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孤独症鼠模型海马区脑源性神经营养因子-酪氨酸激酶受体b通路的动态变化研究

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中国康复医学杂志 2022年第7期37卷 882-886页

作者：周玉楠姜志梅佳木斯大学康复医学院黑龙江佳木斯市154007

目的:探究孤独症模型鼠海马区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,bDNF)-酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor b,Trkb)通路在不同时间点的动态表达情况,为孤独症发病机制和临床治疗的研究提供思路。方法:随机... 详细信息

目的:探究孤独症模型鼠海马区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,bDNF)-酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor b,Trkb)通路在不同时间点的动态表达情况,为孤独症发病机制和临床治疗的研究提供思路。方法:随机选取孕12.5天Wistar雌鼠24只,实验组12只腹腔注射丙戊酸钠,对照组12只腹腔注射生理盐水。分别对两组雌鼠生产的仔鼠进行行为学检测。于仔鼠P7、P21、P28、P35、P42时,从实验组和对照组中随机各取8只,采用Western blot对两组仔鼠海马区bDNF和Trkb蛋白表达进行检测,采用Rt-PCR对两组仔鼠海马区bDNF和Trkb的mRNA表达进行检测。结果:与对照组仔鼠相比,实验组仔鼠存在以下异常:①行为学方面:社会交流能力下降,重复性刻板行为增加,学习记忆能力下降,以上差异均有显著性意义(Pblot检测:在P7、P21、P28时,实验组仔鼠海马区bDNF和Trkb蛋白表达都高于对照组(PbDNF和Trkb蛋白表达低于对照组(PbDNF和Trkb的mRNA表达都高于对照组(PbDNF和Trkb的mRNA表达低于对照组(PbDNF-Trkb通路早期过度表达,后期表达下降,且此改变在转录水平就已发生。

关键词：孤独症脑源性神经营养因子酪氨酸激酶受体b 海马

酪氨酸激酶受体b在鼻咽癌中的表达及临床意义

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007年第11期21卷 497-500页

作者：赵卫民温文胜张哲廖芝玲张淑香黄光武中国武警广西总队医院耳鼻咽喉科南宁530003 广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科中国武警天津医学院附属医院耳鼻咽喉科

目的:探讨酪氨酸激酶受体b(Trkb)及其配体脑源性神经营养因子(bDNF)的表达水平在鼻咽癌(NPC)发生与发展中的作用。方法:用免疫组织化学染色法检测Trkb及其配体bDNF在NPC患者活检切片中的表达。结果:Trkb和bDNF在NPC组中的阳性表达率分别... 详细信息

目的:探讨酪氨酸激酶受体b(Trkb)及其配体脑源性神经营养因子(bDNF)的表达水平在鼻咽癌(NPC)发生与发展中的作用。方法:用免疫组织化学染色法检测Trkb及其配体bDNF在NPC患者活检切片中的表达。结果:Trkb和bDNF在NPC组中的阳性表达率分别为82.5%(47/57)和52.6%(30/57),均高于鼻咽炎组(均Pb在NPC组中的表达水平与肿瘤的TNM分期及临床分期有关,在T3+T4、Ⅲ+Ⅳ期比在T1+T2、Ⅰ+Ⅱ期高(均Pb和bD-NF的表达在NPC组织学类型之间差异无统计学意义(P>0.05);bDNF的表达与NPCTNM分期、临床分期及有无颈部淋巴结转移无关(均P>0.05);NPC组中Trkb与bDNF的表达无相关性(r=0.049,P>0.05)。结论:Trkb及其配体bDNF表达上调对NPC的发生具有重要作用,NPC组织中Trkb及其配体bDNF蛋白表达水平可作为预测NPC发生及浸润转移的重要指标。

关键词：鼻咽肿瘤酪氨酸激酶受体b 脑源性神经营养因子

丘脑脑源性神经生长因子-酪氨酸激酶受体b信号介导脑缺血诱发的痛觉过敏

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实用医学杂志 2022年第21期38卷 2663-2669页

作者：金博文李东娜庄朋伟郭虹张艳军天津中医药大学天津301617 天津中医药大学第一附属医院天津300193

目的基于丘脑bDNF信号探讨实验性脑缺血大鼠模型脑卒中痛觉过敏的病理机制。方法选用8周龄雄性Wistar大鼠,运用大脑中动脉阻塞方法复制大鼠脑缺血再灌注模型,利用热板法测定大鼠热痛阈,设置假手术组(SHAM),筛选术后3 d出现痛觉过敏的大... 详细信息

目的基于丘脑bDNF信号探讨实验性脑缺血大鼠模型脑卒中痛觉过敏的病理机制。方法选用8周龄雄性Wistar大鼠,运用大脑中动脉阻塞方法复制大鼠脑缺血再灌注模型,利用热板法测定大鼠热痛阈,设置假手术组(SHAM),筛选术后3 d出现痛觉过敏的大鼠为脑卒中后中枢性疼痛组(central post⁃stroke pain,CPSP),运用TTC染色,HE染色、尼氏染色和Neun免疫组化染色确认大鼠丘脑损伤,运用免疫荧光检测丘脑小胶质细胞活化与bDNF表达情况,运用Western blot检测丘脑bDNF、Trkb、GAbAAR蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组神经功能评分升高,热痛阈显著降低,TTC染色丘脑出现梗死区域,丘脑VPL区出现病理损伤,尼氏体数量减少,Neun阳性表达降低,小胶质细胞数量和bDNF表达增加,且小胶质细胞与bDNF存在共表达,丘脑bDNF、Trkb蛋白表达量升高,GAbAAR蛋白表达量降低。结论脑缺血损伤可诱发痛觉过敏症状的发生,发病率可达30%左右,丘脑小胶质细胞激活伴随的bDNF⁃Trkb信号在介导脑卒中后痛觉过敏的病理进展方面有重要作用。

关键词：脑卒后中枢性疼痛丘脑痛觉过敏小胶质细胞脑源性神经生长因子酪氨酸激酶受体b

酪氨酸激酶受体b介导的信号传导通路与肿瘤的失巢凋亡抑制

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中华妇产科杂志 2007年第4期42卷 280-282页

作者：于晓辉刘玲万小平上海交通大学附属第一人民医院妇科 200080

酪氨酸激酶是细胞分化、凋亡、增殖和浸润的信号传导途径中的中心调控因子，受体型酪氨酸激酶是酪氨酸激酶家族的主要成员。原癌基因Trk编码的神经营养因子受体——酪氨酸激酶受体b（tyrosine kinase receptor b，Trkb），有抑制失巢凋... 详细信息

酪氨酸激酶是细胞分化、凋亡、增殖和浸润的信号传导途径中的中心调控因子，受体型酪氨酸激酶是酪氨酸激酶家族的主要成员。原癌基因Trk编码的神经营养因子受体——酪氨酸激酶受体b（tyrosine kinase receptor b，Trkb），有抑制失巢凋亡、诱导癌细胞转移的作用，为失巢凋亡抑制与恶性肿瘤浸润的关系研究提供了实验依据。

关键词：酪氨酸激酶受体b 凋亡抑制肿瘤浸润信号传导通路神经营养因子受体 receptor 介导信号传导途径

酪氨酸激酶受体b基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

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中华行为医学与脑科学杂志 2013年第4期22卷 370-373页

作者：李梅赵玉井超耿德勤庄柏翔樊红彬南京医科大学教学示范中心南京210029 徐州医学院解剖学系附属医院神经内科

目的构建有效抑制酪氨酸激酶受体b（Trkb）基因的RNA干扰慢病毒表达载体。方法根据大鼠Trkb基因的不同部位设计4对短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）寡核苷酸片段，克隆到慢病毒干扎载体pXZRNAi1．0中，构建shRNA慢病毒表达载体pXZ... 详细信息

目的构建有效抑制酪氨酸激酶受体b（Trkb）基因的RNA干扰慢病毒表达载体。方法根据大鼠Trkb基因的不同部位设计4对短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）寡核苷酸片段，克隆到慢病毒干扎载体pXZRNAi1．0中，构建shRNA慢病毒表达载体pXZRNAi-shTrkb-1，2，3，4。获得较高滴度的慢病毒颗粒后感染大鼠神经干细胞，应用实时荧光PCR和Westernblot方法检测对Trkb的干扰效果。结果酶切鉴定和测序结果提示慢病毒载体的寡核苷酸链插入正确。包装浓缩慢病毒颗粒的滴度为8．6×105cfu／ml，对神经干细胞感染效率可达80％。与未感染组相比，转染pXZRNAi-shTrkb-3和4的神经干细胞中TrkbmRNA表达水平分别为（66．7±5．5）％和（76．8±4．9）％，Trkb蛋白的表达水平分别为（68．5±4．3）％和（78．2±5．1）％，均差异有统计学意义（p〈0．05）。结论成功构建可高效沉默Trkb基因的pXZRNAi-shTrkb慢病毒载体，为研究Trkb在神经干细胞中的作用提供了有力工具。

关键词：酪氨酸激酶受体b 慢病毒载体 RNA干扰神经干细胞

酪氨酸激酶受体b与人卵巢癌OVCAR-3细胞侵袭能力的关系

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中国癌症杂志 2008年第10期18卷 728-733页

作者：于晓辉蔡斌杨懿霞严沁万小平任海军刘天卿上海交通大学附属上海市第一人民医院妇产科大连市友谊医院辽宁大连116001

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor b,Trkb)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。Trkb在神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,Trkb在卵巢癌细胞中的表... 详细信息

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor b,Trkb)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。Trkb在神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,Trkb在卵巢癌细胞中的表达及其与卵巢癌细胞的高侵袭能力的关系的研究鲜有报道。本研究探讨失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor b,Trkb)与人卵巢癌OVCAR-3细胞侵袭能力的关系。方法:RT-PCR和Western印迹法检测卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞贴壁培养、细胞立体培养以及细胞立体培养得到的多细胞团簇经胰酶消化成单细胞后再次贴壁培养细胞Trkb的表达差异;体内、体外细胞侵袭实验检测通过RNAi技术沉默Trkb后OVCAR-3细胞侵袭及转移能力的改变。结果:RT-PCR结果表明,OVCAR-3多细胞团簇中TrkbmRNA的表达高于贴壁细胞(Pb表达升高[(17.47±0.58)%vs(8.93±0.19)%,(Pb沉默后OVCAR-3的侵袭及转移能力受到抑制(Pb通过失巢凋亡抑制机制介导了卵巢上皮性癌细胞的侵袭和转移。

关键词：酪氨酸激酶受体b 卵巢癌失巢凋亡 Anoikis 多细胞团簇

酪氨酸激酶受体b在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

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酪氨酸激酶受体B在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

作者：姜朝翔第四军医大学

学位级别：硕士

膀胱癌是人类目前常见的泌尿系恶性肿瘤之一,据统计约占全部恶性肿瘤的3 % ,占男性恶性肿瘤的6.6%左右;在我国其发病率位于泌尿生殖系肿瘤之首,复发率高达55%～85%。90%以上的膀胱癌病理类型为膀胱移行细胞癌(transitional cell carcino... 详细信息

膀胱癌是人类目前常见的泌尿系恶性肿瘤之一,据统计约占全部恶性肿瘤的3 % ,占男性恶性肿瘤的6.6%左右;在我国其发病率位于泌尿生殖系肿瘤之首,复发率高达55%～85%。90%以上的膀胱癌病理类型为膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of bladder ,TCCb),因此对膀胱移行细胞癌的诊断、治疗及预后等方面的研究具有重大意义。酪氨酸激酶受体b(Tyrosine kinase b,Trkb)是新近发现的一种具有抗凋亡的分子,是神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)的功能性受体。近年来的研究表明,Trkb在一些已知的恶性肿瘤组织中高表达,且具有促进肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的能力。本课题表明Trkb与膀胱移行细胞癌病理分级、分期以及预后具有相关性,提示其可能参与了TCCb的转移,是一个具有应用前景的肿瘤标志物,以Trkb为靶点的新的治疗策略有可能有效地抑制膀胱癌的转移。目的使用免疫组织化学的技术探讨酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase b Trkb)在膀胱移行上皮癌(transitional cell carcinoma of bladder ,TCCb)中的表达水平并分析其与TCCb病理分级、临床病理分期和预后的相关性。方法随机选取膀胱移行细胞癌标本60例,以16例正常膀胱黏膜作为对照,应用免疫组织化学(即S-P法)来研究Trkb的表达水平,并对患者术后的预后进行随访,随访时间为6～36个月,并对患者术后生存时间进行分析。结果在所选的60例TCCb中,Trkb的阳性率明显高于正常对照组(Pb中,Trkb的表达显著高于高分化及浅表的TCCb。随访的在复发病例中,Trkb的阳性率高于初发病例。结论Trkb很可能是TCCb发病及转移过程中起重要作用的分子,并有可能作为判断预后的肿瘤标志物。

关键词：酪氨酸激酶受体b 膀胱移行细胞癌免疫组织化学

酪氨酸激酶受体b在卵巢上皮性癌中的表达及其意义

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中国癌症杂志 2008年第7期18卷 501-506页

作者：于晓辉蔡斌杨懿霞严沁万小平上海交通大学附属第一人民医院妇产科

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor, Trkb)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。Trkb在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显... 详细信息

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor, Trkb)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。Trkb在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显增高;转移灶和低分化癌组织中明显增高,如在神经母细胞瘤和其它多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,本研究旨在探讨其过度表达与肿瘤组织分化及病人预后的关系。方法:选取卵巢癌石蜡标本73例(包括与原发灶相对应的8例腹水中的癌细胞团簇),其中低分化腺癌34例,28例卵巢交界性上皮性肿瘤;16例卵巢良性上皮性肿瘤及13例正常卵巢组织作为对照,行免疫组化AbC法检测Trkb的表达;随机选取上述病例中30例(包括4例与原发灶相对应的大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇)、交界性上皮性肿瘤7例;卵巢良性上皮性肿瘤4例及正常卵巢组织(包括卵巢皮质和髓质)2例作为对照,行RT-PCR检测Trkb的表达。结果:RT-PCR结果表明,Trkb mRNA在卵巢癌与卵巢交界性肿瘤中的相对转录水平分别为(16.7±3.1)%和(4.6±0.4)%,在卵巢癌组织中表达明显增加(Pb mRNA在大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇中的Trkb mRNA相对表达量分别为(31.4±1.4)%和(28.2±0.7)%,与相应的原发灶(18.1±1.1)%比较,差异有显著性(Pb;Trkb在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为67.12%(49/73)和14.29%(4/28),两者比较差异有显著性(Pb前体蛋白(表达于胞质)广泛地高表达于卵巢上皮性癌组织中67.12%(49/73),全长Trkb蛋白(表达于胞膜)在腹水中的癌细胞团簇100%(8/8)和低分化卵巢癌组织中100%(34/34)表达增强,与原发灶49.32%(36/73)和高分化癌7.69%(3/39)比较,差异有显著性(Pb阳性表达与卵巢癌患者不良预后有关(Pb的过度表达;全长Trkb高表达于低分化卵巢癌和腹水中的癌细胞团簇中,Trkb可能是介导卵巢癌失巢凋亡抑制的因子;Trkb的过度表达预示卵巢癌的不良预后。

关键词：酪氨酸激酶受体b 卵巢癌失巢凋亡多细胞团簇

酪氨酸激酶受体b在OVCAR-3卵巢癌细胞中的表达及意义

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中国癌症杂志 2008年第6期18卷 405-409页

作者：于晓辉蔡斌杨懿霞严沁万小平上海交通大学附属第一人民医院妇产科大连市妇产医院辽宁大连116033

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor,Trkb)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高侵袭能力。Trkb过度表达与神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤的化疗耐药和不良预后有关。本研... 详细信息

背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体b(tyrosine kinase receptor,Trkb)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高侵袭能力。Trkb过度表达与神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤的化疗耐药和不良预后有关。本研究旨在探讨Trkb及其配体脑源性神经营养因子(brain- derived neurotrophic factor,bDNF)在卵巢上皮性癌细胞系OVCAR-3中的表达及其意义。方法:检测卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞贴壁培养(AC)、细胞立体培养(AIC)以及细胞立体培养得到的多细胞团簇(CS)经胰酶消化成单细胞后再次贴壁培养(RAC)细胞中Trkb及bDN F的表达差异。结果:经RT-PCR检测,与贴壁培养细胞(adhesive cells)比较,Trkb mRNA高表达于OVCAR-3多细胞团簇中(multicellular-spheroids),两组数值分别(23.5±0.5)%,(35.3±0.7)%,差异有显著性(PbDNF mRNA的表达则正相反,两组数值分别(41.4±0.6)%,(32.2±0.7)%,差异有显著性(Pblot检测,Trkb的前体蛋白(未发生糖基化的受体形式)广泛地高表达于上述3种不同培养方式的OVCAR-3细胞中;与贴壁培养细胞比较,OVCAR-3细胞立体培养全长Trkb(发生糖基化的完整受体形式,分子量145 000)明显高表达(Pb及bDNF的自分泌环路,Trkb可能是介导卵巢癌失巢凋亡抑制的因子。

关键词：酪氨酸激酶受体b 脑原性神经营养因子卵巢癌失巢凋亡多细胞团簇