检索结果-南通市图书馆

作者：涂瑶筠四川大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在比较热带念珠菌(Candida tropicalis)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)、克柔念珠菌(Candida krusei)体外生成生物膜的能力,评价上述3种念珠菌生物膜对氯碘羟喹、萘替芬-酮康唑的敏感性。材料和方法:1.活化热带念... 详细信息

目的:本研究旨在比较热带念珠菌(Candida tropicalis)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)、克柔念珠菌(Candida krusei)体外生成生物膜的能力,评价上述3种念珠菌生物膜对氯碘羟喹、萘替芬-酮康唑的敏感性。材料和方法:1.活化热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌后,在96孔细胞培养板中形成生物膜,3,3’-[1-(苯氨酰基)-3,4-四氮唑]-二(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸钠(3,3’-[1-(phenylamino)carbonyl]-3,4-tetrazolium-bis(4-methoxy-6-nitro)benzenesulfonic acid,XTT)法半定量测定上述3种念珠菌生物膜量并绘制生长曲线。***法测定不同浓度氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑对热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜形成不同时期的抑制作用,测定氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑对热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜的50%最小抑菌浓度(50%Minimum inhibitory concentrations,MIC)。3.热提取法提取热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜胞外多聚物(Extracellular polymeric substances,EPS)以及氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑处理后的热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌EPS;考马斯亮蓝法、亚甲基蓝比色法分别测定EPS中蛋白质和多糖含量。4.荧光显微镜和扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)观察氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑处理前后的热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜的形态变化。结果:***法半定量检测结果显示:热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌都可形成生物膜,其中热带念珠菌和克柔念珠菌生物膜的光密度(Optical density,OD)值较高,近平滑念珠菌生物膜的OD值最低。热带念珠菌生物膜在8小时内增殖速度较快,8小时后增殖速度减慢。近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜在16小时内增殖速度较快,16小时后增殖速度减慢。2.氯碘羟喹对热带念珠菌、近平滑念珠菌生物膜的MIC分别为8μg/ml和2μg/ml;克柔念珠菌生物膜的MIC小于1μg/ml;萘替芬-酮康唑对热带念珠菌、克柔念珠菌生物膜的MIC均为8μg/ml;对近平滑念珠菌生物膜的MIC小于1μg/ml。在实验浓度内氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑对热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜的抑制率均未超过80%。随着药物作用时间和(或)药物浓度的增加3种念珠菌生物膜量均减少。3.生物膜EPS中多糖含量测定结果显示:热带念珠菌生物膜胞外多糖含量最高,近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜胞外多糖含量相近。EPS中蛋白质含量测定结果显示:热带念珠菌>近平滑念珠菌>克柔念珠菌。氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑作用后热带念珠菌和近平滑念珠菌生物膜胞外多糖和胞外蛋白质均减少,克柔念珠菌生物膜胞外蛋白质含量减少,多糖无明显减少。4.荧光显微镜及扫描电镜下观察热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜结构及组成均不同。热带念珠菌可形成致密的由胞外多聚物包绕酵母细胞和菌丝的厚层生物膜;近平滑念珠菌生物膜较薄,几乎完全由聚集的酵母细胞和假菌丝组成;克柔念珠菌生物膜厚度介于近平滑念珠菌和热带念珠菌之间,由少量胞外多聚物包绕酵母细胞团块和假菌丝组成。用氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑处理后的热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜明显变薄,EPS、孢子、菌丝及假菌丝不同程度减少,孢子出现不同程度皱缩、孔隙形成、凹陷等。结论:1.热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌均有生物膜形成能力,其中热带念珠菌与克柔念珠菌生物膜含量较高,近平滑念珠菌生物膜含量最低。2.氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑对热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜形成均有良好的抑制作用,呈浓度依赖性和(或)时间依赖性。氯碘羟喹对克柔念珠菌和近平滑念珠菌生物膜的抑制作用更强;萘替芬-酮康唑对近平滑念珠菌生物膜的抑制作用更强。氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑对热带念珠菌和克柔念珠菌生物膜形成的抑制作用相当。3.氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑对热带念珠菌和近平滑念珠菌生物膜胞外多糖和胞外蛋白质以及克柔念珠菌生物膜胞外蛋白质均有抑制作用。氯碘羟喹对热带念珠菌生物膜胞外蛋白质的抑制作用强于萘替芬-酮康唑。4.氯碘羟喹和萘替芬-酮康唑均能减少热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌生物膜的厚度,不同程度改变孢子形态、菌丝及假菌丝数量,胞外多聚物不同程度减少,氯碘羟喹明显抑制近平滑念珠菌生物膜假菌丝形成。

关键词：热带念珠菌近平滑念珠菌克柔念珠菌氯碘羟喹萘替芬-酮康唑生物膜胞外多聚物

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两株典型念珠菌属真菌对钛材的腐蚀影响及机理

两株典型念珠菌属真菌对钛材的腐蚀影响及机理

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作者：李艳云南大学

学位级别：硕士

钛及其合金因具有较高的化学惰性、优良的生物相容性等优点,已被广泛用于口腔种植。但是口腔中微生物对植入材料的腐蚀会导致金属离子的溶出,例如Al、V、Ni等。这些金属离子对人体的长期作用会影响人体健康,轻则造成牙龈变色,材料植入失... 详细信息

钛及其合金因具有较高的化学惰性、优良的生物相容性等优点,已被广泛用于口腔种植。但是口腔中微生物对植入材料的腐蚀会导致金属离子的溶出,例如Al、V、Ni等。这些金属离子对人体的长期作用会影响人体健康,轻则造成牙龈变色,材料植入失败;重则引起组织癌变。如何防止钛及其合金的腐蚀和溶解成了亟待解决的问题。近几十年,口腔微生物腐蚀大多数在探索细菌对植入材料的影响,而关于口腔中真菌对植入材料的研究报道相对较少。真菌作为口腔中分布较多的微生物,对口腔植入材料的影响不可忽视。此外,由于口腔环境较为复杂,微生物种类繁多,口腔微生物对材料的腐蚀机理尚存争议。因此,研究口腔真菌对植入材料的影响对于全面研究微生物腐蚀以及解释腐蚀机理具有重要意义。基于此,本文以口腔钛材钛镍合金和钛锆合金为研究对象,依次开展了单真菌以及混合真菌存在下的腐蚀实验。具体实验内容如下:(1)探究了热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌在钛材表面生物膜的形成过程及生物膜的电子转移能力。荧光显微镜观察结果表明,热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌在钛镍合金及钛锆合金表面能够定植。随着培养时间的变化,单菌以及混合菌在钛材表面均出现酵母状与菌丝状的转变,最终形成生物膜。不同的是,单菌以及混合念珠菌更容易在钛锆合金表面定植,形成的生物膜更厚。差分脉冲伏安曲线显示出热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌的生物膜能促进电子从阳极转移到阴极,进而加速钛镍合金和钛锆合金的腐蚀。(2)探究了热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌存在下,钛镍合金、钛锆合金在人工唾液中的电化学行为。与无菌组相比,有菌组的电化学测试结果显示,钛镍合金与钛锆合金的阻抗值均有一定程度的减小,腐蚀电流增大,说明热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌能够加速钛镍合金、钛锆合金的腐蚀。其中,混合念珠菌存在下,阻抗值最小,腐蚀电流最大,说明混合念珠菌对两种钛材的腐蚀最为严重。(3)研究了热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌对钛镍合金、钛锆合金的表面形貌影响并对单菌、混菌的腐蚀产物进行了分析。去除真菌生物膜后,钛镍合金、钛锆合金表面均出现点蚀坑,并且混合念珠菌存在下,两种钛材表面的点蚀坑数目最多,腐蚀程度最为严重。电化学测试结果也表明混合真菌对钛材的腐蚀影响最大。XPS和FTIR测试结果则显示出单菌、混菌条件下,两种钛材的腐蚀产物类似,主要为金属的氧化物。综上所述,本文探索了热带念珠菌、近平滑念珠菌以及混合念珠菌分别对口腔钛材钛镍合金、钛锆合金的腐蚀影响,对两种钛材的电化学行为、表面形貌及腐蚀产物进行了分析,总结了腐蚀规律,提出了腐蚀机理。该课题为研究混合菌的腐蚀提供了借鉴,也为后期使用口腔修复材料提供了选择依据。

关键词：热带念珠菌近平滑念珠菌钛镍合金钛锆合金微生物腐蚀

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实时荧光定量PCR技术在深部念珠菌感染早期诊断中的研究

实时荧光定量PCR技术在深部念珠菌感染早期诊断中的研究

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作者：郭强第二军医大学

学位级别：硕士

实时荧光定量PCR技术在深部念珠菌感染早期诊断中的研究近年来随着广谱抗生素、糖皮质激素和免疫抑制剂的广泛应用,深部真菌感染的发病率和死亡率也呈逐年递增的趋势。大量临床资料和经验表明,深部真菌感染的疗效与转归,很大程度上取... 详细信息

实时荧光定量PCR技术在深部念珠菌感染早期诊断中的研究近年来随着广谱抗生素、糖皮质激素和免疫抑制剂的广泛应用,深部真菌感染的发病率和死亡率也呈逐年递增的趋势。大量临床资料和经验表明,深部真菌感染的疗效与转归,很大程度上取决于早期诊断和治疗。目前研究显示住院患者中60%的深部真菌感染是由白念珠菌引起,且其在人体中是致病状态还是定植状态,与它的繁殖数量有关。同时发现非白念珠菌的检出率已逐步增加,且耐药性较高。因此,不仅要早期、快速诊断深部真菌病,还要在短时间内尽快鉴别致病菌,以选择敏感有效的药物进行有效治疗。然而,临床上深部真菌感染的诊断面临着巨大的困难和挑战,目前仍在沿用传统方法,这些方法有耗时长、易污染、难定量等缺点,很大程度上制约了早期诊断和治疗,延误了最佳治疗时机。鉴于目前存在的问题,本课题拟在其他研究基础上,利用实时荧光定量PCR技术中的荧光嵌合法为基本原理,设计白念珠菌特异性引物,利用白念珠菌标准菌株构建重组质粒建立标准品,不断优化荧光定量PCR实验反应条件,绘制成白念珠菌的循环阈值(Ct)与拷贝数log(Copy number)之间的标准曲线图,其他待测样品则根据其作为标准进行检测定量,从而得以快速检测并明确诊断。同时,为了进一步快速鉴别五种常见念珠菌以选择敏感有效的药物进行治疗。我们尝试利用真菌通用引物,构建五种不同念珠菌的重组质粒作为标准品,对其进行实时荧光定量PCR检测并分别得到五种念珠菌特异性的融解温度。融解温度与PCR扩增产物的序列有关,对于某一PCR扩增产物,其值是固定的。根据不同的融解温度,使我们可快速鉴别不同的致病菌种。第一部分实时荧光定量PCR技术检测白念珠菌方法的研究目的探索利用实时荧光定量PCR技术检测白念珠菌的快速、可靠的新方法。方法在NCBI的Genbank中查找不同菌种的18SrRNA、5.8SrRNA、28SrRNA以及ITSⅠ、ITSⅡ基因序列,通过BLAST比对找出白念珠菌特异的基因序列,并保证此段高度保守。根据引物设计的原则,利用Primer 5.0设计白念珠菌特异性引物,扩增目的基因片段大约为270bp。应用特异性引物对白念珠菌标准菌株进行常规PCR,产物经1%琼脂糖凝胶电泳,大约为270bp,紫光灯下切胶,试剂盒胶回收。将回收的片段与载体pMD18-T vector连接,构建白念珠菌重组质粒;将质粒转化到DH5感受态细胞,在含氨苄抗性的LB固体培养基上过夜筛选单克隆,提取重组克隆质粒,10μl白念珠菌重组质粒送至上海美孚公司进行测序鉴定,其余白念珠菌重组质粒-20℃保存备用为荧光定量PCR标准品。将鉴定好的白念珠菌重组质粒纯化后,于紫外分光光度计上进行定量,根据重组质粒的碱基长度计算其分子质量,根据分子质量计算浓度,进而计算每微升所含的拷贝数,10倍稀释成5×107–5×103浓度梯度。在最佳反应条件下,每个浓度平行加入3个反应管同时进行扩增,反应结束后计算机自动绘制标准曲线。结果白念珠菌重组质粒测定稀释后,在最佳反应条件下进行定量扩增,得出了一条标准曲线及扩增曲线图。从而可以得出循环阈值(Ct)与拷贝数log(Copy number)之间的线性关系表达式:y=–3.385x+42.80。荧光定量PCR技术检测白念珠菌最低能检测到10个拷贝的基因,即相当于(1-5)CFU/ml,同时与其他真菌、细菌及病毒等无交叉阳性反应。结论实时荧光定量PCR技术检测白念珠菌不仅具有较高的敏感性和特异性,而且可以对白念珠菌进行定量。第二部分实时荧光定量PCR技术快速鉴别五种念珠菌方法的研究目的探索利用实时荧光定量PCR技术快速鉴别五种常见念珠菌的方法。方法应用真菌通用引物ITS4和ITS86分别与白念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌进行常规PCR,产物经1%琼脂糖凝胶电泳,扩增目的基因片段分别约为300bp、360bp、260bp、248bp、214bp。紫光灯下切胶,试剂盒胶回收。分别将胶回收的片段与载体pMD18-T vector连接,构建五种不同念珠菌重组质粒;分别将五种不同念珠菌的质粒转化到DH5感受态细胞,含氨苄抗性的LB固体培养基上过夜筛选单克隆,提取重组克隆质粒,分别将10μl五种不同念珠菌重组质粒送至上海美孚公司进行测序鉴定,其余五种念珠菌重组质粒-20℃保存备用为荧光定量PCR标准品。将鉴定测序的五种念珠菌重组质粒纯化后,于紫外分光光度计上进行定量,根据重组质粒的碱基长度计算其分子质量,根据分子质量计算浓度,进而计算每微升所含的拷贝数,分别10倍稀释成1010–104浓度梯度。在最佳反应条件下,五种不同念珠菌按1010–104浓度梯度同时进行扩增,连续进行8组相同反应,结束后计算机自动生成特异性的融解温度和绘制融解曲线图。结

关键词：深部念珠菌感染深部真菌感染荧光定量PCR 白念珠菌光滑念珠菌近平滑念珠菌克柔念珠菌热带念珠菌检测鉴别

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早产儿侵袭性真菌感染相关危险因素和临床诊治研究

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世界临床药物 2019年第9期40卷 642-648页

作者：桂明珠李泓静杨巧玲李志玲傅晓燕谢晓恬上海交通大学附属上海市儿童医院内科上海200020 上海交通大学附属上海市儿童医院药学部上海200020 上海市宝山区罗店医院儿内科上海201908 上海市同济医院儿科上海200065

目的通过归纳和分析临床资料,探索早产儿不同类型真菌感染的主要危险因素和疗效差异,为临床有效防治早产儿深部真菌感染提供参考依据。方法收集2015年6至2018年6月上海市儿童医院收治的75例侵袭性真菌感染早产儿相关资料,分析不同类型... 详细信息

目的通过归纳和分析临床资料,探索早产儿不同类型真菌感染的主要危险因素和疗效差异,为临床有效防治早产儿深部真菌感染提供参考依据。方法收集2015年6至2018年6月上海市儿童医院收治的75例侵袭性真菌感染早产儿相关资料,分析不同类型真菌感染的临床特点、实验检测结果和疗效转归差异。结果 75例患儿根据感染真菌类型分布特征分为近平滑念珠菌感染(近平滑组)组49例,非近平滑念珠菌感染组(非近平滑组)26例,包括白色念珠菌9例、光滑念珠菌5例、胶红酵母菌4例、热带念珠菌3例、季也蒙假丝酵母菌2例、克柔假丝酵母菌2例、罗伦特隐球酵母菌1例。近平滑组的前期经外周静脉穿刺中心静脉置管术使用率明显高于非近平滑组(P=0.001);而外科手术史(P=0.021)、中枢神经系统感染(P=0.032),住院时间>30d(P=0.003),C反应蛋白升高(P=0.013)等,非近平滑组均高于近平滑组。药敏试验结果显示,近平滑组对于三唑类抗真菌药物敏感性均明显高于非近平滑组;临床疗效显示,近平滑组和非近平滑组总有效率分别为89.79%和69.23%(P=0.025),提示近平滑组总体临床转归优于非近平滑组。结论早产儿侵袭性真菌感染的主要病原类型中,近平滑念珠菌与非近平滑念珠菌感染在主要危险因素、药物疗效和预后等方面存在显著差异,可为临床有效防治与后续研究提供参考依据。

关键词：早产儿近平滑念珠菌侵袭性真菌感染

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抗菌药物临床应用指导原则(第四部分续)

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药物不良反应杂志 2005年第6期7卷 437-444页

作者：卫生部国家中医药管理局总后卫生部

阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同,可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎.细菌性阴道病的最常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属.念珠菌性外阴阴道病的病原体80%以上为白念珠菌;10%～20%为其他... 详细信息

阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同,可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎.细菌性阴道病的最常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属.念珠菌性外阴阴道病的病原体80%以上为白念珠菌;10%～20%为其他念珠菌属,如热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌.滴虫性阴道炎的病原体为毛滴虫,可同时合并细菌或念珠菌感染.

关键词：临床应用抗菌药物念珠菌性外阴阴道病细菌性阴道病滴虫性阴道炎阴道加德纳菌近平滑念珠菌念珠菌属热带念珠菌光滑念珠菌

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关于施行《抗菌药物临床应用指导原则》的通知(续十二)

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中国乡村医药 2006年第1期13卷 25-28页

阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同，可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎。细菌性阴道病的最常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属。念珠菌性外阴阴道病的病原体80％以上为白念珠菌；10％～20... 详细信息

阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同，可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎。细菌性阴道病的最常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属。念珠菌性外阴阴道病的病原体80％以上为白念珠菌；10％～20％为其他念珠菌属，如热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌。滴虫性阴道炎的病原体为毛滴虫，可同时合并细菌或念珠菌感染。

关键词：临床应用抗菌药物念珠菌性外阴阴道病细菌性阴道病滴虫性阴道炎十二阴道加德纳菌近平滑念珠菌阴道感染念珠菌属

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外阴阴道念珠菌病诊治规范(草案)

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继续医学教育 2007年第17期21卷 40-42页

作者：中华妇产科学分会感染疾病协作组中华妇产科学分会感染疾病协作组

外阴阴道念珠菌病（Vulvovaginal Candidiasis，VVC）曾称为霉菌性阴道炎，其病原菌是以白念珠菌为主的酵母菌，其他如光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌等占少数。本文提出的VVC诊疗原则及方案，是基于目前国内外对本病的认识和诊... 详细信息

外阴阴道念珠菌病（Vulvovaginal Candidiasis，VVC）曾称为霉菌性阴道炎，其病原菌是以白念珠菌为主的酵母菌，其他如光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌等占少数。本文提出的VVC诊疗原则及方案，是基于目前国内外对本病的认识和诊断及治疗原则而制定。

关键词：外阴阴道念珠菌病诊治规范霉菌性阴道炎近平滑念珠菌光滑念珠菌热带念珠菌白念珠菌诊疗原则

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念珠菌鉴定和分离方法的研究和探讨

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青海医药杂志 1993年第3期23卷 40-41页

作者：张洪宇幸卫斌汪春翔冯忠生青海省卫生防疫站

据文献记载Lodder分离81株念珠菌,仅7种与医学有关:白色念珠菌(***)、类星形念珠菌(***)、热带念珠菌(***)、假热带念珠菌(***)、克柔氏念珠菌(***)、近平滑念珠菌(***)和高厘念珠菌(***),其中以白色念珠菌对人类危害最大,致病性最强。

关键词：念珠菌感染类星形念珠菌热带念珠菌白色念珠菌克柔氏念珠菌血平板近平滑念珠菌沙氏培养基芽管试验致病性

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抗菌药物临床应用指导原则(13)——各类细菌性感染的治疗原则及病原治疗

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中国临床医生杂志 2006年第5期34卷 26-28页

14阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同,可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎.细菌性阴道病的最常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属.

关键词：细菌性感染病原治疗治疗原则临床应用抗菌药物念珠菌性外阴阴道病细菌性阴道病滴虫性阴道炎阴道加德纳菌近平滑念珠菌

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酵母样真菌的鉴定与结果分析

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医学临床研究 1997年第S1期18卷 82-83页

作者：傅有荣湖北医科大学第二附属医院 430071

酵母样真菌是一种呈酵母样菌落形态的单细胞芽生真菌,是临床上重要的条件致病菌,它可以引起全身组织和器官的条件感染,特别是院内继发性感染.近年来,由于广谱抗生素.免疫抑制剂及皮质类固醇激素的广泛应用,导致酵母样真菌感染日益增多,... 详细信息

酵母样真菌是一种呈酵母样菌落形态的单细胞芽生真菌,是临床上重要的条件致病菌,它可以引起全身组织和器官的条件感染,特别是院内继发性感染.近年来,由于广谱抗生素.免疫抑制剂及皮质类固醇激素的广泛应用,导致酵母样真菌感染日益增多,其中主要是白色念珠菌.现将本院1993年以来鉴定的酵母样真菌的结果报道如下.

关键词：酵母样真菌结果分析白色念珠菌光滑念珠菌热带念珠菌临床检验近平滑念珠菌酵母样菌落条件致病菌克柔念珠菌

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