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连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生的影响

广州中医药大学学报 2023年第3期40卷 693-700页

作者：李绍霄李邦亮温州医科大学附属平阳医院耳鼻喉科浙江温州325400 温州医科大学附属瑞安医院耳鼻喉科浙江温州325299

【目的】观察连翘苷抗鼻咽癌效应及机制。【方法】(1)体外实验:不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)连翘苷作用于体外人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人鼻咽正常上皮细胞系NP69和鼻咽癌细胞系HNE1和SUNE-1后,采用细胞计数试剂盒8(CCK... 详细信息

【目的】观察连翘苷抗鼻咽癌效应及机制。【方法】(1)体外实验:不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)连翘苷作用于体外人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人鼻咽正常上皮细胞系NP69和鼻咽癌细胞系HNE1和SUNE-1后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,小管形成实验测定HUVECs血管新生活性,Transwell小室实验测定HUVECs侵袭活性,Western Blot法测定HNE1和SUNE-1细胞、HUVECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、Wnt和β-catenin表达水平。(2)体内实验:以连翘苷(10 mg/kg)对鼻咽癌异种移植瘤裸鼠进行干预后,采用血管造影法检测裸鼠鼻咽癌异种移植瘤的血管密度,免疫组织化学法检测鼻咽癌异种移植瘤中CD34、VEGFA和Wnt的表达。【结果】(1)连翘苷(0.625~10μmol/L)对体外HNE1和SUNE-1细胞活力有显著抑制效果,但对体外HUVECs和NP69的细胞活力无显著抑制效果;连翘苷(0.625~10μmol/L)可明显抑制HUVECs血管新生和侵袭活性,VEGFA(20μg/L)可削弱连翘苷对体外HUVECs血管新生和侵袭活性的抑制作用;连翘苷可下调VEGFA、Wnt和β-catenin在HNE1和SUNE-1细胞中的含量;连翘苷可诱导HUVECs中VEGFR2表达下调。(2)连翘苷(10 mg/kg)对裸鼠无明显毒副作用,但可显著抑制鼻咽癌异种移植瘤生长和血管新生,抑制鼻咽癌异种移植瘤组织中的CD34、VEGFA和Wnt的阳性表达。【结论】连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生有显著抑制作用,其主要作用机制可能与调控Wnt/β-catenin/VEGFA/VEGFR2信号通路有关。

关键词：连翘苷鼻咽癌血管新生 Wnt/β-catenin/血管内皮生长因子A(VEGFA)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路 HNE1细胞 SUNE-1细胞裸鼠

连翘叶茶对肝癌细胞增殖和迁移功能的影响及其作用机制

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生物技术通报 2024年第4期40卷 287-296页

作者：滕文龙吴永娜王德富牛颜冰山西农业大学生命科学学院晋中030600

【目的】探究连翘叶茶粗提物及其主要成分连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3增殖和迁移功能的影响及其作用机制。【方法】利用水提法提取连翘叶绿茶和红茶,HPLC方法检测连翘绿茶和连翘红茶中有效成分连翘苷、连翘酯苷A的含量。采用CCK8实... 详细信息

【目的】探究连翘叶茶粗提物及其主要成分连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3增殖和迁移功能的影响及其作用机制。【方法】利用水提法提取连翘叶绿茶和红茶,HPLC方法检测连翘绿茶和连翘红茶中有效成分连翘苷、连翘酯苷A的含量。采用CCK8实验,探究两种连翘叶茶粗提物、连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3增殖的影响;利用两种连翘叶茶粗提物、连翘苷和连翘酯苷A培养肝癌细胞LM3,通过细胞划痕实验,观察24、48、72、96 h细胞迁移情况,检测两种连翘叶茶粗提物、连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3迁移的影响;使用RT-PCR技术,检测增殖迁移相关基因Ki-67、Erk、PI3K和mTOR的表达,揭示连翘叶茶粗提物及其主要成分连翘苷和连翘酯苷A影响肝癌细胞增殖迁移功能的分子机制。【结果】连翘叶绿茶和红茶粗提物、连翘苷均显著抑制肝癌细胞LM3的增殖和迁移,连翘酯苷A显著抑制肝癌细胞LM3的迁移。其中,连翘绿茶粗提物在低、中和高浓度,培养时间24、48、72 h,均可明显抑制肝癌细胞增殖和迁移。连翘红茶粗提物随着浓度升高对LM3细胞增殖和迁移的抑制效果不断增强,在高浓度72 h抑制效果最佳。RT-PCR结果分析,其主要作用机制可能是通过降低Ki-67基因表达量来实现的。【结论】连翘叶绿茶和连翘叶红茶粗提物及连翘苷和连翘酯苷A均能够通过降低Ki-67表达抑制肝癌细胞LM3的增殖或迁移。

关键词：连翘叶茶连翘苷连翘酯苷A 肝癌细胞 CCK-8 划痕实验 Ki-67

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连翘苷的提取条件优化研究

山东化工 2022年第8期51卷 22-25页

作者：韩勇宋金玉山西药科职业学院山西太原030031

运用响应面实验法优化连翘中连翘苷的乙醇提取条件。研究液料比、乙醇积分数、提取温度及提取时间对连翘苷提取率的影响。确定最优的连翘苷乙醇提取条件为液料比7∶1(mL/g)、乙醇体积分数69%、提取温度72℃、提取时间108 min。在优化条... 详细信息

运用响应面实验法优化连翘中连翘苷的乙醇提取条件。研究液料比、乙醇积分数、提取温度及提取时间对连翘苷提取率的影响。确定最优的连翘苷乙醇提取条件为液料比7∶1(mL/g)、乙醇体积分数69%、提取温度72℃、提取时间108 min。在优化条件下提取连翘苷,提取率为0.322%。

关键词：连翘苷提取响应面法

连翘苷对脑出血所致脑组织水肿的影响及作用机制

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中国科技期刊数据库医药 2022年第5期 34-37页

作者：姚伟伟麻琳张虹超闫瑞海李峰邯郸市中心医院河北邯郸056008

本实验通过制备脑出血模型大鼠后给予连翘苷进行干预,目的在于探讨连翘苷能够改善大鼠脑出血所引发的脑水肿及其原因,以期为临床防治脑出血探索新的药物及治疗方案。方法:本研究取20只SD大鼠设为正常对照组、20只设为脑出血模型组、20... 详细信息

本实验通过制备脑出血模型大鼠后给予连翘苷进行干预,目的在于探讨连翘苷能够改善大鼠脑出血所引发的脑水肿及其原因,以期为临床防治脑出血探索新的药物及治疗方案。方法:本研究取20只SD大鼠设为正常对照组、20只设为脑出血模型组、20只设为连翘苷治疗组、20只设为阳性对照(尼莫地平)组,除正常对照组外的其它3组采用脑基底节注射自体血液的方法构建脑出血模型大鼠。各组分别造模完成后灌胃给予相应药物,治疗完成后评测大鼠神经功能、血脑屏障通透性、脑含水量、脑组织AQP4表达量。结果:脑出血模型大鼠神经功能较正常组明显低下,血脑屏障通透性和脑含水量较正常组明显升高,AQP4相对表达量较正常组明显提高。连翘苷组和阳性对照组大鼠神经功能明显改善、血脑屏障通透性和含水量明显降低、AQP4相对表达量明显降低,上述指标较模型组差异均有统计学意义(P连翘苷对各指标的影响明显优于阳性对照组(P连翘苷可明显改善脑出血大鼠所致的脑水肿症状,作用机制可能与连翘苷抑制脑出血所致脑组织AQP4表达量升高进而抑制BBB通透性升高有关。

关键词：连翘苷脑出血脑水肿血脑屏障水通道蛋白4 作用机制

连翘苷通过调控miR-483-3p对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响

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中国药师 2022年第12期25卷 2108-2112页

作者：武国利张宁马竞保定市第一中心医院河北保定071000 河北大学附属医院

目的:探讨连翘苷(PHN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法:人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组(50 mg·ml^(-1))、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN低(1μmol·L^(-1))、中... 详细信息

目的:探讨连翘苷(PHN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法:人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组(50 mg·ml^(-1))、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN低(1μmol·L^(-1))、中(10μmol·L^(-1))、高(100μmol·L^(-1))剂量组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+anti-miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+anti-miR-NC组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN(100μmol·L^(-1))+miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN(100μmol·L^(-1))+miR-NC组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测活化的半胱胺酸蛋白酶(Cleaved-Caspase)3和Cleaved-Caspase9蛋白表达;ELISA法检测白细胞介素1β(IL^(-1)β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;RT-qPCR检测miR-483-3p表达水平。结果:低、中、高浓度连翘苷处理后,oxLDL诱导的HA-VSMC细胞凋亡率、Cleaved-Caspase3和Cleaved-Caspase9蛋白表达水平、IL^(-1)β和TNF-α水平、miR-483-3p表达水平显著降低(P连翘苷对oxLDL诱导的HA-VSMC炎症损伤的作用。结论:连翘苷通过下调miR-483-3p表达从而抑制oxLDL诱导的HA-VSMC炎症损伤。

关键词：连翘苷 miR-483-3p 血管平滑肌细胞凋亡炎症反应

连翘苷调节MAPK/NF-κB/NLRP3信号通路对膝骨性关节炎大鼠软骨损伤的影响

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国际检验医学杂志 2023年第15期44卷 1902-1907页

作者：王海滨李平张志刚周万淼张家口市第二医院骨科河北张家口075000

目的探讨连翘苷调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对膝骨性关节炎大鼠软骨损伤的影响。方法采用经典碘乙酸钠(MIA)法制备膝骨关节炎大鼠模型,随机分为模型组、连... 详细信息

目的探讨连翘苷调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对膝骨性关节炎大鼠软骨损伤的影响。方法采用经典碘乙酸钠(MIA)法制备膝骨关节炎大鼠模型,随机分为模型组、连翘苷组、C16-PAF(MAPK激活剂)组、连翘苷+C16-PAF组,每组10只,另选10只大鼠作为对照组,以连翘苷和C16-PAF分组处理后,检测大鼠关节肿胀度,并以步态评分和爪压评分评测大鼠关节功能;透射电镜检测各组大鼠关节软骨形态;TUNEL检测各组大鼠关节软骨细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清促炎因子白细胞介素(IL)-18、IL-1β、前列腺素E2(PGE2)水平;免疫印迹检测大鼠关节软骨组织基质降解相关蛋白[基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9]、凋亡蛋白(caspase-3、Bax)和MAPK/NF-κB/NLRP3信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠关节软骨超微结构受损,关节肿胀度、步态评分和爪压评分、软骨细胞凋亡率、血清IL-18、IL-1β及PGE2水平、软骨组织caspase-3、Bax、MMP3、MMP9、NLRP3蛋白表达及p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P连翘苷组大鼠关节软骨超微结构受损减轻,关节肿胀度、步态评分和爪压评分、软骨细胞凋亡率、血清IL-18、IL-1β及PGE2水平、软骨组织caspase-3、Bax、MMP3、MMP9、NLRP3蛋白表达及p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P连翘苷+C16-PAF组大鼠关节软骨超微结构受损减轻,关节肿胀度、步态评分和爪压评分、软骨细胞凋亡率、血清IL-18、IL-1β及PGE2水平、软骨组织caspase-3、Bax、MMP3、MMP9、NLRP3蛋白表达及p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P连翘苷可通过下调MAPK/NF-κB/NLRP3信号通路而抑制炎症反应,减轻膝骨关节炎大鼠软骨损伤与凋亡,缓解其关节肿胀症状,改善大鼠关节功能。

关键词：连翘苷 MAPK/NF-κB/NLRP3 膝骨性关节炎软骨损伤

秦巴山不同产区连翘茎和花中连翘苷,连翘酯苷A,芦丁和总黄酮含量测定

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湖北医药学院学报 2022年第4期41卷 333-337,343页

作者：魏娟王林海张晓燕祝宇周灿赵利军湖北医药学院附属人民医院药学部湖北十堰442000 湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:分别测定秦巴山不同产区连翘茎和花中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和总黄酮等活性成分的含量,评价秦巴山境内连翘不同产地、不同药用部位的质量差异。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定连翘苷、连翘酯苷A和芦丁的含量,色谱柱:Inertsil... 详细信息

目的:分别测定秦巴山不同产区连翘茎和花中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和总黄酮等活性成分的含量,评价秦巴山境内连翘不同产地、不同药用部位的质量差异。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定连翘苷、连翘酯苷A和芦丁的含量,色谱柱:Inertsil C(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相:乙腈-水=22∶78(连翘苷),乙腈-0.1%磷酸水溶液=18∶82(连翘酯苷A、芦丁);流速为1 mL/min;柱温为35℃;检测波长为277 nm(连翘苷)和330 nm(连翘酯苷A及芦丁);进样量2μL。采用紫外-可见分光光度法(λ=500 nm)测定总黄酮的含量。结果:对不同产地连翘活性成分总含量的比较中发现,房县化龙镇所产连翘茎总含量高达29.02 mg/g,竹山麻家渡桂花村所产连翘花总含量高达17.00 mg/g,可综合评定房县化龙镇、竹山麻家渡桂花村两个产区连翘茎、花质量较优。对于连翘不同药用部位活性成分含量测定结果表明含量差异较大,连翘茎中连翘酯苷A含量极低,茎的总含量全部高于花。结论:连翘茎和花中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和总黄酮含量在产地方面有差异,在不同药用部位上内在质量差异更明显,研究结果为连翘药材的后续研究及综合开发提供了依据。

关键词：连翘高效液相色谱法紫外分光光度法连翘苷连翘酯苷A 芦丁总黄酮

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连翘苷对营养性肥胖小鼠减肥作用的影响

中药材 2005年第2期28卷 123-124页

作者：赵咏梅李发荣杨建雄安小宁周敏鹃西安文理学院生命科学系西安710065 陕西师范大学生命科学学院西安710062

目的:研究连翘苷对营养性肥胖小鼠的减肥作用。方法:采用高脂饲料建立小鼠肥胖模型,以脂肪湿重,全视野内脂肪数目(HBF)、空肠绒毛表面积变化、Lee’s指数及血清总胆固醇和甘油三酯等指标,观察连翘苷的减肥作用。结果:连翘苷可以使肥胖... 详细信息

目的:研究连翘苷对营养性肥胖小鼠的减肥作用。方法:采用高脂饲料建立小鼠肥胖模型,以脂肪湿重,全视野内脂肪数目(HBF)、空肠绒毛表面积变化、Lee’s指数及血清总胆固醇和甘油三酯等指标,观察连翘苷的减肥作用。结果:连翘苷可以使肥胖小鼠脂肪湿重减轻(P连翘苷对营养性肥胖小鼠有一定的减肥作用。

关键词：小鼠连翘苷营养性肥胖减肥作用血清总胆固醇空肠甘油三酯肠绒毛脂肪数目

连翘叶连翘苷提取物对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用

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食品科学 2021年第9期42卷 85-90页

作者：王静黄庆辰高敏玥朱小盼陈子彤王少康孙桂菊东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210009

目的:研究连翘叶中连翘苷提取物对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用。方法:将48只SD大鼠分为6组,即空白对照组,模型对照组,连翘苷提取物(本实验室自制,连翘苷质量分数为13.3%)低、中、高剂量组和标准品组。连翘苷提取物低、中、高剂量组... 详细信息

目的:研究连翘叶中连翘苷提取物对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用。方法:将48只SD大鼠分为6组,即空白对照组,模型对照组,连翘苷提取物(本实验室自制,连翘苷质量分数为13.3%)低、中、高剂量组和标准品组。连翘苷提取物低、中、高剂量组分别给予连翘苷提取物0.2、0.4、1.2 g/(kg m_(b)·d),即连翘苷剂量分别为26.6、53.2、159.6 mg/(kg m_b·d),标准品组给予连翘苷标准品(连翘苷质量分数按98%计)54.3 mg/(kg m_b·d),与中剂量组连翘苷剂量相同。空白对照组给予基础饲料,其余各组给予高脂饲料,连续灌胃6周,观察连翘苷提取物干预后,肥胖大鼠摄食量、体质量、肥胖指数(Lee’s指数)、脂肪系数和血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoproteincholesterol,HDL-C)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)、瘦素(leptin,LP)、游离脂肪酸(free fat acid,FFA)水平以及脂肪组织病理切片。结果:模型对照组的TC、LDL-C、TBA、LP、FFA水平均显著高于空白对照组(P连翘苷提取物能够降低肥胖大鼠的TC、LDL-C、LP、FFA水平;脂肪组织病理结果较模型对照组有所改善,可见脂肪细胞数量增加,脂肪细胞变小,但低剂量组效果不明显,高剂量组效果最显著。与模型对照组相比,低剂量组脂肪细胞的面积显著减小(P连翘苷提取物还能降低肥胖大鼠的内脏脂肪质量及其系数、Lee’s指数、体质量,且高剂量组效果更显著,中剂量组与标准品组对肥胖大鼠干预效果相当。结论:连翘苷提取物能够预防高脂饮食诱导的大鼠肥胖,连翘叶中的连翘苷是其功能成分。

关键词：连翘叶连翘苷高脂饮食肥胖大鼠预防肥胖