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酶解提取松针粉挥发油和葛根黄酮的研究

酶解提取松针粉挥发油和葛根黄酮的研究

作者：汤海鸥安徽农业大学

学位级别：硕士

本试验应用了两种酶解处理方法研究了酶解对中草药类饲料添加剂松针粉和葛根的有效成分挥发油和黄酮溶出率的影响,并应用色谱法对酶解前后提取物进行了对比分析。试验研究了以高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等组成的复合酶制剂对松针... 详细信息

本试验应用了两种酶解处理方法研究了酶解对中草药类饲料添加剂松针粉和葛根的有效成分挥发油和黄酮溶出率的影响,并应用色谱法对酶解前后提取物进行了对比分析。试验研究了以高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等组成的复合酶制剂对松针粉和葛根进行酶解处理再进行常规提取,并测定其有效成分挥发油和黄酮的提取量。以提取量为参照值,采用单因素及正交设计方法优化了复合酶解提取的最佳反应条件:酶解温度50℃,pH=4.5,酶解作用时间6h,最适加酶量为4%。试验结果表明:在最优酶解条件下松针粉挥发油和葛根黄酮的提取率分别提高了37.9%和26.3%。经t检验分析,两种中草药有效成分加酶后的提取量显著提高(P酶解条件下,应用复合酶解法提取松针粉和葛根,有效成分的提取率能得到显著性提高。试验利用产高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的黑曲霉ANO2鲜曲酶解处理提取松针粉和葛根。对酶解条件进行了优化,确定黑曲霉酶解法提取松针粉和葛根的最佳条件为:温度40℃,pH=4.0,酶解作用时间和加霉量分别为6h和6%。试验结果表明:在最优酶解条件下,松针粉挥发油的提取率提高了34.3%,葛根黄酮的提取量提高21.1%;经t检验分析,两种中草药有效成分加霉后提取量显著提高(P酶解条件下,黑曲霉ANO2鲜曲能显著的提高松针粉和葛根有效成分的释放提取,且与复合酶法相比更经济方便。试验应用色谱法对松针粉和葛根酶解前后提取物进行了鉴别。薄层层析结果表明酶解提取前后挥发油和黄酮色谱带基本一致,且各提取物与标准品展点在同一水平线上;气相色谱结果表明松针油标准品出现的较大波峰在同一时间值其它三个提取物中也出现一样的较大波峰,且三个提取物的色谱图基本上完全相同;高效液相色谱结果表明标准品的最大波峰和其它三个提取物的最大波峰基本出现在同一时间,且四个最大波峰的紫外吸收光值都在700～800mAU之间。从几种色谱分析结果可知:酶解前后提取物和标准品含有相同的成分,酶解处理对提取产物没有影响。

关键词：复合酶黑曲霉酶解提取色谱鉴别

基于BP神经网络的纤维性根茎药材酶解提取-超滤纯化的临界通量与压力预测

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天然产物研究与开发 2016年第4期28卷 586-590,546页

作者：王继龙刘晓霞魏舒畅柳春范凌云金辉甘肃中医药大学兰州730000

为了有效解决纤维性根茎药材在采用酶解提取-超滤纯化集成技术过程中的膜污染问题,保证该集成技术的顺畅使用,以红芪酶解液的超滤数据为基础,采用BP神经网络构建了临界通量和临界压力预测模型,对模型的模拟能力和对黄芪的适用性进行了检... 详细信息

为了有效解决纤维性根茎药材在采用酶解提取-超滤纯化集成技术过程中的膜污染问题,保证该集成技术的顺畅使用,以红芪酶解液的超滤数据为基础,采用BP神经网络构建了临界通量和临界压力预测模型,对模型的模拟能力和对黄芪的适用性进行了检验,并对利用连接权法计算得到的输入变量的相对贡献进行了敏感性分析。结果表明,所建模型具有很好的模拟能力和适用性,模拟的临界通量和临界压力的绝对误差和误差率的平均值分别为1.5228 L/(m^2·h)、0.0032 MPa和3.46%、2.50%,R^2分别为0.96和0.95;对黄芪模拟的绝对误差和误差率的平均值分别为1.4360 L/(m^2·h)、0.0034 MPa和3.93%、2.80%;输入变量对临界通量和压力的相对贡献大小顺序均为黏度>浓度>p H>温度。

关键词：红芪黄芪酶解提取超滤临界通量临界压力 BP神经网络

酶解提取-超滤纯化过程中红芪活性成分转移情况及相关预测模型研究

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酶解提取-超滤纯化过程中红芪活性成分转移情况及相关预测模型研究

作者：陈方圆甘肃中医药大学(原名：甘肃中医学院)

学位级别：硕士

本文以酶解提取-超滤纯化过程中红芪总多糖、总皂苷和芒柄花素的转移情况及相关模型的建立为目标,开展了以下内容的研究:通过研究建立了芒柄花素的含量测定方法;采用二次通用旋转组合设计优化红芪酶解提取工艺;研究了陶瓷膜(10 nm)在不... 详细信息

本文以酶解提取-超滤纯化过程中红芪总多糖、总皂苷和芒柄花素的转移情况及相关模型的建立为目标,开展了以下内容的研究:通过研究建立了芒柄花素的含量测定方法;采用二次通用旋转组合设计优化红芪酶解提取工艺;研究了陶瓷膜(10 nm)在不同料液浓度、运动黏度、PH和温度条件下的临界通量,并采用前馈型BP神经网络建立了临界通量及临界压力预测模型;在临界压力以下通过改变影响成分转移率的超滤运行参数膜孔径、操作压力和料液温度,建立了分别以总多糖、总皂苷和芒柄花素转移率为输出变量的BP神经网络预测模型;以黄芪为模型验证药材,进一步考察了所建预测模型的适用性;以纯水通量恢复率为考察指标,研究了超滤膜的化学清洗条件。红芪最佳酶解提取工艺为:复合酶用量280 mg,酶解时间90 min,加水量21倍,提取时间170 min。所建超滤临界通量及临界压力神经网络预测模型的拓扑结构为4-7-2,平均绝对误差分别为1.523 L·m-2·h-1和0.003 MPa,平均误差率分别为3.46%和2.50%;总多糖、总皂苷和芒柄花素转移率神经网络预测模型的拓扑结构均为3-6-1,其平均绝对误差分别为0.98%、1.10%和1.59%,平均误差率分别为1.55%、1.48%和1.78%,表明所建神经网络模型具有较好的预测精度。以黄芪为模型验证药材,其酶解提取液的临界通量、临界压力及总多糖、总皂苷、芒柄花素转移率的平均误差率分别为3.93%、2.94%、3.24%、2.91%和1.92%,预测值与实测值吻合性较好,提示研究所得神经网络预测模型具有较好的实用价值。本文研究结果可实现成分相近的纤维性根茎药材红芪、黄芪在采用酶解提取-超滤纯化集成技术时的数学模拟。对酶解条件下临界通量的系统研究可有效防止膜污染,保证该集成技术的顺畅使用。

关键词：红芪酶解提取超滤临界通量转移率人工神经网络

二次通用旋转组合设计优化红芪总多糖与皂苷的酶解提取工艺

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中成药 2014年第2期36卷 286-290页

作者：魏舒畅陈方圆闫治攀金辉王继龙甘肃中医学院甘肃兰州730000

目的采用二次通用旋转组合设计优化酶解提取红芪总多糖与皂苷的工艺。方法在均匀设计及单因素试验的基础上,选定生物酶用量、酶解时间、提取时间和加水倍量为试验因素,以红芪总多糖、总皂苷提取率为指标,采用二次通用旋转组合设计对红... 详细信息

目的采用二次通用旋转组合设计优化酶解提取红芪总多糖与皂苷的工艺。方法在均匀设计及单因素试验的基础上,选定生物酶用量、酶解时间、提取时间和加水倍量为试验因素,以红芪总多糖、总皂苷提取率为指标,采用二次通用旋转组合设计对红芪酶解提取工艺进行优化。结果优化所得红芪酶解提取的最佳工艺条件为酶用量280 mg,酶解时间90 min,加水量21倍,提取时间180 min,在此条件下,红芪总多糖得率为9.58‰,总皂苷得率为4.20‰。结论优化所得红芪酶解提取工艺稳定可行。

关键词：红芪总多糖总皂苷酶解提取二次通用旋转组合设计

肉苁蓉酶解提取物对HKC细胞及慢性肾衰竭大鼠的影响研究

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肉苁蓉酶解提取物对HKC细胞及慢性肾衰竭大鼠的影响研究

作者：马腾甘肃中医药大学(原名：甘肃中医学院)

学位级别：硕士

目的:酶解辅助肉苁蓉提取前期结果表明,该方法可以显著提高肉苁蓉中苯乙醇苷及多糖的传质,因此,在此基础上研究肉苁蓉的酶解提取物对HKC细胞及慢性肾衰竭大鼠的影响,以便为肉苁蓉酶解辅助提取提供理论依据。方法:肉苁蓉酶解提取部分,通... 详细信息

目的:酶解辅助肉苁蓉提取前期结果表明,该方法可以显著提高肉苁蓉中苯乙醇苷及多糖的传质,因此,在此基础上研究肉苁蓉的酶解提取物对HKC细胞及慢性肾衰竭大鼠的影响,以便为肉苁蓉酶解辅助提取提供理论依据。方法:肉苁蓉酶解提取部分,通过对单因素考察以及工艺参数优选等实验来确定肉苁蓉酶解提取的最佳工艺参数。细胞实验部分,对人正常胚肾上皮细胞株HKC细胞进行体外培养,采用细胞增殖毒性实验探讨HKC细胞经阿霉素(Doxourbicin)损伤后,不同浓度肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物分别在24 h、48 h、72 h对其存活率的影响。采用Hoechst 33258染色法观察HKC经阿霉素损伤后,用不同浓度肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物处理24 h后HKC细胞的形态学变化。应用流式细胞技术检测不同浓度肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物作用24 h后对经阿霉素损伤的HKC细胞周期分布的影响。动物实验部分,大鼠通过腺嘌呤灌胃给药造慢性肾衰竭动物模型,造模成功后的大鼠分组给予相应的治疗药物,治疗28天后,对大鼠进行血清生化指标检测和血常规检测,并观察大鼠一般情况和肾脏组织改变。结果:肉苁蓉酶解辅助提取部分,实验最终确定的肉苁蓉酶解提取的最佳工艺参数为料液比1:8,酶解温度55℃,酶解时间2.5 h,纤维素酶的用量0.1%,肉苁蓉酶解辅助提取比传统水提法苯乙醇苷含量增加了64%。细胞实验部分,MTT结果表明,不同浓度肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物均对阿霉素损伤后的HKC细胞有明显的增殖作用,即细胞的存活率升高,并且作用强度与药物的浓度有明显的依赖性关系。染色结果表明,不同浓度肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物处理阿霉素损伤的HKC细胞24 h后,细胞凋现象亡明显减少,细胞形态趋于正常细胞,且与药物浓度有明显的依赖性。流式细胞技术测细胞周期结果表明,肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物影响阿霉素损伤后的HKC细胞周期的分布,随着肉苁蓉酶提液的正丁醇萃取物浓度的增加,G0/G1期细胞百分比逐渐升高,而G2/M期百分比逐渐降低,且细胞凋亡明显减少。动物实验部分,与模型对照组相比,肉苁蓉煎剂治疗组和正丁醇萃取治疗组的大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平明显降低,白蛋白(ALB)水平明显升高,红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、细胞压积(HCT)水平明显升高,大鼠肾脏指数减小,病理检查出现明显异常,水层治疗组基本没有变化。结论:酶解提取能够显著的提高肉苁蓉中有效成分苯乙醇苷的传质,而通过细胞实验和动物实验,说明肉苁蓉对慢性肾衰衰竭有一定的治疗作用,且其起主要治疗作用的是正丁醇萃取的有效部位。

关键词：肉苁蓉慢性肾衰竭酶解提取阿霉素腺嘌呤

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复合酶发酵液酶解提取葛根黄酮的研究

饲料与畜牧（新饲料） 2010年第6期 50-52页

作者：汤海鸥黄辉北京挑战生物技术有限公司

此试验以产高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的复合酶发酵液对葛根进行酶解处理,然后对葛根进行常规提取,测定其有效成分黄酮的提取量,并与未加酶组进行了对比分析。结果表明:葛根黄酮的提取量提高21.1%;经t检验分析,加酶前后提取量均数... 详细信息

此试验以产高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的复合酶发酵液对葛根进行酶解处理,然后对葛根进行常规提取,测定其有效成分黄酮的提取量,并与未加酶组进行了对比分析。结果表明:葛根黄酮的提取量提高21.1%;经t检验分析,加酶前后提取量均数差异极显著(P酶解条件进行了优化,确定复合酶发酵液酶解法提取松针粉的最佳条件为:最佳温度40℃,pH=4.0,而酶解作用时间和加酶量分别为6h和6%。研究表明在最佳酶解条件下,复合酶发酵液能显著的提高葛根有效成分的释放提取。

关键词：葛根黄酮复合酶酶解提取

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黑曲霉酶解提取葛根黄酮的研究

饲料工业 2006年第24期27卷 14-18页

作者：汤海鸥程茂基石秀侠薛培俭安徽省蚌埠市丰原集团发酵技术国家工程研究中心安徽农业大学动物科技学院

试验以产高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的黑曲霉ANO2鲜曲对葛根进行酶解处理,然后对葛根进行常规提取,测定其有效成分黄酮的提取量,并与未加黑曲霉组进行了对比分析。结果表明:葛根黄酮的提取量提高21.1%,经t检验分析,加黑曲霉前后提... 详细信息

试验以产高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的黑曲霉ANO2鲜曲对葛根进行酶解处理,然后对葛根进行常规提取,测定其有效成分黄酮的提取量,并与未加黑曲霉组进行了对比分析。结果表明:葛根黄酮的提取量提高21.1%,经t检验分析,加黑曲霉前后提取量均数差异极显著(P酶解条件进行了优化,确定黑曲霉酶解法提取葛根的最佳条件为:最佳温度40℃、pH值4.0、酶解作用时间6h、加黑曲霉量为6%。研究表明,在最佳酶解条件下,黑曲霉ANO2鲜曲能显著提高葛根有效成分的释放提取。

关键词：葛根黄酮黑曲霉酶解提取

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响应面法优化独一味多糖酶解提取工艺

当代化工研究 2021年第23期 4-8页

作者：高飞邵湘玲李雨婷范潇刘志海青岛农业大学化学与药学院山东266109

本研究利用酶解提取独一味粗多糖,以提取温度、提取时间、pH为影响因素,以多糖提取率为考察指标,通过单因素考察筛选出对多糖提取率影响程度最大的三个影响因素,即提取时间、温度与pH值。设计响应面,利用响应面分析法,优化提取工艺,最... 详细信息

本研究利用酶解提取独一味粗多糖,以提取温度、提取时间、pH为影响因素,以多糖提取率为考察指标,通过单因素考察筛选出对多糖提取率影响程度最大的三个影响因素,即提取时间、温度与pH值。设计响应面,利用响应面分析法,优化提取工艺,最终得到最佳提取工艺为:提取温度60℃,提取时间60min,pH6,复合酶用量为2.0%。

关键词：独一味多糖酶解提取单因素试验响应面分析法

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超声波辅助酶解法提取五味子乙素

食品科学 2011年第6期32卷 115-119页

作者：阴冠秀杜冰华洋林赵小艳杨公明华南农业大学食品学院广东广州510642 无限极(中国)有限公司广东广州510665

以五味子干果为原料,采用酶解法辅助超声波技术提取其中的五味子乙素。单因素试验结果表明,酶解温度、酶解时间以及酶用量对乙素得率的影响较大。通过响应面回归分析,得到酶解辅助超声波提取乙素的优化工艺条件为酶解温度52.89℃、提取... 详细信息

以五味子干果为原料,采用酶解法辅助超声波技术提取其中的五味子乙素。单因素试验结果表明,酶解温度、酶解时间以及酶用量对乙素得率的影响较大。通过响应面回归分析,得到酶解辅助超声波提取乙素的优化工艺条件为酶解温度52.89℃、提取时间4.04h、酶用量0.96%。在此最优条件下,五味子乙素的得率为0.262%。

关键词：五味子乙素酶解提取超声波响应面试验高效液相色谱法