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Reelin在小鼠穿通纤维及大脑连合纤维寻径中的作用

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解剖学报 2017年第5期48卷 511-519页

作者：王晨阳王强李瑞萍孙仪征石贞玉邓锦波河南大学护理学院神经生物学研究所河南开封475004

目的通过对比野生型小鼠和Reeler小鼠穿通通路及连合纤维的发育,探讨Reelin在穿通通路及连合纤维寻径中的作用。方法共取野生型小鼠(WT)和Reelin基因缺失小鼠(Reeler),从胚龄16 d(E16)至出生7d(P7)各年龄点,共123例。采用Di I/Di O离体... 详细信息

目的通过对比野生型小鼠和Reeler小鼠穿通通路及连合纤维的发育,探讨Reelin在穿通通路及连合纤维寻径中的作用。方法共取野生型小鼠(WT)和Reelin基因缺失小鼠(Reeler),从胚龄16 d(E16)至出生7d(P7)各年龄点,共123例。采用Di I/Di O离体示踪技术对不同年龄点的WT小鼠及Reeler小鼠的穿通通路及连合纤维进行顺行和逆行示踪。结果 1.穿通通路主要由内嗅皮质第Ⅱ层和第Ⅳ层神经元所发出,在E16时进入海马腔隙分子层,P1时穿通纤维出现在齿状回,P7时穿通纤维形成致密纤维束终止于齿状回外分子层2/3;Reeler小鼠的穿通通路出现明显的发育延迟并且投射纤维分布紊乱;2.穹隆连合纤维主要由海马CA3锥体细胞,门细胞及内嗅皮质Ⅱ~Ⅳ层神经元发出,在E16时形成;Reeler小鼠穹隆纤维与WT小鼠在发育中无明显区别;3.胼胝体连合纤维主要由新皮质Ⅱ~Ⅳ层神经元及纹状体神经元所投射,在E18时形成并向对侧皮质进行纤维投射,并且投射部位出现对称分布,P3时一侧胼胝体纤维到达对侧纹状体。Reeler小鼠胼胝体投射的皮质神经元向对侧新皮质投射出现延迟。结论 Reelin可能是穿通通路及连合纤维发育的导向因子。Reelin的缺失导致穿通通路发育延迟,并且连合纤维在皮质的细胞来源及穿通通路细胞来源紊乱。

关键词： Reelin 穿通通路连合纤维发育 Nissl染色小鼠

Wnt3a过表达对脊髓连合纤维投射及神经元迁移的影响

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Wnt3a过表达对脊髓连合纤维投射及神经元迁移的影响

作者：李秋玲新乡医学院

学位级别：硕士

背景在脊髓发育过程中,产生于背部的连合纤维沿固定轨迹投射到脊髓对侧,而神经元从神经上皮祖细胞区域迁移到正确的位置,才能形成正确的组织结构和神经回路,发挥脊髓信息传递的功能。Wnt3a作为Wnt家族的重要成员,参与多种细胞功能,包括... 详细信息

背景在脊髓发育过程中,产生于背部的连合纤维沿固定轨迹投射到脊髓对侧,而神经元从神经上皮祖细胞区域迁移到正确的位置,才能形成正确的组织结构和神经回路,发挥脊髓信息传递的功能。Wnt3a作为Wnt家族的重要成员,参与多种细胞功能,包括自我更新、增殖、分化以及迁移。有关Wnt3a在脊髓损伤修复方面的功能已有研究,但其在胚胎脊髓发育过程中功能(如调控神经元迁移、连合纤维投射等)研究国内外尚属空白。目的1.研究Wnt3a异位表达对脊髓连合纤维投射及神经元迁移的影响。2.探索Wnt3a过表达对神经细胞及相关分子表达的影响。方法1.通过RNA提取、PCR扩增、酶切和连接等常规分子生物学技术将Wnt3a基因克隆到pCAGGS-EGFP载体上,再进行菌落PCR和酶切验证,最后进行基因测序。2.利用脂质体转染技术将Wnt3a过表达载体(pCAGGS-EGFP-Wnt3a)转入SH-SY5Y细胞,提取蛋白,再利用Western blot技术检测Wnt3a表达情况。另外,利用鸡胚活体原位电转基因技术将pCAGGS-EGFP-Wnt3a转入E2.8鸡胚脊髓中,E4取材切片,通过免疫荧光检测Wnt3a表达情况。3.将pCAGGS-EGFP-Wnt3a或pCAGGS-EGFP转入E2.8鸡胚脊髓中,E6时取绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)阳性胚胎,一部分材料进行组织切片,每组至少5个材料,利用免疫荧光检测Wnt3a,Pax7,Map2和MNR2的表达情况,同时利用GFP示踪检测Wnt3a异位表达后对神经元形态及迁移的影响。另一部分材料用于神经元的提取培养,检测体外条件下Wnt3a异位表达对神经元形态的影响。4.将pCAGGS-EGFP-Wnt3a或pCAGGS-EGFP转入SH-SY5Y细胞,利用免疫荧光检测Tubulin的表达,并观察细胞形态变化;提取蛋白,利用Western blot技术检测β-catenin,CyclinD1,C-myc,PCNA,Caspase3和Bcl-2的表达情况。结果1.菌落PCR,酶切验证以及基因测序结果表明成功构建了pCAGGS-EGFP-Wnt3a载体。***-EGFP-Wnt3a转染的SH-SY5Y细胞的Western blot及脊髓切片免疫荧光结果表明,Wnt3a在SH-SY5Y细胞和脊髓中表达量增加。3.在E6鸡胚脊髓中,Wnt3a异位表达后,连合纤维未投射到对侧,绝大多数GFP阳性神经元滞留在VZ区,且无法伸出突起或伸出较短的突起。免疫荧光结果表明,Map2阳性表达区域减少,MNR2阳性神经元数量明显减少且大部分滞留在VZ区,而Pax7的表达没有明显差异。脊髓神经元分离培养的结果显示,pCAGGS-EGFP-Wnt3a转染的神经元呈球形或伸出较短的突起。***-EGFP-Wnt3a转染的SH-SY5Y细胞的Tubulin免疫荧光结果显示,绝大部分细胞无法伸出突起或突起变短;Western blot的结果表明实验组中β-catenin,C-myc以及PCNA的表达量明显增加,Bcl-2的表达量下调,而CyclinD1和Caspase3的表达量没有明显差异。结论***3a异位表达抑制脊髓连合纤维投射;***3a异位表达调节神经元形态进而影响迁移;***3a通过β-catenin信号通路调控细胞增殖与凋亡。

关键词： Wnt3a 鸡胚脊髓神经元连合纤维

Reelin在穿通纤维及大脑连合纤维寻径中的作用

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Reelin在穿通纤维及大脑连合纤维寻径中的作用

作者：王晨阳河南大学

学位级别：硕士

自Reelin发现以来,Reelin及Reelin信号通路在哺乳动物中枢神经系统发育中的作用始终是神经发育生物学领域研究的热点课题。Reelin这种大分子糖蛋白在哺乳动物发育的不同时期有不同的生物功能。作为维持投射神经元放射状迁移稳定性和切... 详细信息

自Reelin发现以来,Reelin及Reelin信号通路在哺乳动物中枢神经系统发育中的作用始终是神经发育生物学领域研究的热点课题。Reelin这种大分子糖蛋白在哺乳动物发育的不同时期有不同的生物功能。作为维持投射神经元放射状迁移稳定性和切线迁移的导向信号蛋白,在调节投射神经元迁移过程及准确定位的发生有着重要的作用,Reelin在哺乳动物大脑新皮质片层化的形成、大脑结构的稳定、连合纤维的形成方面扮演着重要的角色。当Reelin蛋白表达异常或其信号通路突变时,不仅会引发大脑结构畸形性疾病,如小脑发育不全、无脑回畸形等,还能够引起多种神经发育性精神类疾病和神经退行性疾病。目前大多数学者研究的重点主要集中于Reelin在中枢神经系统发育过程中所起的作用,但有关Reelin蛋白在穿通通路及连合纤维发育中的作用的研究尚未能引起足够的重视。因此,我们通过运用DiI/DiO顺行和逆行示踪等技术,分别比较野生型小鼠和Reelin基因缺失小鼠穿通通路、胼胝体连合纤维及海马连合纤维的发育差异,以此来推断Reelin在穿通通路及连合纤维发育中的作用。目的:研究Reelin在穿通通路及连合纤维寻径中的作用。方法:取Reelin基因缺失小鼠(Reeler)和野生型小鼠(WT),胚龄16d(E16)至出生7d(P7)各年龄点共123例(WT小鼠75例,Reeler小鼠48例)。采用DiI/Di O离体示踪技术对不同年龄点的野生型(WT)小鼠及Reelin基因缺失小鼠(Reeler)的穿通通路及连合纤维进行顺行和逆行示踪。结果:(1)穿通通路主要由内嗅皮质第Ⅱ层和第Ⅳ层神经元所发出,在E16时进入海马腔隙分子层,P1时穿通纤维出现在齿状回,P7时穿通纤维形成致密纤维束终止于齿状回外分子层2/3;Reeler小鼠的穿通通路出现明显的发育延迟并且投射纤维分布紊乱。(2)穹窿连合纤维主要由海马CA3锥体细胞,门细胞及内嗅皮质Ⅱ-Ⅳ层神经元发出,在胚胎E16时形成;Reeler小鼠穹窿纤维与WT小鼠在发育中无明显区别。(3)胼胝体连合纤维主要由新皮质Ⅱ-Ⅳ层神经元及纹状体神经元所投射,在E18时形成并向对侧皮质进行纤维投射,并且投射部位出现对称分布,P3时一侧胼胝体纤维到达对侧纹状体。Reeler小鼠胼胝体投射的皮质神经元向对侧新皮质投射出现延迟。结论:(1)Reelin可能是穿通通路及连合纤维发育的导向因子。(2)Reelin的缺失导致穿通通路发育延迟。(3)连合纤维在皮质的细胞来源及穿通通路细胞来源紊乱。

关键词： Reelin 穿通通路连合纤维发育

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人脑连合纤维的弥散张量纤维束成像

中国医学影像技术 2004年第3期20卷 378-380页

作者：于春水李坤成李永忠梁志刚秦文刘嘉宾首都医科大学宣武医院医学影像部放射科北京100053

目的　建立弥散张量纤维束成像对人脑连合纤维的显示方法 ,探讨显示结果与已知解剖知识的一致性。方法　对 1个正常志愿者进行单次激发回波平面弥散张量成像 ,利用纤维束成像软件包显示脑内连合纤维 ,观察重建的连合纤维与已知解剖知识... 详细信息

目的　建立弥散张量纤维束成像对人脑连合纤维的显示方法 ,探讨显示结果与已知解剖知识的一致性。方法　对 1个正常志愿者进行单次激发回波平面弥散张量成像 ,利用纤维束成像软件包显示脑内连合纤维 ,观察重建的连合纤维与已知解剖知识的一致性。结果　通过选择恰当的感兴趣区 ,设置不同的分数各向异性阈值、角度阈值、步长和体素内采样数目等参数 ,弥散张量纤维束成像可以清楚地显示胼胝体、穹隆和前连合等连合纤维的三维结构。显示结果与已知解剖知识具有良好的一致性。结论　纤维束成像的结果与解剖学描述具有高度一致性 ,该方法是一种可靠的研究人脑纤维连接的方法。

关键词：弥散张量成像纤维束成像连合纤维人脑解剖

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豚鼠海马和齿状回连合纤维的研究

解剖学报 1982年第1期 64-67,116页

作者：戴鸿佐吴文瑶淳于莉娟复旦大学生物系

我们用辣根过氧化物酶(HRP)轴突逆行追踪的方法对豚鼠海马不同区和齿状回连合纤维进行了研究,结果如下:海马上区发出连合纤维投射到对侧海马上区。海马下区发出连合纤维投射到对侧海马上区、海马下区和齿状回。齿状回多形细胞层内的一... 详细信息

我们用辣根过氧化物酶(HRP)轴突逆行追踪的方法对豚鼠海马不同区和齿状回连合纤维进行了研究,结果如下:海马上区发出连合纤维投射到对侧海马上区。海马下区发出连合纤维投射到对侧海马上区、海马下区和齿状回。齿状回多形细胞层内的一些梭形细胞和变形的锥体细胞也发出连合纤维到对侧,它们的末梢终止在对侧齿状回、或海马下区的CA_(4)。或同时终止在上述两个区域。由连合纤维联系着的两侧海马上区具有明显的对称性,两侧齿状回可能同样如此,而两侧海马下区则不具有对称性。

关键词：海马辐射层连合纤维对侧 HRP 齿状回海马边缘系统豚鼠荷兰猪

大白鼠大脑皮质第3、17:18区的连合纤维

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解剖学通报 1983年第3期 248-250,277页

作者：张可仁胡海涛任惠民西安医学院人体解剖教研室

胼胝体纤维在大脑皮质活动的同步化方面起作用。如果切断黑猩猩的胼胝体,它就不能将一隻手学到的本领立即转到另一隻手,而必须重新学习(1)。Yorke(1975)(2)用溃变法和HRP法研究过小鼠的胼胝体纤维,认为肢体的远侧、触鬚等的皮质感觉代... 详细信息

胼胝体纤维在大脑皮质活动的同步化方面起作用。如果切断黑猩猩的胼胝体,它就不能将一隻手学到的本领立即转到另一隻手,而必须重新学习(1)。Yorke(1975)(2)用溃变法和HRP法研究过小鼠的胼胝体纤维,认为肢体的远侧、触鬚等的皮质感觉代表区没有胼胝体细胞。

关键词：大脑皮质半球对侧大白鼠家鼠属酶标连合纤维

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精神外科学进展

中华医学杂志 2008年第15期88卷 1076-1079页

作者：何锦赵继宗首都医科大学附属北京天坛医院神经外科 100050

精神外科（psychosurgery）是神经外科学一个分支，采用手术技巧破坏脑内某些联合和连合纤维；或者在脑特定区域切除部分皮质，从而消除或者减轻患者精神症状。世界卫生组织（WHO）在1976年的定义是：通过选择性地切除或者毁损神经传导... 详细信息

精神外科（psychosurgery）是神经外科学一个分支，采用手术技巧破坏脑内某些联合和连合纤维；或者在脑特定区域切除部分皮质，从而消除或者减轻患者精神症状。世界卫生组织（WHO）在1976年的定义是：通过选择性地切除或者毁损神经传导通路以影响精神病患者行为的目的外科操作。这是一门极具争议的学科，从诞生之日起就引起了精神病学界、神经外科学界、伦理学界，乃至政界的极大兴趣，争议和质疑不断。

关键词：神经外科学精神外科神经传导通路世界卫生组织精神病患者连合纤维手术技巧区域切除

全胼胝体梗死后胼胝体离断综合征1例报告并文献复习

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首都医科大学学报 2020年第3期41卷 495-499页

作者：武婧月薛茜邹玉安杨金水张宇河北北方学院河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院神经内科河北张家口075000

胼胝体位于两侧大脑半球之间,是中枢神经系统最大的连合纤维束,具有丰富的血液供应,临床梗死相对少见。单纯的全胼胝体梗死会出现胼胝体离断综合征,典型表现为失读、失写、意向运动性失用、触觉命名不能、异己手综合征等[1]。现将本院... 详细信息

胼胝体位于两侧大脑半球之间,是中枢神经系统最大的连合纤维束,具有丰富的血液供应,临床梗死相对少见。单纯的全胼胝体梗死会出现胼胝体离断综合征,典型表现为失读、失写、意向运动性失用、触觉命名不能、异己手综合征等[1]。现将本院收治的1例全胼胝体梗死表现为异己手综合征、触觉失认、意向运动性失用、结构性失用的患者报道如下。并结合既往文献报道对其解剖功能、病因机制、临床症状等情况进行分析。

关键词：两侧大脑半球胼胝体梗死病因机制连合纤维中枢神经系统失用失读失写

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神经传导径路模型设计

沂水医专学报 1980年第2期 243-250页

作者：阎锡光沂水医专人体解剖学教研室

在人体解剖学的教学过程中,神经系统是较复杂的一个系统,特别是神经传导径路,在标本上想看一个完整的神经传导径路,是相当困难。教师只好在黑板上画或借助于挂图,然而更重要的是用立体直观教具—模型,利于讲解,学生易懂而又便于复习,是... 详细信息

在人体解剖学的教学过程中,神经系统是较复杂的一个系统,特别是神经传导径路,在标本上想看一个完整的神经传导径路,是相当困难。教师只好在黑板上画或借助于挂图,然而更重要的是用立体直观教具—模型,利于讲解,学生易懂而又便于复习,是教学过程中不可忽视的直观教具。我们设计、制作了几种神经传导径路模型,因我们技术较差和业务水平所限,仅供参考。

关键词：神经传导脊髓脑干内部结构脑径路传导束神经核小脑中脚脑桥臂连合纤维小脑延髓切面制作方法模型制作钢筋支架下丘