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BST-1基因多态性与帕金森病运动症状进展相关性的研究

BST-1基因多态性与帕金森病运动症状进展相关性的研究

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作者：杨雨福建医科大学

学位级别：硕士

目的:通过这项3年纵向回顾性研究比较中国南方汉族人群的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者中骨髓基质细胞抗原1基因(BST-1)rs4698412位点基因风险变异携带者与非携带者在临床特征和运动症状进展方面的差异。方法:选取从2016年到2... 详细信息

目的:通过这项3年纵向回顾性研究比较中国南方汉族人群的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者中骨髓基质细胞抗原1基因(BST-1)rs4698412位点基因风险变异携带者与非携带者在临床特征和运动症状进展方面的差异。方法:选取从2016年到2018年在福建医科大学附属协和医院就诊的182例原发性帕金森病患者(均为南方汉族),所有参与者在初次就诊时获得基线临床信息。神经病学医师评测并记录患者的统一帕金森病评分量表、临床信息、人口学和Hoehn-Yahr分期等资料。所有患者基因分型后分为BST-1 rs4698412基因风险变异携带者组与非携带者组。对所有患者在就诊后3年再次随访进行UPDRS量表评估,每个患者运动症状进展用前后两次UPDRS-III评分的差值表示。等位基因频率采用拟合优度卡方检验进行哈迪-温伯格平衡定律分析,检验样本的群体代表性。并对两组数据采用卡方检验、Mann-Whitney秩和检验、多元线性回归分析以及Spearman相关分析等方法进行统计学分析,结果以P运动迟缓评分差值、姿势不稳定和步态困难评分差值进行比较,结果提示两组患者在UPDRS-III评分差值和强直评分差值这2项指标的比较差异有统计学意义(P运动迟缓这两项评分与震颤为主(Tremor Dominant,TD)亚型+混合(Mixed,MX)亚型患者相比差异无统计学意义(P>0.05);而在携带者组中,AR亚型患者的这两项评分与TD+MX亚型患者相比差异有统计学意义(P0.05);3.多元线性回归分析结果显示BST-1 rs4698412基因风险变异携带状态和年龄是帕金森病患者运动症状进展的独立危险因素(P运动亚型、受教育程度、病程年限、认知水平对帕金森病患者运动症状进展无显著性影响(所有P>0.05)。结论:1.携带BST-1 rs4698412基因风险变异的中国南方汉族PD患者运动症状进展更快,其中以强直症状的进展为主;2.在僵直少动型的中国南方汉族PD患者中,携带BST-1 rs4698412基因风险变异的患者,其强直和运动迟缓这两项运动症状更为严重;***-1 rs4698412基因风险变异携带状态和年龄是中国南方汉族帕金森病患者的运动症状进展的独立因素,两者均与其呈正相关。

关键词：基因多态性帕金森病骨髓基质细胞抗原-1基因运动症状进展

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APOE ε4对帕金森病运动症状进展的影响

APOE ε4对帕金森病运动症状进展的影响

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作者：金崇耀浙江大学

学位级别：硕士

背景:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一类以运动迟缓、肌强直和静止性震颤等运动症状为主要临床表现,同时伴有各种非运动症状的中枢神经系统退行性疾病;α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）的异常聚集沉积是其主要的病理特征... 详细信息

背景:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一类以运动迟缓、肌强直和静止性震颤等运动症状为主要临床表现,同时伴有各种非运动症状的中枢神经系统退行性疾病;α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）的异常聚集沉积是其主要的病理特征。遗传因素在PD的发生发展中起着重要的作用。APOEε4基因型是帕金森病性痴呆和路易体痴呆的风险因素,同时也是PD认知障碍和冻结步态发生的风险因素。既往研究认为APOEε4对PD症状的影响主要通过对β-淀粉样蛋白（amyloid-β,Aβ）的作用而产生,而其对α-syn病理及运动症状进展的作用仍不清楚。因此本研究旨在探索APOEε4基因型对PD运动症状进展的作用,及其对以α-syn病理为主要特征的快速眼动期睡眠障碍（Rapid eye movement sleep behavior disorder,RBD）亚型的影响。方法:本研究共纳入384名PD患者,平均随访时间78.9个月,根据基线水平的快速眼动期睡眠障碍筛查量表得分将PD分为PD+RBD组和PD-RBD组。使用混合线性模型模型分析了APOEε4基因型对PD运动症状进展的影响,同时,加入了APOEε4基因型和脑脊液β-淀粉样蛋白（amyloid-β,Aβ）的交互作用来探究这种作用是否依赖于Aβ。在亚组分析中,主要研究了APOEε4基因型对PD+RBD组和PD-RBD组的不同影响。结果:APOEε4基因型会加快PD运动症状的进展（回归系数=0.04,p值=0.01）,在校正了脑脊液Aβ因素后,这一作用仍然显著。亚组分析中,APOEε4基因型对PD-RBD运动症状进展有显著作用（回归系数=0.07,p值＜0.01）。结论:APOEε4是PD运动症状进展的危险因素,且这一作用在PD-RBD中显著。APOEε4对PD疾病进展的调节作用,可能是通过独立于Aβ的途径。

关键词：帕金森病快速动眼期睡眠障碍运动症状进展 APOEε4

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MiR-31通过调控SRSF11蛋白表达参与帕金森病发病的机制研究

MiR-31通过调控SRSF11蛋白表达参与帕金森病发病的机制研究

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作者：崔璨南京医科大学

学位级别：硕士

第一部分MiR-31在SH-SY5Y细胞中的转录组测序分析背景与目的:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种进行加重的运动障碍性疾病。目前PD的病因不明确且无法根本治愈。本研究前期在患者和对照者血清中,通过Solexa测序、qRT-PCR技术... 详细信息

第一部分MiR-31在SH-SY5Y细胞中的转录组测序分析背景与目的:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种进行加重的运动障碍性疾病。目前PD的病因不明确且无法根本治愈。本研究前期在患者和对照者血清中,通过Solexa测序、qRT-PCR技术筛选出了7个有表达差异的miRNAs,并且在脑组织的RNA提取液中进一步验证,最终得到具有统计学差异的miR-31。本部分研究继续以上研究,探索miR-31在人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞）中的功能及参与的信号通路,为miR-31在PD中的深入研究提供理论基础。方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞,在SH-SY5Y细胞中,分别转染miR-31mimic、miR-31 inhibitor、miR-NC mimic及miR-NC inhibitor。通过RNA-seq技术对分别4组SH-SY5Y细胞进行深度转录组测序。采用R软件对细胞内差异基因表达、差异基因的GO功能、Pathway功能和转录因子家族进行分析。结果:1)结果显示841个基因出现上调,1268个基因出现下调。2)GO分析结果显示,差异基因参与细胞处理、代谢、过程,生物调节、构成细胞组分、蛋白结合等过程。3)Pathway分析表明,差异基因大都分布在信号转导、信号分子和相互作用、肿瘤形成、病毒感染性疾病、代谢、免疫系统、内分泌系统等通路中。其中67个差异基因参与细胞增殖与死亡通路。结论:miR-31具有重要生物学功能,参与细胞中的信号转导、细胞增殖与死亡、肿瘤形成、免疫、代谢等1信号通路,为miR-31的研究提供初步基础。第二部分Mi R-31在帕金森病中的功能研究及其机制探索背景与目的:探讨mi R-31在PD中的功能及其具体机制。方法:首先用不同浓度的MPP+溶液处理人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞）,构建急性PD细胞模型;通过流式细胞技术探讨mi R-31对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响;然后通过生物信息学技术预测mi R-31的靶基因。并利用Western blot和q RT-PCR技术在细胞内检测预测靶基因m RNA和蛋白的表达水平。根据结果筛选出最可能靶基因,然后通过双荧光素酶报告基因实验验证mi R-31是否直接结合SRSF11的3′UTR区。最后通过补救实验验证mi R-31是否通过调控SRSF11 m RNA表达影响细胞凋亡。结果:1)流式细胞实验和CCK8实验结果发现mi R-31对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有保护作用。2)生物信息学预测SRSF11是mi R-31的靶基因,并用q RT-PCR技术和Western blot验证mi R-31可调控SRSF11的m RNA和蛋白水平表达。3)双荧光素酶报告基因检测验证mi R-31可结合SRSF11的3′UTR区域从而抑制SRSF11的表达,mi R-31是SRSF11的直接靶基因。4)Rescue实验证明mi R-31、SRSF11对细胞凋亡的作用相反,均可调控Bax/Bcl-2 m RNA表达影响凋亡;mi R-31可结合SRSF11的3′UTR抑制其表达,逆转SRSF11过表达引起的细胞凋亡。结论:mi R-31可抵抗MPP+造成的SH-SY5Y细胞毒性作用,减少细胞凋亡,对细胞有保护作用;mi R-31通过结合SRSF11的3′UTR调控其表达,能抑制SRSF11的m RNA和蛋白水平表达;SRSF11是mi R-31的直接靶基因;mi R-31通过下调SRSF11表达,调节凋亡相关基因Bax/Bcl-2 m RNA表达抑制细胞凋亡。第三部分STK39、BST1基因单核苷酸多态性对中国人群帕金森病发病风险和运动症状进展的相关性研究背景与目的:STK39、BST1基因的单核苷酸多态性位点（single nucleotide polymorphisms,SNPs）与白种人PD发病风险有关,而SNPs受种族,环境等多种因素影响。本部分研究旨在研究STK39、BST1基因的SNPs与亚洲中国人群PD病人的发病风险和病情进展的相关性。方法:本部分研究收集前来南京医科大学附属脑科医院PD门诊就诊的153名散发性PD患者。同时从南京体检中心收集性别年龄相匹配的健康对照者197名。由专业神经内科医师收集基本人群资料并评估PD统一评定量表第三部分（Unified Parkinsons′disease ratingⅢ,UPDRSⅢ）和第五部分Hoehn-Yahr（H-Y）分期,抽取病人静脉血5 m L备用。利用Mass ARRAY?SNP对所有研究对象STK39、BST1基因型进行分型。入组PD病人进行随访（平均随访年限大于2年）,在随访点由同个神经内科医师再次评估PD量表。采用R软件的lme4软件包的混合线性模

关键词：帕金森病 miR-31 RNA-seq SH-SY5Y细胞细胞凋亡 SRSF11 Bax/Bcl-2 STK39 BST1 随访研究运动症状进展发病风险

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