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产褥期抑郁樽型的建立及白藜芦醇对抑郁症的治疗干预

产褥期抑郁樽型的建立及白藜芦醇对抑郁症的治疗干预

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作者：汪磊江苏大学

学位级别：硕士

第一部分产褥期抑郁模型的建立[目的]探究产褥期抑郁(Postpartum Depression,PPD)模型的最佳建立方法,为产褥期抑郁症的发病机制及治疗的研究提供科学有效的动物模型。[方法]成年雌性ICR妊娠(Gestation,G)小鼠根据不同的干预时间段随机... 详细信息

第一部分产褥期抑郁模型的建立[目的]探究产褥期抑郁(Postpartum Depression,PPD)模型的最佳建立方法,为产褥期抑郁症的发病机制及治疗的研究提供科学有效的动物模型。[方法]成年雌性ICR妊娠(Gestation,G)小鼠根据不同的干预时间段随机分成六组,每个时间段再分为给药组和对照组,给药组分别于妊娠第1天至妊娠第10天(G1-G10)、妊娠第1天至妊娠第21天(G1-G21)、妊娠第1天至产后(Postpartum,P)第 21 天(G1-P21)、妊娠第 10 天至妊娠第 21 天(G10-G21)、妊娠第10天至产后第21天(G10-P21)和产后第1天至产后第21天(P1-P21)连续皮下注射皮质酮构建产褥期抑郁症模型,对照组分别于相应时期注射等量的芝麻油,模型建立完成后分别进行旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验、悬尾实验等行为学实验验证产褥期抑郁症模型的构建效果。[结果]行为学实验结果显示:强迫游泳实验中G1-G21、G1-P21、G10-G21和G10-P21皮下注射皮质酮组小鼠的静止不动时间明显比对照组增加;悬尾实验中,G1-G21、G1-P21和G10-P21皮下注射皮质酮组小鼠的静止不动时间明显比对照组增加;高架十字迷宫实验中,G10-G21皮质酮注射组小鼠在开放臂的次数比对照组增加,G1-P21皮质酮注射组小鼠进入开放臂的次数比对照组小;旷场实验中,G1-G10皮质酮注射组小鼠运动的总距离以及在中间区域活动的次数都明显大于对照组小鼠,G10-G21皮质酮注射组小鼠运动的总距离明显大于对照组小鼠,P1-P21皮质酮注射组小鼠在中心区域活动的频率明显低于对照组。据实验统计,在妊娠前期(即G1-G10)给予小鼠高剂量皮质酮可导致较高的流产率和母鼠的死亡率。[结论]在G1-G21、G1-P21、G10-G21和G10-P21等四个时间段给予连续皮下注射皮质酮均能诱导抑郁样行为的产生,因妊娠前期给药可导致母鼠高流产率和死亡率,所以,G10-G21和G10-P21可作为产褥期抑郁症模型构建的最佳时间靶点;在G1-P21和P1-P21两个时间段给予连续皮下注射皮质酮均能诱导焦虑样行为的发生,除去妊娠前期给药时间段,P1-P21可作为产褥期焦虑模型构建的最佳时间靶点。第二部分白藜芦醇对抑郁症的治疗干预[目的]探索一种多酚类复合物—白藜芦醇拮抗抑郁症模型小鼠伴发的认知功能障碍及其可能的机制。[方法]成年雄性C57BL/6J小鼠,随机分成四组,分别为对照组(Control)、模型组(Model)、模型+白藜芦醇组(Model+ RSV)、模型+烟酰胺+白藜芦醇组(Model+ NA + RSV),除对照组外,其余三组连续皮下注射皮质酮21天,构建抑郁症动物模型,对照组给予皮下注射等量的生理盐水,注射完成后行糖水偏好实验,验证模型的建立情况,模型建立成功后,模型+白藜芦醇组给予连续强饲白藜芦醇21天,模型+烟酰胺+白藜芦醇组连续强饲白藜芦醇的同时给予腹腔注射烟酰胺21天,应用新物体识别实验、新位置识别实验、水迷宫实验等行为学实验检测小鼠的认知功能。行为学结束后处死小鼠,取脑中海马组织,分别行RT-PCR、western bolting检测海马中沉默信息调节因子2相关酶，(SIRT1),过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)及小清蛋白(PV)的转录和蛋白的表达情况。[结果]小鼠连续皮下注射皮质酮诱导抑郁症模型完成后,进行糖水偏好实验验证抑郁模型构建情况,结果显示模型组小鼠对糖水的消耗百分比明显大于模型组小鼠;继续给予白藜芦醇和烟酰胺后,进行行为学实验,在新物体识别实验中,模型组小鼠对新物体的探索次数比明显低于对照组,而模型+白藜芦醇组小鼠对新物体的探索次数比明显大于模型组;在新位置识别实验中,模型组小鼠对新位置的探索次数比、探索时间比、探索距离比以及新位置的站立次数比都明显低于对照组,而模型+白藜芦醇组能够逆转模型组小鼠对新位置探索次数比、探索时间比、探索距离比以及新位置的站立次数比的减低,事先给予烟酰胺的模型+烟酰胺+白藜芦醇组则不能逆转抑郁模型小鼠对新位置探索次数比、探索时间比、探索距离比以及新位置的站立次数比的降低;在水迷宫实验中,模型组小鼠找到平台的平均时间、平均运动距离明显大于对照组,而模型+白藜芦醇组小鼠则能逆转模型组小鼠寻找平台平均时间、平均运动距离的增加,事先给予烟酰胺的模型+烟酰胺+白藜芦醇组则不能逆转模型组寻找平台时间的增加;在水迷宫探测实验中,模型组小鼠在平台所在的目标象限探索的次数明显低于对照组,而给予白藜芦醇后,抑郁模型小鼠显著增加了在平台所在的目标象限探索的次数;模型组小鼠显著降低了海马组织中SIRT1,PGC-1α及PV蛋白的表达,而白藜芦醇显著增加了抑郁模型伴随的SIRT1,PGC-1α及PV蛋白表达水平,烟酰胺显著降低了白藜芦醇诱导的SIRT1

关键词：产褥期抑郁症动物模型皮质酮白藜芦醇认知沉默信息调节因子2相关酶Ⅰ 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1 α 小清蛋白

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