检索结果-南通市图书馆

迟钝爱德华氏菌FimA基因的克隆及序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品科学 2006年第11期27卷 45-48页

作者：郭立新李寿崧江树勋陈文炳邵碧英杨婕福建出入境检验检疫局福建福州350001

以迟钝爱德华氏菌Et、XA、EA分离株的DNA为模板,采用PCR技术,扩增菌毛亚基(FimA)基因的DNA片段,将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定,分析结果表明:Et、XA、EAFimA基因由534个核苷酸组成,编码177个氨基酸。Et、XA、EA之间FimA基因核... 详细信息

以迟钝爱德华氏菌Et、XA、EA分离株的DNA为模板,采用PCR技术,扩增菌毛亚基(FimA)基因的DNA片段,将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定,分析结果表明:Et、XA、EAFimA基因由534个核苷酸组成,编码177个氨基酸。Et、XA、EA之间FimA基因核苷酸同源性为99%,与其它分离物核苷酸同源性为76%～77%,氨基酸同源性为81%～82%。

关键词：迟钝爱德华氏菌菌毛亚基克隆序列分析

迟钝爱德华氏菌Ⅲ型分泌系统效应蛋白功能域预测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水产科学 2013年第7期32卷 385-390页

作者：王斌李军伟赵凤梅王惠胡亮姜志强大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室辽宁省高校海洋生物资源可持续利用重点实验室辽宁大连116023

采用PCR法检测了大菱鲆出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌L-49231菌株Ⅲ型分泌系统中的eseB、eseC、eseD基因,经PCR产物克隆测序;利用生物信息学方法对eseB、eseC、eseD表达蛋白的分子量、氨基酸组成、疏水性、跨膜结构、信号肽等进行... 详细信息

采用PCR法检测了大菱鲆出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌L-49231菌株Ⅲ型分泌系统中的eseB、eseC、eseD基因,经PCR产物克隆测序;利用生物信息学方法对eseB、eseC、eseD表达蛋白的分子量、氨基酸组成、疏水性、跨膜结构、信号肽等进行初步预测和分析。结果显示,迟钝爱德华氏菌L-49231菌株eseB、eseC、eseD基因分别为:594、934、445bp,与GenBank中登录的迟钝爱德华氏菌PPD FL6-60菌株的eseB、eseC、eseD基因碱基序列的同源性分别为100%、100%、99%。eseB蛋白分子量为21 732.26u,天冬氨酸含量最高,占10.61%;eseC蛋白分子量为53 606.08u,丙氨酸含量最高,占14.43%;eseD蛋白的分子量为21 112.43u,谷氨酰胺含量最高,占11.04%。3种蛋白质中甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸含量都很高,而半胱氨酸、色氨酸含量都很低或缺少。3种蛋白均为亲水性蛋白质。eseB无明显的跨膜结构;eseC在192～210aa、213～233aa、263～284aa处形成3个跨膜区域;eseD在90～106aa处形成一个跨膜区域。3种蛋白均不含信号肽。

关键词：迟钝爱德华氏菌 Ⅲ型分泌系统克隆生物信息

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

迟钝爱德华氏菌黏附及侵袭特性的研究

大连水产学院学报 2010年第1期25卷 1-7页

作者：王斌刘双凤袁甜大连水产学院农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室辽宁大连116023

将引发养殖大菱鲆Scophthalmus maximus出血性败血症的病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda(L-49231)接种于体外培养细胞——人上皮角质层形成细胞(HaCaT-cell),观察其对细胞的黏附性和侵袭性,研究了不同作用时间下以及用不同因素... 详细信息

将引发养殖大菱鲆Scophthalmus maximus出血性败血症的病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda(L-49231)接种于体外培养细胞——人上皮角质层形成细胞(HaCaT-cell),观察其对细胞的黏附性和侵袭性,研究了不同作用时间下以及用不同因素处理菌体后,细菌对HaCaT细胞黏附性及侵袭性的影响。结果表明:L-49231菌株能黏附HaCaT细胞,2 h后即可侵入细胞;随着作用时间的延长,细菌黏附细胞与侵入细胞的数量增加。分别用甲醛、戊二醛、盐酸、胰蛋白酶处理L-49231菌体,细菌的黏附力及侵袭力均有所下降;用蔗糖、甘露糖处理L-49231菌体时,细菌的黏附力变化不大;用葡萄糖处理时,能够促进细菌对细胞的黏附作用。用甘露糖和葡萄糖处理菌体时,能促进细菌对细胞的侵袭;用蔗糖处理菌体时,能部分抑制细菌对细胞的侵袭作用。用抗体处理L-49231菌体后,细菌的黏附力及侵袭力均明显下降。说明L-49231菌株对HaCaT细胞具明显的侵袭性,其主要黏附因子为胞外蛋白质成分,无确切的糖受体。

关键词：大菱鲆迟钝爱德华氏菌人上皮角质层形成细胞黏附性侵袭性

迟钝爱德华氏菌Ⅲ型分泌系统基因的克隆及多重PCR检测方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大连海洋大学学报 2013年第3期28卷 217-223页

作者：王斌赵凤梅李军伟沈皓王惠胡亮大连海洋大学辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室农业部北方海水增养殖重点实验室辽宁大连116023

采用PCR法扩增大菱鲆Scophthalmus maximus出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tardaL-49231菌株Ⅲ型分泌系统(TTSS)的装置蛋白(esaC)、效应蛋白(eseB、eseC、eseD)和调节蛋白(esrA、esrB)6种基因,并将其克隆到载体PMD19-T中分别进行测序;通过优化反应条件,建立一次检出效应蛋白eseB、eseC和eseD 3种基因片段的多重PCR方法;采用所建立的多重PCR方法检测迟钝爱德华氏菌不同菌株(L-49231、GhAn080310、GhAn080313和GhAn080314)、沙门氏菌Salmonella enterica、大肠杆菌Escherichia coli和肠杆菌Enterobacter中效应蛋白基因的存在情况。结果表明:L-49231菌株中存在esaC、eseB、eseC、eseD、esrA和esrB 6种基因片段,大小分别为837、184、934、445、464、458 bp,与GenBank中迟钝爱德华氏菌PPD130/91菌株的这6种基因的同源性分别为99%、97%、99%、99%、99%、98%;通过优化反应条件,在退火温度为54℃,基因eseB、eseC和eseD引物浓度(μmol/L)组合比为5∶10∶2,Mg2+浓度为1.5 mmol/L时,能够得到清晰、稳定且均一的多重PCR产物,并与目的条带分子量一致;采用所建立的多重PCR方法进行检测,迟钝爱德华氏菌L-49231菌株中存在eseB、eseC和eseD 3种基因片段,迟钝爱德华氏菌GhAn080310、GhAn080313、GhAn080314菌株中存在eseB和eseC基因片段,但未检出eseD基因片段;沙门氏菌、大肠杆菌和肠杆菌中均未检出eseB、eseC和eseD基因。表明所建立的多重PCR方法对迟钝爱德华氏菌具有较好的特异性,可检出具有Ⅲ型分泌系统效应蛋白的菌株。

关键词：迟钝爱德华氏菌 Ⅲ型分泌系统克隆多重PCR

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

迟钝爱德华氏菌感染大菱鲆的病理学研究

中国水产科学 2009年第3期16卷 411-419页

作者：秦蕾王印庚张晓君淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

采用光学显微镜和电子显微镜技术分别对患迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)病的大菱鲆(Scophthalmus maximus)的病理学变化进行了研究。结果发现,迟钝爱德华氏菌可引起大菱鲆肾脏、脾脏、肝脏、心脏、肠和鳃等多个器官组织发生不同... 详细信息

采用光学显微镜和电子显微镜技术分别对患迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)病的大菱鲆(Scophthalmus maximus)的病理学变化进行了研究。结果发现,迟钝爱德华氏菌可引起大菱鲆肾脏、脾脏、肝脏、心脏、肠和鳃等多个器官组织发生不同程度的病变,其中以肾脏病理变化最为显著,主要表现为造血组织局部坏死、单核巨噬细胞显著增生和肉芽肿形成。肝脏发生脂肪变性,血窦扩张充满单核巨噬细胞,严重者发生局部坏死;脾脏单核巨噬细胞增生显著,脾实质出现多处局部坏死;心肌纤维变性,肌纤维间有单核巨噬细胞浸润,病变严重者形成局部坏死灶。此外,在病鱼的肠和鳃内也发现大量单核巨噬细胞浸润的现象。研究表明,迟钝爱德华氏菌感染的大菱鲆主要是以单核巨噬细胞来参与炎症反应。爱德华氏菌病的病理分型应属肾脏型或肝肾混合型。

关键词：大菱鲆迟钝爱德华氏菌病理学单核巨噬细胞

牙鲆与大菱鲆病原迟钝爱德华氏菌生物学特性及系统发育学分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

高技术通讯 2005年第10期15卷 82-88页

作者：陈翠珍房海张晓君战文斌河北科技师范学院动物科学系秦皇岛066600 河北科技师范学院动物科学系秦皇岛066600水产病害与免疫学研究室教育部海水养殖重点实验室中国海洋大学青岛266003 水产病害与免疫学研究室教育部海水养殖重点实验室中国海洋大学青岛266003

对从7起牙鲆(Bastard halibut,Paralichthys olivaceus L.)、3起大菱鲆(Turbot,Scophthalmus maximus L.)病害的病(死)鱼中分离到的相应病原菌较系统地进行了形态特征、理化特性等表观分类学指征的鉴定及代表菌株DNA中G+Cmol%的测定.同... 详细信息

对从7起牙鲆(Bastard halibut,Paralichthys olivaceus L.)、3起大菱鲆(Turbot,Scophthalmus maximus L.)病害的病(死)鱼中分离到的相应病原菌较系统地进行了形态特征、理化特性等表观分类学指征的鉴定及代表菌株DNA中G+Cmol%的测定.同时,择代表菌株进行了16S rRNA基因的分子鉴定,测定了16S rRNA基因序列,分析了相关细菌相应序列的同源性,构建了系统发生树.结果表明,分离鉴定的148株菌均为爱德华氏菌属(Edwardsiella Ewing and McWhorter 1965)的迟钝爱德华氏菌(***),其中128株为迟钝爱德华氏菌野生型(*** wild type)菌株,20株暂定为迟钝爱德华氏菌吲哚阴性变异株.代表菌株(HC010907-1及HC010830-1)的16S rRNA基因序列,与GenBank数据库中的迟钝爱德华氏菌的同源性均在99%.

关键词：牙鲆大菱鲆迟钝爱德华氏菌生物学特性系统发育学系统发育学分析 16SrRNA基因序列病原菌 Paralichthys GenBank数据库

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

迟钝爱德华氏菌的保存方法

微生物学通报 1997年第1期24卷 60-64页

作者：黄志坚肖克宇金燮理湖南农业大学水产系长沙410128

比较了7种不同方法保存迟钝爱德华氏菌的效果。测定存活力、毒力和生物学特性的结果表明，采用30％甘油PBS液保存该菌的效果较好。

关键词：迟钝爱德华氏菌菌种保存微生物保藏法

迟钝爱德华氏菌对杂交东方鲀rags基因表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水产科学 2017年第2期36卷 216-219页

作者：张菡戴伟石洪玥陈成勋王庆奎邢克智天津农学院水产学院天津市水产与养殖生态重点实验室天津300384

利用实时荧光定量PCR技术检测冀研一号(菊黄东方鲀♀×红鳍东方鲀♂)稚鱼肝胰脏、脾脏、头肾中重组激活基因rags在腹腔注射迟钝爱德华氏菌后6、12、24、36、48、72h内相对表达量的变化情况。试验结果显示,感染迟钝爱德华氏菌后,肝胰脏中... 详细信息

利用实时荧光定量PCR技术检测冀研一号(菊黄东方鲀♀×红鳍东方鲀♂)稚鱼肝胰脏、脾脏、头肾中重组激活基因rags在腹腔注射迟钝爱德华氏菌后6、12、24、36、48、72h内相对表达量的变化情况。试验结果显示,感染迟钝爱德华氏菌后,肝胰脏中rags基因表达呈下降趋势,相对表达量峰值出现在攻毒后6h。脾脏和头肾中rags基因表达均呈先升后降趋势,但在攻毒后48h出现反弹回升。脾脏中,rags基因相对表达量峰值出现在攻毒后6h;头肾中,rag1基因和rag2基因相对表达量峰值分别出现在攻毒后48h和6h。与对照组相比,腹腔注射迟钝爱德华氏菌能引起冀研一号东方鲀rags基因表达上调,且rag1基因和rag2基因表达趋势基本一致。

关键词：冀研一号东方鲀重组激活基因 mRNA表达迟钝爱德华氏菌

迟钝爱德华氏菌RNA提取及痕量基因组DNA去除方法探究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通报 2012年第6期28卷 179-182页

作者：王克平叶江张惠展华东理工大学生物工程学院、生物反应器工程国家重点实验室上海200237

迟钝爱德华氏菌EIB202是一类细胞壁结构特殊的革兰氏阴性菌,高质量RNA提取相对较难。为了从转录组水平研究这类致病菌的致病机理,需要摸索有效的RNA提取及RNA样品中痕量基因组DNA去除方法。对常规RNA提取步骤进行改进,增加PBS清洗、反... 详细信息

迟钝爱德华氏菌EIB202是一类细胞壁结构特殊的革兰氏阴性菌,高质量RNA提取相对较难。为了从转录组水平研究这类致病菌的致病机理,需要摸索有效的RNA提取及RNA样品中痕量基因组DNA去除方法。对常规RNA提取步骤进行改进,增加PBS清洗、反复冻融及较高浓度溶菌酶处理等步骤;另外,利用小体系基因组DNA去除系统,Mg2+与Mn2+协同激活DNase I去除RNA样品中基因组DNA污染。利用优化方法提取的RNA在质量及浓度(1 740 ng/μL)方面均有了显著改善,并建立了一套完全去除RNA样品中痕量基因组DNA污染的程序。

关键词：迟钝爱德华氏菌 RNA 基因组 DNA DNase I RT-PCR