检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组戊型肝炎疫苗抗原工程菌发酵工艺的优化

中国生物制品学杂志 2012年第12期25卷 1697-1701页

作者：徐军曹玉锋时成波李铮长春生物制品研究所有限责任公司生物技术研究室长春130062

目的优化重组戊型肝炎疫苗抗原工程菌的发酵工艺,为其规模化生产奠定基础。方法以目的蛋白的表达量及菌体浓度作为综合评价指标,对重组戊型肝炎疫苗抗原工程菌的摇瓶发酵温度、初始pH值、溶解氧、IPTG浓度及诱导时间进行优化;以摇瓶发... 详细信息

目的优化重组戊型肝炎疫苗抗原工程菌的发酵工艺,为其规模化生产奠定基础。方法以目的蛋白的表达量及菌体浓度作为综合评价指标,对重组戊型肝炎疫苗抗原工程菌的摇瓶发酵温度、初始pH值、溶解氧、IPTG浓度及诱导时间进行优化;以摇瓶发酵结果为基础,进一步对发酵罐培养工艺中诱导时机、诱导时间及补料培养基配方进行优化;以确定的罐发酵工艺条件连续发酵5批,验证该发酵工艺。结果最适摇瓶发酵工艺条件为:发酵温度为37℃,初始pH值为7.0,高溶氧,IPTG诱导浓度为0.05 mmol/L,诱导时间为4 h;最适罐发酵工艺条件为:菌体A600值约为40时开始诱导,诱导时间为4 h,补料培养基配方为葡萄糖25%,MgSO4.7H2O 0.5%。按照确定的工艺连续发酵5批,最终菌体A600均达50.0以上,目的蛋白的表达量均高于15%。结论优化的重组戊型肝炎疫苗抗原工程菌的发酵工艺稳定性良好,已达到中试生产规模的要求。

关键词：重组戊型肝炎疫苗发酵表达量菌体浓度

重组戊型肝炎疫苗应用于16～65岁人群的安全性及免疫原性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华疾病控制杂志 2018年第7期22卷 736-740页

作者：梁祁李利时成波王文娟吕云磊陆秀芳孟繁岳唐蓉胡家垒陶红江苏省疾病预防控制中心疫苗临床评价所江苏南京210009 长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130012 常州市金坛区疾病预防控制中心办公室江苏常州213200

目的评价长春生物制品研究所有限责任公司研制的重组戊型病毒性肝炎(戊肝)疫苗用于16~65周岁人群免疫的临床安全性与免疫原性。方法先筛选出戊肝抗体阴性者作为试验目标人群,再采用单中心、随机、盲法、同类制品平行对照的试验设计,选... 详细信息

目的评价长春生物制品研究所有限责任公司研制的重组戊型病毒性肝炎(戊肝)疫苗用于16~65周岁人群免疫的临床安全性与免疫原性。方法先筛选出戊肝抗体阴性者作为试验目标人群,再采用单中心、随机、盲法、同类制品平行对照的试验设计,选择戊肝抗体阴性的16~65周岁健康受试者60人,按1∶1的比例随机接种试验疫苗和阳性对照疫苗,免疫程序均为0,1,6月程序,记录每针次接种后28 d内的不良反应/事件发生情况。采集免疫接种前和全程免疫接种后1个月的血液标本,进行戊肝Ig G浓度检测。结果招募369名受试者,经筛查戊肝抗体阴性者有187人,最终入组60人。试验组和阳性对照组免疫接种后总体征集性不良反应发生率分别为43.33%和40.00%,严重程度以轻、中度为主,最常见接种部位和全身不良反应分别为疼痛和头痛,不良反应的发生在组间差异均无统计学意义(均有P>0.05)。免疫后试验组与阳性对照组戊肝抗体阳性率均达到100%,抗体几何平均浓度(geometric mean concentration,GMC)分别为72.53 U/ml和87.49 U/ml。结论试验疫苗具有良好的安全性和免疫原性,可以开展Ⅱ期临床试验。

关键词：重组戊型肝炎疫苗安全性免疫原性

重组戊型肝炎疫苗类病毒颗粒纯度高效分子排阻色谱检测方法的建立、验证及应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2018年第12期31卷 1367-1372页

作者：吴清胜李媛媛北京生物制品研究所有限责任公司

目的建立检测重组戊型肝炎疫苗类病毒颗粒(hepatitis E virus-like particle,HE-VLP)纯度的高效分子排阻色谱法(size-exclusion high performance liquid chromatography,SEC-HPLC),并对该方法进行验证及应用。方法利用TSK G5000 PW色谱柱(7. 5 mm×30 cm)和LC-20AT高效液相色谱系统检测HE-VLP纯度,并对该方法的专属性、线性、重复性、中间精密度、耐用性进行验证,确定检测限及定量限。应用建立的方法检测戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)疫苗原液以及纯化工艺过程中粗纯液、超滤液、超滤透过液、层析纯化液纯度;将蛋白原液与铝佐剂进行吸附制备疫苗半成品,应用建立的方法检测游离蛋白含量。结果空白溶剂在设定的积分范围内无特异峰出现;样品浓度在50~500μg/mL时,溶液浓度与吸收峰峰面积呈线性相关,相关系数R2=0. 999;6次重复进样峰面积相对标准偏差(RSD)为0. 47%;不同实验人员间隔7 d对相同样品进行5次检测,RSD均小于2. 0%;将样品浓度2μg/mL,进样体积20μL,即0. 04μg定为检测限,将样品浓度4μg/mL,进样体积20μL,即0. 08μg定为定量限;耐用性试验中,PBS浓度在0. 05~0. 001 mol/L范围内,保留时间RSD为0. 89%,峰面积RSD为0. 94%。该方法可在20 min内完成检测,原液纯度均不低于95%;随着蛋白纯化步骤的进行,纯度逐步显著提高;吸附完全性检测显示灵敏度较为理想。结论建立的SEC-HPLC法各项指标均符合要求,可用于HE-VLP蛋白的纯度检测。

关键词：重组戊型肝炎疫苗类病毒颗粒高效分子排阻色谱法纯度

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组戊型肝炎疫苗原液长期稳定性评价

中国生物制品学杂志 2017年第12期30卷 1233-1237,1273页

作者：贾媛迟祥李铮宋昊于爱东韩顺子常东英陈子杨迟春萍时成波曹玉锋刘照惠长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130012 长春博迅生物技术有限责任公司吉林长春130102

目的评价重组戊型肝炎疫苗原液的长期稳定性。方法将连续3批重组戊型肝炎疫苗原液置(-20±2)℃保存12个月,分别于第0、3、6、9和12月取样,依据《中国药典》第三部和第四部(2015版)和《重组戊型肝炎疫苗制造及检定规程(暂定)》规定进行... 详细信息

目的评价重组戊型肝炎疫苗原液的长期稳定性。方法将连续3批重组戊型肝炎疫苗原液置(-20±2)℃保存12个月,分别于第0、3、6、9和12月取样,依据《中国药典》第三部和第四部(2015版)和《重组戊型肝炎疫苗制造及检定规程(暂定)》规定进行无菌检查、蛋白含量、纯度、相对分子质量、等电点和细菌内毒素检测及紫外光谱扫描;第6和12月,分别将3批原液配制成疫苗进行效力测定。结果 3批疫苗原液在各时间点无菌检查均为阴性,细菌内毒素含量均小于5 EU/ml,蛋白含量在3.47~3.81 mg/ml,单体及二聚体总量在96.0%以上,二聚体占总蛋白的85%~100%,单体相对分子质量为19 500~19 700,等电点检查主区带在4.05~5.80之间,紫外光谱扫描最大吸收峰在(278±3)nm,3批原液第6和12月的效力ED_(50)值≤1.0μg,均符合暂定制检规程。结论重组戊型肝炎疫苗原液在(-20±2)℃可稳定存放12个月,本研究为原液的存放效期提供了可靠的数据支持。

关键词：重组戊型肝炎疫苗原液长期稳定性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组戊型肝炎疫苗的无菌生产工艺验证

广东化工 2017年第2期44卷 47-48页

作者：王先厦门万泰沧海生物技术有限公司生产部福建厦门361022

采用胰酪胨大豆肉汤培养基进行模拟灌装,对灌装后的注射器进行培养,根据注射器内培养基的污染情况,评估现行重组戊型肝炎疫苗无菌生产工艺的有效性。结果表明:灌装后的注射器经培养均未出现培养基污染,现行重组戊型肝炎疫苗的无菌生产... 详细信息

采用胰酪胨大豆肉汤培养基进行模拟灌装,对灌装后的注射器进行培养,根据注射器内培养基的污染情况,评估现行重组戊型肝炎疫苗无菌生产工艺的有效性。结果表明:灌装后的注射器经培养均未出现培养基污染,现行重组戊型肝炎疫苗的无菌生产工艺可确保产品的无菌性。

关键词：重组戊型肝炎疫苗无菌工艺培养基模拟灌装试验

重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体的稳定性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2016年第12期29卷 1233-1237页

作者：李铮贾媛迟祥宋昊唐剑光徐军陈子杨张健锋孟多佳韩顺子于爱东迟春萍时成波刘照惠长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130062 苏州金诺生物技术有限公司江苏苏州215414

目的分析重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体在不同条件下的稳定性,为该抗原的纯化工艺及原液储存条件提供参考。方法将重组戊型肝炎疫苗原液置不同温度、不同p H、高盐浓度、高盐低p H条件下及低温长期储存后,通过透射电镜观察P... 详细信息

目的分析重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体在不同条件下的稳定性,为该抗原的纯化工艺及原液储存条件提供参考。方法将重组戊型肝炎疫苗原液置不同温度、不同p H、高盐浓度、高盐低p H条件下及低温长期储存后,通过透射电镜观察P179抗原蛋白颗粒状态,SDS-PAGE分析二聚体含量。结果 HEV抗原在不同温度、不同p H、高盐浓度、高盐低p H条件下,及低温储存不同时间,P179抗原蛋白颗粒维持在20 nm左右,二聚体含量不低于80%;P179抗原低温储存24个月,其蛋白颗粒及二聚体含量均未发生明显改变。结论重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体稳定性较好。

关键词：重组戊型肝炎疫苗 P179抗原蛋白颗粒二聚体稳定性