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吉林大学学报（医学版） 2017年第4期43卷 845-848页

作者：孙茂蕾徐晓薇顾中一刘杰高雪彬孟许亚孙宏晨吉林大学口腔医院病理科吉林长春130021 吉林大学口腔医院牙周病科吉林长春130021

纳米载体传递药物或核酸进入细胞,要穿透细胞膜,逃逸溶酶体并进入细胞核,其中逃逸溶酶体是纳米载体发挥作用的关键步骤。近年来,国内外许多学者根据纳米载体逃逸溶酶体的机制,利用大分子对现有纳米载体进行修饰或合成新型纳米载体。本... 详细信息

纳米载体传递药物或核酸进入细胞,要穿透细胞膜,逃逸溶酶体并进入细胞核,其中逃逸溶酶体是纳米载体发挥作用的关键步骤。近年来,国内外许多学者根据纳米载体逃逸溶酶体的机制,利用大分子对现有纳米载体进行修饰或合成新型纳米载体。本文作者就纳米载体进入细胞的屏障、逃逸溶酶体机制及根据逃逸机制对其进行修饰调控3个方面做进行分析和综述。

关键词：纳米载体细胞屏障逃逸溶酶体修饰调控

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壳寡糖的免疫佐剂效果及作为减毒活菌载体疫苗佐剂的可行性探索

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四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 441-446页

作者：欧倩陈昭斌唐静陈梦蝶张云雯陈梓楠刘曲罗俊容汪川四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院卫生检验与检疫系成都610041 深圳市生医联盟生物科技集团有限公司深圳518057

目的探究壳寡糖(chitosan oligosaccharide, COS)的免疫佐剂效果,包括免疫激活作用和引发溶酶体逃逸作用,并探索其是否可以作为减毒活菌载体疫苗佐剂。方法 (1)以0(对照组)、0.1~4 mg/mL COS培养小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞24 h,利用CCK... 详细信息

目的探究壳寡糖(chitosan oligosaccharide, COS)的免疫佐剂效果,包括免疫激活作用和引发溶酶体逃逸作用,并探索其是否可以作为减毒活菌载体疫苗佐剂。方法 (1)以0(对照组)、0.1~4 mg/mL COS培养小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞24 h,利用CCK8实验检测细胞活力的影响;以0(对照组)、1、2、4 mg/mL COS干预小鼠RAW264.7细胞24 h,通过RT-qPCR实验检测细胞因子IFN-γ、IL-10、TGF-β、TLR-4的mRNA表达水平。(2)RAW264.7细胞加入1 mL含有不同组分[钙黄绿素(Calcein)50μg/mL,COS 2 mg/mL,阻断剂bafilomycin A1 1μmol/mL]的PBS培养,分组为Calcein组、Calcein+COS组、Calcein+COS+Bafilomycin A1组。通过激光共聚焦显微镜观察RAW264.7细胞在有或无COS干预下对荧光染料Calcein的吞噬和胞内荧光分布情况,判断COS是否能够引发溶酶体逃逸。(3)用0.5、1、2、4、8 mg/mL COS包被减毒李斯特菌载体宫颈癌治疗性疫苗候选株LM?E6E7和LI?E6E7,测定Zeta电位变化,选择COS成功包被细菌的质量浓度。检测2 mg/mL COS包被LM?E6E7和LI?E6E7前后,RAW264.7细胞对疫苗菌株的吞噬率。结果 (1)CCK8结果显示,与对照组相比,不同质量浓度COS干预RAW264.7细胞24 h后,对细胞无毒性,并能够促进细胞增殖,差异有统计学意义(P溶酶体内释放进入胞内,而这个过程可以被bafilomycin A1阻断。(3)Zeta电位结果表明COS质量浓度达到2 mg/mL时,能成功包被到细菌表面。疫苗株被COS包被前、后,RAW264.7细胞对LM?E6E7的吞噬率分别为5.70%和22.00%,差异有统计学意义(P溶酶体内物质逃逸溶酶体的作用,包被减毒活菌载体疫苗候选菌株可促进巨噬细胞对细菌的吞噬,可望进一步开发作为细菌载体类疫苗佐剂。

关键词：壳寡糖巨噬细胞李斯特菌逃逸溶酶体

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