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癌症 2000年第10期19卷 890-892页

作者：卢文菊张晓实罗进贤韦永芳广州医学院检验系广东广州510182 中山医科大学肿瘤防治中心广东广州510060 中山大学生物工程研究中心广东广州510275

目的：观察重组人血管抑素（ recombinant human angiostatin,rhAGN）对鼻咽癌皮下移植瘤生长的抑制作用，探讨其应用价值。方法：应用 MTT法观察 rhAGN对 CNE 1鼻咽癌细胞和 HDMEC血管内皮细胞增殖的影响；建立 CNE 1鼻咽癌裸鼠皮下移... 详细信息

目的：观察重组人血管抑素（ recombinant human angiostatin,rhAGN）对鼻咽癌皮下移植瘤生长的抑制作用，探讨其应用价值。方法：应用 MTT法观察 rhAGN对 CNE 1鼻咽癌细胞和 HDMEC血管内皮细胞增殖的影响；建立 CNE 1鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤模型，皮下注射不同剂量 rhAGN，治疗期为 30天，观察肿瘤体积和重量变化。结果： (1)在 0.5μ g/ml、 1.0μ g/ml和 2.0μ g/ml测试浓度下，培养 72 h， rhAGN对 CNE 1细胞生长抑制率为 3.4％、 5.2％和 5.9％，对 HDMEC细胞生长抑制率为 39.4％、 65.3％和 89.7％； (2)rhAGN剂量为 50 mg· (kg· d)－ 1、 100mg· (kg· d)－ 1和 200mg· (kg· d)－ 1时的抑瘤率分别为 32.3％、 64.0％和 83.2％。结论： rhAGN在体外对 CNE 1细胞增殖无明显抑制作用，在体内能显著抑制 CNE 1鼻咽癌移植瘤的生长，具有潜在的应用前景。

关键词：鼻咽肿瘤 MTT法重组人血管抑素 rhAGN

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重组人血管抑素的生物学活性研究

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苏州大学学报（医学版） 2010年第4期30卷 732-734,766,898页

作者：杨炳华何杨赵益明金坚苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所江苏苏州215006 江南大学医药学院江苏无锡214000

目的通过培养人微血管内皮细胞(HMEC-1)及建立鸡胚尿囊膜模型(CAM)观察重组人血管抑素(rhAS)的生物学活性。方法将不同浓度的rhAS加入含HMEC-1的培养瓶中,培养48h后,用MTT法检测其对细胞的抑制率;用乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性测定检测rhA... 详细信息

目的通过培养人微血管内皮细胞(HMEC-1)及建立鸡胚尿囊膜模型(CAM)观察重组人血管抑素(rhAS)的生物学活性。方法将不同浓度的rhAS加入含HMEC-1的培养瓶中,培养48h后,用MTT法检测其对细胞的抑制率;用乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性测定检测rhAS诱导HMEC-1凋亡的作用;用CAM模型检测rhAS对血管的抑制作用。结果 rhAS在体外可显著抑制HMEC-1细胞的增殖;在体内则可明显抑制CAM上血管的生成。通过AchE活性测定,发现rhAS既可抑制HMEC-1细胞的增殖,也可诱导HMEC-1细胞凋亡,其作用的不同与rhAS剂量相关。结论 rhAS是一个较有前景的抗肿瘤血管药物。

关键词：重组人血管抑素人微血管内皮细胞鸡胚尿囊膜模型生物学活性

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重组人血管抑素(rhAGN)包涵体变性与复性初探

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药物生物技术 2005年第2期12卷 85-89页

作者：田亚平邵玲莉金坚江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214036

在优化的培养条件下,进行rhAGN5L罐发酵,菌体干重由原摇瓶发酵的3.02g/L增加到8.06g/L,表达量依然稳定在35%;对所产生的包涵体进行溶解变性研究,确定较佳变性缓冲液组成为8mol/L尿素,50mmol/LTrisHCl,20mmol/LDTT,pH值8.0;凝胶过滤色谱... 详细信息

在优化的培养条件下,进行rhAGN5L罐发酵,菌体干重由原摇瓶发酵的3.02g/L增加到8.06g/L,表达量依然稳定在35%;对所产生的包涵体进行溶解变性研究,确定较佳变性缓冲液组成为8mol/L尿素,50mmol/LTrisHCl,20mmol/LDTT,pH值8.0;凝胶过滤色谱复性效果相对较好,蛋白浓度4.28μg/ml(IC50)时对HEMC细胞的抑制活性达50.1%。

关键词：重组人血管抑素包涵体变性复性

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重组人血管抑素的克隆、表达及活性测定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2000年第4期7卷 285-287页

作者：姜颖孙陆果于永利白求恩医科大学免疫学教研室长春130021

目的 :研究血管抑素 (angiostatin)的临床应用价值 ,将其开发为多肽类药物。方法 :以RT PCR从胎儿肝脏钓取人血管抑素全编码区cDNA ,使用Pichia分泌型酵母表达系统表达重组人血管抑素 ,重组蛋白经肝素亲和层析纯化后 ,以鸡胚尿囊膜法血... 详细信息

目的 :研究血管抑素 (angiostatin)的临床应用价值 ,将其开发为多肽类药物。方法 :以RT PCR从胎儿肝脏钓取人血管抑素全编码区cDNA ,使用Pichia分泌型酵母表达系统表达重组人血管抑素 ,重组蛋白经肝素亲和层析纯化后 ,以鸡胚尿囊膜法血管生成实验及小鼠创伤愈合实验检测活性。结果 :重组人血管抑素在酵母系统中得到较高量表达 (5mg/L) ,经肝素亲和层析纯化 ,SDS PAGE显示分子量为 43kD。活性实验表明 ,重组蛋白能够抑制新生血管形成、抑制伤口愈合。结论 :重组人血管抑素在酵母系统中实现高效表达 ,并具有很好的生物学活性。

关键词：表达活性重组人血管抑素多肽类药物克隆

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