSV Ⅰ重组gD蛋白作为包被抗原进行ELISA检测是一种敏感、特异的方法,具有较大的应用价值。

关键词： ELISA检测重组抗原 HSV-Ⅰ ELISA方法感染包被抗原单纯疱疹病毒经统计学处理重组蛋白试剂盒种特异性临床标本检测结果病毒抗原应用价值灵敏性符合率糖蛋白德国金标准特异度敏感度重复性酵母菌国产

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日本血吸虫病重组诊断抗原研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2013年第1期25卷 90-92页

作者：李俊立王昌富湖北省荆州市中心医院检验科荆州434020

随着分子生物学和免疫学技术的发展,将重组抗原用于日本血吸虫病免疫诊断已成为当前血吸虫病研究领域的热点。本文将近10年用于日本血吸虫病免疫诊断的重组抗原研究进展作一综述。

关键词：日本血吸虫病免疫诊断重组抗原

重组抗原免疫印迹法与化学免疫发光法检测梅毒假阳性对比分析

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中国皮肤性病学杂志 2018年第5期32卷 536-540页

作者：党倩丽吴玲智张小艳杨江存陆学东陕西省人民医院陕西西安710068 康泰生物科技有限公司浙江温州325000 中山大学附属第八医院检验医学部广东深圳518033

目的采用重组抗原免疫印迹法(RAWB),对化学免疫发光法(CMIA)检测部分梅毒阳性血清进行比对分析,拟排除假阳性。方法 63例CMIA阳性标本,包括有梅毒临床表现及输血前筛查阳性标本,依年龄分为:19~50岁(A组)35例,51~70岁(B组)12例,71~101岁(... 详细信息

目的采用重组抗原免疫印迹法(RAWB),对化学免疫发光法(CMIA)检测部分梅毒阳性血清进行比对分析,拟排除假阳性。方法 63例CMIA阳性标本,包括有梅毒临床表现及输血前筛查阳性标本,依年龄分为:19~50岁(A组)35例,51~70岁(B组)12例,71~101岁(C组)16例。有明确二期梅毒临床表现16例(均为A组)。对每份标本进行TPPA/RPR、RAWB及欧蒙免疫印迹方法(WB)检测。结果 A组CMIA阳性率94.29%,可疑阳性率5.71%;RAWB阳性率88.57%,两者结果差异无统计学意义(P>0.05);TPPA及RPR阳性率为88.57%和71.43%;16例有明确二期梅毒临床表现标本,CMIA、RAWB及TPPA/RPR检测结果均为阳性。B及C组:CMIA阳性率分别91.67%及81.25%,可疑阳性8.33%和18.75%;RAWB法检测阳性率33.33%及25.00%,阴性率41.67%和43.75%,两者结果差异有统计学意义(P均0.05)。结论 CMIA方法快捷方便,但存在假阳性;在无明确梅毒病史而CMIA阳性的老年人、肿瘤、中风等患者,怀疑假阳性时,应进一步做免疫印迹检测。

关键词：梅毒重组抗原化学发光免疫法假阳性

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重组抗原在弓形虫病诊断中的应用

中国病原生物学杂志 2011年第10期6卷 779-782页

作者：黄泽智赵晋英李艳伟侯玉英湖南省邵阳医学高等专科学校检验系湖南邵阳422000 山西医科大学寄生虫学教研室山西太原030001

刚地弓形虫感染危害严重,研究敏感性高和特异性好的弓形虫感染检测方法对于弓形虫病的诊断至关重要。弓形虫病的诊断一般依赖于检测患者血清中弓形虫特异性IgM和IgG。目前,商业试剂盒大多采用天然抗原,其检测精确性较差。重组抗原已经... 详细信息

刚地弓形虫感染危害严重,研究敏感性高和特异性好的弓形虫感染检测方法对于弓形虫病的诊断至关重要。弓形虫病的诊断一般依赖于检测患者血清中弓形虫特异性IgM和IgG。目前,商业试剂盒大多采用天然抗原,其检测精确性较差。重组抗原已经被发展用来诊断弓形虫病,且具有潜在的应用价值。本综述主要介绍重组抗原在弓形虫病诊断中的应用。

关键词：刚地弓形虫重组抗原弓形虫病血清学诊断综述

问号钩端螺旋体lipL41基因表达及重组抗原分析

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中华流行病学杂志 2005年第8期26卷 608-612页

作者：阮萍严杰毛亚飞彭慧琴周晓辉绍兴文理学院医学院 312000 浙江大学医学院病原生物学教研室

目的构建问号钩端螺旋体(钩体)ltB/ctBlipL41/1融合基因及其原核表达系统。方法采用连接引物聚合酶链反应(PCR)构建ltBlipL41/1和ctBlipL41/1融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳检测目的重组蛋... 详细信息

目的构建问号钩端螺旋体(钩体)ltB/ctBlipL41/1融合基因及其原核表达系统。方法采用连接引物聚合酶链反应(PCR)构建ltBlipL41/1和ctBlipL41/1融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳检测目的重组蛋白rLTBrLipL41/1和rCTBrLipL41/1表达情况;用免疫印迹和神经节苷脂酶联免疫吸附试验(GM1ELISA)分别检测上述目的重组蛋白的免疫原性和佐剂活性;采用PCR和显微镜凝集试验(MAT)分别检测97株问号钩体野生株lipL41/1基因及其表达情况;用ELISA检测228例钩体患者血清lipL41基因产物的抗体。结果与报道的相关序列比较,ltBlipL41/1和ctBlipL41/1融合基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.6%～99.9%和99.8%～100%。rLTBrLipL41/1和rCTBrLipL41/1表达产量均约为细菌总蛋白的10%,主要以包涵体形式存在。rLTBrLipL41/1和rCTBrLipL41/1均分别能与rLipL41/1兔抗血清和牛GM1结合。87.6%(85/97)问号钩体野生株含有lipL41基因,84.5%(82/97)问号钩体野生株分别与rLipL41/1和rLipL41/2兔抗血清出现效价范围为1∶4～1∶128的MAT阳性结果。84.6%(193/228)和78.5%(179/228)的患者血清分别rLipL41/1和rLipL41/2抗体阳性。结论成功地构建了ltBlipL41/1和ctBlipL41/1融合基因及其原核表达系统。所表达的rLTBrLipL41/1和rCTBrLipL41/1融合蛋白有良好的免疫原性和佐剂活性。lipL41基因存在于不同问号钩体血清群中并高频率表达。rLTBrLipL41/1和rCTBrLipL41/1具有成为钩体属特异性疫苗抗原的良好前景。

关键词：问号钩端螺旋体 lipL41基因基因表达重组抗原免疫原性融合基因疫苗抗原

变性梅毒重组抗原免疫印迹技术的建立及其在鉴别梅毒血清学假阳性实验的应用

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现代检验医学杂志 2023年第2期38卷 150-154页

作者：彭振亚张银辉陈安宁肖桂初靳晶邹钢陆学东中山大学附属第八医院广东深圳518033

目的为了评估临床梅毒抗体筛查中出现假阳性实验结果的真实性,建立了变性梅毒重组抗原免疫印迹技术,并应用于对临床非高危人群梅毒抗体筛查阳性血清进行验证确认,分析出现假阳性的可能性。方法采用梅毒TP47,TP45,TP17和TP15重组抗原,将... 详细信息

目的为了评估临床梅毒抗体筛查中出现假阳性实验结果的真实性,建立了变性梅毒重组抗原免疫印迹技术,并应用于对临床非高危人群梅毒抗体筛查阳性血清进行验证确认,分析出现假阳性的可能性。方法采用梅毒TP47,TP45,TP17和TP15重组抗原,将变性后的抗原与非变性的抗原配对包被在硝酸纤维膜载体上,建立梅毒免疫印迹抗体谱检测方法。收集临床经电化学发光免疫分析仪及配套试剂检测的梅毒螺旋体抗体假阳性的非性病高危人群门诊和住院患者血清样本56例、临床确认梅毒患者血清样本25例和健康体检人员样本30例进行方法学验证。并用该方法对1例特殊的“梅毒患者”进行了鉴别。结果根据建立的变性与非变性抗原配对梅毒免疫印迹抗体谱检测结果判定模式,56例临床梅毒螺旋体抗体筛查假阳性样本,对四种变性重组抗原均不发生反应,无阳性条带。但是对二种以上非变性抗原发生弱阳性反应,出现阳性条带;25例梅毒患者对照样本,对四种非变性和变性重组抗原均有反应,出现强阳性条带;30例健康体检人员样本,对四种非变性和变性重组抗原均无反应。梅毒螺旋体特异性抗体阳性特殊“梅毒患者”血清样本,对四种变性重组抗原均为阴性反应,但对四种非变性重组抗原出现阳性反应。患者样本经血清免疫固定电泳分析,结合临床资料诊断为IgGλ型单克隆免疫球蛋白血症。结论变性梅毒重组抗原免疫印迹抗体谱检测,可有效鉴别临床梅毒抗体假阳性样本。但是,对于梅毒患者的确认一定要将检验结果结合患者的流行病学史、临床表现等进行诊断。

关键词：梅毒梅毒螺旋体重组抗原免疫印迹技术生物学假阳性

重组抗原酶联免疫吸附试验检测人疱疹病毒6型抗体的研究

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中华检验医学杂志 2006年第3期29卷 244-245页

作者：王云罗兵闫丽平王笑峰李慧青岛大学医学院微生物教研室 266021 青岛市中心医院检验科青岛大学医学院附属医院检验科

人疱疹病毒6型(HHV-6)与幼儿急疹(ES)、良性和恶性淋巴增生性疾病、慢性疲劳综合征及多发性硬化症等发生有关,在免疫功能低下患者可引起致死性感染。

关键词：人疱疹病毒6型特异性抗体检测准确性酶联免疫吸附试验重组抗原 HHV-6 淋巴增生性疾病慢性疲劳综合征多发性硬化症免疫功能低下

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重组抗原用于弓形虫病免疫诊断研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2004年第5期16卷 393-398页

作者：司进朱荫昌南京医科大学医学分子生物学研究所南京210029 江苏省血吸虫病防治研究所江苏省寄生虫分子生物学重点实验室

弓形虫是一种世界范围内寄生的原虫,全世界大约有1/3的人感染弓形虫[1].正常人感染弓形虫后无明显的临床症状,但对孕妇来说,弓形虫可以穿过胎盘屏障,引起流产、畸胎或死胎;尤其对AIDS患者,弓形虫性脑炎可能是致命的[2].除了感染人,弓形... 详细信息

弓形虫是一种世界范围内寄生的原虫,全世界大约有1/3的人感染弓形虫[1].正常人感染弓形虫后无明显的临床症状,但对孕妇来说,弓形虫可以穿过胎盘屏障,引起流产、畸胎或死胎;尤其对AIDS患者,弓形虫性脑炎可能是致命的[2].除了感染人,弓形虫还可以感染家畜,引起羊和猪的流产[3].目前虽已建立了多种弓形虫病诊断试剂盒,但至今似还没有令人十分满意的弓形虫病诊断试剂盒,所以,研制高质量的血清检测试剂盒,对于弓形虫病的防治具有较为重要的意义.弓形虫病诊断方法大致可分为病原学检查、免疫学方法、分子生物学技术等3类.

关键词：弓形虫病感染重组抗原免疫诊断诊断试剂盒流产畸胎家畜寄生原虫