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重组人碱性成纤维细胞生长因子等电聚焦分析

药物分析杂志 2001年第4期21卷 251-253页

作者：王永保杨化新徐康森中国药品生物制品检定所北京100050

目的 :建立重组人成纤维细胞生长因子的等电聚焦电泳法。方法 :利用载体两性电解质和聚丙烯酰胺 ,采用毛细管灌胶法自制平板胶 ,并从凝胶浓度、电极溶液等方面优化重组人成纤维细胞生长因子的等电聚焦电泳条件。结果 :pH梯度曲线线性回... 详细信息

目的 :建立重组人成纤维细胞生长因子的等电聚焦电泳法。方法 :利用载体两性电解质和聚丙烯酰胺 ,采用毛细管灌胶法自制平板胶 ,并从凝胶浓度、电极溶液等方面优化重组人成纤维细胞生长因子的等电聚焦电泳条件。结果 :pH梯度曲线线性回归方程为Y =- 1 2 5 93X + 10 80 8,r =0 993 9。重组人成纤维细胞生长因子的等电点为 9 4(n =5 ,RSD =1 0 % )。结论 :该法简便 ,实用 ,重复性好 ,为碱性多肽或蛋白的等电点测定提供了实验依据。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子平板等电聚焦 rbbFGF 基因工程蛋白类药

重组人碱性成纤维细胞生长因子对缩小兔急性心肌梗死面积作用的观察

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中国循环杂志 2002年第3期17卷 232-234页

作者：李易马雁冰孙林冮宏映光雪峰蒲里津昆明医学院第二附属医院心内科云南省昆明市650101 中国医学科学院协和医科大学医学生物研究所分子生物研究室

目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌... 详细信息

目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接 4点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及心电图QRS积分观察rhbFGF对兔急性心肌梗死面积的影响。结果 :①血清心肌酶学观察 :2组左前降支结扎后 2 4h与基础值比较血清谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、α 羟丁酸脱氢酶均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,2组左前降支结扎后48h与基础值比较 ,除生理盐水组的谷草转氨酶和rhbFGF组的谷草转氨酶及乳酸脱氢酶同工酶外 ,其它均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。左前降支结扎后 48h ,rhbFGF组较生理盐水对照组乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶及肌酸激酶MB同工酶明显降低 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。生理盐水对照组乳酸脱氢酶同工酶 ,左前降支结扎后48h与左前降支结扎后 2 4h比较升高 ,而在rhbFGF组降低 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。②心电图QRS积分 :左前降支结扎后 6周rhbFGF组QRS积分 (4 3 0± 0 95 )

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子急性心肌梗死心肌酶学心电图

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重组人碱性成纤维细胞生长因子的柱复性研究

中国生物工程杂志 2005年第6期25卷 36-39页

作者：汪炬曹莹洪岸刘侃暨南大学生物工程研究所广州510632

收集rhbFGF工程菌菌体,包涵体纯化后经凝胶过滤柱复性,所得复性后bFGF通过肝素亲和柱纯化并测活。各种复性方案中复性后bFGF比活最高为2.5×105U/mg,得率最高为74%。复性液中的变性剂浓度及是否含有还原剂,柱流速及柱体积都会影响复性后... 详细信息

收集rhbFGF工程菌菌体,包涵体纯化后经凝胶过滤柱复性,所得复性后bFGF通过肝素亲和柱纯化并测活。各种复性方案中复性后bFGF比活最高为2.5×105U/mg,得率最高为74%。复性液中的变性剂浓度及是否含有还原剂,柱流速及柱体积都会影响复性后bFGF的得率和活性。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子复性包涵体生物活性成纤维细胞因子细胞增殖

重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其在齿槽外科的应用

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中国临床康复 2005年第22期9卷 179-179,182页

作者：刘冰詹春华彭燕豪叶春婷梁佩红暨南大学医学院附属广州市红十字会医院口腔科广东省广州市510220 暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所广东省广州市510220

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵对牙科创面止血及伤口修复愈合的影响。方法实验于2003-01/2004-03在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所和口腔科完成。首先用Ⅰ型胶原蛋白、碱性成纤维细胞生长因子与... 详细信息

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵对牙科创面止血及伤口修复愈合的影响。方法实验于2003-01/2004-03在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所和口腔科完成。首先用Ⅰ型胶原蛋白、碱性成纤维细胞生长因子与壳聚糖配制成混合物,冷冻干燥成复合胶原海绵备用。收治60例错牙合畸型患者需行牙齿对称减数进行正畸治疗,共计对称拔除双尖牙212颗、磨牙14颗。左侧为实验组牙槽窝置入复合胶原海绵,右侧为对照组置入医用明胶海绵。记录拔牙创面止血时间,观察术后2,7d拔牙面创愈合情况。结果60例236颗牙拔除后的止血时间,实验组(45.9±12.8)s,对照组(89.0±16.4)s。实验组2d拔牙创面愈合78例(66%)、7d拔牙创面愈合117例(98%);对照组2d拔牙创面愈合25例(21%)、7d拔牙创面愈合95例(79%)。实验组创面愈合均好于对照组。结论重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的止血效果和促进创面愈合作用明显优于明胶海绵。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子胶原海绵复合齿槽外科广州市红十字会医院创面愈合制备 Ⅰ型胶原蛋白明胶海绵止血时间实验组对照组伤口修复创面止血暨南大学冷冻干燥正畸治疗观察术后愈合情况愈合作用

重组人碱性成纤维细胞生长因子对缺血心肌的保护作用

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中国急救医学 2002年第11期22卷 628-629页

作者：李易孙林马雁冰孙茂盛冮宏映楚天舒光雪峰昆明医学院第二附属医院心内科 650101 中国医学科学院-协和医科大学医学生物研究所分子生物研究室

目的　探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)在急性心肌缺血中对缺血心肌细胞的保护作用。方法　无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 (LAD) ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接四点注入兔缺血心肌内 ,通过... 详细信息

目的　探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)在急性心肌缺血中对缺血心肌细胞的保护作用。方法　无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 (LAD) ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接四点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及电镜病理观察rhbFGF对缺血心肌的保护作用。结果　①血清心肌酶学观察 :结扎LAD后 2 4h及4 8h心肌酶AST、LDH、LDH - 1、CK、CK -MB、HBDH与术前比较显著升高 ,术后 4 8hrhbFGF组心肌酶CK -MB较生理盐水对照组明显降低 ;术后 4 8h与 2 4h相比较 ,LDH - 1在生理盐水对照组升高而在rhbFGF组降低 ;②电镜观察 :与生理盐水对照组相比rhbFGF组心肌细胞间可见大量毛细血管生长 ,新生血管周围可见趋于正常的心肌细胞。结论　rhbFGF可缩小心肌梗死面积 ,对缺血心肌细胞可能有直接的保护作用。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子缺血心肌保护作用心肌缺血

重组人碱性成纤维细胞生长因子对脂肪干细胞分化的影响

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重组人碱性成纤维细胞生长因子对脂肪干细胞分化的影响

作者：徐扬阳郑州大学

学位级别：硕士

研究目的本实验目的在于探讨不同浓度重组人碱性成纤维细胞生长因子(Recombinant Human FGF-basic, rh-bFGF)对体外培养的人脂肪源干细胞(human adipose-derived stem cells, hAS Cs)诱导分化为脂肪细胞的影响,通过观察hASCs诱导分化... 详细信息

研究目的本实验目的在于探讨不同浓度重组人碱性成纤维细胞生长因子(Recombinant Human FGF-basic, rh-bFGF)对体外培养的人脂肪源干细胞(human adipose-derived stem cells, hAS Cs)诱导分化为脂肪细胞的影响,通过观察hASCs诱导分化为脂肪细胞中新形成脂滴出现的时间、新形成脂肪细胞的增殖速率和成熟脂滴表面定位蛋白CIDEC的表达量,从而寻找体外促进hASCs向脂肪细胞分化所需加入rh-bFGF的最佳浓度。材料与方法 1.郑大五附院健康抽脂患者获得脂肪混悬液,采用胶原酶消化的方法,分离、提取hASCs,进行体外培养、扩增,在显微镜下进行细胞形态的观察,台盼蓝染色后对hASCs进行计数,应用流式细胞仪进行细胞表型的鉴定。将传至第三代的细胞进行成脂诱导并用油红O染色对其进行鉴定。 2. hASCs传至第三代时,分四组进行成脂诱导,将加入Ong/ml rh-bFGF的设为对照组,将加入10ng/mlrh-bFGF,20ng/ml rh-bFGF,40ng/ml rh-bFGF设为实验组。各组分别用油红O染色连续监测脂滴出现时间,并比较其差异是否有统计学意义。 3.各组分别于加入不同浓度的rh-bFGF之后的12h、24h、48h用MTT比色法检测hASCs诱导分化为脂肪细胞的细胞增殖率。 4.各组在成脂诱导的14d时,运用western印迹法检测成熟脂滴定位蛋白CIDEC的蛋白表达量,并比较其差异。结果 1.体外提取、培养的hASCs光镜下观察成梭形,流式细胞仪鉴定其表型均符合hASCs标准,成脂诱导第7天后镜下观察到大小不一的脂滴,油红O染色呈阳性。 2.各组在油红O染色时定性记录脂滴出现时间,实验组和对照组之间平均出现脂滴时间比较p细胞的增殖率。其中40ng/ml rh-bFGF的吸光度平均值为0.522±0.100。 4. Western印迹法检测实验组和对照组新形成脂滴表面定位蛋白CIDEC的表达量并进行比较,差异均有统计学意义(p细胞的时间和促进成脂细胞的增殖,脂滴表面蛋白CIDEC表达量随着实验组浓度升高而持续增加。其中以40ng/ml rh-bFGF为最佳浓度。

关键词：脂肪干细胞重组人碱性成纤维细胞生长因子脂肪细胞诱导分化

重组人碱性成纤维细胞生长因子与痴呆脑及其神经细胞凋亡相关基因的实验研究

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重组人碱性成纤维细胞生长因子与痴呆脑及其神经细胞凋亡相关基因...

作者：朱大明暨南大学

学位级别：硕士

目的：研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对原代培养新生大鼠海马神经细胞的影响和对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的作用。从体内和体外两方面探讨rh-bFGF对神经细胞凋亡的抑制作用及治疗AD的可能性。方法：采用体外培养新... 详细信息

目的：研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对原代培养新生大鼠海马神经细胞的影响和对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的作用。从体内和体外两方面探讨rh-bFGF对神经细胞凋亡的抑制作用及治疗AD的可能性。方法：采用体外培养新生海马神经细胞，加入聚集状态的Aβ建立AD样神经细胞模型，在正常成年大鼠脑室内注射聚集状态的Aβ建立AD样大鼠模型;实验组给予rh-bFGF。然后对细胞模型检测如下指标：Gimea’s,Hoechst33258染色法研究凋亡细胞的形态学变化：Annexin-V法定量分析细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳分析凋亡梯带：Westen-blot分析凋亡相关基因的表达;对大鼠模型检测如下指标：Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力的变化;免疫组化分析海马凋亡相关基因的表达;HE染色法研究脑组织中凋亡细胞的形态学变化。以观察rh-bFGF对老年性大鼠学习记忆障碍、凋亡细胞、凋亡相关基因表达情况的影响。结果：1在细胞模型上，1)rh-bFGF能改善凋亡细胞的形态学变化。2)rh-bFGF能抑制DNA凋亡梯带的出现，使细胞凋亡率下降。3)rh-bFGF能上调凋亡抑制基因Bcl-2在蛋白水平上的表达，下调凋亡促进基因Bax、ICE在蛋白水平上的表达。2在大鼠模型上，1)，定位航行试验中，模型组大鼠平均逃避潜伏期较正常组明显延长，而实验组同模型组比较有显著缩短;空间探索试验中，实验组在平台象限游泳距离百分比明显高于模型组。2)rh-bFGF能改善脑组织中凋亡细胞的形态学变化。3)rh-bFGF能上调凋亡抑制基因Bcl-2在蛋白水平上的表达，下调凋亡促进基因Bax、ICE在蛋白水平上的表达。结论：研究结果表明，rh-bFGF具有抑制Aβ对神经元的神经毒性作用，能毕业沦之：H。【小U‘U痴不＊仕儿仰汁刎胞州广川只Q山的”分俭M穴 4;：jta 改妒AD痴米人阶的学习l忆能力。几作用机制可能是巡过凋控凋亡相关基因 Bcl－2，Bax，ICE的表达对实1则／］u 说明rl。－bFGF是只有很好)I’发前景的AD治疗药物。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子 β-淀粉样蛋白阿尔茨海默病细胞凋亡细胞培养大鼠

重组人碱性成纤维细胞生长因子对慢性宫颈炎宫颈LEEP术后创面愈合的影响

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中国妇幼保健 2009年第10期24卷 1419-1420页

作者：刘爱民郭亮生夏美慧李连华吉林大学第二医院妇产科吉林长春130041 苏州大学附属第二医院妇产科

目的:观察慢性宫颈炎宫颈环形电切术(LEEP)术后外用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对宫颈创面愈合的影响及安全性。方法:将100例LEEP术后患者分为观察组(常规口服抗生素预防感染+rh-bFGF)和对照组(常规口服抗生素预防感染),观... 详细信息

目的:观察慢性宫颈炎宫颈环形电切术(LEEP)术后外用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对宫颈创面愈合的影响及安全性。方法:将100例LEEP术后患者分为观察组(常规口服抗生素预防感染+rh-bFGF)和对照组(常规口服抗生素预防感染),观察创面愈合情况及愈合时间,阴道流液、流血量及持续时间。结果:观察组创面愈合时间明显缩短,阴道流液量明显减少,持续时间缩短。结论:重组人碱性成纤维细胞生长因子可明显促进慢性宫颈炎LEEP术后宫颈创面的愈合。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子宫颈环形电切术创面愈合

重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌高密度发酵及表达产物的纯化

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中国生物制品学杂志 2002年第4期15卷 214-217页

作者：张淑子杨美华郭桥张红缨张今长春长生基因药业股份有限公司长春130012 长春生物制品研究所长春130062 吉林大学分子酶学工程教育部重点试验室长春130023

目的研究重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌高密度发酵和表达产物的纯化工艺。方法采用最适基质浓度、pH、溶氧量、培养温度等发酵表达条件及产物提纯方法。结果菌体密度A6000达40.8,表达量达160mg/L。提纯的bFGF回收率为40％,生物... 详细信息

目的研究重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌高密度发酵和表达产物的纯化工艺。方法采用最适基质浓度、pH、溶氧量、培养温度等发酵表达条件及产物提纯方法。结果菌体密度A6000达40.8,表达量达160mg/L。提纯的bFGF回收率为40％,生物学活性（ED50）为 0.21ng/mL,比活性达4.76×106U/mg,其纯度、分子量、残余DNA等各项检测结果均符合“重组 DNA制品质量控制要点”。结论为hbFGF工业化生产和临床应用提供了依据。

关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌高密度发酵表达产物纯化