检索结果-南通市图书馆

拟南芥醛还原酶编码基因At3g04000表达模式分析及过量表达转基因植株获得

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

广西植物 2016年第6期36卷 698-706页

作者：包曙光魏情情刘智康聂祥门淑珍南开大学生命科学学院植物生物学和生态学系天津300071

植物体内的α,β-不饱和活性醛类化合物对植物细胞具有毒害作用,清除这些α,β-不饱和活性醛类化合物对于植物细胞维持正常的生命活动至关重要。前人研究报道通过体外酶活测定和异源瞬时表达鉴定拟南芥At3g04000基因编码的蛋白为NADPH... 详细信息

植物体内的α,β-不饱和活性醛类化合物对植物细胞具有毒害作用,清除这些α,β-不饱和活性醛类化合物对于植物细胞维持正常的生命活动至关重要。前人研究报道通过体外酶活测定和异源瞬时表达鉴定拟南芥At3g04000基因编码的蛋白为NADPH依赖的叶绿体醛还原酶(Arabidopsis NADPH-dependent chloroplastic aldehyde reductases,At Chl ADRs),推测其在清除叶绿体中长链(≥5)α,β-不饱和醛类物质中具有重要的功能。该研究主要构建了拟南芥At3g04000基因的表达模式分析载体Pro At3g04000:GUS、亚细胞定位分析载体At3g04000-EGFP和过量表达载体At3g04000-OE,并获得了转基因拟南芥,并通过实时定量PCR分析了At3g04000基因在拟南芥不同组织中的转录水平。结果表明:拟南芥At3g04000基因在幼苗中的转录水平最高,在莲座叶、茎生叶、花序和角果中均有较高的转录水平;而在根部和茎秆中的转录水平较低。通过对Pro At3g04000:GUS转基因植株的GUS染色分析可知,At3g04000基因在子叶、莲座叶和萼片的维管组织和保卫细胞中均有较强的表达,在根的维管组织中有较弱的表达。通过共聚焦显微镜对At3g04000-EGFP转基因植株的观察和分析发现,At3g04000不是定位于叶绿体中,而是定位在细胞质和细胞核中。该研究结果为深入研究拟南芥醛还原酶编码基因At3g04000的功能奠定了基础。

关键词：拟南芥 α,β-不饱和醛醛还原酶 At3g04000 表达模式过量表达

p38MAPK信号通路与醛糖还原酶对转化生长因子β1诱导人系膜细胞纤连蛋白表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华病理学杂志 2015年第11期44卷 778-782页

作者：黄平张月娟蒋涛张农复旦大学上海医学院病理学系 200032 贵州省人民医院病理科山东省烟台市烟台山医院病理科

目的探讨p38MAPK信号通路与醛糖还原酶（AR）对转化生长因子131（TGF·131）诱导人系膜细胞（HMC）细胞外基质成分纤连蛋白（FN）表达的影响。方法应用醛糖还原酶抑制剂和p38MAPK信号通路抑制剂、转染及RNA干扰技术分别作用于HMC后，再... 详细信息

目的探讨p38MAPK信号通路与醛糖还原酶（AR）对转化生长因子131（TGF·131）诱导人系膜细胞（HMC）细胞外基质成分纤连蛋白（FN）表达的影响。方法应用醛糖还原酶抑制剂和p38MAPK信号通路抑制剂、转染及RNA干扰技术分别作用于HMC后，再用TGF-1刺激，观察刺激前后HMC表达FN的情况。Westernblot和免疫荧光检测HMC的FN、AR、p38的变化及real—time聚合酶链反应（PCR）鉴定转染和RNA干扰效果。结果HMC在TGF—β1作用后，AR和FN蛋白表达升高；单独使用醛糖还原酶抑制剂Sorbinil、Zopolrestat并不能下调FN蛋白的表达；但预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后，再用TGF－β1刺激，FN蛋白表达下降（P〈0．05）；单独使用p38MAPK信号通路抑制剂后，FN蛋白表达下降；各组细胞预先使用Sorbinil、Zopolrestat、SB203580孵育后，再用TGF-β1刺激，FN蛋白表达下降（P〈0．05）；转染pCDNA3-AR后，HMC中ARmRNA及FN蛋白表达增多，再用TGF—β1刺激，FN蛋白表达明显上调（P〈0．05）；用AR—siRNA干扰AR基因后，HMC中ARmRNA及FN蛋白表达减少，即使用TGF-β1刺激，FN蛋白表达仍然下降（P〈0．05）。结论AR基因作为TGF-β1反应性基因，参与了HMC中TGF-Bl诱导的FN表达的调控，p38MAPK信号通路在这一过程中起着重要作用。

关键词：醛还原酶转化生长因子β1 纤连蛋白肾小球系膜细胞

PKC信号通路与醛糖还原酶对转化生长因子β1诱导人肾系膜细胞纤连蛋白表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华病理学杂志 2010年第6期39卷 405-409页

作者：黄平张月娟黄渊赵晶晶蒋涛张农复旦大学上海医学院病理学系 200032 山东省烟台市烟台山医院病理科

目的探讨PKC信号通路与醛糖还原酶在非高糖条件下对转化生长因子（TGF）-β1诱导人肾系膜细胞（HMC）细胞外基质成分纤连蛋白表达的影响.方法应用醛糖还原酶抑制剂、PKC信号通路抑制剂G（O）6983、转染pcDNA3-醛糖还原酶及siRNA分别... 详细信息

目的探讨PKC信号通路与醛糖还原酶在非高糖条件下对转化生长因子（TGF）-β1诱导人肾系膜细胞（HMC）细胞外基质成分纤连蛋白表达的影响.方法应用醛糖还原酶抑制剂、PKC信号通路抑制剂G（O）6983、转染pcDNA3-醛糖还原酶及siRNA分别作用于人系膜细胞后,再用TGF-β1刺激,观察刺激前后人系膜细胞表达纤连蛋白的情况.Western blot检测系膜细胞内纤连蛋白和醛糖还原酶的变化,即时RT-PCR鉴定转染和干扰效果.结果系膜细胞在TGF-β1作用后,醛糖还原酶和纤连蛋白表达升高;单独使用醛糖还原酶抑制剂并不能下调纤连蛋白的表达;但预先使用醛糖还原酶抑制剂孵育后,再用TGF-β1刺激,纤连蛋白表达减少为对照组的34%（P〈0.05）.单独使用PKC信号通路抑制剂并不能下调纤连蛋白的表达;用PKC信号通路抑制剂后,再用TGF-β1刺激,纤连蛋白表达下降为对照组的42%（P〈0.05）.预先使用醛糖还原酶抑制剂、PKC抑制剂孵育细胞后,再用TGF-β1刺激,纤连蛋白表达下降;转染pcDNA3-醛糖还原酶后,系膜细胞中醛糖还原酶mRNA表达增多超过10倍,纤连蛋白表达增加了2.5倍（P〈0.05）,再用TGF-β1刺激,纤连蛋白表达增加了3.6倍（P〈0.05）;转染siRNA后,系膜细胞中醛糖还原酶mRNA表达减少为对照组的20%,纤连蛋白表达减少为对照组的6%（P〈0.01）,即使再用TGF-β1刺激,纤连蛋白表达仍然下降,为对照组的12%（P〈0.01）.结论醛糖还原酶基因参与了系膜细胞中TGF-β1诱导纤连蛋白表达过程的调控,这一过程可能与PKC信号通路的活化有关.

关键词：醛还原酶转化生长因子β1 纤连蛋白

甘露醇对肝叶切除术患者红细胞醛糖还原酶、血浆一氧化氮和丙二醛水平的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华麻醉学杂志 2012年第5期32卷 545-547页

作者：王灿琴王忠云潘寅兵 210029南京医科大学第一附属医院麻醉科

目的探讨甘露醇对肝叶切除术患者红细胞醛糖还原酶（AR）活性、血浆一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）浓度的影响。方法择期行肝叶切除术患者40例，性别不限，年龄24～60岁，体重50～68kg，ASA分级Ⅰ或Ⅱ级，采用随机数字表法，将其随机分... 详细信息

目的探讨甘露醇对肝叶切除术患者红细胞醛糖还原酶（AR）活性、血浆一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）浓度的影响。方法择期行肝叶切除术患者40例，性别不限，年龄24～60岁，体重50～68kg，ASA分级Ⅰ或Ⅱ级，采用随机数字表法，将其随机分为2组（n=20）：生理盐水对照组（c组）和甘露醇组（M组）。2组均采用硬膜外复合全麻。术中阻断肝门即刻开始静脉输注20％甘露醇1．5ml／kg，经30min输完，c组给予等容量生理盐水。分别于麻醉前（基础状态）、肝门开放前即刻、术毕、术后1d、术后3d（T0-4）时采集静脉血样，测定红细胞AR活性、血浆NO和MDA浓度。结果与c组比较，M组L1,2时AR活性及血浆MDA浓度降低，血浆NO浓度升高（P〈0．05）。结论甘露醇可降低肝叶切除术患者肝缺血再灌注损伤，其机制与清除氧自由基，抑制脂质过氧化反应有关。

关键词：甘露醇肝切除术醛还原酶红细胞一氧化氮丙二醛

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

醛糖还原酶在非糖尿病疾病发生发展中作用

临床与实验病理学杂志 2007年第1期23卷 88-90页

作者：邹丽萍张农复旦大学上海医学院病理系教研室上海200032

醛糖还原酶（aldose reductase，AR）属于醛一酮还原酶超家族成员，种类多且组织分布广，具有极广泛的底物。AR是多元醇通路的限速酶，以NADPH为辅酶，将葡萄糖还原为山梨醇，继而在山梨醇脱氢酶（SDH）作用下，进一步将其氧化为果糖。... 详细信息

醛糖还原酶（aldose reductase，AR）属于醛一酮还原酶超家族成员，种类多且组织分布广，具有极广泛的底物。AR是多元醇通路的限速酶，以NADPH为辅酶，将葡萄糖还原为山梨醇，继而在山梨醇脱氢酶（SDH）作用下，进一步将其氧化为果糖。在糖尿病（diabetes mellitus，DM）高血糖条件下，AR以及多元醇通路被激活，引起山梨醇蓄积于多种组织中，如晶状体、血管、神经及肾脏等，可引起相应的症状。基于糖尿病实验动物模型基础上的广泛研究已证实：醛糖还原酶介导的多元醇糖代谢通路与糖尿病慢性并发症的发生和病变发展密切相关，AR活性增强是其主要原因。有关AR与糖尿病慢性并发症的关系研究已有很多报道，但对AR的生理功能仍不甚明了。大多数组织中均有AR分布，提示AR可能具有广泛而多样的生理功能。近年来，国内外学者发现在非糖尿病性的许多病理状态下也有AR的参与，如动脉粥样硬化、心肌缺血及非糖尿病性肾小球肾炎及肾脏纤维化等病变中AR的表达显著增高，并且与这些疾病的发生发展过程相关。以下即为对该领域近年来研究报道的综述。

关键词：醛还原酶糖尿病非糖尿病疾病文献综述

醛糖还原酶基因5′端两种基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

天津医药 2006年第8期34卷 513-515页

作者：汪玮琳于德民刘德敏天津医科大学代谢病医院 300070

目的:研究AR基因5′-端(AC)n多态标记及启动子区C(-106)T多态标记与2型糖尿病肾病易感性之间的关系。方法:研究对象为421例中国北方汉族人,包括320例2型糖尿病(DM)患者,其中162例合并糖尿病肾病(DN),另101例为非糖尿病对照组(CON)。用P... 详细信息

目的:研究AR基因5′-端(AC)n多态标记及启动子区C(-106)T多态标记与2型糖尿病肾病易感性之间的关系。方法:研究对象为421例中国北方汉族人,包括320例2型糖尿病(DM)患者,其中162例合并糖尿病肾病(DN),另101例为非糖尿病对照组(CON)。用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶-银染的方法检测AR基因5′-端(AC)n串联重复序列多态标记,同时设计引物,PCR扩增含AR基因调控区多态标记的C(-106)T的目的片断,以限制性内切酶XspI行酶切RFLP分析。比较各组间等位基因频率和基因型频率。结果:在2型糖尿病和对照组中共发现AR基因(AC)n序列的10种等位基因,28种基因型(Z-10￣Z+8),C(-106)T多态标记的CC、CT和TT3种基因型及C、T两种等位基因;上述各种等位基因和基因型频率在DM组和CON组之间无显著性差异;2型糖尿病合并肾病者Z-2等位基因、含Z-2等位基因的基因型、T等位基因及CT+TT基因型频率明显高于无肾病患者。结论:AR基因5′端(AC)n多态标记Z-2等位基因及C(-106)T多态标记T等位基因与2型糖尿病肾病易感性密切相关。

关键词：糖尿病,2型醛还原酶糖尿病肾病多态现象,遗传

原核表达醛（糖）还原酶及霍乱毒素类似嵌合蛋白的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

原核表达醛（糖）还原酶及霍乱毒素类似嵌合蛋白的研究

作者：周小芬广东工业大学

学位级别：硕士

本论文主要涉及了三个蛋白的基因克隆表达及相关抑制剂筛选的研究,主要包括与糖尿病综合症及炎症相关的醛糖还原酶和醛还原酶,以及一种具有脑靶向作用的多亚基全新的霍乱毒素类似嵌合蛋白的基因克隆表达和纯化,及采用醛糖还原酶和醛还... 详细信息

本论文主要涉及了三个蛋白的基因克隆表达及相关抑制剂筛选的研究,主要包括与糖尿病综合症及炎症相关的醛糖还原酶和醛还原酶,以及一种具有脑靶向作用的多亚基全新的霍乱毒素类似嵌合蛋白的基因克隆表达和纯化,及采用醛糖还原酶和醛还原酶进行抑制剂的筛选,主要得到的结果有以下三种。第一,醛糖还原酶(Aldehyde reductase AKR1B1, EC1.***.1.21)是醛酮还原酶家族成员,是多元醇通路的关键限速酶。越来越多的研究发现,AKR1B1与多种疾病有关,在一系列的炎症性疾病等中起着关键作用,与多种炎症介质的产生有直接的关系,可作为筛选非甾体抗炎药物的新靶点。为了筛选相应的酶抑制剂,为药物开发及临床应用提供参考,本研究构建了重组表达质粒pET-22b-AKR1B1-(His)6,将该质粒转化至Rosetta(DE3)宿主菌中,通过对表达条件的优化,确定表达条件为0.175 mMIPTG、14℃、80 rpm诱导14h,重组蛋白以可溶和沉淀两种形式表达。采用亲和纯化得到纯度为93%的AKR1B1-(His)6融合蛋白。使用Western blotting蛋白质进行鉴定,蛋白质序列分析仪测定氨基酸序列片段与目的蛋白序列比对。利用体外酶动学方法测定AKR1B1-(His)6的比活力为(9.4±0.23)U/mg。使用该蛋白建立醛还原酶抑制剂筛选方法,分别测定已上市的13种非甾体抗炎药(Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs,NSAIDs)对AKR1B1-(His)6的抑制活性。结果表明,萘普生、双氯芬酸、氟灭酸、布洛芬等对融合蛋白AKR1B1-(His)6有较强的抑制作用,可与抗糖尿病并发症药物联合用药。醛还原酶(Aldehyde reductase AKR1A1, EC 1.***.1.2)是醛酮还原酶家族成员,能将有毒醛还原成相应的醇。为研究非甾体抗炎药对AKR1A1的抑制作用,为非甾体抗炎药的副作用及临床应用提供参考,本研究构建了重组表达质粒pET-22b-(His)6-DDDD K-AKR1A1,将该质粒转化至Rosetta(DE3)宿主菌中,通过对表达条件的优化,确定表达条件为0.25 mMIPTG,16℃,80 rpm诱导14h,重组蛋白以可溶形式表达。采用亲和纯化得到纯度为90%的pelB-(His)6-DDDDK-AKR1A1融合蛋白。重组蛋白用肠激酶特异性剪切,经过Ni-NTA、Sephadex G-75再次纯化,得到纯度为98%的野生型AKR1A1蛋白。使用Western blotting和蛋白质序列分析对蛋白质进行鉴定。利用体外酶动学方法测定(His)6-DDDDK-AKR1A1的比活力为(41.3±0.1)U/mg、AKR1A1比活力为(79.4±0.15)U/mg。奥沙普秦、酮基布洛芬、氟灭酸、托芬那酸等对AKR1A1有很强的抑制作用,为抗炎药副作用提供参考。为了得到一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质,本研究还使用原核共表达系统,设计表达了一种全新的霍乱毒素类似嵌合蛋白。分别获得重组质粒pET-28a-CTB和pET-22b-EGFP-CTA2-TAT,利用pET-28a-CTB和pET-22b-EGFP-CTA2-TAT二者不同抗性,将双质粒分步转化到大肠杆菌BL21中。优化表达条件后,重组嵌合蛋白能以可溶形式表达。经过Ni-NTA、Sephadex G-75纯化,Western blotting对蛋白质进行鉴定,确定获得(CTB)5/EGFP-CTA2-TAT嵌合蛋白,为该蛋白进一步的入脑研究提供了物质基础。

关键词：醛糖还原酶醛还原酶组氨酸标签非甾体抗炎药嵌合蛋自

香椿子乙酸乙酯萃取物组分抗氧化及醛糖还原酶抑制作用研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

国际中医中药杂志 2018年第6期40卷 543-546页

作者：孟超左敏刘迪李义清韩瑾李万忠潍坊医学院药学院 261053 潍坊医学院附属医院药剂 261031

目的研究香椿子乙酸乙酯萃取物组分体外抗氧化作用及醛糖还原酶抑制作用.方法测定香椿子乙酸乙酯萃取物组分总还原力和二苯基苦苯肼自由基（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical,DPPH？）清除率.采用醛糖还原酶抑制模型,研究组分... 详细信息

目的研究香椿子乙酸乙酯萃取物组分体外抗氧化作用及醛糖还原酶抑制作用.方法测定香椿子乙酸乙酯萃取物组分总还原力和二苯基苦苯肼自由基（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical,DPPH？）清除率.采用醛糖还原酶抑制模型,研究组分对醛糖还原酶抑制作用及类型,并对其抗氧化活性与醛糖还原酶抑制作用进行相关性分析.结果香椿子乙酸乙酯萃取物组分具有一定抗氧化活性,总还原力顺序为：Fr.B〉Fr.A〉Fr.D〉Fr.C,DPPH＊清除率顺序为：Fr.A〉Fr.B〉Fr.D〉Fr.C.各组分可抑制醛糖还原酶活性并呈一定浓度依赖关系,对醛糖还原酶抑制能力顺序为Fr.B〉Fr.A〉Fr.C〉Fr.D,其中Fr.B对醛糖还原酶的抑制作用较强,半数抑制浓度为0.401 mg/ml,Fr.B对醛糖还原酶抑制为非竞争性抑制.各组分总还原力和醛糖还原酶抑制作用有一定相关性,相关系数均大于0.9.结论香椿子乙酸乙酯萃取物组分有抗氧化作用及醛糖还原酶抑制作用,可为其研究与开发提供理论依据.

关键词：香椿乙酸乙酯萃取物醛还原酶

糖尿病肾病病人醛糖还原酶基因多态性相关研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

青岛大学医学院学报 2007年第4期43卷 308-310页

作者：钟丽娜苗志敏王忠超李长贵青岛大学医学院附属医院内分泌科山东青岛266003

目的探讨醛糖还原酶(AR)基因5′端(AC)n多态性与2型糖尿病肾病的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染色技术分析了139例2型糖尿病病人(早期糖尿病肾病组61例,非糖尿病肾病组78例)和63例正常对照者AR基因5′端(A... 详细信息

目的探讨醛糖还原酶(AR)基因5′端(AC)n多态性与2型糖尿病肾病的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染色技术分析了139例2型糖尿病病人(早期糖尿病肾病组61例,非糖尿病肾病组78例)和63例正常对照者AR基因5′端(AC)n的多态性。结果早期糖尿病肾病组Z-2等位基因频率高于非糖尿病肾病组和正常对照组(χ2=6.88、10.51,P<0.01);含Z-2等位基因的基因型频率也高于非糖尿病肾病组和正常对照组(χ2=4.95、8.15,P<0.05、0.01)。结论AR基因Z-2等位基因与青岛地区汉族2型糖尿病病人糖尿病肾病的发生发展有关。

关键词：糖尿病肾病醛还原酶基因型基因频率