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酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/NAD^(+)信号通路相关因子表达的影响

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中国老年学杂志 2024年第2期44卷 382-387页

作者：胡怡然瞿惠燕郭佳莹杨涛周华上海中医药大学上海201203 上海中医药大学附属曙光医院上海市中西医结合心血管病研究所

目的观察酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))信号通路相关因子表达的影响。方法建立H9C2细胞缺血缺氧再灌注模型,将H9C2细胞分为正常组、模型组、CD38抑制剂+中药单体组和中药单体组,使用CCK-8... 详细信息

目的观察酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))信号通路相关因子表达的影响。方法建立H9C2细胞缺血缺氧再灌注模型,将H9C2细胞分为正常组、模型组、CD38抑制剂+中药单体组和中药单体组,使用CCK-8法筛选中药单体干预的最佳浓度并检测细胞活力;生化法检测三磷酸腺苷(ATP)含量、活性氧(ROS)水平、NAD^(+)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)含量和NAD^(+)/NADH比值;酶联免疫法吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;Western印迹检测CD38、沉默信息调节因子2同源蛋白(SIRT)3和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3蛋白表达。结果与正常组相比,模型组细胞活力明显下降,ATP含量明显下降,ROS水平及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显增加,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显下降,CD38和NLRP3蛋白表达明显增加,SIRT3蛋白表达明显下降(均P酸枣仁皂苷A能够改善H9C2细胞的缺血缺氧再灌注损伤,其机制可能与抑制CD38表达,改善能量代谢障碍和线粒体功能,减缓炎症反应有关。

关键词：酸枣仁皂苷A 缺血缺氧再灌注烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+)) CD38

UPLC-MS/MS法结合化学计量学法分析酸枣仁和理枣仁中多指标成分

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中草药 2021年第8期52卷 2400-2407页

作者：武宝爱闫锋申晨曦马敏张福生杜晨晖闫艳山西大学山西太原030006 山西省食品药品检验所山西太原030001 山西中医药大学山西太原030619

目的建立大宗中药材酸枣仁的多指标含量测定方法,为准确发现酸枣仁和理枣仁中差异性质量控制成分提供参考。方法采用UPLC-MS/MS多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)正、负离子切换扫描模式,ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(150 mmX... 详细信息

目的建立大宗中药材酸枣仁的多指标含量测定方法,为准确发现酸枣仁和理枣仁中差异性质量控制成分提供参考。方法采用UPLC-MS/MS多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)正、负离子切换扫描模式,ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(150 mmX2.1 mm,1.8μm)进行分离,流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),进行梯度洗脱,测定16批酸枣仁和13批理枣仁中乌药碱、木兰花碱、维采宁Ⅱ、斯皮诺素、当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、6’’’-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B的含量,并结合主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squares discrimination analysis,PLS-DA)评价酸枣仁和理枣仁中9种成分的差异。结果9种成分在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)>0.9991,仪器精密度RSD酸枣仁中乌药碱、木兰花碱、当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、酸枣仁皂苷A和B的含量显著高于理枣仁(P枣仁中斯皮诺素、维采宁Ⅱ和6’’’-阿魏酰斯皮诺素的含量显著高于酸枣仁(P酸枣仁和理枣仁可明显分开,两者组内样品成分具有很强的相似性,而组间差异较大。结论建立了专属性强、灵敏度高的酸枣仁和理枣仁质量差异性评价方法,为两者质量差异性评价的指标成分选择提供依据,为阐明理枣仁可否作为酸枣仁的代用品提供实验基础。

关键词：酸枣仁理枣仁乌药碱木兰花碱维采宁Ⅱ 斯皮诺素当药黄素山柰酚-3-O-芸香糖苷 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 质量评价

cAMP/Epac/Rap1信号通路调控NG2细胞分泌IL-1β、TNF-α、BDNF及酸枣仁皂苷A的作用研究

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安徽医科大学学报 2023年第2期58卷 265-270页

作者：杨婷婷王慧石鹏滕柳李悦杜敏涂小华杨光勇邓颖贵州中医药大学基础医学院贵阳550025

目的研究环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白(Epac)/Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路是否参与调控NG2细胞分泌白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脑源性神经营养因子(BDNF)及酸枣仁皂苷A(JuA)的作用。方法体外培养NG2细胞... 详细信息

目的研究环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白(Epac)/Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路是否参与调控NG2细胞分泌白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脑源性神经营养因子(BDNF)及酸枣仁皂苷A(JuA)的作用。方法体外培养NG2细胞,分为对照组、百日咳毒素(PTX)组、非环状核苷酸Epac拮抗剂(ESI-09)组、酸枣仁皂苷A(JuA)组、艾司唑仑(阳性药)组。采用CCK-8法检测不同浓度JuA对NG2细胞存活率的影响,RT-PCR法和Western blot法检测各组细胞IL-1β、TNF-α、BDNF、cAMP、Epac、Rap1 mRNA及蛋白的表达情况。结果与对照组比较,PTX组降低IL-1β和TNF-αmRNA和蛋白的表达(P<0.01),增加BDNF和cAMP mRNA和蛋白的表达(P<0.01);ESI-09组增加IL-1β和TNF-αmRNA和蛋白的表达(P<0.05),降低BDNF、Epac和Rap1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);JuA组、阳性药组均增加IL-1β、TNF-α、BDNF、cAMP、Epac、Rap1 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论cAMP/Epac/Rap1信号通路可介导NG2细胞分泌IL-1β、TNF-α、BDNF,JuA可能作用于cAMP/Epac/Rap1信号通路影响NG2细胞分泌BDNF。

关键词： NG2细胞酸枣仁皂苷A cAMP Epac Rap1

不同产区酸枣仁中斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B的含量测定

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中草药 2019年第11期50卷 2712-2717页

作者：周赛男陈安家郭宝林张庆英秦小龙山西医科大学山西太原030001 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 北京大学药学院北京100191 河北荣和中药材销售有限公司河北保定071299

目的研究和比较全国7大产区不同产地酸枣仁药材中2种黄酮和2种皂苷的含量,筛选优质药材来源。方法 2016年和2017年2个年度对7大产区进行调查和样品收集,共收集样品74份,使用UPLC-UV-ELSD检测斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素2种黄酮,... 详细信息

目的研究和比较全国7大产区不同产地酸枣仁药材中2种黄酮和2种皂苷的含量,筛选优质药材来源。方法 2016年和2017年2个年度对7大产区进行调查和样品收集,共收集样品74份,使用UPLC-UV-ELSD检测斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素2种黄酮,以及酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B2种皂苷的含量。结果 2016、2017年采集样品中酸枣仁样品中斯皮诺素的质量分数分别为0.052%~0.102%和0.049%~0.144%,6′′′-阿魏酰斯皮诺素质量分数分别为0.021%~0.072%和0.026%~0.088%,酸枣仁皂苷A的质量分数分别为0.016%~0.061%和0.033%~0.054%,酸枣仁皂苷B的质量分数分别为0.008%~0.046%和0.005%~0.046%。结论经相关性分析,7个大产区间各成分含量基本上没有显著差异,斯皮诺素含量较高的产地有山西临汾(包括大宁和吉县)、河北涉县、河北迁安、甘肃庆阳、陕西眉县、陕西合阳、辽宁建昌、天津蓟县,酸枣仁皂苷A含量高的产地为山东各地,以及河北内丘和陕西渭南。综合比较山东各地2类成分含量普遍都高且变化较小。相关性分析也显示2种黄酮含量具有较好的相关性,而2种皂苷含量的相关性较差。

关键词：酸枣仁斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B UPLC-UV-ELSD 含量测定

基于肠道菌群转化的酸枣仁质量标志物预测分析

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中草药 2019年第19期50卷 4634-4642页

作者：崔小芳杜晨晖裴香萍秦雪梅闫艳山西中医药大学中药学院山西太原030619 山西大学中医药现代研究中心山西太原030006

目的从肠道菌群代谢转化的角度,研究酸枣仁水提取物转化前后原型及代谢产物。方法酸枣仁水提取物与正常人肠道菌群在厌氧条件下分别共孵育0.083、1、4、12、24h。采用超高效液相色谱-高分辨质谱分析技术,对孵育液中的化合物进行鉴定并... 详细信息

目的从肠道菌群代谢转化的角度,研究酸枣仁水提取物转化前后原型及代谢产物。方法酸枣仁水提取物与正常人肠道菌群在厌氧条件下分别共孵育0.083、1、4、12、24h。采用超高效液相色谱-高分辨质谱分析技术,对孵育液中的化合物进行鉴定并分析代谢途径,继而以化合物峰面积百分比为指标,绘制不同时间点孵育液中黄酮、皂苷和生物碱类成分的变化规律。结果酸枣仁水提取物中共表征了31种原型成分,转化后的提取物中鉴定了4个代谢产物。苄基异喹啉类生物碱转化24 h内无明显降解。黄酮类成分的代谢反应类型丰富且反应程度剧烈,在24 h内降解完全。酸枣仁皂苷A和B主要发生水解反应。乌药碱、酸李碱、山柰酚-3-O-芸香糖苷、斯皮诺素、维采宁、酸枣仁皂苷A和B可作为酸枣仁潜在质量标志物(Q-marker)。结论将肠道菌群体外转化作为逆向佐证体内研究结果的一种方式,为中药Q-marker的预测提供一种新思路和新途径。

关键词：酸枣仁提取物肠道菌群代谢产物高分辨质谱质量标志物乌药碱酸李碱山柰酚-3-O-芸香糖苷斯皮诺素维采宁酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B

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酸枣仁饮片汤剂质量评价研究

中草药 2018年第19期49卷 4520-4527页

作者：张敏杜晨晖马敏张福生高晓霞闫艳秦雪梅山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化工学院山西太原030006 山西中医药大学山西太原030619 山西省食品药品检验所山西太原030001

目的建立酸枣仁饮片汤剂质量评价方法。方法收集10批酸枣仁饮片,制备成饮片汤剂。以出膏率和指标成分含量为指标,优化提取工艺。采用HPLC-UV/ELSD技术,建立多维度酸枣仁饮片汤剂指纹图谱。以相似度及相对保留时间、相对峰面积RSD综合评... 详细信息

目的建立酸枣仁饮片汤剂质量评价方法。方法收集10批酸枣仁饮片,制备成饮片汤剂。以出膏率和指标成分含量为指标,优化提取工艺。采用HPLC-UV/ELSD技术,建立多维度酸枣仁饮片汤剂指纹图谱。以相似度及相对保留时间、相对峰面积RSD综合评价10批酸枣仁饮片汤剂的质量。建立LC-MS/MS同时测定乌药碱、木兰花碱、维采宁、斯皮诺素、当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、6'''-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和B 9种指标成分含量的方法,并应用于酸枣仁饮片汤剂的质量评价。结果 10批酸枣仁饮片汤剂的平均出膏率为20.77%。在HPLC-UV 227、335 nm和HPLC-ELSD指纹图谱中分别标定了3、4、2个共有峰,不同检测波长下指纹图谱的相似度为0.942～0.988;相对保留时间和相对峰面积RSD均小于3%。9种指标成分在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数r均>0.999 0;平均加样回收率为87.40%～110.42%,RSD均酸枣仁饮片汤剂中9种指标性成分的质量分数分别为乌药碱0.25～0.27 mg/g、木兰花碱3.2～3.6mg/g、维采宁0.077～0.084 mg/g、斯皮诺素0.82～0.89 mg/g、当药黄素0.007 6～0.008 5 mg/g、山柰酚-3-O-芸香糖苷0.057～0.060 mg/g、6'''-阿魏酰斯皮诺素0.32～0.35 mg/g、酸枣仁皂苷A 0.83～0.91 mg/g、酸枣仁皂苷B 0.095～0.110 mg/g。结论建立了稳定、可靠的酸枣仁饮片汤剂质量评价方法,为后续药动学和药效学实验提供稳定的物质基础,同时为含酸枣仁的成方制剂质量控制提供依据。

关键词：酸枣仁饮片汤剂 HPLC 指纹图谱质量评价乌药碱木兰花碱维采宁斯皮诺素当药黄素山柰酚-3-O-芸香糖苷 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B

酸枣仁皂苷A下调TLR/NF-κB通路改善高脂肥胖幼鼠血管内皮功能障碍

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中国新药与临床杂志 2020年第6期39卷 374-380页

作者：朱建丽张娜娜刘小菊丽水市中医院药剂科浙江丽水323000 丽水市中医院血透室浙江丽水323000

目的观察酸枣仁皂苷A(JuA)对高脂肥胖幼鼠血管内皮功能障碍的作用及对Toll样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)炎症信号通路的影响。方法66只21日龄断乳雄性Wistar大鼠,随机分为对照组,模型组,阳性对照(烟酸100 mg·kg-1)组和JuA低、中、高剂... 详细信息

目的观察酸枣仁皂苷A(JuA)对高脂肥胖幼鼠血管内皮功能障碍的作用及对Toll样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)炎症信号通路的影响。方法66只21日龄断乳雄性Wistar大鼠,随机分为对照组,模型组,阳性对照(烟酸100 mg·kg-1)组和JuA低、中、高剂量(10、20、40 mg·kg-1)组,每组11只,对照组予以常规饲料,其余各组给予高脂饲料饲养12周造高脂肥胖模型,阳性对照组和JuA各组在高脂饲养同时每日灌胃给予相应剂量药物12周。记录各组大鼠体重及Lee’s指数变化,观察血管内皮细胞的病理改变及凋亡情况,比较血脂水平、血清血管内皮指标水平、血管内皮细胞TLR/NF-κB炎症信号通路mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠体重及Lee’s指数均显著增加(P<0.05);总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著增高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著降低(P<0.05);血清一氧化氮(NO)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平显著降低,内皮素1(ET-1)、血栓烷B2(TXB2)、血管性血友病因子(vWF)水平显著增高(P<0.05);胸主动脉内皮细胞凋亡指数(AI)增加(P<0.05);TLR2、TLR4、NF-κB蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05),IκBα表达显著下降(P<0.05)。与模型组比较,JuA各剂量组大鼠体重及Lee’s指数均显著降低(P<0.05);胸主动脉内皮细胞AI减小(P<0.05);TC、TG、LDL-C降低,HDL-C增高(P<0.05);血清NO、6-keto-PGF1α、VEGF增加,ET-1、TXB2、vWF降低(P<0.05);内皮细胞TLR2、TLR4、NF-κB蛋白和mRNA表达水平下调,IκBα上调(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论JuA可改善高脂肥胖幼鼠血脂水平,纠正血管内皮功能障碍,其作用可能与下调TLR/NF-κB炎症信号通路有关。

关键词：酸枣仁皂苷A 肥胖症膳食,高脂内皮,血管炎症

快速溶剂萃取-电雾式检测器同时测定酸枣仁中4种成分

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中草药 2017年第10期48卷 2002-2006页

作者：陈学松张杨刚广西壮族自治区梧州食品药品检验所广西梧州543002 赛默飞世尔科技(中国)有限公司上海201206

目的建立一种快速溶剂萃取(ASE)-电雾式检测器(CAD)同时测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素、白桦脂酸的方法。方法采用正交试验对快速溶剂萃取系统的提取条件进行优化,并用电雾式检测器对酸枣仁中目标成分进行同时检测。... 详细信息

目的建立一种快速溶剂萃取(ASE)-电雾式检测器(CAD)同时测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素、白桦脂酸的方法。方法采用正交试验对快速溶剂萃取系统的提取条件进行优化,并用电雾式检测器对酸枣仁中目标成分进行同时检测。色谱柱为Thermo Syncronis C_(18)(100 mm×3 mm,3μm),流动相为乙腈-水,体积流量为0.5 mL/min,柱温为40℃,Corona Ultra电雾式检测器,雾化温度35℃。结果优化了ASE参数,极大地提高了提取效率,通过1次进样,同时测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素、白桦脂酸的量,线性关系良好,相关系数为0.998 3～0.999 6,加样回收率在98.46%～102.02%。结论该方法快速、简便、准确可靠,可用于酸枣仁药材的质量控制。

关键词：快速溶剂萃取电雾式检测器酸枣仁酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 斯皮诺素白桦脂酸

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中药酸枣仁饮片中3种成分的含量比较研究

中国新药杂志 2017年第1期26卷 91-96页

作者：李铮任爽常增荣闫海霞陈有根傅欣彤郭洪祝北京市药品检验所中药成分分析与生物评价北京市重点实验室北京100035 华润双鹤药业股份有限公司北京100102

目的:通过建立针对不同来源酸枣仁和炒酸枣仁饮片中3种成分(斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B)的高效液相色谱含量测定方法,对酸枣仁、炒酸枣仁饮片及方剂酸枣仁汤实际煎煮所测成分的含量进行比较,为其质量控制和临床应用提供依据。... 详细信息

目的:通过建立针对不同来源酸枣仁和炒酸枣仁饮片中3种成分(斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B)的高效液相色谱含量测定方法,对酸枣仁、炒酸枣仁饮片及方剂酸枣仁汤实际煎煮所测成分的含量进行比较,为其质量控制和临床应用提供依据。方法:采用高效液相色谱法,使用Capcell PAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,10%A→19%A;10~20 min,19%A→23%A;20~30 min,23%A→35%A;30~35 min,35%A→50%A;35~40 min,50%A→70%A;40~44 min,70%A→90%A;44~55 min,90%A→100%A;55~60 min,100%A),流速1 m L·min-1,检测波长为0~35 min,335 nm;35~60 min,200 nm,柱温30℃。结果:建立的3种成分含量测定方法简便、可行;酸枣仁、炒酸枣仁饮片中的含量无显著性差异;酸枣仁汤中可检出3种成分,但含量变化明显。结论:所建立的含量测定方法,同时兼顾3种成分的测定,可用于酸枣仁、炒酸枣仁饮片的质量评价。

关键词：酸枣仁炒酸枣仁高效液相色谱含量测定斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 水煎液