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油橄榄活性物质对大鼠运动性骨关节损伤的保护作用

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分子植物育种 2023年第10期21卷 3410-3417页

作者：袁凤敏雷小明郑州电力高等专科学校体育教学部郑州450000 玉溪师范学院体育学院玉溪653100

油橄榄(Olea europaea L.)是一种产于地中海地区的木本油料兼果用树种,油橄榄叶及其提取物的主要活性成分是橄榄苦苷,具有抗氧化、抗炎、激活AMPK的作用。本研究试图揭示油橄榄叶提取物橄榄苦苷(OLE)对大鼠运动性骨关节损伤(EOI)的保护... 详细信息

油橄榄(Olea europaea L.)是一种产于地中海地区的木本油料兼果用树种,油橄榄叶及其提取物的主要活性成分是橄榄苦苷,具有抗氧化、抗炎、激活AMPK的作用。本研究试图揭示油橄榄叶提取物橄榄苦苷(OLE)对大鼠运动性骨关节损伤(EOI)的保护作用及机制。通过剪断大鼠右膝关节前后交叉韧带联合间歇性中等强度运动建立EOI大鼠模型。将大鼠分成5组:Control组、EOI组、EOI+25OLE组、EOI+50OLE组和EOI+100OLE组(n=12)。研究结果表明,与EOI组比较,EOI+25OLE组、EOI+50OLE组和EOI+100OLE组的PWT升高(P关节组织形态明显改善。与EOI组比较,EOI+25OLE组、EOI+50OLE组和EOI+100OLE组的膝关节组织p-AMPKα、PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白表达水平升高(P运动性骨关节损伤大鼠的疼痛、氧化应激和炎症反应,其机制可能与AMPK通路的活化有关。

关键词：油橄榄(Olea europaea L.) 橄榄苦苷运动性骨关节损伤氧化应激

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运动性骨关节损伤线粒体通路机制及干预初探

运动性骨关节损伤线粒体通路机制及干预初探

作者：容瑛湖南师范大学

学位级别：硕士

研究目的：通过观察大鼠运动性骨关节损伤模型血清学改变及关节组织线粒体凋亡通路中相关细胞因子表达的影响。以布洛芬进行阳性对照,探讨运动性骨关节损伤的可能分子机制及虎纹蜘蛛毒素-Ⅰ(HWTX-I)抗凋亡干预效果,为运动性骨关节损伤... 详细信息

研究目的：通过观察大鼠运动性骨关节损伤模型血清学改变及关节组织线粒体凋亡通路中相关细胞因子表达的影响。以布洛芬进行阳性对照,探讨运动性骨关节损伤的可能分子机制及虎纹蜘蛛毒素-Ⅰ(HWTX-I)抗凋亡干预效果,为运动性骨关节损伤发生和发展的分子机制提供新的理论和实验依据。研究方法：5-6周龄健康雄性SD大鼠96只,随机分为早期生理盐水组(n=16)、早期HWTX-Ⅰ用药组(n=16)、早期布洛芬用药组(n=16)、晚期生理盐水组(n=16)、晚期HWTX-Ⅰ用药组(n=16)、晚期布洛芬用药组(n=16),采用改良Hulth模型结合间歇性中低强度运动建立大鼠运动性骨关节损伤病理模型,采用本课题组建立的大鼠硬脊膜外腔置管手术方法,应用光镜观察模型中运动性骨关节损伤膝关节软骨形态学变化;应用免疫组织化学法观察膝关节软骨中Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9等线粒体凋亡通路相关因子蛋白表达水平;应用分光光度法测定血清中SOD、CAT、GSH-Px活力及NO含量。研究结果：(1)通过HE染色光镜下观察到早期生理盐水组膝关节软骨组织潮线消失,软骨细胞排列紊乱,多量软骨细胞固缩;早期布洛芬用药组膝关节软骨组织潮线欠整齐,软骨细胞排列欠整齐,少量软骨细胞固缩;早期HWTX-Ⅰ用药组膝关节软骨组织结构接近正常组织。晚期生理盐水组膝关节软骨表面出现关节裂隙,潮线消失,软骨细胞排列紊乱;晚期布洛芬用药组膝关节软骨组织潮线不齐,软骨细胞排列不齐,可见软骨细胞可见少量细胞空泡;晚期HWTX-Ⅰ用药组膝关节软骨组织结构接近正常,潮线较整齐,软骨细胞排列较一致,可见少量软骨细胞固缩。(2)应用免疫组织化学染色法观察膝关节软骨中Bcl-2在HWTX-Ⅰ用药组可见阳性细胞表达率高(阳性细胞为棕褐色)且染色深;布洛芬用药组次之;生理盐水组可见阳性细胞表达,但其分布明显较HWTX-Ⅰ用药组、布洛芬用药组分布稀疏,且染色较浅。膝关节软骨中Bax、Caspas e-3、Caspas e-9在生理盐水组可见阳性细胞表达率高(阳性细胞为棕褐色)且染色深;布洛芬用药组次之;HWTX-Ⅰ用药组可见阳性细胞表达,但其分布明显较生理盐水组、布洛芬用药组分布稀疏,且染色较浅。(3)分光光度法测定血清中SOD、CAT、GSH-Px活力及NO含量,血清中SOD、GSH-Px活力以HWTX-Ⅰ用药组最高,布洛芬用药组、生理盐水组随之降低;血清中CAT活力以生理盐水组最低;血清中NO以生理盐水组最高,布洛芬用药组、HWTX-Ⅰ用药组随之降低。结论：(1) HWTX-Ⅰ硬脊膜外腔用药可以上调线粒体通路中运动性骨关节损伤大鼠关节软骨抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达,下调凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达,对运动性骨关节损伤有明显的抗凋亡作用。(2)HWTX-Ⅰ硬脊膜外腔用药可以上调运动性骨关节损伤大鼠血清中SOD、CAT、GSH-Px活力,下调大鼠血清中NO含量,明显减轻自由基对运动性骨关节损伤的影响,对大鼠运动性骨关节损伤关节有一定的抗损伤保护作用。(3)线粒体通路与运动性骨关节损伤密切相关。阐明线粒体通路在运动性骨关节损伤中的作用机制,对于有效防治由此造成的骨关节损伤具有重要的理论意义。(4)钙离子流动与运动性骨关节损伤的发生发展密切相关,本研究对钙通道拮抗剂HWTX-Ⅰ在运动性骨关节损伤中的作用机制进行了初步探讨,对有效防治运动性骨关节损伤具有理论和实际意义。

关键词：运动性骨关节损伤线粒体通路自由基 HWTX-I

大鼠运动性骨关节损伤模型构建及HWTX-Ⅰ的干预研究

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武汉体育学院学报 2011年第1期45卷 40-45页

作者：黄鹏柳维林容瑛钟文涛陈嘉勤湖南师范大学体育学院湖南长沙410012

运动性骨关节损伤是一种严重危害运动员运动能力和运动寿命的机械磨损性和无菌慢性进行性骨关节病。长期从事剧烈运动的运动员,如长跑、举重、柔道等项目的运动员,骨关节经常承受过大的压力,更会加速骨关节的磨损,从而导致关节损伤,诱... 详细信息

运动性骨关节损伤是一种严重危害运动员运动能力和运动寿命的机械磨损性和无菌慢性进行性骨关节病。长期从事剧烈运动的运动员,如长跑、举重、柔道等项目的运动员,骨关节经常承受过大的压力,更会加速骨关节的磨损,从而导致关节损伤,诱发运动性骨关节炎。一个理想的运动性骨关节损伤动物模型是实验研究能否取得顺利进展的决定性因素之一,而硬脊膜外腔用药是目前临床镇痛及神经保护类药物的常用施药途径。采用通过切断大鼠右膝关节前后交叉韧带结合中等强度运动训练制作大鼠慢性骨关节损伤结合硬脊外腔置管术,构建了重复性好的大鼠运动性骨关节损伤模型。并在此模型上,以Ibuprofen为阳性对照,观察HWTX-Ⅰ硬膜外腔用药对早期(建模14天用药)和晚期(建模28天用药)骨关节运动摩损性病变大鼠骨关节组织形态学改变及血清中SOD和GSH-PX的浓度变化。实验结果显示:HWTX-Ⅰ硬膜外腔用药具有明显抗伤害性作用,能对慢性运动型骨关节损伤病程进展起到缓解和抑制作用,且其效果优于目前临床常用的离子通道选择性低、副作用大的钙通道拮抗剂Ibuprofen,为慢性运动性骨关节病临床抗伤害性药物的研究提供理论和实验依据。

关键词：运动性骨关节损伤 HWTX-I 钙通道拮抗剂抗伤害作用

大鼠运动性骨关节损伤模型构建及炎性通路相关因子差异表达和干预研究

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大鼠运动性骨关节损伤模型构建及炎性通路相关因子差异表达和干预...

作者：黄鹏湖南师范大学

学位级别：硕士

研究目的：构建大鼠运动性骨关节损伤模型,并在此模型以布洛芬作为阳性对照,观察运动性骨关节损伤的可能分子机制及HWTX-I的抗伤害效应,为运动性骨关节损伤发生和发展的分子机制提供新的理论和实验依据。研究方法：5-6周龄健康雄性SD大... 详细信息

研究目的：构建大鼠运动性骨关节损伤模型,并在此模型以布洛芬作为阳性对照,观察运动性骨关节损伤的可能分子机制及HWTX-I的抗伤害效应,为运动性骨关节损伤发生和发展的分子机制提供新的理论和实验依据。研究方法：5-6周龄健康雄性SD大鼠96只,随机分为早期生理盐水组(n=16)、早期HWTX-Ⅰ用药组(n=16)、早期布洛芬用药组(n=16)、晚期生理盐水组(n=16)、晚期HWTX-Ⅰ用药组(n=16)、晚期布洛芬用药组(n=16)。采用改良Hulth模型结合间歇性中低强度运动建立大鼠运动骨关节损伤病理模型,用本课题组建立的大鼠硬脊膜外腔置管手术方法,通过光镜观察运动性骨关节损伤膝关节软骨形态学变化;分光光度法测定血清中SOD、CAT、GSH-Px活力及NO含量;RT-PCR法检测膝关节软骨中TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-8以及MMP-13mRNA的表达水平。研究结果：(1)HE染色光镜观察发现早期生理盐水组膝关节软骨组织的潮线消失,软骨细胞排列较为紊乱,大量软骨细胞固缩;早期布洛芬用药组膝关节软骨组织的潮线不齐,软骨细胞排列不齐,少量软骨细胞固缩;早期HWTX-Ⅰ用药组膝关节软骨组织结构较另外两组更接近正常组织。晚期生理盐水组膝关节软骨表面出现关节裂隙,潮线消失,软骨细胞排列较紊乱;晚期布洛芬用药组膝关节软骨组织潮线不齐,软骨细胞排列不齐,可见软骨细胞有少量空泡;晚期HWTX-Ⅰ用药组膝关节软骨组织结构正常,潮线较整齐,软骨细胞排列比较一致,有少量软骨细胞固缩。(2)分光光度法测定大鼠血清中NO含量及CAT、GSH-Px、SOD活力,血清中CAT、GSH-Px、SOD活力以HWTX-Ⅰ用药组最高,布洛芬用药组、生理盐水组随之降低;血清中CAT活力以生理盐水组最低;血清中NO以生理盐水组最高,布洛芬用药组、HWTX-Ⅰ用药组随之降低。(3)RT-PCR法检测滑膜组织和软骨细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-8、MMP-13 mRNA的表达水平。其结果均以生理盐水组最高,布洛芬用药组次之,HWTX-Ⅰ用药组最低。布洛芬用药组、HWTX-Ⅰ用药组与生理盐水组之间存在显著性差异(P运动性骨关节损伤模型,模拟了运动员膝关节运动性骨关节损伤状态。为HWTX-Ⅰ的抗伤害作用研究提供了实验动物模型。(2)形态学观察表明HWTX-Ⅰ硬脊膜外腔用药,对大鼠运动性骨关节损伤起到明显的抗损伤和保护作用,其抗伤害效果要优于布洛芬。(3)HWTX-Ⅰ硬脊膜外腔用药可以下调大鼠血清中NO含量,上调运动性骨关节损伤大鼠血清中CAT.GSH-Px.SOD活力,从而通过减轻自由基对运动性骨关节损伤的影响。(4)HWTX-Ⅰ硬脊膜外腔用药可下调运动性骨关节损伤软骨滑膜中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-8、MMP-13 mRNA的表达。其抗炎效果相对于目前临床使用的钙通道拮抗剂布洛芬更明显。(5)钙离子在细胞内外的分布与运动性骨关节损伤的发生发展病理过程密切相关,本研究对钙通道拮抗剂HWTX-Ⅰ在运动性骨关节损伤中的抗伤害效应及作用机制进行了初步探讨,对有效防治运动性骨关节损伤具有重要的理论和实际意义。

关键词：运动性骨关节损伤 HWTX-I 细胞内炎性通路细胞因子自由基

HWTX-I对运动性骨关节损伤大鼠关节软骨中iNOS表达及血清NO含量的影响

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湖南师范大学学报（医学版） 2010年第1期7卷 5-10页

作者：容瑛黄鹏钟文涛陶谷阳杨华罗赤苗陈嘉勤湖南师范大学体育学院湖南长沙410012 邵阳市中心医院湖南邵阳422000

目的:观察虎纹蜘蛛毒素(HWTX-I)对运动性骨关节损伤大鼠软骨诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达及血清中一氧化氮(NO)含量的影响,探讨HWTX-I对慢性运动性骨关节损伤的保护作用机制,为其临床应用提供理论和实验依据。方法:雄性SD大鼠30只... 详细信息

目的:观察虎纹蜘蛛毒素(HWTX-I)对运动性骨关节损伤大鼠软骨诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达及血清中一氧化氮(NO)含量的影响,探讨HWTX-I对慢性运动性骨关节损伤的保护作用机制,为其临床应用提供理论和实验依据。方法:雄性SD大鼠30只,采用改良Hulth模型结合间歇性中低强度运动建立大鼠运动磨损性骨关节病理模型。随机分成3组:非用药组、HWTX-I用药组和布洛芬用药组。对各组大鼠膝关节软骨进行显微结构形态学观察,采用免疫组织化学和图像分析系统检测iNOS水平的差异表达,分光光度法测定血清中NO含量。结果:3组iNOS的表达强度相比较,HWTX-I用药组明显低于非用药组和布洛芬用药组;HWTX-I用药组血清中NO的含量亦明显低于非用药组和布洛芬用药组。结论:INOS、NO在运动性骨关节损伤的病理进程中具有重要作用,HWTX-I可通过下调其在关节软骨的表达和血清中的含量,对大鼠运动性骨关节损伤关节有一定的抗损伤保护作用。

关键词：虎纹蜘蛛毒素运动性骨关节损伤软骨诱导型一氧化氮合成酶一氧化氮

一种新型钙通道拮抗剂HWTX-I在大鼠运动性骨关节损伤模型中抗伤害作用的研究

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湖南师范大学学报（医学版） 2008年第3期5卷 16-19页

作者：钟文涛陶谷扬容瑛陈嘉勤湖南师范大学体育学院湖南长沙410081

目的:探讨一种新型的钙通道拮抗剂HWTX-I(虎纹蜘蛛毒素-I)经硬脊膜外腔用药对大鼠运动性骨关节损伤模型中的抗伤害作用。方法:木瓜蛋白酶踝关节腔内注射制造大鼠踝关节炎性损伤模型,在此模型上分别进行两个剂量组HWTX-I(40μg/kg、80μg... 详细信息

目的:探讨一种新型的钙通道拮抗剂HWTX-I(虎纹蜘蛛毒素-I)经硬脊膜外腔用药对大鼠运动性骨关节损伤模型中的抗伤害作用。方法:木瓜蛋白酶踝关节腔内注射制造大鼠踝关节炎性损伤模型,在此模型上分别进行两个剂量组HWTX-I(40μg/kg、80μg/kg大鼠体重)和等体积0.9%生理盐水硬脊膜外腔注射给药。通过检测其关节肿胀度的变化和行为学疼痛评分,观察HWTX-I经硬脊膜外腔用药对该模型的抗伤害作用。结果:40μg/kg和80μg/kg浓度下的HWTX-I均能明显缓解大鼠关节炎性疼痛,并具有剂量依赖性(P运动性骨关节损伤的大鼠踝关节肿胀程度影响的差异性不显著。结论:HWTX-I作为一种新型的多肽类钙通道拮抗剂,能够专一性的抑制N-型钙离子通道,阻断伤害性刺激的传导,对实验性骨关节损伤炎性疼痛具有显著的抗伤害性效应。

关键词： HWTX-I 钙通道拮抗剂运动性骨关节损伤抗伤害作用