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过氧化物还原酶4在胃癌中的表达及其意义的生物信息学研究

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肿瘤预防与治疗 2024年第2期37卷 110-120页

作者：张博凯王子雨李佳芪宗咏花王骁胡晓松李娟成都医学院临床医学院临床医学系成都610500 成都医学院公共卫生学院预防医学系成都610500 成都医学院基础医学院成都610500 西藏藏医药大学藏医系拉萨850000

目的:通过生物信息学途径探究过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,PRDX4)在胃癌(gastric cancer,GC)中的表达及其意义,并通过免疫组织化学检测63例GC患者肿瘤组织中PRDX4的表达情况。方法:从Ualcan数据库获取正常胃组织及原发性胃癌组织PR... 详细信息

目的:通过生物信息学途径探究过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,PRDX4)在胃癌(gastric cancer,GC)中的表达及其意义,并通过免疫组织化学检测63例GC患者肿瘤组织中PRDX4的表达情况。方法:从Ualcan数据库获取正常胃组织及原发性胃癌组织PRDX4表达数据,在LinkedOmics中检索PRDX4的共表达基因,并通过GO富集分析、KEGG通路分析确定这些基因参与的生物学过程及功能,利用STRING数据库分析相关基因编码蛋白的互作网络。最后利用GEPIA数据库分析PRDX4表达与胃癌患者预后的关系;纳入2022年1月至2022年10月在成都医学院第一附属医院就诊的63例GC患者,通过MaxVision法对GC肿瘤组织及其周围正常组织进行PRDX4表达情况的免疫组化染色并观察结果。结果:Ualcan数据库显示,与周围正常胃组织相比,PRDX4在GC组织中高度表达(P4共表达基因主要与生物调节、代谢过程、刺激反应等分子生物学过程存在紧密联系,并与ErbB、Hippo、Hedgehog等信号通路及各种癌症通路显著相关。多个GC相关基因编码蛋白与PRDX4所编码蛋白存在互作关系。经免疫组化分析,PRDX4在63例GC患者的GC组织中高度表达。结论:PRDX4在GC组织中高表达,且与GC的发生和发展密切相关,有望成为GC筛选的一项标志物。

关键词：过氧化物还原酶4 胃癌生物标记生物信息学

过氧化物还原酶4在口腔鳞癌中的表达及临床意义

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北京口腔医学 2021年第1期29卷 7-12页

作者：于玢玢王丽珍吴开柳池政兵严明上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔颌面头颈肿瘤科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔病理科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院儿童口腔科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的研究过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,PRDX4)在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义。方法通过苏木素-伊红染色方法明确口腔鳞癌患者手术中所取组织的病理类型,荧光定量PCR实验检测30例口腔鳞癌患者正常组织和肿瘤组织中PRDX4的表达,... 详细信息

目的研究过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,PRDX4)在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义。方法通过苏木素-伊红染色方法明确口腔鳞癌患者手术中所取组织的病理类型,荧光定量PCR实验检测30例口腔鳞癌患者正常组织和肿瘤组织中PRDX4的表达,通过免疫组织化学实验检测101例正常和口腔鳞癌组织中PRDX4的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果荧光定量PCR实验结果显示,PRDX4在正常组织中的2^(-△CT)值为2.064±0.2023,在口腔鳞癌组织中的2^(-△CT)值为4.170±0.2866(P4表达强度与口腔鳞癌患者生存率(P=0.0132)、淋巴结转移(P=0.0033)和组织病理分级(P=0.0353)显著相关。结论PRDX4在口腔鳞癌组织中高表达,且与患者不良预后存在密切关系。

关键词：口腔鳞癌过氧化物还原酶4 免疫组织化学实验预后

过氧化物还原酶4在大肠癌组织中的表达及其意义

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交通医学 2014年第6期28卷 593-595页

作者：易楠肖明兵江枫倪润洲南通大学附属医院消化内科江苏226001

目的:研究过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prx4)在大肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测59例手术切除大肠癌及26例癌旁正常组织中Prx4蛋白的表达情况,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果:大肠癌组织中P... 详细信息

目的:研究过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prx4)在大肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测59例手术切除大肠癌及26例癌旁正常组织中Prx4蛋白的表达情况,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果:大肠癌组织中Prx4蛋白阳性率明显高于相应的癌旁组织(P4蛋白的表达强度与大肠癌的肿瘤浸润深度、淋巴转移、Dukes分期及生存期均有相关性(P4在大肠癌组织中表达水平高于癌旁正常组织,并与是否伴有淋巴转移、肿瘤浸润深度和Dukes分期有关,提示Prx4与大肠癌的发生发展有关。

关键词：大肠癌过氧化物还原酶4 免疫组织化学法预后

刺参中过氧化物还原酶peroxiredoxin4的抗氧化活性分析

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食品安全质量检测学报 2020年第21期11卷 7816-7820页

作者：孙晶熊爽赵健杨韬吴志刚凌平辽宁省重要技术创新与研发基地建设工程中心沈阳110168

目的研究刺参中过氧化物还原酶4(peroxiredoxin4,Prx4)的抗氧化活性。方法利用生物信息学方法对刺参peroxiredoxin4一级结构进行分析,克隆并表达重组刺参peroxiredoxin4蛋白,构建DTT/Fe3+/O2混合功能氧化酶体系,确定重组刺参peroxiredox... 详细信息

目的研究刺参中过氧化物还原酶4(peroxiredoxin4,Prx4)的抗氧化活性。方法利用生物信息学方法对刺参peroxiredoxin4一级结构进行分析,克隆并表达重组刺参peroxiredoxin4蛋白,构建DTT/Fe3+/O2混合功能氧化酶体系,确定重组刺参peroxiredoxin4蛋白功能。结果刺参peroxiredoxin4氨基酸序列含有活性Cys,且活性Cys位于Prx4保守基序FYPLDFTFVCPTEI和HGEVCPAGW中,克隆得到的重组刺参peroxiredoxin4蛋白能够保护DNA免遭氧化剂损伤。结论重组刺参peroxiredoxin4蛋白具有抗氧化生物学活性。

关键词：刺参过氧化物还原酶4 克隆表达抗氧化

过氧化物还原酶参与调控小龙虾先天免疫的分子机制研究

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过氧化物还原酶参与调控小龙虾先天免疫的分子机制研究

作者：杨兵兵内蒙古科技大学

学位级别：硕士

克氏原螯虾养殖业是我国沿海地区重要的支柱产业。近年来,以克氏原螯虾为代表的海洋无脊椎动物养殖业迅速发展,但是由病原微生物引起的各种疾病给这些养殖业带来了巨大损失。如何提高养殖品种的抗病性能,是当前水产养殖业的重要课题。... 详细信息

克氏原螯虾养殖业是我国沿海地区重要的支柱产业。近年来,以克氏原螯虾为代表的海洋无脊椎动物养殖业迅速发展,但是由病原微生物引起的各种疾病给这些养殖业带来了巨大损失。如何提高养殖品种的抗病性能,是当前水产养殖业的重要课题。甲壳类动物主要依靠先天性免疫(Innate immunity)来抵御病原微生物的入侵,因此,需要深入研究克氏原螯虾的先天免疫应答机制,为克氏原螯虾相关产业的病害防控提供理论参考与技术支持。本研究基于克氏原螯虾转录组测序获得过氧化物还原酶4基因(Pc-Prx 4)的c DNA全长序列,通过生物信息学分析,发现过氧化物还原酶4在不同物种间相对保守并有信号肽序列;通过q RT-PCR技术,发现Pc-Prx 4在克氏原螯虾心脏中相对表达量最高;通过哈维氏弧菌刺激后,发现Pc-Prx 4在不同组织中显著上调表达;同时,肝胰腺、鳃组织中的HO水平也发生明显上调。通过基因克隆、蛋白纯化等相关技术手段,研究发现Pc-PRX 4体外重组蛋白能够保护DNA分子免受ROS的损伤,具有一定的生物酶活性。通过RNA干扰技术敲低Pc-Prx 4之后,未注射哈维氏弧菌时发现会使克氏原螯虾体内HO水平异常升高;注射哈维氏弧菌克氏原螯虾体内HO含量较未注射哈维氏弧菌克氏原螯虾体内的HO含量升至更高,同时,克氏原螯虾的存活率增加;而且,黑化途径、活性氧途径、细胞凋亡途径、Toll途径相关的基因发生上调表达。此外,敲低Pc-Prx 4之后,注射哈维氏弧菌之后再注射抗氧化剂NAC,克氏原螯虾体内HO水平明显下调,而且克氏原螯虾的存活率降低;同时,黑化途径、细胞凋亡途径、Toll途径相关的基因发生下调表达。以上实验结果表明,Pc-PRX 4是克氏原螯虾抗氧化系统中重要的调节酶,它可以通过调节HO的水平来影响克氏原螯虾的抗细菌先天免疫反应。本研究明确了Pc-PRX 4在克氏原螯虾先天免疫反应中所发挥的重要作用,并且发现了HO可以调节Toll、黑化、细胞凋亡等途径,这为无脊椎动物抗细菌先天免疫系统的基础理论做出了重要补充,也为克氏原螯虾细菌性疾病的防控提供了理论依据。

关键词：克氏原螯虾过氧化物还原酶4 RNA干扰抗细菌先天免疫

日本囊对虾过氧化物还原酶Ⅳ抗病毒与抑菌功能的机制研究

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日本囊对虾过氧化物还原酶Ⅳ抗病毒与抑菌功能的机制研究

作者：高林山东大学

学位级别：硕士

研究背景近年来,以对虾为代表的海洋无脊椎动物养殖业迅速发展,其中日本囊对虾作为一种经济价值非常高的对虾养殖品种,每年可以为水产养殖业带来巨额利润。然而,对虾养殖业的迅速发展,导致与病毒、真菌和细菌有关的各种疾病的爆发显著增... 详细信息

研究背景近年来,以对虾为代表的海洋无脊椎动物养殖业迅速发展,其中日本囊对虾作为一种经济价值非常高的对虾养殖品种,每年可以为水产养殖业带来巨额利润。然而,对虾养殖业的迅速发展,导致与病毒、真菌和细菌有关的各种疾病的爆发显著增加,尤其是白斑综合征病毒（Whitespotsyndromevirus,WSSV）、黄头病毒（Yellow head virus）、鳗弧菌（Vbrio anguillarum）等,给这一产业带来了巨大损失。因此通过深入研究对虾的先天免疫机制,可以为目前的对虾养殖业病害防治提供理论上的依据以及技术上的支持。科学问题与研究意义过氧化物还原酶Ⅳ（Peroxiredoxin,Prx4）,是一类在生物体内广泛分布的硫醇依赖性的抗氧化酶,虽然有研究报道其参与了动物的免疫过程,但是在对虾的抗病毒和抗细菌免疫中发挥的具体功能和机制还不清楚。深入探究日本囊对虾过氧化物还原酶Ⅳ（MjPrx4）在对虾免疫中的功能和机制可以为了解Prx4蛋白在甲壳动物抗病毒或抗细菌免疫中的功能以及相关疾病的控制和药物开发提供帮助。研究结果一、MjPrx4通过与病毒极早期蛋白IE1相互作用从而抑制IE1的DNA结合活性并抑制病毒的复制。在这项研究中,我们首次发现MjPrx4在白斑综合征病毒感染后可以进入细胞核,并且与WSSV的极早期基因1（Immediate-early gene 1,IE1）蛋白相互作用。通过与WSSV IE1的DNA结合位点竞争性结合抑制其DNA结合活性,进而抑制了对虾体内病毒的复制。此外,通过死亡率实验,免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）,凝胶迁移实验（Electrophoretic mobility shift assay,EMSA）和突变体实验表明,MjPrx4的抗病毒活性需要MjPrx4二聚体的形成。我们进一步发现,MjPrx4的二聚体形成和核移位是由于病毒感染引起的H2O2浓度增加,而通过N-乙酰基-L-半胱氨酸（N-Acetyl-L-cysteine,NAC）处理之后抑制了MjPrx4的二聚体形成和核移位,并导致对虾体内病毒滴度的升高。二、MjPrx4通过激活JAK/STAT途径调节抗菌肽表达发挥抗菌免疫的功能。在此研究中,我们通过表达模式分析发现MjPrx4在受到细菌尤其是革兰氏阴性菌的刺激后在细胞内表达量显著升高,并且在细胞外血淋巴中的含量增加。使用双链RNA干扰技术敲低对虾体内MjPrx4表达后,鳗弧菌感染会引起对虾体内细菌数量增加,对虾的死亡率显著升高。此外干扰MjPrx4的表达,会抑制由鳗弧菌感染引起的转录因子STAT的磷酸化以及核移位,并且抑制STAT下游五种效应抗菌肽（Antimicrobial peptide,AMP）的表达,同时,抗体封闭和外源注射MjPrx4及其突变体实验,发现胞外的MjPrx4通过Dome受体促进转录因子STAT的入核以及抗菌肽的表达。以上的实验结果说明在弧菌刺激下分泌至胞外的MjPrx4会通过Dome受体激活JAK/STAT途径,引起抗菌肽的表达,从而发挥抗细菌的免疫功能。研究创新点及总结本论文主要研究并阐明了MjPrx4在对虾中抗病毒和抗细菌免疫的功能和分子机制。创新点总结如下:1、我们的研究首次揭示了MjPrx4蛋白通过与病毒极早期蛋白IE1互作,进而抑制病毒复制的新机制。研究发现WSSV感染可以促进MjPrx4进入细胞核,并以二聚体依赖的方式与WSSV IE1的DNA结合位点竞争性结合并抑制其DNA结合活性,从而抑制了对虾体内病毒的复制。2、证明了细菌刺激可以引起MjPrx4蛋白释放至胞外,并通过Dome受体激活JAK/STAT途径,促进转录因子STAT的磷酸化以及入核,从而引起下游抗菌肽的表达,发挥抗细菌免疫功能。

关键词：过氧化物还原酶4 白斑综合征病毒极早期基因1 DNA结合活性 H2O2 JAK/STAT 日本囊对虾鳗弧菌

Prdx4蛋白表达水平的改变对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响

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肿瘤 2017年第4期37卷 340-349页

作者：张丽袁伟燕石红琴龚小卫姜勇南方医科大学病理生理学教研室广东省蛋白质组学重点实验室广东广州510515

目的:探讨上调或沉默过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:利用脂质体瞬时转染法将重组质粒pcDNA3.0-HA-Prdx4(以空载体pcDNA3.0-HA为对照组)和特异性针对人Prdx 4基因的siR... 详细信息

目的:探讨上调或沉默过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:利用脂质体瞬时转染法将重组质粒pcDNA3.0-HA-Prdx4(以空载体pcDNA3.0-HA为对照组)和特异性针对人Prdx 4基因的siRNA(Prdx4-siRNA)(以阴性对照-siRNA为对照组)分别转染A549细胞;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测Prdx4 mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8法和免疫荧光技术分别检测A549细胞的增殖和凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell小室法检测A549细胞迁移能力的改变。结果:转入重组质粒pcDNA3.0-HA-Prdx4的A549细胞中Prdx4 mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P值均4-siRNA的A549细胞中Prdx4 mRNA和蛋白的表达水平明显下调(P值均4过表达的A549细胞在24、48和72 h时的D 450 nm值均明显高于对照组(P值均450 nm值(2.241±0.068和1.596±0.103)差异更加明显(P4表达后A549细胞在48、72和96 h时的D 450 nm值明显低于对照组(P值均4过表达的A549细胞在顺铂刺激24和48 h后凋亡细胞数与对照组相比明显减少,差异均具有统计学意义(P4表达的A549细胞在顺铂刺激24和48 h后,凋亡细胞数明显多于对照组(P4过表达A549细胞的愈合率明显高于对照组(P4表达的A549细胞的愈合率明显低于对照组(P4过表达的A549细胞穿过小室膜的细胞数明显多于对照组(P4表达的A549细胞穿过小室膜的细胞数明显少于对照组(P4可促进A549细胞的增殖和迁移并抑制其凋亡,其有可能成为临床治疗肺腺癌的一个潜在靶点。

关键词：癌,非小细胞肺过氧化物还原酶4 细胞增殖细胞凋亡细胞运动

Prdx4蛋白表达改变对HeLa细胞迁移和侵袭的影响

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中国病理生理杂志 2016年第4期32卷 637-643页

作者：袁伟燕张丽石红琴龚小卫姜勇南方医科大学病理生理学教研室广东省蛋白质组学重点实验室广东广州510515

目的:观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达的改变对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pc DNA3.0-HA-Prdx4转染HeLa细胞;LV-Prdx4 RNAi重组病毒感染HeLa细胞,构建Prdx4 shRNA HeL... 详细信息

目的:观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达的改变对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pc DNA3.0-HA-Prdx4转染HeLa细胞;LV-Prdx4 RNAi重组病毒感染HeLa细胞,构建Prdx4 shRNA HeLa细胞系沉默Prdx4的表达;用蛋白质印迹法证实Prdx4蛋白表达水平的变化;应用划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别检测细胞迁移及侵袭能力的变化。结果:pc DNA3.0-HA-Prdx4质粒转染组He La细胞的Prdx4蛋白表达水平明显上调(P4 shRNA HeLa稳定干扰细胞系Prdx4表达水平明显下调(P4过表达组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显增强,与空白对照组及空载体转染组比较,差异显著(P4表达干扰组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制,与空白对照组及阴性对照组比较,差异显著(P4蛋白表达水平可促进HeLa细胞的迁移和侵袭,在宫颈癌的发生和发展过程中可能起重要作用;下调Prdx4蛋白表达水平可以明显抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力,Prdx4有可能成为临床治疗宫颈癌的一个潜在靶点。

关键词：宫颈癌过氧化物还原酶4 细胞迁移细胞侵袭

不同期别矽肺患者肺泡巨噬细胞PRDX4表达差异

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中华劳动卫生职业病杂志 2021年第1期39卷 17-19页

作者：韩科杜胜强王焕乔洁洁张旭汪鹏沈福海华北理工大学公共卫生学院河北省煤矿卫生与安全实验室唐山063210

目的探讨不同期别矽肺患者肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs)过氧化物还原酶4(PRDX4)表达的差异。方法于2017年6月至2018年6月,采用随机抽样方法选取中国煤矿工人北戴河疗养院尘肺科就诊的12名矽肺患者作为研究对象,分为肺内粉尘... 详细信息

目的探讨不同期别矽肺患者肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs)过氧化物还原酶4(PRDX4)表达的差异。方法于2017年6月至2018年6月,采用随机抽样方法选取中国煤矿工人北戴河疗养院尘肺科就诊的12名矽肺患者作为研究对象,分为肺内粉尘沉着症组、矽肺壹期组、矽肺贰期组、矽肺叁期组共4组,每组3人。取其肺灌洗液经过滤、离心得到AMs,提取胞内蛋白,以蛋白免疫印迹(Western blotting)方法对PRDX4进行检测,结果进行统计学分析。结果肺内粉尘沉着症组、矽肺壹期组、矽肺贰期组、矽肺叁期组患者的AMs中PRDX4均有表达;4组患者AMs中PRDX4蛋白平均相对表达量分别为0.258±0.026、0.214±0.012、0.180±0.004、0.165±0.008,差异有统计学意义(P氧化应激损伤与矽肺的发生发展关系密切,PRDX4在不同期别矽肺患者AMs中存在差异表达,应对氧化应激指标监测,以便预测矽肺发病和评估预后。

关键词：矽肺肺灌洗液过氧化物还原酶4 蛋白免疫印迹法