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醉茄素a诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡及其可能的机制

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肿瘤 2013年第6期33卷 502-508页

作者：李旭王敏田锐何政彭丰郭兴军秦仁义华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科湖北武汉430030 宜昌市中心人民医院普通外科湖北宜昌443003

目的:探讨醉茄素a体外诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡及其可能的分子机制。方法:以不同浓度醉茄素a处理人胆囊癌GBC-SD细胞后,CCK-8法检测GBC-SD细胞的增殖情况,Hoechst33258荧光染色和透射电子显微镜下观察GBC-SD细胞的凋亡形态和超微结... 详细信息

目的:探讨醉茄素a体外诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡及其可能的分子机制。方法:以不同浓度醉茄素a处理人胆囊癌GBC-SD细胞后,CCK-8法检测GBC-SD细胞的增殖情况,Hoechst33258荧光染色和透射电子显微镜下观察GBC-SD细胞的凋亡形态和超微结构变化,FCM法检测GBC-SD细胞的凋亡率和周期分布,蛋白质印迹法检测GBC-SD细胞中多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]、cyclin D1、cyclin B1、细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase1,Cdk1)和p21蛋白的表达。结果:醉茄素a对GBC-SD细胞的增殖有明显的抑制作用(P醉茄素a能诱导GBC-SD细胞出现典型的凋亡形态学改变及超微结构变化。与未加药的阴性对照组比较,醉茄素a作用后GBC-SD细胞的凋亡率明显增加(P醉茄素a可能通过下调细胞周期相关蛋白cyclin D1、Cdk1的表达和上调cyclin B1、p21的表达,使GBC-SD细胞阻滞于G2/M期,进而抑制GBC-SD细胞的增殖并诱导其凋亡。

关键词：胆囊肿瘤细胞周期细胞凋亡醉茄素a 细胞 GBC—SD

醉茄素a通过诱导白色脂肪组织褐变抵御高脂饮食诱导的肥胖

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解剖学报 2020年第4期51卷 570-575页

作者：郭冰冰王炳蔚苏志洁张辰雨赵淼王俊博郑瑞茂北京大学医学部基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系国家教育部神经科学重点实验室国家卫生健康委员会神经科学重点实验室北京100191

目的探索醉茄素a对高脂饮食诱导肥胖的抵抗作用及其作用机制。方法8周龄C57BL/6 J小鼠分为醉茄素a组和对照组,每组10只,高脂饮食(HFD)饲养,分别给予醉茄素a或对照溶剂DMSO腹腔注射,每天测量小鼠体重及摄食量。1周后取材,称量小鼠腹股沟... 详细信息

目的探索醉茄素a对高脂饮食诱导肥胖的抵抗作用及其作用机制。方法8周龄C57BL/6 J小鼠分为醉茄素a组和对照组,每组10只,高脂饮食(HFD)饲养,分别给予醉茄素a或对照溶剂DMSO腹腔注射,每天测量小鼠体重及摄食量。1周后取材,称量小鼠腹股沟白色脂肪(i WAT)、附睾白色脂肪(e WAT)、腹膜后白色脂肪(r WAT)和肩胛间棕色脂肪(BAT)的重量;取i WAT检测褐变相关因子表达水平;HE染色观察i WAT细胞形态变化。结果醉茄素a组小鼠的体重和各部位脂肪组织重量均显著低于对照组,摄食量无明显变化;Real-time PCR显示,醉茄素a组小鼠i WAT中褐变相关基因表达水平显著提高;Western blotting结果表明,醉茄素a组小鼠i WAT中解耦联蛋白1(UCP1)和过氧化物酶体增殖体激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)表达明显增加;HE染色与免疫荧光结果显示,醉茄素a组小鼠腹股沟白色脂肪细胞呈现典型褐变特征,如脂肪细胞多腔室化。结论醉茄素a可能通过诱导小鼠白色脂肪组织褐变抵御高脂饮食诱导的肥胖。

关键词：醉茄素a 白色脂肪组织褐变肥胖实时定量聚合酶链反应免疫印迹法小鼠

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醉茄素a联合顺铂对宫颈癌的协同作用及机制

中国药理学通报 2023年第6期39卷 1127-1135页

作者：李威石忠秀黄勇程志颖董嘉慧龙青青何杉刘涛王呈呈毕节市市场监督管理局检验检测中心贵州毕节551700 贵州大学医学院贵州贵阳550025

目的研究醉茄素a(withaferin,WA)联合顺铂(cisplatin,DDP)对宫颈癌的协同作用及机制。方法以宫颈癌细胞系为对象,采用MTT法检测WA对DDP的协同增效作用。通过Annexin V-FITC/PI染色法、TUNEL法和Western blot法探究WA联合DDP对宫颈癌细... 详细信息

目的研究醉茄素a(withaferin,WA)联合顺铂(cisplatin,DDP)对宫颈癌的协同作用及机制。方法以宫颈癌细胞系为对象,采用MTT法检测WA对DDP的协同增效作用。通过Annexin V-FITC/PI染色法、TUNEL法和Western blot法探究WA联合DDP对宫颈癌细胞凋亡的诱导作用。使用免疫荧光法和免疫印迹法检测NF-κB/MDR1通路相关蛋白。细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平通过DCFH-DA和MitoSOX法进行测定。采用裸鼠移植瘤模型在动物水平上评价WA对DDP的增效作用。结果WA与DDP联合用药可协同抑制宫颈癌细胞存活,促进细胞凋亡,并对荷瘤小鼠的肿瘤有明显的生长抑制作用。WA能抑制DDP诱导的NF-κB/MDR1信号通路的激活,并促进ROS的产生。结论WA通过抑制DDP诱导的NF-κB/MDR1通路激活和增强DDP诱导的ROS产生,发挥抗宫颈癌协同增效作用。

关键词：醉茄素a 顺铂宫颈癌协同增效 NF-κB MDR1 ROS

醉茄素a对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2021年第4期47卷 919-925页

作者：周弟弥甘露陈琳周成芳曾良南华大学附属第二医院神经内科湖南衡阳421001 南华大学附属第二医院急诊科湖南衡阳421001

目的:探讨醉茄素a对缺血性脑卒中大鼠神经功能的保护作用,阐明其可能作用机制。方法:75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(尼莫地平组,12 mg·kg^(-1))、低剂量醉茄素a组(25 mg·kg^(-1))和高剂量醉茄素a组(100 mg·kg^(-1... 详细信息

目的:探讨醉茄素a对缺血性脑卒中大鼠神经功能的保护作用,阐明其可能作用机制。方法:75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(尼莫地平组,12 mg·kg^(-1))、低剂量醉茄素a组(25 mg·kg^(-1))和高剂量醉茄素a组(100 mg·kg^(-1)),每组15只。采用改良Longa线栓法制备缺血性脑卒中大鼠模型,建模成功后灌胃给药,每天1次,连续14 d。采用Zea-Longa评分法评估各组大鼠神经功能,检测大鼠脑组织含水量,TTC染色法检测大鼠脑梗死体积,生化法检测大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平,TUNEL染色法检测大鼠脑细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测大鼠脑组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积、细胞凋亡率和脑组织中MDA水平均明显升高(P醉茄素a组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积、细胞凋亡率和脑组织中MDA水平明显降低(P醉茄素a组大鼠上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:醉茄素a能提高缺血性脑卒中大鼠机体抗氧化水平,减轻脑组织氧化损伤,抑制脑组织神经细胞凋亡,改善大鼠神经行为功能,其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。

关键词：缺血性脑卒中醉茄素a 氧化应激核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1信号通路

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醉茄素a药理活性研究进展

中国临床药理学杂志 2018年第14期34卷 1714-1718页

作者：王番宋颖贾艳艳白娟崔冬晓程梁华赵瑾怡高凯尚刚伟杨红莲陕西中医药大学药学院陕西咸阳712046 西京医院药剂科西安710032

醉茄素a(WA)是一种高度氧化的甾体内酯。WA对多种癌细胞生长具有抗增殖、抗侵袭、抗转移和促凋亡的作用,且在抗炎、免疫调节、抗血管生成、抗微生物感染等方面也有活性。

关键词：醉茄素a 甾体内酯抗增殖抗炎

醉茄素a对肺鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及凋亡的影响

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肿瘤研究与临床 2018年第12期30卷 825-829页

作者：王鹏飞刘凤娟武晓孙荣丽青岛大学第二临床医学院呼吸与危重症医学科 266042

目的研究醉茄素a对肺鳞状细胞癌凋亡相关蛋白的调控作用以及对细胞上皮间质转化的影响。方法体外培养肺鳞状细胞癌SK-MES-1细胞株。用终质量浓度分别为0(对照组)、5、10、20、40μg/ml的醉茄素a处理SK-MES-1细胞24h后,于倒置相差显微镜... 详细信息

目的研究醉茄素a对肺鳞状细胞癌凋亡相关蛋白的调控作用以及对细胞上皮间质转化的影响。方法体外培养肺鳞状细胞癌SK-MES-1细胞株。用终质量浓度分别为0(对照组)、5、10、20、40μg/ml的醉茄素a处理SK-MES-1细胞24h后,于倒置相差显微镜下观察细胞的一般形态结构、脱落情况等;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞免疫荧光法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关蛋白及基因bcl-2、bax的表达,以及E-cadherin和Vimentin的表达。结果不同浓度(0、5、10、20、40μg/ml)的醉茄素a均能抑制SK-MES-1细胞活性,各组细胞活性分别为0.62±0.05、0.42±0.04、0.33±0.06、0.21±0.03、0.17±0.04,提示抑制作用与醉茄素a浓度相关(F=386.505,P=0.005)。不同浓度(0、5、10、20、40μg/ml)醉茄素a作用SK-MES-1细胞24h后,各组细胞凋亡率分别为(0.180±0.011)%、(0.310±0.013)%、(0.500±0.021)%、(0.540±0.018)%、(0.410±0.027)%,提示醉茄素a很少引起细胞凋亡,多为坏死细胞(F=1065.78,P=0.124);免疫荧光法结果提示不同浓度醉茄素a作用SK-MES-1细胞24h后,20μg/ml醉茄素a实验组Vimentin表达较对照组减弱,荧光强度较对照组降低;E-cadherin荧光强度较对照组增强;其余浓度实验组无明显变化;而bax、bcl-2蛋白在对照组及实验组中的相对表达强度无明显改变;RT-PCR结果显示在浓度为20、40μg/ml醉茄素a组E-cadherinmRNA表达(6.7±0.6及6.4±0.9)较对照组(4.2±1.0)增加,且差异均有统计学意义(均P醉茄素a能抑制肺鳞状细胞癌细胞的生长,并抑制其上皮间质转化过程,而与凋亡及凋亡相关蛋白无明显关系。

关键词：醉茄素a 鳞状细胞癌,肺细胞凋亡上皮-间质转化

醉茄素a通过抑制有氧糖酵解影响肝癌发生发展的机制研究

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醉茄素A通过抑制有氧糖酵解影响肝癌发生发展的机制研究

作者：朱琳淼河北大学

学位级别：硕士

目的:利用人肝癌Hep G2细胞,分别从细胞和分子水平上研究异柠檬酸脱氢酶1(Isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)及缺氧诱导因子-1ɑ(Hypoxia-inducible factor-1ɑ,HIF-1ɑ)通路与肿瘤细胞有氧糖酵解之间的关系,并基于此探讨植物提取物醉茄... 详细信息

目的:利用人肝癌Hep G2细胞,分别从细胞和分子水平上研究异柠檬酸脱氢酶1(Isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)及缺氧诱导因子-1ɑ(Hypoxia-inducible factor-1ɑ,HIF-1ɑ)通路与肿瘤细胞有氧糖酵解之间的关系,并基于此探讨植物提取物醉茄素a(Withaferin A,WA)抑制肝癌发生发展的机制,以期为肝癌的早期预防和治疗寻找合适的作用靶标及药物。方法:1.在组织水平,通过Western blot分别检测肝癌组织和相应的临近正常肝组织中野生型IDH1蛋白表达;在Hep G2细胞中分别将IDH1过表达或抑制表达,首先通过细胞增殖实验观察IDH1对Hep G2细胞增殖的影响;其次,利用Western blot检测糖酵解相关蛋白的表达,研究IDH1对肝癌细胞有氧糖酵解的影响;同时进行线粒体膜电位及线粒体复合体Ι活性的检测,探究IDH1表达水平的改变对肝癌细胞线粒体功能的影响。2.通过细胞增殖实验确定WA作用Hep G2细胞的合适作用浓度及时间;利用克隆形成实验观察WA对Hep G2细胞克隆样增殖的抑制情况。Hep G2细胞给予WA处理后,利用荧光定量PCR实验在分子水平检测IDH1及糖酵解相关基因的m RNA表达情况;Western blot检测蛋白水平的表达,研究WA对于肝癌细胞有氧糖酵解的影响;通过进一步检测WA处理后的Hep G2细胞的线粒体膜电位,观察WA对于肝癌细胞线粒体功能的影响。3.在Hep G2细胞中利用细胞增殖实验筛选出Co Cl(HIF-1ɑ的化学诱导剂)合适的作用浓度及时间。Hep G2细胞给予Co Cl处理后,荧光定量PCR实验检测HIF-1ɑ,IDH1及糖酵解相关基因m RNA水平;Western blot检测其蛋白表达水平,研究HIF-1ɑ对肝癌有氧糖酵解的影响。Hep G2细胞给予WA和Co Cl联合处理,Western blot检测糖酵解相关蛋白表达,进一步探讨HIF-1ɑ如何介导WA对肝癌细胞有氧糖酵解的抑制。4.统计学分析:利用独立样本T检验进行两组的组间差异比较;利用单因素方差分析(One-Way ANOVA)进行多组均数差异比较。结果:***1通过抑制有氧糖酵解,稳定线粒体功能影响肝癌发生发展。1.1在组织水平,与相应癌旁正常肝组织相比,肝癌组织中野生型IDH1蛋白表达均降低(P0.05)。同时,IDH1过表达后增加Hep G2细胞线粒体膜电位,并促进其线粒体复合体Ι活性(P0.05)。WA下调LDHA,PKM2的蛋白表达,上调IDH1蛋白表达(P0.05)。***1通过HIF-1α通路介导WA对肝癌细胞有氧糖酵解的抑制作用。3.1在转录水平,Co Cl诱导LDHA,PKM2的m RNA表达上调(P0.05)。而在翻译水平,Co Cl使HIF-1ɑ,LDHA,PKM2和葡萄糖转运蛋白1(Glucose transporter 1,GLUT1)蛋白表达均增加(P0.05)。3.2 WA可减少Co Cl诱导的HIF-1ɑ及其下游分子GLUT1和糖酵解相关蛋白LDHA和PKM2的蛋白表达增加(P<0.05)。结论:***1可抑制肝癌细胞的有氧糖酵解,维持正常线粒体功能,从而阻止肝癌的发生发展。***诱导肝癌细胞中IDH1的表达维持线粒体功能,并下调肿瘤细胞赖以获取能量的有氧糖酵解的相关基因表达,在肝癌发生发展的过程中发挥重要作用。***1通过阻断HIF-1ɑ介导的信号通路参与WA对肝癌细胞有氧糖酵解的抑制作用

关键词：肝癌发生发展有氧糖酵解异柠檬酸脱氢酶醉茄素a HIF-1ɑ通路

醉茄素a通过STAT6信号通路抑制巨噬细胞向M2型极化的作用研究

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醉茄素A通过STAT6信号通路抑制巨噬细胞向M2型极化的作用研究

作者：万晓晴广州医科大学

学位级别：硕士

研究背景与目的巨噬细胞是先天免疫的重要组成之一,根据功能和表型可分为两种:经典激活的M1型巨噬细胞和替代活化的M2型巨噬细胞。M2型巨噬细胞由Th2细胞因子IL-4和IL-13以及其他细胞因子IL-10、IL-33等刺激激活,可高表达Arg-1,MR,Fizz1... 详细信息

研究背景与目的巨噬细胞是先天免疫的重要组成之一,根据功能和表型可分为两种:经典激活的M1型巨噬细胞和替代活化的M2型巨噬细胞。M2型巨噬细胞由Th2细胞因子IL-4和IL-13以及其他细胞因子IL-10、IL-33等刺激激活,可高表达Arg-1,MR,Fizz1,YM1等细胞因子,具有抑制炎症、促进肿瘤生长转移侵袭、组织修复、血管形成等功能。肿瘤微环境中的巨噬细胞称为肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs),大部分TAMs表现出M2型巨噬细胞的特性。以TAMs为靶点治疗癌症有望成为一种新的治疗策略。醉茄素a(Withaferin A,WA)是从药用植物南非醉茄中提取的甾体内酯,已被证实具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、抗血管生成等功能。近年来的研究表明,WA可能成为非小细胞肺癌、肝癌、乳腺癌等癌症潜在的治疗方案。本课题组前期的研究结果发现:脂多糖刺激的巨噬细胞产物,可以通过抑制NF-κB通路的作用,增强WA诱导的人乳腺癌细胞凋亡。鉴于文献中报道的WA的抗炎和免疫调节的作用,WA对肿瘤微环境中的TAMs的极化状态是否有一定作用,尚未见报道。STAT6信号通路是M2型巨噬细胞极化过程中最重要的信号通路之一。因此我们拟探讨WA对肿瘤微环境中M2型巨噬细胞极化的影响以及STAT6信号通路在其中的作用。本研究选用小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠单核巨噬细胞株Raw264.7作为研究对象。先用IL-4极化两种细胞观察WA对巨噬细胞极化的作用;再选用人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的条件培养基(conditioned medium,CM),模拟肿瘤微环境,观察巨噬细胞暴露于肿瘤条件培养基的极化状态及WA对其的影响,探讨WA对肿瘤微环境中的巨噬细胞的作用,同时检测上述影响因素下STAT6信号通路的改变,初步探讨WA对巨噬细胞极化状态影响的作用机制。研究方法(1)首先观察WA对小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠单核巨噬细胞株Raw264.7的细胞增殖存活率的影响,选用不同浓度的WA(1,2.5,5,10μM)处理细胞12h,通过MTS法观察WA对两种巨噬细胞增殖存活率的影响。(2)观察WA对IL-4处理的小鼠腹腔巨噬细胞极化状态的影响,设立DMSO对照组(对照组),IL-4组(20ng/ml)、WA组(1μmol/ml)、WA+IL-4组,通过Western blotting方法和qRT-PCR方法检测WA对M2型巨噬细胞相关细胞因子Arg-1和MR的作用。(3)观察WA对MDA-MB-231CM处理的小鼠腹腔巨噬细胞极化状态的影响,设立对照组、MDA-MB-231CM组(100%),WA组、WA+231CM组;观察WA对MCF-7CM处理的小鼠腹腔巨噬细胞极化状态的影响,设立对照组、MCF-7CM组(100%)、WA组和WA+MCF-7CM组,通过Western blotting方法和qRT-PCR方法检测WA对M2型巨噬细胞相关细胞因子Arg-1和MR的作用。(4)观察WA对IL-4处理的小鼠单核巨噬细胞株Raw264.7极化状态的影响,设立对照组、IL-4组、WA组、WA+IL-4组;观察WA对两种人乳腺癌细胞CM处理的Raw264.7细胞极化状态的影响,设立对照组、MDA-MB-231CM组,MCF-7CM组、WA组、WA+MDA-MB-231CM组和WA+MCF-7CM组,通过Western blotting方法、qRT-PCR方法和流式细胞术检测WA对M2型巨噬细胞标志因子Arg-1和MR/CD206的作用。(5)观察WA对IL-4处理的两种巨噬细胞的STAT6通路的影响,分别设立对照组、IL-4组、WA组、WA+IL-4组,通过Western blotting方法检测WA对STAT6信号通路中的STAT6和p-STAT6蛋白的作用。(6)观察WA对两种人乳腺癌细胞CM处理的两种巨噬细胞的STAT6信号通路的影响,分别设立对照组、MDA-MB-231CM组、MCF-7CM组、WA组、WA+MDA-MB-231CM组和WA+MCF-7CM组,通过Western blotting方法检测WA对STAT6信号通路中的STAT6和p-STAT6蛋白的作用。结果(1)1μmol/ml的WA对细胞的存活率无明显影响;WA浓度在2.5μmol/ml以上时,两种细胞的存活率明显下降。(2)与对照组相比,小鼠腹腔巨噬细胞的IL-4组的M2型巨噬细胞相关细胞因子Arg-1和MR表达明显增加;与IL-4组相比,小鼠腹腔巨噬细胞的WA+IL-4组的Arg-1和MR表达明显降低。(3)与对照组相比,小鼠腹腔巨噬细胞的MDA-MB-231CM组、MCF-7CM组的Arg-1和MR表达明显增加;与MDA-MB-231CM组、MCF-

关键词：醉茄素a 肿瘤相关巨噬细胞 M2型巨噬细胞极化信号转导与转录激活因子6

小鼠JB6 P+细胞中IDH1介导醉茄素a抑制皮肤肿瘤发生发展机制的研究

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小鼠JB6 P+细胞中IDH1介导醉茄素A抑制皮肤肿瘤发生发展机制的研究

作者：许凯悦河北大学

学位级别：硕士

目的:利用成熟肿瘤模型小鼠JB6 P+细胞,在细胞和分子水平探索IDH1介导醉茄素a抑制皮肤肿瘤发生发展的作用机制,为肿瘤化学预防寻找新的药物提供实验依据和分子靶标。方法:1.研究醉茄素a(Withaferin A,WA)在皮肤肿瘤早期发生发展过程中稳... 详细信息

目的:利用成熟肿瘤模型小鼠JB6 P+细胞,在细胞和分子水平探索IDH1介导醉茄素a抑制皮肤肿瘤发生发展的作用机制,为肿瘤化学预防寻找新的药物提供实验依据和分子靶标。方法:1.研究醉茄素a(Withaferin A,WA)在皮肤肿瘤早期发生发展过程中稳定IDH1的机制。肿瘤促进剂TPA或/和WA处理小鼠JB6 P+细胞,检测IDH1蛋白,观察WA对IDH1蛋白表达的影响。分别在转录、翻译和翻译后水平研究WA稳定IDH1的机制:首先,检测IDH1 mRNA水平;其次,蛋白合成抑制剂CHX预处理后检测IDH1蛋白表达;随后,测定蛋白酶体20S活性;蛋白酶体抑制剂MG132预处理后检测IDH1蛋白表达;最后,免疫沉淀检测IDH1泛素化水平。2.研究IDH1作为抑癌基因抑制皮肤肿瘤早期发生发展的机制。利用过表达载体pcDNA3.1-IDH1和siRNA分别在小鼠JB6 P+细胞过表达和沉默IDH1,检测IDH1对其产物α-KG及线粒体复合体I的影响;同时检测糖酵解中重要代谢酶LDH的表达和活性,观察IDH1对线粒体功能及糖酵解的影响。3.研究IDH1介导醉茄素a抑制皮肤肿瘤发生发展的调控机制。TPA或/和WA处理小鼠JB6 P+细胞,分别检测HIF-1α及其下游Glut-1蛋白表达,VEGF和IDH1下游PHD的活性;LDH蛋白表达,观察WA对HIF-1α通路及糖酵解的影响。在JB6 P+细胞中分别过表达和沉默IDH1,检测上述参数,观察IDH1对HIF-1α通路的影响。4.运用one-way ANOVA分析实验结果,利用Student-Newman-Keuls比较多组均值差异性。结果:***通过抑制泛素-蛋白酶体途径稳定IDH1。1.1 WA抑制TPA诱导的IDH1蛋白表达和活力下调(P0.05)。1.3 CHX预处理前后,WA均抑制TPA诱导的IDH1表达下调(P0.05)。1.5免疫沉淀前后检测IDH1蛋白及其泛素化水平,WA抑制TPA诱导的IDH1表达下调及泛素化水平增强(P醉茄素a通过抑制泛素-蛋白酶体途径,稳定TPA诱导的IDH1蛋白表达下调。***1通过抑制有氧糖酵解,维持线粒体的正常功能发挥抑癌基因的作用。***通过稳定IDH1抑制HIF-1α通路和糖酵解,发挥肿瘤化学预防的作用。

关键词：醉茄素a 皮肤癌泛素-蛋白酶体途径异柠檬酸脱氢酶1 化学预防