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运动神经元病康复护理指导手册

一种微管-荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼运动神经元系统的建立

2020年

作者：中国残疾人联合会编

《运动神经元病康复护理手册》一书紧紧围绕运动神经元病基层医疗工作者与照护者需要学习掌握的疾病与康复护理基本知识，了解运动神经元病康复护理的主要技术与方法，掌握与之相关的政策与社会支持网络，关注现代医学和科技进步能够为... 详细信息

ISBN: (纸本)9787508099231

《运动神经元病康复护理手册》一书紧紧围绕运动神经元病基层医疗工作者与照护者需要学习掌握的疾病与康复护理基本知识，了解运动神经元病康复护理的主要技术与方法，掌握与之相关的政策与社会支持网络，关注现代医学和科技进步能够为患者所提供的支持等内容，为患者提供精准、及时和有效的指导，以帮助患者规范化的综合治疗、科学护理，改善生活质量、延长生存期。本书共有六章，介绍了了运动神经元病有关概念、治疗与康复护理规范，供基层医疗工作者及照料者在运动神经元病患者提供治疗与康复护理服务中参考、使用。

关键词：运动神经元脊髓疾病护理手册康复

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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生理学报 2022年第3期74卷 411-418页

作者：袁芳钱佩佩王新盛佳婧刘东巩杰南通大学生命科学学院南通226001 南通大学医学院南通226001 南通大学神经再生重点实验室南通226001

运动神经元是一类支配运动行为的重要神经元。传统的荧光蛋白标记的转基因斑马鱼品系(用于活体成像分析运动神经元形态发生)存在胞体密集、突触交错、不好区分单个神经元等不足。为了优化活体成像分析运动神经元,本研究旨在建立一种微管... 详细信息

运动神经元是一类支配运动行为的重要神经元。传统的荧光蛋白标记的转基因斑马鱼品系(用于活体成像分析运动神经元形态发生)存在胞体密集、突触交错、不好区分单个神经元等不足。为了优化活体成像分析运动神经元,本研究旨在建立一种微管-荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼运动神经元系统。首先通过Gateway克隆技术将运动神经元表达基因mnx1启动子序列与绿色荧光蛋白-α-Tubulin融合蛋白序列构建到含有Tol2转座位点的表达载体中,然后将该质粒和Tol2 mRNA同时注射到4~8细胞期斑马鱼受精卵中,在72 hpf(hours post fertilization)进行共聚焦显微成像分析。结果显示,该系统中绿色荧光融合蛋白在3种类型运动神经元中表达,从而实现单个运动神经元嵌合标记。本研究进一步探索注射剂量与嵌合标记神经元数量以及分布频率的关系,并确定了重组蛋白的合适剂量(15 ng)。此外,本研究在该模型上验证了insm1a和kif15表达下调导致的运动神经元异常发育。这些结果表明我们成功建立了一种微管-荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼运动神经元系统,为探究运动神经元的发育和形态发生提供了一个直观和快速的模型,在运动神经元病发病机制和药物筛选等研究中有潜在的应用价值。

关键词：转基因嵌合体运动神经元斑马鱼

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少见晚发型庞贝病合并运动神经元受损1例

中华内科杂志 2023年第2期62卷 200-202页

作者：徐金娥戚晓昆姚生韩晓琛刘建国段枫孙辰婧解放军总医院第六医学中心神经内科北京100048

庞贝病(Pompe disease)亦称糖原贮积病Ⅱ型(GSDⅡ),传统认为它是一种遗传性肌肉病,特征是编码酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)的基因突变,其糖原贮积主要在肌肉。但有文献报道庞贝病可见脑血管内皮细胞受损、自主神经功能障碍、周围神经系统和... 详细信息

庞贝病(Pompe disease)亦称糖原贮积病Ⅱ型(GSDⅡ),传统认为它是一种遗传性肌肉病,特征是编码酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)的基因突变,其糖原贮积主要在肌肉。但有文献报道庞贝病可见脑血管内皮细胞受损、自主神经功能障碍、周围神经系统和小纤维神经病变。罕见运动神经元受累表现。本文报道1例庞贝病合并运动神经元受损病例,提示庞贝病是一种神经肌肉疾病并文献回顾,以提高临床诊断效率。

关键词：糖原贮积病Ⅱ型神经肌肉疾病中枢神经系统运动神经元

基于人源运动神经元神经突起模型的图像识别算法构建与毒理学评估研究

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陆军军医大学学报 2023年第12期45卷 1311-1319页

作者：代致远郑媛媛张方荣聂海峰李新玉徐升敏吴李君中国科学院合肥物质科学研究院强磁场中心中国科学技术大学科学岛分院安徽大学物质科学与信息技术研究院信息材料与智能感知安徽省实验室

目的编写一个MATLAB算法，用于自动化测量运动神经元(motor neuron, MN)神经突起，并利用该算法评估有机磷酸酯阻燃剂三(2-氯乙基)磷酸酯[Tris(2-chloroethyl) Phosphate, TCEP]对MN神经突起生长的影响。方法诱导人胚胎干细胞逐步分化... 详细信息

目的编写一个MATLAB算法，用于自动化测量运动神经元(motor neuron, MN)神经突起，并利用该算法评估有机磷酸酯阻燃剂三(2-氯乙基)磷酸酯[Tris(2-chloroethyl) Phosphate, TCEP]对MN神经突起生长的影响。方法诱导人胚胎干细胞逐步分化为MN,利用βⅢ-tubulin标记不同条件下的神经突起进行荧光成像，开发图像识别算法用于自动分析神经突起以及污染物处理后的神经突起网络面积变化。在MN分化过程中，利用不同浓度的TCEP处理细胞，TCEP浓度分别为0、25、50和100μmol/L。结果成功诱导出表达胆碱乙酰化酶的MN。开发的图像识别算法可以对图像进行批量化处理，能够计算神经突起网络所占像素面积，并可以通过优化细丝保留阈值来保留微弱的神经突起，提高测量的精度。基于该算法的量化数据表明，TCEP从50μmol/L开始显著降低神经突起网络面积百分比(P神经突起模型成功开发了图像识别算法，并且该算法能够用于TCEP对神经突起的毒性评估。

关键词： MATLAB算法人胚胎干细胞运动神经元神经突起污染物

C3H1型锌指结合蛋白36介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症运动神经元退变中的作用

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解剖学报 2022年第3期53卷 273-280页

作者：丁康张烽萍齐高秀林盟陈敏陈燕春郭章玉周风华管英俊潍坊医学院基础医学院临床病理系潍坊医学院附属医院病理科潍坊医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东省神经疾病与再生修复重点实验室山东潍坊261053

目的探讨C3H1型锌指结合蛋白36(ZFP36L1)介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症(ALS)运动神经元退变中的作用。方法以铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)-G93A转基因小鼠作为动物模型,同窝野生型小鼠作为对照(突变型及野生型小鼠各时间点分... 详细信息

目的探讨C3H1型锌指结合蛋白36(ZFP36L1)介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症(ALS)运动神经元退变中的作用。方法以铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)-G93A转基因小鼠作为动物模型,同窝野生型小鼠作为对照(突变型及野生型小鼠各时间点分别取13只小鼠);Real-time PCR、Western blotting检测小鼠发病早期、中期及晚期脊髓内ZFP36L1 mRNA及蛋白变化,免疫荧光染色检测ZFP36L1在脊髓内的表达及分布;出生后1~2 d新生小鼠15只,建立SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞模型,Real-time PCR、Western blotting检测星形胶质细胞内ZFP36L1 mRNA及蛋白水平的变化,si-ZFP36L1转染SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞,Western blotting检测转染效率,Western blotting及ELISA检测转染后星形胶质细胞分泌炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)变化;沉默SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1后,与SOD1-G93A突变型NSC34细胞共培养,通过5’-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)实验和观察增殖细胞核抗原(PCNA)的水平明确ZFP36L1对NSC34细胞增殖的影响,通过TUNEL实验及观察剪切Caspase-3(cleaved-Caspase-3)的水平明确ZFP36L1对NSC34细胞凋亡的影响,以转染空白小干扰RNA(siRNA)作为对照组。结果与野生型小鼠相比,ZFP36L1在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓组织内mRNA及蛋白水平均下调,在野生型小鼠脊髓组织内,ZFP36L1主要与β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)阳性的神经元共表达,而SOD1-G93A突变型小鼠的脊髓组织内,ZFP36L1在神经元内表达减弱,与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的星形胶质细胞共表达明显增加;SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1表达增加,si-ZFP36L1能明显降低SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1水平;沉默ZFP36L1后星形胶质细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-18明显降低。此外,沉默ZFP36L1后,SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞能显著增强NSC34细胞增殖活性,抑制NSC34细胞凋亡。结论在ALS发病过程中,星形胶质细胞被激活,ZFP36L1通过星形胶质细胞分泌的炎性因子促进了ALS运动神经元的退变。

关键词：肌萎缩侧索硬化症 C3H1型锌指结合蛋白36 炎性因子运动神经元星形胶质细胞免疫荧光转基因小鼠

小鼠臂丛离断对脊髓运动神经元树突结构与形态退变的影响

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中国临床解剖学杂志 2022年第3期40卷 277-285页

作者：李咪许嘉玮邹颖郭家松南方医科大学基础医学院组织胚胎学教研室广州510515

目的研究臂丛离断后脊髓运动神经元树突退变与时间和损伤距离的相关性。方法在距离椎间孔3 mm或10 mm处处离断小鼠臂丛,术后7、14、28、56 d取材,采用MAP2免疫荧光染色和体视学分析、Golgi-Cox染色和Sholl分析观测颈膨大处脊髓前角运动... 详细信息

目的研究臂丛离断后脊髓运动神经元树突退变与时间和损伤距离的相关性。方法在距离椎间孔3 mm或10 mm处处离断小鼠臂丛,术后7、14、28、56 d取材,采用MAP2免疫荧光染色和体视学分析、Golgi-Cox染色和Sholl分析观测颈膨大处脊髓前角运动神经元的树突结构和形态变化;术后28 d比较距离椎间孔3 mm和10 mm臂丛离断对脊髓运动神经元树突的影响。结果MAP2免疫荧光显示臂丛离断导致脊髓前角内树突的密度和完整性随时间延长逐渐下降;Golgi-Cox染色和Sholl分析显示运动神经元最长树突、总树突长度、树突最大跨度、树突3级分支的数量均呈时间依赖性下降。与距离椎间孔10 mm处离断组相比,3 mm处离断引起的树突长度退变更为明显。结论脊髓运动神经元树突在周围神经损伤后会发生退变,随时间延长其退变程度加重,随损伤部位与脊髓的距离延长树突长度退变程度减轻。

关键词：树突运动神经元臂丛离断脊髓

组胺对脊髓α-运动神经元兴奋性的易化作用及其离子机制（英文）

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生理学报 2019年第6期71卷 809-823页

作者：伍冠一庄乾兴张潇洋李红召王建军朱景宁南京大学医药生物技术国家重点实验室和生命科学学院生理学系南京210023 广西中医药大学基础医学院南宁530200

脊髓α运动神经元直接支配骨骼肌活动,是躯体运动和行为控制的最后公路(final common path)。因此,运动神经元兴奋性调控对于运动行为的执行至关重要。事实上,脊髓运动神经元接受多种神经调质的传入,尤其是单胺能神经调质。然而,组胺和... 详细信息

脊髓α运动神经元直接支配骨骼肌活动,是躯体运动和行为控制的最后公路(final common path)。因此,运动神经元兴奋性调控对于运动行为的执行至关重要。事实上,脊髓运动神经元接受多种神经调质的传入,尤其是单胺能神经调质。然而,组胺和下丘脑组胺能神经系统对脊髓运动神经元的调控作用及其下游离子机制至今仍不清楚。本研究采用大鼠脊髓脑片细胞内记录方法,发现组胺H1和H2受体的激活均能增强脊髓α运动神经元的重复放电行为和兴奋性。钾通道的关闭和钠-钙交换体的激活共同参与了H1受体激活介导的脊髓运动神经元的兴奋,而超极化激活的环核苷酸门控(hyperpolarizationactivated cyclic nucleotide-gated, HCN)通道的开放则负责H2受体激活介导的兴奋性效应。以上结果提示,通过切换与组胺受体相耦联的离子通道和交换体的功能状态,组胺可以有效地偏置脊髓α运动神经元的兴奋性,而下丘脑组胺能神经传入很可能以这种方式直接调控最终的运动输出并主动调节脊髓运动反射和运动执行。

关键词：组胺组胺受体运动神经元脊髓钾通道钠-钙交换体 HCN通道

非运动神经元细胞在脊髓性肌萎缩发病机制中的作用

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神经解剖学杂志 2022年第6期38卷 705-708页

作者：王国霞车凤玉张李钰李本昌莫丽党芝杨颖西安市儿童医院儿科疾病研究所西安710003

脊髓性肌肉萎缩症(SMA)是脊髓前角运动神经元退行性变导致的肌肉无力、肌肉萎缩的疾病,是导致婴儿死亡的最常见的常染色体隐性遗传病。SMA是由于存活运动神经元1(Smn1)基因的纯合突变和/或缺失,其编码的SMN蛋白表达减少,导致运动神经元... 详细信息

脊髓性肌肉萎缩症(SMA)是脊髓前角运动神经元退行性变导致的肌肉无力、肌肉萎缩的疾病,是导致婴儿死亡的最常见的常染色体隐性遗传病。SMA是由于存活运动神经元1(Smn1)基因的纯合突变和/或缺失,其编码的SMN蛋白表达减少,导致运动神经元死亡。然而,越来越多的证据表明,除了运动神经元外,其他类型的细胞也参与了SMA的发生与发展。在这篇综述中,我们将讨论位于中枢神经系统非运动神经元(感觉神经元、中间神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞)和外周神经系统中施万细胞在SMA病变过程中的作用。通过阐述非运动神经元细胞在SMA发病中的作用,将有助于全面理解SMA的发病机制,并对SMA的治疗提供新的思路。

关键词：脊髓性肌萎缩运动神经元 SMN蛋白星形胶质细胞少突胶质细胞小胶质细胞施万细胞

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运动神经元的模型研究方法

体育科技文献通报 2021年第12期29卷 26-28页

作者：徐伟航华东师范大学通信与电子工程学院上海200241

运动神经元是参与骨骼肌控制的最后通路,对脊椎动物行进运动的产生起着至关重要的作用,运动神经元的研究方法可分为生理实验研究和模型研究两种。使用模型研究运动神经元的优势在于成本低且效率高,依赖于现有的计算资源,建立一个运动神... 详细信息

运动神经元是参与骨骼肌控制的最后通路,对脊椎动物行进运动的产生起着至关重要的作用,运动神经元的研究方法可分为生理实验研究和模型研究两种。使用模型研究运动神经元的优势在于成本低且效率高,依赖于现有的计算资源,建立一个运动神经元模型非常简单,但模型仿真得到的结果是否具有生理学意义是需要考虑的事情,这要求模型研究人员在建模的时候要同时拟合运动神经元的主动膜特性和被动膜特性参数,使模型具有可用性。

关键词：运动神经元 H-H模型主动膜特性被动膜特性