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中国现代中药 2024年

作者：谭斯尹潘礼业宋叶刘闪闪范耀耀罗宇琴李国卫广东一方制药有限公司广东省中药配方颗粒企业重点实验室

目的：为保证醋龟甲饮片、配方颗粒的质量和用药安全，使用特异性位点聚合酶链式反应（PCR）方法鉴别醋龟甲饮片和配方颗粒的真伪。方法：分析乌龟及其伪品的细胞色素C氧化酶亚基I（COI）基因序列差异，获得单核苷酸多态性（SNP）位点... 详细信息

目的：为保证醋龟甲饮片、配方颗粒的质量和用药安全，使用特异性位点聚合酶链式反应（PCR）方法鉴别醋龟甲饮片和配方颗粒的真伪。方法：分析乌龟及其伪品的细胞色素C氧化酶亚基I（COI）基因序列差异，获得单核苷酸多态性（SNP）位点，筛选出特异性鉴别引物，建立和优化特异性PCR鉴别体系。结果：当退火温度为62 ℃、正反引物量(10 μmol·L–1)各为0.3 μL、循环数为34次时，醋龟甲饮片、标准汤剂冻干粉和配方颗粒可扩增出92 bp的特异性条带，而混伪品无条带。该方法对醋龟甲饮片和配方颗粒的最低检出限分别为0.70 ng和5.61 ng。结论：本文建立的特异性PCR方法能够实现对醋龟甲饮片、标准汤剂冻干粉和配方颗粒真伪的快速鉴定，为醋龟甲配方颗粒质量标准研究提供了参考。

关键词：醋龟甲配方颗粒位点特异性聚合酶链式反应分子鉴定

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HPLC-ELSD法测定醋龟甲中羟脯氨酸

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中草药 2011年第7期42卷 1338-1340页

作者：王新雨谭晓梅陈飞龙汤庆发张文新南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东广州510515

目的建立一种测定未衍生化氨基酸的方法,测定醋龟甲中羟脯氨酸。方法以高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法,采用Prevail C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液(含5.0 mmol/L七氟丁酸)为流动相进行洗脱,洗... 详细信息

目的建立一种测定未衍生化氨基酸的方法,测定醋龟甲中羟脯氨酸。方法以高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法,采用Prevail C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液(含5.0 mmol/L七氟丁酸)为流动相进行洗脱,洗脱时间为25 min。结果羟脯氨酸峰面积的自然对数与相应浓度的自然对数呈良好的线性关系,其方程为Y=1.212 4 X+7.803 4,r=0.999 6,羟脯氨酸的线性范围为0.1～1.0 mg/mL,平均加样回收率为101.7%,RSD为2.7%。结论该法快速、简便、准确,可作为醋龟甲药材的质量控制方法。

关键词： HPLC-ELSD 醋龟甲羟脯氨酸质量控制氨基酸

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醋龟甲不同剂型对血虚或骨质疏松小鼠的防治作用比较

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中国药房 2017年第19期28卷 2661-2665页

作者：王新雨谭晓梅张文新胡元立南方医科大学中医药学院广州510515 广东岭南职业技术学院医药健康学院广州510663

目的:比较醋龟甲的水煎剂和散剂对血虚小鼠或骨质疏松小鼠的防治作用。方法:将小鼠随机分为正常组(1%羧甲基纤维素钠溶液)、模型组(1%羧甲基纤维素钠溶液)、阳性组(复方阿胶浆20 m L/kg或骨松宝胶囊1.98 g/kg)以及醋龟甲水煎剂和散剂的... 详细信息

目的:比较醋龟甲的水煎剂和散剂对血虚小鼠或骨质疏松小鼠的防治作用。方法:将小鼠随机分为正常组(1%羧甲基纤维素钠溶液)、模型组(1%羧甲基纤维素钠溶液)、阳性组(复方阿胶浆20 m L/kg或骨松宝胶囊1.98 g/kg)以及醋龟甲水煎剂和散剂的低、中、高剂量组(剂量均为1.95、3.90、7.80 g/kg),每组10只。在小鼠血虚模型实验中,除正常组外,其余各组小鼠ip环磷酰胺0.1 g/kg造模;并从实验第1天起ig给药(阳性药物为复方阿胶浆),每天1次,连续8 d;给药结束后,测定小鼠外周血中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HG)、血细胞比容(HCT)、血小板(PLT)水平及股骨中骨髓有核细胞(BMNC)数。在小鼠骨质疏松模型实验中,除正常组外,其余各组小鼠ig维甲酸0.105 g/kg造模;并从实验第1天ig相应药物(阳性药物为骨松宝胶囊),每天1次,连续30 d;给药结束后,测定小鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)水平、脏器(胸腺、肝、脾、卵巢)系数和股骨的干质量、去脂干质量、灰质量以及股骨中钙、磷含量。结果:在小鼠血虚模型实验中,与正常组比较,模型组小鼠外周血中WBC、RBC、HG、HCT、PLT水平及股骨中BMNC数均显著降低(P醋龟甲水煎剂低剂量组小鼠外周血中HCT、PLT、BMNC水平和中剂量组中RBC、HG水平以及高剂量组中HCT水平均显著升高(P醋龟甲散剂低、高剂量组小鼠外周血中WBC水平以及中剂量组HG水平显著升高(P0.05);与模型组比较,醋龟甲水煎剂高剂量组小鼠血清中ALP水平和股骨的干质量、磷含量均显著升高(P醋龟甲散剂中、高剂量组以及中剂量组小鼠股骨的灰质量、灰质量/去脂干质量和钙、磷含量均显著升高(P醋龟甲水煎剂对血虚小鼠的防治作用较好;醋龟甲散剂对骨质疏松小鼠的防治作用较好。

关键词：醋龟甲水煎剂散剂骨质疏松血虚小鼠

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醋龟甲免煎颗粒剂制备工艺、质量标准及药效学研究

醋龟甲免煎颗粒剂制备工艺、质量标准及药效学研究

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作者：王新雨南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景中药配方颗粒又称免煎中药、单味中药浓缩颗粒,是用单味中药饮片作为原料,经现代制药技术提取、浓缩、分离、干燥、制粒、包装、精制而成的新剂型。中药免煎颗粒遵循了中医药的基本理论;保持了汤剂的固有特点;克服了汤剂服用、... 详细信息

研究背景中药配方颗粒又称免煎中药、单味中药浓缩颗粒,是用单味中药饮片作为原料,经现代制药技术提取、浓缩、分离、干燥、制粒、包装、精制而成的新剂型。中药免煎颗粒遵循了中医药的基本理论;保持了汤剂的固有特点;克服了汤剂服用、携带、保管不方便等缺点,近年来已得到广泛的应用。动物药免煎颗粒剂也已经广泛应用,但由于动物药饮片的物质基础研究比较薄弱,化学成分与药效间的关系复杂,饮片的质量标准存在不足,还有待完善。目前,更没有关于动物药免煎颗粒剂的系统研究。因此,本课题将对动物药醋龟甲免煎颗粒剂进行系统的研究。目前,醋龟甲免煎颗粒剂临床上已有应用,但未见关于其质量标准以及制备工艺的药效学评价,因此,本课题将从醋龟甲饮片的质量标准,醋龟甲免煎颗粒剂制备工艺及质量标准进行研究,并通过动物实验对醋龟甲免煎颗粒的药效学进行研究,以评价醋龟甲免煎颗粒剂的制备工艺进行。目的1、对国内外有关醋龟甲的研究文献进行分类综述,对目前国内外对醋龟甲的化学成分及药理作用的主要研究概况加以合理分析。2、建立醋龟甲饮片的质量控制标准。3、制定醋龟甲免煎颗粒剂的制备工艺。4、用小鼠血虚和骨质疏松模型,评价制备工艺。5、建立醋龟甲免煎颗粒剂的质量标准。方法1、以计算机检索、手工追溯检索等手段相结合,充分利用PubMed、CNKI中国期刊全文文数据库、互联网等工具数据库与工具书,查阅有关醋龟甲的化学成分、药理作用以及临床应用、现代制剂等资料,对醋龟甲的研究概况进行科学分析。2、醋龟甲饮片质量标准的研究2.1醋龟甲饮片的鉴定：2.1.1性状鉴定：按照(中国药典2010版一部168龟甲项下)性状鉴定。2.1.2薄层色谱法：按照(中国药典2010版一部168龟甲项下)薄层色谱鉴定。2.1.3钙的鉴定：按照(中国药典2010版一部634龙母壮骨颗粒项下)鉴别①鉴定。2.2醋龟甲浸出物的得率测定：按照水溶性浸出物测定法(中国药典2010版一部附录XA)项下的热浸法测定。2.3醋龟甲饮片中钙含量的测定：按(中国药典2010版一部161牡蛎项下)钙黄绿素法测定。2.4醋龟甲饮片中羟脯氨酸含量的测定：采用高相液相色谱仪-蒸发光散射检测法建立快速、科学、稳定的羟脯氨酸含量测定方法。3、醋龟甲免煎颗粒剂制备工艺的研究3.1醋龟甲浸膏的制备：采用等量值法。3.2醋龟甲浸膏中间体的质量控制。3.2.1醋龟甲浸膏中钙含量的测定：按(中国药典2010版一部161牡蛎项下)钙黄绿素法测定。3.2.2醋龟甲浸膏中羟脯氨酸含量的测定：采用高相液相色谱仪-蒸发光散射检测法测定。3.3辅料的筛选：根据免煎颗粒剂的特点,考察辅料的种类及其用量。3.4醋龟甲免煎颗粒剂的制备：采用挤压制粒法。3.5醋龟甲免煎颗粒剂的常规检查3.5.1粒度：照粒度测定法(中国药典2010版一部附录ⅪB第二法,双筛分法)测定。3.5.2水分：照水分测定法第一法(中国药典2010版一部附录ⅨH)烘干法测定。3.5.3溶化性：按照颗粒剂(中国药典2010版一部附录IC)项下的规定测定。4、醋龟甲免煎颗粒剂质量标准的研究。4.1免煎颗粒的鉴定：按照(中国药典2010版一部634龙母壮骨颗粒项下)鉴别①鉴定。4.2免煎颗粒中钙含量的测定：按钙黄绿素法(中国药典2010版一部161牡蛎项下)测定钙含量。4.3免煎颗粒羟脯氨酸含量的测定：高效液相色谱-蒸发光散射法测定。5、醋龟甲水煎出物的药效学研究采用环磷酰胺(CY)所致的小鼠血虚模型,观察醋龟甲水煎出物与细粉对小鼠红细胞(RBC),白细胞(WBC),血小板(PLT),红细胞压积比(HCT)及骨髓有核细胞(BMNC)的影响。采用维甲酸所致的小鼠骨质疏松模型,观察醋龟甲水煎出物与细粉对小鼠胸腺系数,肝脏系数,脾系数,卵巢系数、去脂干重、灰重、股骨中钙、磷,血清中血碱性磷酸酶(ALP)的影响。6、统计学处理采用SPSS13.0统计软件。实验数据采用均数±标准差(i±s)表示,比较运用单因素方差分析(One-Way ANOVA),组间多重比较方差齐时,用LSD方法,不齐时用Dunnett's T3。P＜0.05为差异有统计学意义。结果1、经查阅,有关醋龟甲的文献多集中在药材的质量、药理药效及临床应用研究;通过综述查阅的文献,确定了制备醋龟甲免煎颗粒剂的研究方法。2、醋龟甲饮片质量标准的研究经鉴定,与胆甾醇对照品和龟甲对照药材相比,五批醋龟甲饮片在相同位置均出现斑点。醋龟甲细粉0.1g,加水15mL,滤过,滤液调节pH使恰呈酸性,加草酸铵试液,生成白色沉淀;分离,沉淀不溶于醋酸

关键词：醋龟甲免煎颗粒质量标准血虚骨质疏松

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