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中国血吸虫病防治杂志 2009年第3期21卷 183-186页

作者：孟睿杜晓棠储凯侯敏王荣芝王勇张美娟田芳张媛媛徐进梅季旻珺吴海玮南京医科大学病原生物学系南京210029

目的探讨重组的全长日本血吸虫副肌球蛋白(rSj97)的免疫保护作用以及作为疫苗的适用佐剂组合。方法重组副肌球蛋白分别与弗氏佐剂(rSj97-FA)、ISA206(rSj97-ISA206)、CpGODN(rSj97-CpGODN-IFA)联合免疫C57BL/6小鼠,在0、2、4周共进行3... 详细信息

目的探讨重组的全长日本血吸虫副肌球蛋白(rSj97)的免疫保护作用以及作为疫苗的适用佐剂组合。方法重组副肌球蛋白分别与弗氏佐剂(rSj97-FA)、ISA206(rSj97-ISA206)、CpGODN(rSj97-CpGODN-IFA)联合免疫C57BL/6小鼠,在0、2、4周共进行3次免疫注射,剂量为每只每次25μgrSj97。第3次免疫后2周,经腹部贴片感染日本血吸虫尾蚴(40±2)条。第12周剖杀冲虫,计算减虫率与减卵率。同时,在0、2、6、8、12周对各组小鼠采血,检测血清中特异性IgG1与IgG2a抗体。结果相对于未免疫组,rSj97-FA组的减虫率为27.6%、减卵率为-2.3%,rSj97-ISA206组的减虫率为45.3%(P重组副肌球蛋白分别与3种佐剂联合使用均能诱导小鼠产生特异性IgG1和IgG2a,但仅ISA206佐剂组诱导C57BL/6小鼠产生显著的抗日本血吸虫保护力,rSj97-ISA206是潜在用于大动物免疫的疫苗组合。

关键词：日本血吸虫重组副肌球蛋白 ISA206 佐剂小鼠保护力

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重组全长副肌球蛋白在小鼠与水牛中杭日本血吸虫感染的保护力研究

重组全长副肌球蛋白在小鼠与水牛中杭日本血吸虫感染的保护力研究

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作者：孟睿南京医科大学

学位级别：硕士

日本血吸虫病是一种严重危害我国人民身体健康的寄生虫病。根据2006年的调查资料,我国现有血吸虫病人51万多,有6000多万人口受到血吸虫病的威胁。近年,我国血吸虫病防治以人畜同步化疗为主,消灭易感地带钉螺和加强健康教育为辅的综合防... 详细信息

日本血吸虫病是一种严重危害我国人民身体健康的寄生虫病。根据2006年的调查资料,我国现有血吸虫病人51万多,有6000多万人口受到血吸虫病的威胁。近年,我国血吸虫病防治以人畜同步化疗为主,消灭易感地带钉螺和加强健康教育为辅的综合防治措施。多年的防治实践证明,这一综合措施虽然有效,但效果难以巩固,不仅受到生态环境和防治力度变化的挑战,而且面临着人群化疗后再感染的困扰。单纯依赖化疗难以达到防治目标,鉴于疫苗在许多传染病控制中无可比拟的作用,研发血吸虫病疫苗,获取化疗短期效应与疫苗接种诱导的长期免疫预防作用相结合的双重效果,将是未来有效防治血吸虫病的主要奋斗目标。在我国,耕牛作为主要的保虫宿主和传染源在血吸虫病的流行过程中起着重要的传播作用。发展适合耕牛等主要保虫宿主的动物疫苗对血吸虫病的控制具有重要意义,此举不仅可通过控制传播降低人群血吸虫病流行率,而且为人用血吸虫病疫苗的研制提供一定的理论依据。血吸虫病疫苗的研究历时70余年,大体上经历了死疫苗、减毒活疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗研究阶段。作为血吸虫病疫苗候选分子之一的副肌球蛋白,在曼氏血吸虫或日本血吸虫的动物模型中均获得了不错的保护效果。相比其他血吸虫病疫苗候选分子,副肌球蛋白诱生的保护力较为突出,虫源性或重组副肌球蛋白分子片段,以及全长的DNA疫苗在小鼠、水牛等动物实验中的减虫率可以达到60%以上。然而,许多保护力实验中所用的副肌球蛋白为成虫的生化纯化产物,或大肠杆菌中的重组表达产物。生化纯化需要大量的虫源,而重组表达一直未能解决全长片段纯化困难、得率偏低的问题,长期以来,成为阻止其作为潜在疫苗快速推进到大规模研究,尤其是应用于大动物实验的障碍。免疫佐剂在调节免疫和提高疫苗效价方面具有重要作用,是疫苗获得理想效果的一条重要途径。良好的免疫佐剂不仅应该能够加强抗原的免疫原性和免疫保护效果,同时也应该不引起过敏反应或激发自身免疫反应等副作用。本研究使用的重组副肌球蛋白分子表达于大肠杆菌,采用改进的纯化方法后纯度能够达到95%以上,适于大规模制备与研究用途,重组蛋白结构和生物学特性与虫源性副肌球蛋白一致;先后使用多种佐剂与重组副肌球蛋白联合免疫小鼠,寻求最佳的疫苗组合;探索了ISA206佐剂与重组副肌球蛋白联合免疫水牛后对日本血吸虫感染的抵抗能力,以此来寻求适合于家畜(主要为耕牛)等保虫宿主的副肌球蛋白疫苗组合。本研究获得如下结果:1.大规模重组表达的全长副肌球蛋白分子的纯度达到95%以上,其中LPS含量为0.07EU/ml,与虫源性副肌球蛋白分子具有相同的二级结构和生物学功能,后者包括与免疫球蛋白的结合特性以及与胶原物质的结合特性。2.在昆明鼠与C57BL/6小鼠模型中,rSj97-Alhydrogel未能诱导理想的保护力。3.在C57BL/6小鼠模型中,就减虫率与减卵率而言,与rSj97-FA组和rSj97-CpG-ODN组相比,rSj97-ISA206组对C57BL/6小鼠具有显著的保护效果,分别为45.3%(P副肌球蛋白的保护效果研究,尤其是在大动物体内的研究,为构建适合于水牛的副肌球蛋白疫苗组合提供了重要的基础资料。

关键词：重组副肌球蛋白 C57BL/6小鼠水牛 ISA206佐剂保护力

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重组日本血吸虫副肌球蛋白诱导水牛保护性免疫的研究

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中国寄生虫病防治杂志 2000年第4期13卷 282-284页

作者：周金春易新元曾宪芳张顺科曾庆仁蔡春 Joanna Wong Don Mc Manus 湖南医科大学寄生虫学教研室湖南长沙410078 Tropical Health Program the Queensland Institute of Medical Research

为观察重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)对水牛的保护效果。 2 0头水牛随机分为佐剂 (Quil A)对照组和抗原 (r Sj97)免疫组。对照组仅注射 Quil A,而免疫组注射 Quil A加 r Sj97,在第 0、2、15周肌肉注射。第 3次免疫后两周经腹部贴... 详细信息

为观察重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)对水牛的保护效果。 2 0头水牛随机分为佐剂 (Quil A)对照组和抗原 (r Sj97)免疫组。对照组仅注射 Quil A,而免疫组注射 Quil A加 r Sj97,在第 0、2、15周肌肉注射。第 3次免疫后两周经腹部贴片攻击感染 10 0 0条日本血吸虫尾蚴 ,感染后第 49d剖杀冲虫 ,计数虫数和肝卵数。结果显示 ,与对照组相比 ,r Sj97免疫组的减虫率为 49.9% (P副肌球蛋白可作为抗血吸虫病的候选疫苗分子。

关键词：日本血吸虫重组副肌球蛋白免疫水牛

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重组日本血吸虫副肌球蛋白诱导小鼠保护力的研究

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中国血吸虫病防治杂志 2001年第4期13卷 198-200页

作者：蔡春周金春张顺科曾庆仁曾宪芳易新元湖南医科大学寄生虫学教研室长沙410078

目的　用重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)免疫小鼠 ,观察保护效果。方法　小鼠随机分为 3组 ,免疫组在 0、2、15周 ,皮下注射 r Sj97加佐剂 Quil A ,同一时间佐剂对照组和空白对照组注射等量 Quil A和缓冲液 A,第 3次免疫后 2周 ,每... 详细信息

目的　用重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)免疫小鼠 ,观察保护效果。方法　小鼠随机分为 3组 ,免疫组在 0、2、15周 ,皮下注射 r Sj97加佐剂 Quil A ,同一时间佐剂对照组和空白对照组注射等量 Quil A和缓冲液 A,第 3次免疫后 2周 ,每鼠经腹部贴片攻击感染 5 0条尾蚴 ,感染后 45 d剖杀小鼠 ,观察其减虫和减卵效果。结果　与缓冲液和 Quil A对照组相比 ,r Sj97+Quil A免疫组的减虫率分别为 44 .1% (P<0 .0 1)和 17.8% (P<0 .0 5 ) ,每克肝组织虫卵数 (L EPG)减少率分别为76 .5 % (P<0 .0 1)和 16 .9% (P<0 .0 5 ) ,每雌肝组织虫卵数 (L EPF)减少率分别为 6 2 .2 % (P<0 .0 1)和 6 .1% (P<0 .0 5 )。结论　 r Sj97加佐剂 Quil

关键词：日本血吸虫重组副肌球蛋白免疫小鼠

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