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裙带菜配子体与孢子体的附生微生物群落组成分析

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渔业科学进展 2023年第5期44卷 219-230页

作者：李昱倩单体锋逄少军中国科学院海洋研究所、中国科学院实验海洋生物学重点实验室山东青岛266071 中国科学院大学北京100049

裙带菜(Undaria pinnatifida)是一种重要的大型褐藻,具有较高的经济和食用价值。藻类的附生微生物既能通过代谢产物调控宿主藻类的生长发育,特定条件下又可能导致病害。了解裙带菜附生微生物群落组成对研究裙带菜与附生微生物间的相互... 详细信息

裙带菜(Undaria pinnatifida)是一种重要的大型褐藻,具有较高的经济和食用价值。藻类的附生微生物既能通过代谢产物调控宿主藻类的生长发育,特定条件下又可能导致病害。了解裙带菜附生微生物群落组成对研究裙带菜与附生微生物间的相互作用、种质资源的有效保存以及防治藻类病害等有重要意义。现有研究大多集中于海带和紫菜,关于裙带菜的附生微生物,特别是不同生活史的对比研究还很少。本研究通过16S rRNA基因高通量测序发现,裙带菜配子体和孢子体的附生细菌群落组成有明显差异,配子体样品中的细菌群落丰度和多样性均大于孢子体。配子体中变形菌门(Proteobacteria)(66.67%)为第一优势菌门,其次为拟杆菌门(Bacteroidetes)(13.48%)和蓝细菌门(Cyanobacteria)(11.13%),α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)(34.58%)为第一优势菌纲,其次为γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)(31.01%);而孢子体中蓝细菌门(95.67%)占绝对优势,其次为放线菌门(Actinobacteria)(1.65%)和厚壁菌门(Firmicutes)(1.48%)。裙带菜样品经18S rRNA基因测序检测出链形植物(Streptophyta)、纤毛虫门(Intramacronucleata)、担子菌门(Basidiomycota)、顶复亚门(Apicomplexa)、节肢动物门(Arthropoda)、硅藻门(Bacillariophyta)、脊索动物门(Chordata)、腹毛动物门(Gastrotricha)、子囊菌门(Ascomycota)和毛霉菌门(Mucoromycota),其中,担子菌门、子囊菌门和毛霉菌门属于真菌,孢子体的真核微生物群落丰度大于配子体。本研究确定了裙带菜配子体和孢子体附生微生物群落组成以及不同细菌和真核微生物的相对丰度,结果表明,2个世代之间存在显著差异,为后续研究藻类宿主与微生物之间的相互作用、提高海带目褐藻种质保存技术提供了基础的数据支持。

关键词：裙带菜附生微生物高通量测序孢子体配子体

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基于超微结构的海带雌雄配子体差异研究

电子显微学报 2023年第3期42卷 307-315页

作者：王翔宇辛美丽刘晓慧吴海一山东省海洋科学研究院山东青岛266104

目的:海带具有微小配子体世代和大型孢子体世代,可利用营养生长的配子体克隆长期保存海带种质,但配子体克隆肉眼较难分辨雌雄,本研究以901海带品系(Saccharina 901)、DF海带品系(S.DF)、早厚成海带品系(S.zaohoucheng)、长海带(S.longis... 详细信息

目的:海带具有微小配子体世代和大型孢子体世代,可利用营养生长的配子体克隆长期保存海带种质,但配子体克隆肉眼较难分辨雌雄,本研究以901海带品系(Saccharina 901)、DF海带品系(S.DF)、早厚成海带品系(S.zaohoucheng)、长海带(S.longissima)和真海带(S.japonica)的雌雄配子体为研究对象,分析它们的超微结构差异,为种质雌雄鉴定提供细胞学研究参考。方法:海带配子体克隆保存在低温弱光条件,取5种海带共10份配子体克隆,打碎后,固定包埋,在电子显微镜下观察细胞的超微结构。结果:5种海带雌雄配子体的区别在于雌配子体的质体在细胞内各个部位均有分布,雄配子体的质体靠近细胞壁分布,而且雄配子细胞有较小的质体与细胞体积比值,研究结果可作为长期保存的海带种质性别鉴定的指标。

关键词：海带配子体超微结构细胞器差异

基于PGGB途径优化桫椤组织培养繁殖体系研究

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西北植物学报 2023年第9期43卷 1488-1498页

作者：杨姣杨卫诚吴高殷车冰洁梁红飞周壁波贵州师范大学生命科学学院贵州师范大学喀斯特洞穴研究中心贵阳550025

为优化桫椤(Alsophila spinulosa)快繁体系,提高其繁殖效率,以桫椤孢子为外植体,通过研究不同生长调节剂对孢子诱导配子体、原叶体绿色球状体(prothallus green globular body,PGGB)诱导、PGGB分化、孢子体生根4个过程的影响,进一步探... 详细信息

为优化桫椤(Alsophila spinulosa)快繁体系,提高其繁殖效率,以桫椤孢子为外植体,通过研究不同生长调节剂对孢子诱导配子体、原叶体绿色球状体(prothallus green globular body,PGGB)诱导、PGGB分化、孢子体生根4个过程的影响,进一步探讨不同基质对桫椤组培苗移栽的成活效果。结果表明,(1)孢子诱导配子体,1/8 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+蔗糖20 g/L+琼脂10 g/L诱导效果最佳,诱导率64.62%,诱导天数23 d。(2)PGGB诱导,1/2 MS+0.3 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L诱导率达100%,PGGB鲜重1.13 g,增殖倍数11.04,直径2.01 cm。(3)PGGB分化,在1/2 MS+0.3 mg/L KT+0.4 mg/L IBA+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L的分化效果最佳,分化率92.12%,PGGB平均分化芽数41.67个。(4)孢子体生根,孢子体在1/2 MS+1.0 mg/L IBA+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L中的生根率100%。(5)炼苗,组培苗移栽在基质(红壤∶腐殖土∶泥炭土=2∶1∶1)中的成活率为96.3%。桫椤PGGB诱导及其再生体系的建立受植物生长调节剂影响,且基质对桫椤组培苗的成活率差异显著。研究成功构建了1个高效的桫椤繁殖再生体系,为进一步探究桫椤体外培养发育机制、新品种、规模生产及应用提供技术支持。

关键词：桫椤原叶体绿色球状体孢子配子体孢子体

海带PEPC功能区的原核重组表达及功能鉴定

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水产学报 2022年

作者：秦天明金迷娜方佩佩毕燕会周志刚上海海洋大学水产遗传资源开发利用教育部重点实验室上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心

与其他大型海藻一样，海带同样具备无机碳浓缩机制（CCM），以实现高光合作用效率和生产力。胞质磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（phosphoenolpyruvate carboxylase， PEPC）被认为是海带CCM的重要组件，但目前尚没有关于海带胞质PEPC相关研究... 详细信息

与其他大型海藻一样，海带同样具备无机碳浓缩机制（CCM），以实现高光合作用效率和生产力。胞质磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（phosphoenolpyruvate carboxylase， PEPC）被认为是海带CCM的重要组件，但目前尚没有关于海带胞质PEPC相关研究报道。本研究自海带配子体全长转录组数据库中筛选到一条可能位于细胞质的PEPC的编码基因的cDNA全长序列。通过RT-PCR方法验证，获得SjPEPC基因的cDNA全长，为3 503 bp，包含2 850 bp的完整开放阅读框，50 bp的5’-UTR和603 bp的3’-UTR。SjPEPC编码一个含949个氨基酸残基的蛋白，相对分子质量为104.91 ku，等电点为7.31。多序列比对显示PEPC的功能位点在不同物种中高度保守，系统演化及序列结构分析表明SjPEPC属于细菌型的PEPC。选取编码SjPEPC功能区的核苷酸序列，利用同源重组技术构建了pET32a-SjPEPC原核表达载体，经过诱导和纯化，得到了分子量大小为86.3 ku的重组蛋白（rSjPEPC），酶活性测定结果显示，rSjPEPC具有催化PEP发生羧化的活性，比活力为（9.37±0.46）U/mg prot。研究结果为揭示PEPC在海带无机碳储存中的功能及进一步解析海带CCM提供了分子和生物化学证据。

关键词：海带配子体磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶原核表达酶活性测定

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同方期刊数据库

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环境因子对掌状海带有性生殖过程的影响

海洋湖沼通报 2022年第2期44卷 49-56页

作者：王潇刘福利梁洲瑞袁艳敏张朋艳汪文俊孙修涛农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所山东青岛266071 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071

以发育成熟的掌状海带(Laminaria digitata)孢子体为材料,进行游孢子的放散、附着,形成胚孢子后,分别在不同的温度、光强和营养盐(氮、磷)浓度条件下培养,观察配子体生长发育和有性生殖的过程和特征,探究其配子体形成、排卵以及幼孢子... 详细信息

以发育成熟的掌状海带(Laminaria digitata)孢子体为材料,进行游孢子的放散、附着,形成胚孢子后,分别在不同的温度、光强和营养盐(氮、磷)浓度条件下培养,观察配子体生长发育和有性生殖的过程和特征,探究其配子体形成、排卵以及幼孢子体形成的最适环境条件。结果显示:氮浓度为4 mg/L、磷浓度为0.4 mg/L的营养盐浓度有利于掌状海带配子体的形成和成熟及幼孢子体的形成,营养盐浓度较低(氮≤1 mg/L,磷≤0.1 mg/L)或较高(氮=8 mg/L,磷=0.8 mg/L)均显著降低掌状海带的配子体形成率、排卵率以及幼孢子体形成率;15℃组的配子体形成率显著高于其它温度组,排卵率稍低于10℃组,15℃、光强≤40μmol photons/(m^(2)·s)组的幼孢子体形成率显著低于10℃组;20℃下,无排卵及幼孢子体形成;温度15℃、光强20μmol photons/(m^(2)·s)的条件下配子体形成率较高,而温度10℃、光强40μmol photons/(m^(2)·s)的条件下配子体排卵率和幼孢子体形成率显著较高。上述结果表明,掌状海带生殖过程中不同阶段对温度和光强的需求有较大差异。本研究获得了掌状海带有性生殖不同阶段适宜的温度、光强和营养盐(氮、磷)条件,可为掌状海带人工苗种繁育和养殖提供理论依据。

关键词：掌状海带配子体幼孢子体温度光强氮磷

不同pH和培养方式对海带配子体生长发育的影响

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水产学杂志 2023年第3期36卷 52-59页

作者：陈书秀李晓捷李霞孙娟赵楠史良山东东方海洋科技股份有限公司国家海藻与海参工程技术研究中心山东省海藻与海参技术创新中心山东省海藻遗传育种与栽培技术重点实验室山东烟台264003

为了解决海带配子体人工高密度培养过程中因海水中游离CO_(2)减少及pH升高而导致生长受限的问题,本研究以海带’奔牛’(Sacchatina japonica)雌雄配子体为材料,以不用pH的富营养灭菌海水(10 mg/L N,1 mg/L P)为培养液,通过测量配子体长... 详细信息

为了解决海带配子体人工高密度培养过程中因海水中游离CO_(2)减少及pH升高而导致生长受限的问题,本研究以海带’奔牛’(Sacchatina japonica)雌雄配子体为材料,以不用pH的富营养灭菌海水(10 mg/L N,1 mg/L P)为培养液,通过测量配子体长度,计算相对生长率,比较不同pH对配子体生长的影响,结果显示,pH(P配子体生长有显著影响,长期处在pH配子体相对生长率显著低于其他2组,雌配子体的相对生长率(4.61%)显著高于雄配子体(3.35%)。初始pH为7.0的处理组与对照组相比,雌雄配子体的相对生长率均无显著差异(P>0.05)。在此基础上,采用在通空气悬浮培养同时补充CO_(2)的方式进行配子体扩增培养,利用纯CO_(2)压力罐(出气量120 L/h),15 L培养液每2 d补充CO_(2)1~2 min,培养液pH范围即可控制在7.0~8.4,以此排除pH对配子体生长不利影响,并避免频繁测定pH对配子体可能造成的混种或杂藻等污染。结果显示,该培养方式下,雌雄配子体的特定生长率(♀15.42%,♂13.70%)显著高于其他2种培养方式。静置培养组雌雄配子体特定生长率(♀10.02%,♂8.12%)最低,其次为通空气悬浮培养组。在3种培养方式下,雌配子体的特定生长率显著高于雄配子体。海带’奔牛’雌雄配子体在3种培养方式下继代培养60 d后,将雌雄配子体按质量比2∶1混合后放于适宜条件下进行发育实验。结果显示,3种扩增培养模式下高密度培养的配子体均可在适宜的条件下正常发育,且发育率无显著差异(P>0.05)。以上研究结果可为利用补充CO_(2)进行海带配子体高密度扩增培养提供理论依据。

关键词：海带配子体 pH 培养方式生长发育

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疟疾传播阻断疫苗的研究进展

中国病原生物学杂志 2022年第10期17卷 1229-1236页

作者：王姗姗赵龙玉全芯薛庆节谭文彬李士根杜峰济宁医学院精准医学研究院山东济宁272067 济宁医学院基础医学院病原生物学教研室

疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病。蚊虫易被疟原虫感染并传播病原体是消除疟疾面临的一个巨大挑战。疟疾传播阻断疫苗旨在阻断疟原虫在蚊体内的生活史过程,免除蚊的感染,从而阻止疟疾传播。与其... 详细信息

疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病。蚊虫易被疟原虫感染并传播病原体是消除疟疾面临的一个巨大挑战。疟疾传播阻断疫苗旨在阻断疟原虫在蚊体内的生活史过程,免除蚊的感染,从而阻止疟疾传播。与其他防控策略联合使用,有望促进流行区疟疾的消除乃至根除。本文综述了疟疾传播阻断疫苗的研究进展,并对传播阻断免疫进行概述,以期为疟疾传播阻断疫苗的研制提供理论参考。

关键词：疟疾传播阻断疫苗配子体免疫综述

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输入性重症恶性疟1例

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第2期40卷 269-270,F0003页

作者：佘丹娅卢丽丹兰子尧黄雨婷梁文琴贵州省疾病预防控制中心贵阳550000

2019年10月贵州省疾病预防控制中心收到1例输入性疟疾病例报告。该患者于2018年4月至2019年10月在科特迪瓦从事户外广告工作,除蚊香外未采取其他防蚊措施,期间曾感染疟原虫2次。患者入院时意识呈昏睡状,全身皮肤及巩膜黄染,呼吸稍急促,... 详细信息

2019年10月贵州省疾病预防控制中心收到1例输入性疟疾病例报告。该患者于2018年4月至2019年10月在科特迪瓦从事户外广告工作,除蚊香外未采取其他防蚊措施,期间曾感染疟原虫2次。患者入院时意识呈昏睡状,全身皮肤及巩膜黄染,呼吸稍急促,伴脑损害、急性呼吸窘迫综合征、休克、严重贫血、酸中毒等多种症状。实验室检查、疟原虫抗原检测均呈阳性,血涂片检测发现恶性疟环状体、滋养体、裂殖体和配子体,巢式PCR可扩增出恶性疟条带。结合流行病学史和实验室检测结果,判定为恶性疟原虫单一感染。给予患者规范抗疟治疗,并全程监测原虫密度,药物效果显著。治愈出院后随访无不适。

关键词：恶性疟外周血环状体滋养体裂殖体配子体

千里光配子体发育、配子形成与双受精的细胞学特征（英文）

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植物研究 2019年第1期39卷 27-34页

作者：谢欣钱秋博言王蕾王乾兴平军娇贺莉芳钱刚遵义医科大学细胞生物学教研室遵义563003 黔南民族医学高等专科学校护理系都匀558003 中山市第三人民医院中山528400

千里光(Senecio scandens Buch.-Ham.ex D.Don)是具有良好开发前景的传统抗菌中草药。为了探讨该物种有性生殖的细胞学机制,实现在物种的遗传育种过程中的指导作用,本研究从细胞学角度观察了千里光配子体发育、配子形成和双受精作用。... 详细信息

千里光(Senecio scandens Buch.-Ham.ex D.Don)是具有良好开发前景的传统抗菌中草药。为了探讨该物种有性生殖的细胞学机制,实现在物种的遗传育种过程中的指导作用,本研究从细胞学角度观察了千里光配子体发育、配子形成和双受精作用。结果表明,在生殖核分裂为精细胞的过程中,其位置和形态呈现差异,表现为"二态"精细胞;此外,雌配子体的形成符合孢子发育模式,成熟胚囊的形态结构为卵形或梨形,成熟的卵细胞和极核位于珠孔端。根据上述结果可推断,合子在随后二分裂时表现为"基细胞—顶细胞"极性,可能与"二态"精细胞导致的合子细胞质不均一有关。此外,从植物分类学角度,千里光的"二态"精细胞,胚囊极性和合子极性可成为菊科近缘植物分类的细胞学依据。

关键词：千里光配子体双受精合子