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国外医学（生理病理科学与临床分册） 1989年第1期9卷 28-30页

作者：范蓥南京大学医学院

基因芯片筛选骨髓间充质干细胞与透明软骨细胞的差异表达基因

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大连医科大学学报 2008年第5期30卷 405-409页

作者：赵可庆翟立杰王志强冯亚高明珠大连医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科辽宁大连116011

[目的]通过筛选大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)与透明软骨细胞及弹性软骨细胞的差异表达基因,为进一步筛选可诱导MSCs向透明软骨细胞分化的生长因子打下基础。[方法]分离获得所需MSCs、弹性软骨细胞和透明软骨组织... 详细信息

[目的]通过筛选大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)与透明软骨细胞及弹性软骨细胞的差异表达基因,为进一步筛选可诱导MSCs向透明软骨细胞分化的生长因子打下基础。[方法]分离获得所需MSCs、弹性软骨细胞和透明软骨组织,提取细胞和组织块的总RNA并纯化。获得经荧光标记的cDNA,与基因芯片杂交后扫描荧光信号图像,对所获图像进行分析,找到差异表达基因。分析所获差异表达基因功能。[结果]以2倍差异显著性为标准,在两种软骨中共同上调的基因数为582条,而于透明软骨组中上调,弹性软骨组中下调的基因数为459条。将基因功能查询结果与cy5/cy3比值大小结合考虑后,确定了软骨调节素1(chondromodulin1,Chm1)基因、前II型胶原α1链(procollagen,type2,alpha1,Col2α1)基因和软骨同源异型蛋白1(Cartilagehomeopro-tein 1,Cart1)基因可做为目标研究基因。[结论]Chm1基因、Col2α1基因与Cart1基因可能是诱导MSCs向透明软骨细胞方向分化的关键基因。

关键词：基因芯片骨髓间充质干细胞透明软骨弹性软骨

滑膜间充质干细胞向透明软骨分化条件的体外研究

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滑膜间充质干细胞向透明软骨分化条件的体外研究

作者：胡伟全南京大学

学位级别：硕士

目的：研究TGF β1、BMP-2、bFGF、IGF、BMP-7、ASA、Dex七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中起的作用。方法：严格按照无菌性操作从兔膝关节内提取滑膜组织,刮除脂肪、肌肉组织后依靠酶消化法、有限稀释法获得滑膜间充质干细... 详细信息

目的：研究TGF β1、BMP-2、bFGF、IGF、BMP-7、ASA、Dex七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中起的作用。方法：严格按照无菌性操作从兔膝关节内提取滑膜组织,刮除脂肪、肌肉组织后依靠酶消化法、有限稀释法获得滑膜间充质干细胞。等到干细胞传至第三代的时候,诱导其向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞分化。网上搜索有关的文献,了解在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中占据重要作用的因素。正交实验中纳入TGF β1、BMP-2、bFGF, IGF、BMP-7、AsA、Dex七种因素。通过SPSS22.0统计软件设计L8(27)正交实验及表头,定义2水平条件。采用流式细胞仪检测CD151+/CD44+细胞数,免疫组织化学染色检测高表达Col Ⅱ的II型胶原细胞与软骨细胞总数的比值,该比值视为透明软骨转化率(N),设定rate为检验指标,rate为CD151+/CD44+细胞数乘以N所得结果。对实验结果进行验证采用甲苯胺蓝染色法和免疫组化染色法,实验结果分析采用直观观察法和主体间方差分析法。结果：提纯后的滑膜间充质干细胞是一种形态较为一致的细胞,有的呈星型,有的呈梭型,与成纤维细胞的形态较为相似。在诱导其向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化后分别进行油红染色、碱性磷酸酶染色、甲苯胺蓝染色,染色结果均呈现为阳性。正交实验中直观观察可见TGF-β1、作用最强,其次为BMP-7,主体间方差分析显示TGFβ1、bFGF、IGF、BMP-7、AsA可以显著影响SMSCs向透明软骨分化,两种结果一致。结论：滑膜间充质干细胞能够成功诱导向各种组织细胞分化,可以作为种子细胞应用于透明软骨的修复。TGF β1、bFGF、IGF、BMP-7、AsA七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中发挥显著的作用,TGF β1是七种因素中作用最明显的一种。继续对更多诱导滑膜间充质干细胞向透明软骨因素及水平的探索,有助于寻找更为合理、精确的组合用于组织工程修复软骨损伤。

关键词：间充质干细胞透明软骨正交实验体外研究细胞因子分化

同种透明软骨移植后蛋白多糖动态变化的实验观察

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中华烧伤杂志 1995年第2期 129-131+162页

作者：郑信民杨壮群侯成群冯彬王奕许援朝西安医科大学口腔医院生化室 710004 西安医科大学口腔医学院颌面成形外科西安医科大学一附院口腔科

通过动物实验,利用组织学、组织化学和生物化学等手段,对同种透明软骨移植后不同时期基质中的蛋白多糖含量进行了动态变化观察。结果显示,蛋白多糖含量的高低对移植的异体软骨能否存活极为重要。

关键词：透明软骨异体移植蛋白多糖

非诱导脂肪源性干细胞对修复全层透明软骨创伤的可行性研究

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中华关节外科杂志（电子版） 2011年第2期5卷 40-43页

作者：张海宁李磊王英振吕成昱青岛大学医学院附属医院关节外科 266003 山东省日照市东港医院骨科 276800

目的探讨源自分布广泛的脂肪组织的干细胞的体内分化潜能及非诱导修复全层透明软骨缺损的效果。方法体外切取脂肪组织并分离培养脂肪源性干细胞(ADSCs)。随机将36只新西兰大白兔分为三组,混合有藻酸钙凝胶的ADSCs用来填充髌股关节的全... 详细信息

目的探讨源自分布广泛的脂肪组织的干细胞的体内分化潜能及非诱导修复全层透明软骨缺损的效果。方法体外切取脂肪组织并分离培养脂肪源性干细胞(ADSCs)。随机将36只新西兰大白兔分为三组,混合有藻酸钙凝胶的ADSCs用来填充髌股关节的全层透明软骨损伤,凝胶修复或未做治疗组作为对照组。4周和12周后对重建组织进行大体和光镜、电镜下观察,组织学分析和定量计分也用于检测结果。结果 ADSCs重建的组织白色质韧,完全充填缺损处,表面光整与周围软骨连接,修复组织的微观结构与软骨相似,含有更多的细胞和规则的基质纤维,基质有甲苯胺蓝异染性,优于其他各组。透射电镜可见大量胶原纤维环绕细胞周围。凝胶组和对照组修复组织为薄层纤维组织。修复效果评分的统计分析显示实验组在各时间点上与其他组相比有统计学差异(P软骨创伤的能力,组织显示为透明样,产生生物学可行性结果。

关键词：脂肪源性干细胞透明软骨创伤

生长期兔髁突纤维软骨细胞和骨骺透明软骨细胞生物学特性的比较研究

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口腔医学 2014年第2期34卷 81-86页

作者：黄林剑李辉李妙然蔡协艺上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院口腔外科上海市口腔医学重点实验室上海200011

目的建立软骨细胞体外培养模型,研究纤维软骨和透明软骨的生物学差异。方法分离4周龄雌性兔双侧髁突软骨和膝关节骨骺软骨,采用胰酶和胶原酶联合消化的方法收集软骨细胞,分别进行体外培养并连续传代至P10。使用倒置显微镜观察细胞形态;... 详细信息

目的建立软骨细胞体外培养模型,研究纤维软骨和透明软骨的生物学差异。方法分离4周龄雌性兔双侧髁突软骨和膝关节骨骺软骨,采用胰酶和胶原酶联合消化的方法收集软骨细胞,分别进行体外培养并连续传代至P10。使用倒置显微镜观察细胞形态;采用阿利新蓝和Ⅱ型胶原免疫组化染色的方法分别对髁突纤维软骨细胞和骨骺透明软骨细胞进行鉴定;用细胞计数的方法绘制生长曲线;运用荧光定量PCR和Western印迹技术对软骨特异性指标Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原、SOX9和Aggrecan进行检测,并使用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果倒置显微镜观察示,髁突纤维软骨细胞和骨骺透明软骨细胞形态均会随细胞传代而发生改变,且P2代以后改变明显;基因和蛋白水平的检测均证实P2代后软骨细胞去分化明显。阿利新蓝和Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定结果均为阳性,对照组为阴性。实时定量荧光PCR和Western印迹结果证明:在纤维软骨中,Ⅰ型胶原的表达量高于透明软骨;而Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原、SOX9和Aggrecan的表达量却明显低于透明软骨。结论使用本方法培养软骨细胞简单有效;髁突纤维软骨细胞和骨骺透明软骨细胞体外培养均存在去分化现象,且两者Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原、SOX9和Aggrecan的表达存在显著差异,生物学特性并不相同。

关键词：兔髁突骨骺纤维软骨透明软骨生物学特性

滑膜间充质干细胞向透明软骨分化条件的体外研究

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临床与病理杂志 2016年第6期36卷 776-784页

作者：胡伟全张雷徐敬赵建宁南京大学医学院临床学院(南京军区南京总医院)骨科南京210093

目的:研究TGFβ1、BMP-2、b FGF、IGF、BMP-7、ASA、Dex七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中起的作用。方法:酶消化法、有限稀释法获得滑膜间充质干细胞,并诱导其向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞分化。正交实验中纳入TGFβ1、BMP-... 详细信息

目的:研究TGFβ1、BMP-2、b FGF、IGF、BMP-7、ASA、Dex七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中起的作用。方法:酶消化法、有限稀释法获得滑膜间充质干细胞,并诱导其向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞分化。正交实验中纳入TGFβ1、BMP-2、b FGF、IGF、BMP-7、As A、Dex七种因素。通过SPSS22.0统计软件设计L8(27)正交实验及表头,定义2水平条件。结果:滑膜间充质干细胞在成骨、成脂、成软骨分化后分别进行油红染色、碱性磷酸酶染色、甲苯胺蓝染色,染色结果均呈现为阳性。正交实验中直观观察、主体间方差分析显示TGFβ1作用最强。结论:滑膜间充质干细胞能够成功诱导向各种组织细胞分化,TGFβ1是七种因素中作用最明显的一种。

关键词：间充质干细胞透明软骨正交实验

两种方法保存人体透明软骨行异种移植的实验研究

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中国微创外科杂志 2002年第4期2卷 241-243页

作者：栾保华薛文君王永前薛峰吕仁荣张健初晓莲马晓东禚莹莹山东省立医院山东大学临床医学院美容整形外科济南250021

目的　探讨不同方法保存的人体透明软骨 ,异种移植后软骨存活的动态变化及在整形外科应用的可行性。　方法　选择 4 8只新西兰种成年白兔 ,随机分为两组 ,每组 2 4只 ,分别接受 - 198℃液氮冷冻和 75 %酒精灭活法保存的人体透明软骨移... 详细信息

目的　探讨不同方法保存的人体透明软骨 ,异种移植后软骨存活的动态变化及在整形外科应用的可行性。　方法　选择 4 8只新西兰种成年白兔 ,随机分为两组 ,每组 2 4只 ,分别接受 - 198℃液氮冷冻和 75 %酒精灭活法保存的人体透明软骨移植 ,观察一年。术后每 3个月比较两组血清IgG、IgM、IgA、C3、C4 、PFB(补体B因子 )含量 ,每月随机抽取两组各两只兔子取移植软骨块观察其外形、色泽 ,测重量。比较光学显微镜和透射电镜下的组织学变化。　结果　两实验组各时间点IgG、IgM、IgA、C3、C4 、PFB含量与术前相比无显著性差异 ,P >0 0 5。深低温保存法软骨移植后 1- 2个月内重量略有增加 ,3个月重量开始减少 ,至 1年达最低点。光学显微镜下观察 ,2个月可见新生不成熟软骨细胞。 3个月时软骨开始出现退行性变 ,至 6个月时明显加重。酒精灭活移植软骨重量无明显变化 ,仅在 6个月时开始出现轻度退行性变。透射电镜下观察的变化规律基本与光学显微镜下的观察结果相一致。结论酒精灭活法保存的人体透明软骨用于异种移植后 ,外型变化小 ,提示其临床应用可行性优于液氮冷冻保存法。

关键词：实验研究透明软骨异种移植存活率整形外科酒精灭活法液氮冷冻保存法

同种透明软骨移植后蛋白多糖动态变化的实验观察

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中华整形烧伤外科杂志 1995年第2期11卷 129-131,162页

作者：郑信民杨壮群侯成群冯彬王奕许援朝西安医科大学口腔医学院颌面成形外科 710004 西安医科大学一附院口腔科西安医科大学口腔医院生化室

关键词：骨移植透明软骨异体移植蛋白多糖

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透明软骨厚度测量的精密度

国际医学放射学杂志 1993年第2期 115-115页

作者：贺文

作者用平片、B超和MR测量了10例的双侧膝、髋关节,即每人测量4个关节(左、右髋及膝关节)并比较了三种影象手段对关节软骨测量的精密度。4例女性为正常志愿者,其余6例患者中有2个髋关节、1个膝关节呈严重退行性变,4个髋关节和4个膝关节... 详细信息

作者用平片、B超和MR测量了10例的双侧膝、髋关节,即每人测量4个关节(左、右髋及膝关节)并比较了三种影象手段对关节软骨测量的精密度。4例女性为正常志愿者,其余6例患者中有2个髋关节、1个膝关节呈严重退行性变,4个髋关节和4个膝关节呈中度退行性变,其余13个关节正常。年龄24～77岁。摄双侧膝关节和髋关节的立、卧前后位象,中心线通过关节间隙。髋关节取髓臼顶端与股骨头中心连线处和内、外各10°处三点测量关节间隙的宽度。膝关节测量内、外侧平台中点处关节间隙的宽度。平片对关节间隙的测量反映的是关节软骨的复合宽度。B超只能测量股骨头

关键词：透明软骨厚度髓关节关节间隙关节腔膝关节精密度