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果胶酸类物质的酶解及其对DCS稳定性的影响

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中国造纸学报 2010年第2期25卷 39-44页

作者：张春辉詹怀宇李静李兵云付时雨华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室广东广州510640

选用两种商品果胶酶制剂,首先优化其酶解果胶类物质的反应条件,结果发现,两种果胶酶在pH值9.0,温度为60～70℃的较优条件下可以有效地酶解果胶类物质和马尾松化学机械浆DCS,降低其阳离子需求量(CD值)。在探求两种果胶酶酶解果胶类物质... 详细信息

选用两种商品果胶酶制剂,首先优化其酶解果胶类物质的反应条件,结果发现,两种果胶酶在pH值9.0,温度为60～70℃的较优条件下可以有效地酶解果胶类物质和马尾松化学机械浆DCS,降低其阳离子需求量(CD值)。在探求两种果胶酶酶解果胶类物质的机理时,得出在对PGA类物质(酸性果胶物质)进行果胶酸(盐)裂解酶(PGL)处理以降低CD值时,没有必要将其完全酶解成单体,而只需将其聚合度降为6左右即可。碱性果胶酶(PL)处理果胶时也有类似的结果。同时发现,在漂白浆DCS中的果胶类物质主要是以果胶酸的形式存在,在选用果胶酶时应选用PGL。马尾松化学机械浆DCS经PGL酶处理以后虽然对提高DCS的稳定性作用不大,但可以减缓其沉淀的速度。

关键词：果胶酶溶解与胶体物质酶解机理聚合度

Pectinex SMASH在香蕉汁澄清过程中的作用

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无锡轻工大学学报（食品与生物技术） 2003年第5期22卷 46-52页

作者：王素雅王璋江南大学食品学院江苏无锡214036

对PectinexSMASH在香蕉汁澄清过程中澄清度和粘度的变化、还原糖与自由羧基的释放、悬浮颗粒中果胶质及蛋白质含量、悬浮颗粒的Zeta 电位和粒度分布变化等进行了研究.结果表明,香蕉汁悬浮颗粒含有17.68%的蛋白质和24.43%的总果胶质;Zeta... 详细信息

对PectinexSMASH在香蕉汁澄清过程中澄清度和粘度的变化、还原糖与自由羧基的释放、悬浮颗粒中果胶质及蛋白质含量、悬浮颗粒的Zeta 电位和粒度分布变化等进行了研究.结果表明,香蕉汁悬浮颗粒含有17.68%的蛋白质和24.43%的总果胶质;Zeta 电位测定结果表明,在pH4.76的香蕉汁中,悬浮颗粒表面带负电荷.一些带正电的胶体如明胶和酪蛋白可与悬浮颗粒作用而部分地澄清香蕉果汁,而带负电的胶体如CMC、海藻酸钠和阿拉伯胶可部分地阻止果汁的澄清.PectinexSMASH澄清香蕉汁的过程可分为3个阶段:(1)悬浮颗粒被部分水解,香蕉汁粘度快速下降;(2)部分水解的悬浮颗粒相互聚集并出现絮凝;(3)逐渐长大的颗粒沉淀下来.

关键词： Pectinex-SMASH 香蕉汁澄清酶解机理果胶酶

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植物蛋白水解复合酶的研究

食品工业科技 2002年第9期23卷 37-38页

作者：王孝英徐瑞莲湛永辉陈宗霞刘汉灵广西大学化学化工学院南宁530004 广西南宁市庞博生物工程有限公司南宁530004

在研究植物蛋白水解机理及前处理基础上,通过正交实验筛选出植物蛋白水解专用复合酶配方与使用条件,测定植物蛋白水解复合酶酶解产物结果。

关键词：植物蛋白质酶解机理复合酶配方加工方法

利用Alcalase蛋白酶生产牛骨水解明胶

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食品与发酵工业 2004年第3期30卷 52-55页

作者：安广杰王璋许时婴江南大学食品学院无锡214036

介绍了以牛骨素为原料 ,应用Alcalase蛋白酶制备水解明胶的工艺 ,初步探讨了酶解机理。确定了最佳水解条件为 :温度 60℃、pH 9 5、加酶量 1 5 %、底物浓度 4 0 %、水解时间 3h ,得到产品的分子质量分布范围为 5～ 2 0ku。

关键词： Alcalase蛋白酶水解明胶牛骨素酶解机理水解条件

大豆多肽生物活性及其酶解与吸收机制研究进展

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粮食与油脂 2021年第4期34卷 15-17页

作者：尹乐斌刘丹廖聪何平邵阳学院食品与化学工程学院湖南邵阳422000 邵阳学院豆制品加工与安全控制湖南省重点实验室湖南邵阳422000

对蛋白酶酶解机理、多肽的吸收机制以及大豆多肽的生物活性进行了综述,以期为大豆多肽的综合开发利用提供借鉴。

关键词：大豆多肽酶解机理吸收机制抗氧化 ACE抑制

白囊耙齿菌木质素过氧化物酶表达鉴定及在秸秆发酵中的菌酶协同作用

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白囊耙齿菌木质素过氧化物酶表达鉴定及在秸秆发酵中的菌酶协同作...

作者：梁晓玉江苏大学

学位级别：硕士

高密度、难降解的木质纤维素成分限制了秸秆等资源大规模开发和应用。木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)可以高效降解木质纤维素组分。天然产酶菌株生长周期长、产酶条件苛刻,难以实现LiP大规模应用,LiP在工业化菌种中异源高效... 详细信息

高密度、难降解的木质纤维素成分限制了秸秆等资源大规模开发和应用。木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)可以高效降解木质纤维素组分。天然产酶菌株生长周期长、产酶条件苛刻,难以实现LiP大规模应用,LiP在工业化菌种中异源高效表达是LiP商业化应用的前提。然而,目前世界范围内商品化、满足生物安全性的LiP重组菌还是空白。因此,本研究探究LiP降解木质素的机理,构建可异源表达LiP的生物安全的重组工程菌,为秸秆饲料产业化提供参考。本文将来源于白囊耙齿菌(Irpex lacteus CCBAS Fr.238 617/93 v1.0)的LiP(Protein ID:1589173)的CDS序列经密码子优化后导入大肠杆菌原核表达系统,得到*** p ET-21a-lip重组菌株。在30℃、0.5 m M IPTG诱导时,LiP在重组工程菌中异源表达。SDS-PAGE显示,目的蛋白表观分子量约为37 k Da,Western Blot进一步验证上述结论。经包涵体洗涤、尿素梯度复性后获得具有生物活性的纯品蛋白。根据藜芦醇氧化法得到目的蛋白的比酶活为11.2 U/mg。重组LiP最适温度为37℃,最适p H为3.5。金属离子对LiP酶活具有显著影响,其中Zn对酶活具有显著促进作用,Fe对酶活具有明显抑制作用。丙二酸、柠檬酸、甘油等物质对LiP酶活也表现出明显的促进作用,Tween 20、Tween 80对酶活无显著影响。基于LiP酶学性质分析,以秸秆木质素为底物,探究多酶协同降解木质素的最佳条件:首先通过单因素实验和复配实验研究多种酶类和小分子物质对LiP降解木质素的影响,筛选其中具有正向作用的因素;然后通过响应面实验获得协同降解木质素的最佳条件:1 U LiP协同4%葡萄糖氧化酶、0.74%丙二酸、3.29%Ca Cl进行降解,此条件下木质素降解率为45.84%。本研究首次以白囊耙齿菌纯品LiP为实验对象,以秸秆木质素为底物,木质素降解率为指标,多因素复配探究LiP酶解木质素的最佳实验条件,为LiP后续开发利用提供参考。在不同条件下酶解秸秆中木质素,并表征酶解产物。首先测定产物中还原糖含量,发现多酶系协同酶解及添加Zn SO等小分子物质能够有效提升产物中还原糖含量;通过傅里叶红外和气质联用发现不同物质影响LiP降解木质素的途径各不相同;同时,通过扫描电镜从表观形态上证实木质纤维素降解。将lip的线性化片段与原核-真核穿梭表达载体p REP连接,构建原核-真核重组穿梭质粒p REP-lip,并导入粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe,***)中,得到生物安全级***-p REP-lip重组工程菌。工程菌在YES液体培养基中扩配,收集胞外培养液并浓缩,SDS-PAGE验证目的蛋白在粟酒裂殖酵母中胞外分泌表达,Western Blot进一步验证上述结论。Bradford法测定重组工程菌胞外分泌蛋白量,酵母胞外分泌蛋白在培养6 d时达到峰值,此时胞外酶活也达到峰值,为11.25 U/L。利用构建的重组酵母工程菌探究菌酶协同发酵小麦秸秆制备高蛋白、低木质纤维素含量生物饲料的条件。首先通过单因素实验和响应面实验得到最佳产真蛋白条件:先接种***、***一步发酵,发酵3 d后接入***-p REP-lip、***-p REP-mnp、***二步发酵,以1%葡萄糖为碳源,1%尿素、1%硫酸铵为氮源,Zn SO添加量为1.53%,KHPO添加量为0.57%,Mg SO添加量为1.91%。在最佳产真蛋白条件的基础上探究最佳木质素降解条件,响应面分析得到最佳发酵条件为葡萄糖氧化酶添加量为2.46%,漆酶添加量为3.4%,丙二酸添加量为0.6%,此条件下小麦秸秆生物饲料木质素降解率为45.42%,真蛋白含量较发酵前提升了402.7%,为9.35%。本研究对LiP酶学性质进行初步探索,获得多因素协同酶解木质素的最佳条件并表征木质素酶解产物,同时获得利用构建的产LiP的粟酒裂殖酵母工程菌株制备高蛋白、低木质纤维素含量的生物饲料的发酵工艺,为秸秆饲料产业化发展提供参考。

关键词：木质素过氧化物酶重组粟酒裂殖酵母木质素降解酶解机理菌酶协同

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纤维废弃物酶解资源化利用的研究进展

天津造纸 2004年第3期26卷 8-15页

作者：鲁杰石淑兰邢效功杨汝男天津科技大学天津300222 大连轻工业学院大连116034

综述了纤维废弃物资源化的研究进展,介绍了纤维素原料的酶解机理,纤维素酶的生产及纤维素原料的酶解利用途径。

关键词：纤维废弃物资源化利用纤维素酶解机理纤维素酶生物转化