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两种不同激光辅助孵化方法对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

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广东医学 2007年第5期28卷 733-735页

作者：孙玲陈士岭李劲李黎张为青邱卓琳杨杰邢福祺南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心广州510515

目的探讨激光透明带打孔和激光透明带削薄两种激光辅助孵化方法对体外受精-胚胎移植妊娠率的影响。方法回顾性分析了187例行激光辅助孵化治疗的患者,分成透明带打孔穿透组和透明带削薄组,比较两组妊娠率及胚胎着床率。结果用两种方法进... 详细信息

目的探讨激光透明带打孔和激光透明带削薄两种激光辅助孵化方法对体外受精-胚胎移植妊娠率的影响。方法回顾性分析了187例行激光辅助孵化治疗的患者,分成透明带打孔穿透组和透明带削薄组,比较两组妊娠率及胚胎着床率。结果用两种方法进行辅助孵化治疗的妊娠率分别为45.8%和40.7%,胚胎着床率分别为25.2%和24.8%,两组差异无显著性。结论激光透明带削薄可以完全替代透明带穿透打孔,从而减少对胚胎的损伤。

关键词：激光辅助孵化体外受精透明带打孔透明带削薄

Piezo介导的辅助孵化对小鼠胚胎着床和发育影响的研究

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Piezo介导的辅助孵化对小鼠胚胎着床和发育影响的研究

作者：赵一桐内蒙古大学

学位级别：硕士

透明带(zona pellucida,ZP)是包裹在卵母细胞外的一层由糖蛋白组成的外被结构,在初级卵泡早期阶段由卵母细胞和颗粒细胞共同分泌形成。在受精过程和早期胚胎发育中起着重要作用。然而,透明带的厚化和硬化不利于胚胎的孵化。因此,我们尝... 详细信息

透明带(zona pellucida,ZP)是包裹在卵母细胞外的一层由糖蛋白组成的外被结构,在初级卵泡早期阶段由卵母细胞和颗粒细胞共同分泌形成。在受精过程和早期胚胎发育中起着重要作用。然而,透明带的厚化和硬化不利于胚胎的孵化。因此,我们尝试利用辅助孵化(assisted hatching,AH)技术提高囊胚的孵化率,从而提高胚胎的着床率以及子代的出生率。辅助孵化是通过人为的方法对透明带进行处理,使胚胎从透明带释放出的技术。目前,辅助孵化技术有许多种,我们组早期的实验发现,不同的辅助孵化技术对不同时期的胚胎进行操作会有不同的效果。Piezo介导的各种辅助孵化技术中,在桑椹胚期进行透明带打小孔处理后(打孔尺寸约为10 μm),可获得最高的囊胚孵化率。而该种方法是否能够提高胚胎的着床率以及子代的出生率仍有待考究。本实验利用该种辅助孵化方法处理胚胎,再进行胚胎移植(embryo transfer,ET),统计其胚胎着床率、母鼠妊娠率、子代出生率以及子代生长曲线等数据,以探明piezo介导的辅助孵化对小鼠胚胎着床和发育的影响。本研究对以下三种不同来源的胚胎进行分析,包括:(1)自然交配组(mating组),用作非辅助孵化、非胚胎移植操作的对照组;(2)体内受精获得的胚胎,仅进行胚胎移植,而不进行辅助孵化处理,用于观察胚胎移植对妊娠效率及后代发育的影响(embryo transfer,ET组);(3)体内受精获得的胚胎,进行辅助孵化处理后,再进行胚胎移植,用于观察辅助孵化和胚胎移植对妊娠效率及后代发育的影响(small hole,SH组)。我们的研究结果表明,与Mating组相比,ET组中的胚胎移植操作会降低胚胎着床数,着床后的胚胎发育迟缓,孕天延迟,子代出生数降低,并影响子代生长曲线;但对胚移后妊娠率、活胎率、性别都没有影响。胚移后得到的子代小鼠再进行自然交配,其孕天以及生育能力没有受到影响。与ET组相比,SH组虽然能够提高胚胎的体外孵化效率,但着床后胚胎发育迟缓,并影响子代生长曲线。打孔之后的胚胎在胚移之后,母鼠存活率、着床数、着床率、妊娠率、孕天、子代小鼠出生数、出生率、活胎率、性别、孕天以及子代小鼠生育能力等都没有影响。SH组与Mating组相比较,会降低胚胎着床数,着床后的胚胎发育更加迟缓,孕天延迟,子代出生数降低,并影响子代生长曲线;但对胚移后妊娠率、活胎率、性别都没有影响。胚移后得到的子代小鼠再进行自然交配,其孕天以及生育能力没有受到影响。综上所述,piezo介导的透明带打小孔的辅助孵化方式并不能够提高胚胎的着床率、母鼠的妊娠率和子代的出生率。相反,经过辅助孵化和胚胎移植操作后,会导致胚胎发育紊乱,对着床后胚胎的发育和子代生长曲线都有影响,但并不影响子代小鼠的性别和生殖能力。因此,我们认为,依赖于打孔方式的辅助孵化技术,在临床上应该被谨慎使用。

关键词：辅助孵化透明带打孔 piezo 胚胎移植

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不同辅助孵化方式对小鼠囊胚孵化率的影响

不同辅助孵化方式对小鼠囊胚孵化率的影响

作者：吴莎娜内蒙古大学

学位级别：硕士

辅助孵化(Assisted Hatching, AH)是一种能够帮助胚胎从透明带中孵出的技术。体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)过程中的着床率低下现象,一直是困扰人们的问题。临床上,运用AH技术能够有效提高囊胚孵... 详细信息

辅助孵化(Assisted Hatching, AH)是一种能够帮助胚胎从透明带中孵出的技术。体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)过程中的着床率低下现象,一直是困扰人们的问题。临床上,运用AH技术能够有效提高囊胚孵化率以及胚胎着床率。目前,人工辅助孵化的方法主要有机械法、化学法、酶消化法、激光法以及压电脉冲(piezo)显微操作法。AH的具体操作方法包括对卵母细胞的透明带进行打孔或削薄等方法,进行辅助孵化处理时所选择的胚胎发育时期也各不相同。然而,究竟哪种AH方法最有效,选择哪一发育时期的胚胎进行AH操作能够得到最理想的效果,还没有具体研究。本实验利用piezo显微操作法,针对小鼠成熟卵母细胞及着床前各时期胚胎进行不同方式的AH处理,统计各种方法处理后胚胎的发育率和囊胚的孵化率,以探明最佳的AH处理方式。本研究采用的AH方法分别为：(1)透明带打小孔(small hole, SH),开孔长度约为10μm;(2)透明带打大孔(large hole, LH),开孔长度约为50μm;(3)透明带削薄小区域(small length thinner, ST),削薄区域直径约为50μm;(4)透明带削薄大区域(large length thinner, LT),削薄区域直径约为120μm。选择不同发育时期的卵母细胞或胚胎分别进行AH处理,各时期分别为：(1)MⅡ期卵母细胞;(2)IVF体外培养得到的2-cell胚胎;(3)IVF体外培养得到的4-cell胚胎;(4)IVF体外培养得到的桑椹期胚胎。我们的研究结果表明：不同AH方法中,SH处理后囊胚孵化率较高,且多数胚胎为不完全孵出;LT处理后胚胎完全孵化率较高。我们的结果还表明在桑椹胚期进行AH处理效果最好。本实验的结论为：利用piezo对小鼠着床前胚胎进行辅助孵化处理,在桑椹胚期进行SH处理可以获得最高的囊胚孵化率。该研究将为临床上人类胚胎的辅助孵化技术提供基本依据。

关键词：辅助孵化 piezo 透明带打孔透明带削薄

新的囊胚活检方法——囊胚活检不再纠结和繁琐

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生殖医学杂志 2017年第4期26卷 324-327页

作者：吴克良山东大学附属生殖医院济南250001

囊胚活检目前是进行胚胎植入前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)以及单基因疾病诊断的前提。目前常规使用的提前打孔的囊胚活检方法,会出现囊胚孵出时间不确定、内细胞团处于孵出部位以及囊胚过早孵出等异常现象,给囊胚活检带来了一定的困难,... 详细信息

囊胚活检目前是进行胚胎植入前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)以及单基因疾病诊断的前提。目前常规使用的提前打孔的囊胚活检方法,会出现囊胚孵出时间不确定、内细胞团处于孵出部位以及囊胚过早孵出等异常现象,给囊胚活检带来了一定的困难,并部分地影响到囊胚最终移植的临床结局。新的非提前打孔囊胚活检法,利用透明带本身的束缚作用减少激光的创面,可以最大程度地减少活检时异常情况的出现,使得活检更加简单并且可控,可以在一定程度上改善移植胚胎的临床结局。

关键词：囊胚活检透明带打孔囊胚孵出内细胞团

激光辅助孵化技术对囊胚期冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响

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中国医学创新 2020年第27期17卷 58-61页

作者：冯清李嘉泓宋燕周志伟段彪刘娟江西省赣州市人民医院江西赣州341000

目的:探讨激光辅助孵化技术对囊胚期冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响。方法:选取2017年1月-2018年12月在本院行冻融囊胚解冻移植技术助孕的339例患者。按激光辅助方式不同分为A组190例和B组149例,A组行透明带削薄,B组行透明带打孔。比... 详细信息

目的:探讨激光辅助孵化技术对囊胚期冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响。方法:选取2017年1月-2018年12月在本院行冻融囊胚解冻移植技术助孕的339例患者。按激光辅助方式不同分为A组190例和B组149例,A组行透明带削薄,B组行透明带打孔。比较两组胚胎复苏率、胚胎着床率、移植周期妊娠率以及子代出生情况。结果:两组移植胚胎数、优质囊胚率、胚胎解冻复苏率、移植周期妊娠率、胚胎着床率、流产率、活产率、出生缺陷率、早产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:透明带削薄、透明带打孔两种激光辅助在囊胚期冻融胚胎移植中效果相近,临床可根据实际情况选择适宜的辅助孵化技术。

关键词：囊胚期冻融胚胎移植透明带削薄透明带打孔妊娠结局

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冷冻对精子超活化水平的影响

冷冻对精子超活化水平的影响