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响应面法优化辣木叶中水溶性蛋白提取工艺研究

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云南农业大学学报（自然科学版） 2020年第1期35卷 130-138页

作者：代佳和罗旋飞史崇颖赵存朝盛军田洋陶亮云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学云南省茶深加工工程技术研究中心云南昆明650201 国家辣木加工技术研发专业中心云南昆明650201

【目的】辣木总蛋白含量高,但溶解差,水溶性蛋白提取率低,本研究采用超声波辅助酸溶法提取辣木叶中水溶性蛋白。【方法】以辣木叶为原料,分析超声波功率、超声时间、提取温度、水浴时间和溶液pH值6个因素对其水溶性蛋白提取率的影响,在... 详细信息

【目的】辣木总蛋白含量高,但溶解差,水溶性蛋白提取率低,本研究采用超声波辅助酸溶法提取辣木叶中水溶性蛋白。【方法】以辣木叶为原料,分析超声波功率、超声时间、提取温度、水浴时间和溶液pH值6个因素对其水溶性蛋白提取率的影响,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化酸法提取辣木蛋白的最佳工艺条件。【结果】响应面优化结果表明:对蛋白提取率的影响依次为溶液pH>料液比>超声时间>水浴温度,最优提取条件为料液比1∶70(g∶mL)、超声波功率300 W、超声时间30 min、浸提水浴温度53℃、溶液pH 1.4、水浴浸提时间60 min,此条件下的水溶性蛋白提取率最高,可达(79.36±1.13)mg/g,与预测值80.194 mg/g基本相符。【结论】本研究提高了水溶性蛋白的提取率,对辣木产业发展及蛋白系列产品开发及蛋白活性研究具有一定的促进意义。

关键词：辣木叶超声波水溶性蛋白质提取率

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辣木叶中α-淀粉酶抑制物的提取工艺

食品工业 2019年第8期40卷 118-122页

作者：钟英英谢勇鹏郭莎莎魏小月陆嘉欣叶云广西科技大学生物与化学工程学院

为探讨辣木叶中α-淀粉酶抑制物的最佳提取工艺条件,以对α-淀粉酶的抑制率为评价指标,对影响因素进行研究并通过正交试验法确定α-淀粉酶抑制物提取的最佳工艺。利用Lineweaver-Burk双倒数作图法,考察辣木叶乙醇提取物对α-淀粉酶的抑... 详细信息

为探讨辣木叶中α-淀粉酶抑制物的最佳提取工艺条件,以对α-淀粉酶的抑制率为评价指标,对影响因素进行研究并通过正交试验法确定α-淀粉酶抑制物提取的最佳工艺。利用Lineweaver-Burk双倒数作图法,考察辣木叶乙醇提取物对α-淀粉酶的抑制类型。结果表明,辣木叶中α-淀粉酶抑制物提取的最优工艺条件为:乙醇体积分数40%、料液比1︰50 (g/mL)、提取温度50℃、提取时间500 s。在此条件下,辣木叶乙醇提取物对α-淀粉酶的抑制率为65.13%。辣木叶提取物对α-淀粉酶的抑制类型为可逆性混合非竞争性抑制类型。辣木叶提取物对α-淀粉酶有较好的抑制作用,具有较好的潜在药用价值。

关键词：辣木叶 α-淀粉酶抑制物工艺优化

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辣木叶植物化学物质分析及体外生物活性研究

辣木叶植物化学物质分析及体外生物活性研究

作者：郭妍昆明理工大学

学位级别：硕士

辣木叶于2012年被我国卫生部批准为新资源食品,含有丰富的植物化学物质,具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血压、降血糖等功效。本论文以云南辣木叶为原料,研究了辣木叶提取物(MLE)植物化学物质的组成及含量;采用ABTS、DPPH自由基清除能力和F... 详细信息

辣木叶于2012年被我国卫生部批准为新资源食品,含有丰富的植物化学物质,具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血压、降血糖等功效。本论文以云南辣木叶为原料,研究了辣木叶提取物(MLE)植物化学物质的组成及含量;采用ABTS、DPPH自由基清除能力和FRAP三种抗氧化体系相结合的方式评价了其抗氧化能力;同时测定了其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用;并研究了其对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的小鼠RAW264.7细胞NO释放量及相关基因iNOS的表达量。主要研究结果如下:1.主要对MLE总酚含量、植物化学物质组成及含量进行了测定分析,总酚含量为20.16 mg GAE/g DW,并鉴定出39种植物化学物质。包括8种有机酸、2种氨基酸、2种羟基苯甲酸、6种羟基肉桂酸、14种黄酮醇、2种黄酮和5种硫代葡萄糖苷。表明MLE富含一定量的植物化学物质,并且植物化学物质种类丰富。MLE富含柠檬酸和苹果酸,含量分别为199.71和658.86μg/g DW。亚麻酸和亚油酸的含量较高,分别为506.46和192.30μg/g DW;MLE中绿原酸含量较高,达2218μg/g DW。MLE还富含阿魏酰奎宁酸和香豆酰奎宁酸,含量分别为900.98和878.30μg/g DW。此外,MLE富含异硫氰酸酯,达3688.31μg/g DW。其中,乙酰基-苄基菊糖异硫氰酸酯含量最高,为1152.81μg/g DW。2.运用三种抗氧化体系测定了MLE的抗氧化活性,Vc作为阳性对照。结果发现,在DPPH自由基清除体系中,MLE和Vc的IC值分别为5.18和3.31μg/mL。MLE清除DPPH自由基活性略低于Vc。而且显示出较高的ABTS自由基清除活性,IC50值为2.44μg/mL。FRAP体系中,MLE和Vc的IC值分别为2.66和1.05μg/mL,其抗氧化能力的顺序是Vc>MLE。3.测定了不同浓度MLE溶液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制活性。结果表明MLE对金黄色葡萄球菌具有良好的抑制作用,且抑制作用与浓度间呈现量效关系;当浓度为50和500μg/mL时,抑制率分别达到41.28%和84.82%。而浓度为50-500μg/m L的MLE对大肠杆菌无抑制作用。4.在LPS诱导的RAW264.7细胞中添加不同浓度的MLE均对iNOS mRNA的表达产生了一定影响。当其浓度为40μg/mL时,对iNOS mRNA表达的抑制效果比较明显。并且随着浓度的增加抑制效果更为明显,说明MLE对iNOS mRNA表达量的抑制作用呈现浓度依赖趋势,这与MLE对RAW264.7细胞NO释放量的影响趋势相一致。由此可见,MLE可以通过抑制iNOS mRNA的表达实现对NO释放量的抑制,从而证明MLE具有抗炎作用。

关键词：辣木叶植物化学物质抗氧化抗菌抗炎

辣木叶醇提物调节ZDF大鼠下丘脑摄食中枢的机制研究

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辣木叶醇提物调节ZDF大鼠下丘脑摄食中枢的机制研究

作者：董笑克北京中医药大学

学位级别：硕士

目的研究不同剂量的辣木叶醇提物对自发型肥胖型2型糖尿病ZDF大鼠糖脂代谢的调节作用及食欲抑制作用,并从下丘脑摄食相关信号通路及其下游调控蛋白出发,探究辣木叶对下丘脑摄食中枢的调节机制。方法6周龄雄性ZL大鼠8只为正常对照组（No... 详细信息

目的研究不同剂量的辣木叶醇提物对自发型肥胖型2型糖尿病ZDF大鼠糖脂代谢的调节作用及食欲抑制作用,并从下丘脑摄食相关信号通路及其下游调控蛋白出发,探究辣木叶对下丘脑摄食中枢的调节机制。方法6周龄雄性ZL大鼠8只为正常对照组（Nor）大鼠,6周龄雄性ZDF大鼠50只适应性饲养1周后,采用Purina5008饲料诱导4周,4周后根据血糖水平筛选糖尿病模型大鼠,并采用区组随机法分为模型组（Con）、西药组（Met）、辣木叶醇提物低剂量组（EoM1）、辣木叶醇提物中剂量组（EoMm）、辣木叶醇提物高剂量组（EoMh）,每组大鼠各8只。分组完成后西药组给予0.18g·kg-1·d-1二甲双胍水溶液灌胃,EoM1组给予150mg · kg-1 · d-1辣木叶醇提物混悬液灌胃,EoMm组给予300mg · kg-1 · d-1辣木叶醇提物混悬液灌胃,EoMh组给予600 mg · kg-1 · d-1辣木叶醇提物混悬液灌胃,药物总体积为3ml/只,模型组及正常组大鼠予等量生理盐水灌胃,共干预6周,干预期间监测大鼠血糖、体重、进食量。干预结束后大鼠麻醉处死,取血清检测糖脂代谢相关指标,下丘脑组织-80℃冻存进行PCR、WB检测。结果ZDF大鼠血糖、血脂、胰岛素、肝功能、OGTT血糖、AUC、血清糖化蛋白、瘦素等指标显著高于ZL大鼠（P＜0.01）,从给药第三周开始,辣木叶治疗组血糖、体重显著低于模型组,治疗组4组体重增加量显著低于模型组（p＜0.05）;OGTT实验、AUC结果,治疗组均显著低于模型组（P＜0.05）;治疗组血清空腹胰岛素、血清糖化蛋白、瘦素均显著低于模型组（P＜0.01）;HOMA稳态模型结果显示,治疗组HOMA-IR显著低于模型组,HOMA-IS显著高于模型组;血脂结果显示,辣木叶能降低大鼠总胆固醇及甘油三脂水平（P＜0.05）;大鼠肝脏转氨酶的结果提示,辣木叶能降低大鼠肝脏转氨酶水平（P＜0.05）。组织学观察发现辣木叶能增加ZDF大鼠肝糖原合成,减少肝脏脂肪含量,保护胰岛细胞。对辣木叶抑制摄食的研究结果显示,辣木叶组及二甲双胍组大鼠进食量均显著下降（p＜0.01）;下丘脑组织PCR及WB结果显示,辣木叶及二甲双胍可以通过促进IRS-PI3K-AKT-Fox01信号通路蛋白磷酸化水平（P＜0.05）,从而增加大鼠下丘脑POMC蛋白表达增加（P＜0.05）,降低NPY蛋白表达（P＜0.01）,增加下丘脑黑皮素受体基因转录（P＜0.01）,并增加食欲素及促甲状腺激素释放激素的基因转录（P＜0.01）,从而起到抑制食欲的作用。结论1、辣木叶醇提物具有降低大鼠血糖、体重的作用,能显著大鼠改善胰岛素抵抗,增加肝糖原合成,保护胰岛细胞,改善ZDF大鼠糖代谢。2、辣木叶能降低大鼠总胆固醇、甘油三酯,减少肝脏脂肪堆积,保护肝脏,降低肝脏转氨酶,改善ZDF大鼠脂代谢。3、辣木叶能通过调节下丘脑胰岛素信号通路,上调POMC蛋白表达,下调AgRP的蛋白表达,增加黑皮素受体基因转录,进而增加促甲状腺激素释放激素基因转录,抑制食欲素基因转录,起到抑制大鼠食欲、减少进食、降低体重的作用。

关键词：辣木叶摄食中枢糖尿病 FoxO1 POMC NPY

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辣木叶的化学成分和质量评价方法研究

辣木叶的化学成分和质量评价方法研究

作者：许琳暨南大学

学位级别：硕士

辣木(Moringa oleifera Lam)又称鼓槌树,为辣木科(Moringaceae)辣木属(Moringa)植物,原产于非洲东部及印度北部,在我国台湾、海南、广东、云南等省区有引种。辣木的根、茎、叶、花及种子均可入药,具有广泛的药理活性。其中,辣木叶具有... 详细信息

辣木(Moringa oleifera Lam)又称鼓槌树,为辣木科(Moringaceae)辣木属(Moringa)植物,原产于非洲东部及印度北部,在我国台湾、海南、广东、云南等省区有引种。辣木的根、茎、叶、花及种子均可入药,具有广泛的药理活性。其中,辣木叶具有降血糖、抗炎、保肝、抗氧化、抗肿瘤等多种功效。化学成分研究表明,辣木叶中主要含有黄酮及其苷、酚类及酚苷、氨基酸和维生素等化学成分。近年来,随着辣木叶被国家卫生和计划生育委员会批准为新资源食品,市场上出现了很多由辣木叶粗加工而成的保健食品,但目前辣木叶的质量控制标准尚不完善,故其产品质量难以得到保障。为明确辣木叶的特征性成分,为其质量标准的建立提供物质基础和科学依据,本论文开展了相关研究工作并取得如下研究结果:1.在HPLC图谱指导下,对辣木叶中的主要化学成分进行了研究。采用多种色谱分离技术共分离得到21个化合物,并通过现代波谱技术鉴定了它们的结构,分别为:山柰酚(LM-1)、异牡荆素(LM-2)、牡荆素(LM-3)、紫云英苷(LM-4)、异槲皮素(LM-5)、维采宁-2(LM-6)、槲皮素3-O-6’’-(3-羟基-3-甲基-戊二酸单酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(LM-7)、山柰酚3-O-(6’’-丙二酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(LM-8)、槲皮素3-O-(6’’-丙二酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(LM-9)、苄基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(LM-10)、对羟基苯甲酸葡萄糖苷(LM-11)、没食子酸(LM-12)、marumoside B(LM-13)、5-咖啡酰奎宁酸(LM-14)、3-咖啡酰奎宁酸(LM-15)、4-咖啡酰奎宁酸(LM-16)、L-苯丙氨酸(LM-17)、L-色氨酸(L M-18)、(–)-(1S,3S)-1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid(LM-19)、(–)-(1R,3S)-1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid(LM-20)和腺苷(LM-21)。以上化合物中,LM-6、LM-19和LM-20为首次从该植物中分离得到。2.在化学成分研究的基础上,对辣木叶UPLC特征指纹图谱的分析方法进行了研究。色谱条件如下:色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(3.0 mm×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.01%三氟乙酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.5 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为35°C。采用以上色谱条件,对14批次辣木叶样品进行了分析,共确定了14个共有峰,并利用分离得到的对照品和UPLC-MS技术对其中12个共有峰进行了化学确认。以异槲皮素为参照物峰(S),12个共有峰的相对保留时间分别为0.08(峰1,腺苷)、0.14(峰2,L-苯丙氨酸)、0.22(峰3,5-咖啡酰奎宁酸)、0.28(峰4,L-色氨酸)、0.42(峰5,4-咖啡酰奎宁酸)、0.65(峰6,维采宁-2)、0.94(峰7,牡荆素)、0.96(峰8,异牡荆素)、1.00(峰9,异槲皮素)、1.11[峰10,槲皮素3-O-(6’’-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷]、1.21(峰11,紫云英苷)和1.37[峰12,山柰酚3-O-(6’’-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷]。3.采用UPLC法建立了辣木叶中7个主成分(L-苯丙氨酸,5-咖啡酰奎宁酸,L-色氨酸,4-咖啡酰奎宁酸,维采宁-2,异槲皮素和紫云英苷)的含量测定方法。色谱条件同辣木叶的UPLC特征指纹图谱,利用外标一点法分别计算了14批次辣木叶中上述7个主成分的含量:L-苯丙氨酸的含量为0.39.20 mg/g,平均含量1.76 mg/g;5-咖啡酰奎宁酸的含量为1.22.46 mg/g,平均含量3.15 mg/g;L-色氨酸的含量为0.29.46 mg/g,平均含量1.07 mg/g;4-咖啡酰奎宁酸的含量为0.16.28 mg/g,平均含量1.14 mg/g;维采宁-2的含量为0.78.27 mg/g,平均含量2.19 mg/g;异槲皮素的含量为0.54.18 mg/g,平均含量1.43 mg/g;紫云英苷的含量为0.22.64 mg/g,平均含量0.93 mg/g。本论文在化学成分研究的基础上,建立了辣木叶的UPLC特征指纹图谱和含量测定方法。该方法操作简单、快速,具有良好的重现性和精确度,可较为全面地反映辣木叶的化学组成和各主成分的含量,可为辣木叶的质量控制提供科学依据。

关键词：辣木叶化学成分 UPLC 特征指纹图谱含量测定

辣木叶提取物对海产品中副溶血弧菌分离菌株的抗生物被膜作用的研究

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辣木叶提取物对海产品中副溶血弧菌分离菌株的抗生物被膜作用的研...

作者：刘欢华南农业大学

学位级别：硕士

生物被膜(Biofilm)是由微生物形成的被其自身分泌的胞外基质所包裹的一类群体,这种特殊结构能够抵御不良环境的影响,从而有助于微生物自身的生存。副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种常见的嗜盐性革兰氏阴性致病菌,是引起海鲜... 详细信息

生物被膜(Biofilm)是由微生物形成的被其自身分泌的胞外基质所包裹的一类群体,这种特殊结构能够抵御不良环境的影响,从而有助于微生物自身的生存。副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种常见的嗜盐性革兰氏阴性致病菌,是引起海鲜类食物中毒的主要原因,人感染后会引发急性肠胃炎、伤口感染和败血症等一系列疾病。副溶血弧菌形成生物被膜后,会增强其对不良环境的抗性,从而降低了抗生素的药效,增加了感染风险。辣木(Moringa oleifera)具有良好的抗菌活性,并被卫生部列为食品新资源,越来越受到食品研究领域的重视。因此,开发高效、安全、天然的抗生物被膜的物质具有重要的意义,而辣木就是良好的选择之一。本研究从广州市售海产品中分离鉴定副溶血弧菌,并对其耐药性和形成生物被膜的能力进行评估。从辣木叶中提取抗菌物质,筛选适宜的提取条件,分析其抑菌能力。通过结晶紫染色法、微量二倍肉汤稀释法、XTT比色法、荧光显微镜以及激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)等方法探究辣木叶提取物对副溶血弧菌分离菌株生物被膜的抑制和清除作用。具体研究内容及结果如下:广州市售海产品中副溶血弧菌的分离鉴定及其特性研究。采用国标GB4789.7—2013和16S rDNA测序比对法,从广州市售42份海产样品中分离鉴定出8株副溶血弧菌。分离菌株分布于各市区,主要来源于鱼和虾,分别有4株和3株,另外一株来源于蛤。考察了副溶血弧菌分离菌株对20种常见抗生素的耐药性,发现对多粘菌素B等8种抗生素均敏感,对青霉素、万古霉素2种抗生素均耐药,对其他10种抗生素有不同程度的耐药性。来源于鱼、虾中的菌株耐药性、多重耐药性均明显强于来源于蛤的菌株。分离菌株比ATCC 17802标准菌株的多重耐药性更显著。测定了分离菌株生物被膜形成能力,发现其与多重耐药性呈正相关。辣木叶抗菌物质的提取及抑菌作用的研究。利用超声辅助水提取法提取辣木叶中的抗菌物质,发现在料液比1:50、提取时间50 min、超声功率200 w、提取温度50℃的条件下提取的抗菌物质抑制副溶血弧菌标准菌株效果最好,抑菌圈达到24 mm,MIC为3.13 mg/mL。测定提取物中总多酚、总黄酮含量并分析其抗菌作用,发现对金黄色葡萄球菌等常见致病菌都具有很强的抑制能力,对保加利亚乳杆菌等乳酸菌以及真菌均无抑制效果。测定辣木叶水提物对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC)为6.25mg/mL2.5 mg/mL。辣木叶提取物对副溶血弧菌分离菌株生物被膜形成的抑制和清除作用。通过结晶紫染色法测定了分离菌株生物被膜被抑制和被清除的程度。结果表明,辣木叶提取物对分离菌株生物被膜形成、代谢活性具有较强的抑制作用,对成熟生物被膜亦具有清除作用。对不同菌株的抑制、清除效果有所差异。分析抑制和清除效果后,选取一株分离菌株进行后续的深入研究。利用荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察辣木叶提取物处理的副溶血弧菌分离菌株的生物被膜,结果表明:用辣木叶提取物处理的生物被膜中死细胞明显更多更密集,活细胞少且比较分散;添加不同浓度提取物处理的生物被膜,死活细胞的数量、分布也有差别。而且CLSM观察亦显示生物被膜上的胞外多糖明显减少,生物被膜厚度减小。两种显微镜的观察结果与上述抑制、清除率的测定结果具有一致性。揭示了辣木叶提取物通过抑制、杀死细菌以及破坏胞外多糖,从而对副溶血弧菌生物被膜具有抑制和清除作用。综上所述,辣木叶水提取物具有较好的抑菌作用,对副溶血弧菌生物被膜的形成具有抑制作用,且对其成熟生物被膜有一定的清除效果,具有重要的开发潜力及应用价值。

关键词：海产品副溶血弧菌辣木叶生物被膜抑制清除

辣木叶多酚类物质的提取、分离鉴定及抗氧化活性研究

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辣木叶多酚类物质的提取、分离鉴定及抗氧化活性研究

作者：吴迪河南工业大学

学位级别：硕士

辣木为辣木科辣木属多年生植物,原产于印度北部喜马拉雅山南麓地区。自20世纪60年代云南省开始对辣木引种栽培以来,我国种植推广力度逐步加大,辣木产业发展迅速。辣木叶中含有丰富的多酚类活性物质,具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂... 详细信息

辣木为辣木科辣木属多年生植物,原产于印度北部喜马拉雅山南麓地区。自20世纪60年代云南省开始对辣木引种栽培以来,我国种植推广力度逐步加大,辣木产业发展迅速。辣木叶中含有丰富的多酚类活性物质,具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗菌消炎等活性,在保健品、医药等行业开发前景广阔。目前对辣木叶多酚类物质的研究多集中在提取方法及其药物价值方面,而将辣木叶多酚类物质用作油脂抗氧化剂鲜有报道,有待深入开发研究。本论文研究了辣木叶多酚的提取工艺,对辣木叶多酚进行了分离纯化和成分鉴定,并测定了其体外抗氧化活性和对大豆油的抗氧化作用。采用不同提取方法对辣木叶多酚的提取工艺进行优化研究。超声波辅助提取法对辣木叶多酚的最佳提取条件为:乙醇浓度70%,料液比1:30,提取温度50℃,提取时间42 min,在此条件下,总黄酮得率为4.83±0.07%,总酚得率为2.44±0.10%。加压溶剂提取法对辣木叶多酚的最佳提取条件为:乙醇浓度70%,料液比1:40,提取温度110℃,提取时间30min,此条件下总黄酮得率为4.66±0.13%,总酚得率为2.42±0.05%。超声波辅助提取法所得辣木叶总黄酮得率和总酚得率都高于加压溶剂提取法。采用液质联用技术(HPLC-ESI-MS)对超声波辅助提取法和加压溶剂提取法所得的辣木叶多酚类物质进行了成分鉴定,结果表明:共有23种多酚类物质,已初步鉴定出的21种化合物分别为:3-咖啡酰奎尼酸、香豆酰奎尼酸同分异构体1、香豆酰奎尼酸同分异构体2、咖啡酰奎尼酸同分异构体1、4-咖啡酰奎尼酸、4-对香豆酰奎尼酸、咖啡酰奎尼酸同分异构体2、香豆酰奎尼酸同分异构体3、芹菜素6,8-二-C-葡萄糖苷、槲皮素三乙酰半乳糖苷、异落叶松脂素苷、芹菜素葡萄糖苷同分异构体1、芹菜素葡萄糖苷同分异构体2、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素乙酰葡萄糖苷同分异构体1、槲皮素乙酰葡萄糖苷同分异构体2、山奈酚-3-O-葡萄糖苷、槲皮素乙酰葡萄糖苷同分异构体3、山奈酚乙酰葡萄糖苷同分异构体1、山奈酚乙酰葡萄糖苷同分异构体2、山奈酚乙酰葡萄糖苷同分异构体3。另外有两种化合物未知,仍有待于进一步分析鉴定。超声波辅助提取法和加压溶剂提取法提取出的辣木叶多酚类物质的种类有较大差异。加压溶剂提取法在相同温度条件下,纯水、纯乙醇和乙醇/水混合体系提取的化合物种类有明显差异,但不同比例的乙醇/水混合体系提取的化合物种类相同;相同溶剂在140℃条件下提取的化合物种类和相对含量均比110℃条件下少。利用有机溶剂萃取、聚酰胺柱层析对辣木叶多酚粗提物进行分离纯化。结果表明:正丁醇相经聚酰胺柱层析后30%乙醇洗脱相的总黄酮纯度(76.58±0.65%)最高,是纯化前的4.33倍,纯化后的辣木叶多酚可用于进一步对油脂的抗氧化研究;该纯化物再经葡聚糖凝胶LH-20柱层析、制备液相进一步分离,得到单化合物槲皮素-3-O-葡萄糖苷。通过对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基清除能力和总还原能力的测定,评价了辣木叶多酚粗提物及其分离物的体外抗氧化活性。结果表明:超声波辅助提取法所得辣木叶多酚粗提物的抗氧化活性高于加压溶剂提取法。四个有机萃取部位中,正丁醇相的DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基清除能力和总还原能力均高于乙酸乙酯相、石油醚相和水相,略低于同浓度下的V,对多酚类物质有一定的分离效果。不同乙醇洗脱相均表现出较好的抗氧化效果,其中,30%乙醇洗脱相对有效活性成分的富集效果和抗氧化性最好。单体化合物槲皮素-3-O-葡萄糖苷的DPPH自由基和ABTS自由基清除能力均比V高,当样品浓度为0.1 mg/mL时,其DPPH自由基和ABTS自由基清除分别为96.33%和97.98%,与同质量浓度下的V无显著性差异,具有很强抗氧化活性。通过烘箱加热实验研究了辣木叶多酚类物质对大豆油的抗氧化效果,结果表明:在60℃条件下,辣木叶多酚对大豆油的抗氧化效果随着添加量的增加而增强;添加量0.1%的辣木叶多酚对大豆油的抗氧化效果最好,能有效地抑制大豆油过氧化值、茴香胺值和全氧化值的升高,同时对饱和脂肪酸生成的抑制率达61.29%;0.1%辣木叶多酚可将20℃下大豆油的货架寿命延长30.24天。60℃条件下,抗坏血酸和柠檬酸对辣木叶多酚在大豆油中的抗氧化均有良好的协同增效作用,且抗坏血酸的增效作用强于柠檬酸。加热温度对辣木叶多酚的抗氧化效果影响显著,随着温度的升高,辣木叶多酚对大豆油的氧化抑制作用减弱。

关键词：辣木叶多酚类物质提取分离鉴定抗氧化活性

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辣木叶产地加工及润肠通便效果研究

辣木叶产地加工及润肠通便效果研究

作者：田梦媛昆明理工大学

学位级别：硕士

辣木(Moringa oleifera Lam.)为辣木科辣木属植物,常绿或半落叶[1],已于2012年被我国卫生部门公布为新资源食品[2]。辣木的营养价值较高,全株均可利用,并且具有较高的生态、经济、社会效益。辣木作为传统的民间药物,在东南亚国家被用来... 详细信息

辣木(Moringa oleifera Lam.)为辣木科辣木属植物,常绿或半落叶[1],已于2012年被我国卫生部门公布为新资源食品[2]。辣木的营养价值较高,全株均可利用,并且具有较高的生态、经济、社会效益。辣木作为传统的民间药物,在东南亚国家被用来治疗多种疾病[3]。其巨大的营养价值和药用功能对相关食品的开发具有非常大的推动作用,但是辣木在被广泛开发利用的同时,药效成分不明确、产地加工研究不足、质量标准体系不健全等现状制约着辣木产业的发展。本实验采用了云南引种栽培的辣木,对其进行质量标准、产地加工和润肠通便效果等方面的研究。通过对采收、产地加工、贮藏等关键技术优化,提高种植基地辣木适时采收加工水平,保证其原料的质量,为辣木种植与应用提供科学的理论参考。润肠通便作用的研究具有指导临床合理用药、推动辣木药理学研究的发展和新药开发的重要意义。本研究主要结果如下:1、辣木叶粉质量标准研究建立了辣木叶药材中异槲皮苷和紫云英苷的HPLC测定方法。色谱柱:YMC-C18柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为B乙腈-A 0.05%磷酸水,梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为360 nm。结果表明,色谱峰分离效果良好,异槲皮苷和紫云英苷的精密度实验RSD分别为0.87%和0.49%,稳定性实验对照品RSD分别为1.37%和0.89%,供试品RSD分别为0.77%和0.90%,重复性实验RSD分别为0.69%和1.07%,平均回收率分别为98.98%和99.58%,该方法操作简单,线性关系、稳定性、加样回收率良好,仪器精密度可靠,可用于辣木叶药材的质量评价。采用显微鉴别对辣木叶粉和叶柄粉进行了定性鉴别,叶表皮细胞呈不规则形状,气孔为平轴式,非腺毛为单细胞,叶柄木栓细胞成片存在,木纤维成束,导管有孔纹导管、螺纹导管和网纹导管,含大量草酸钙簇晶和方晶。制定了辣木指标成分限度:水分含量不超过13%;总灰分含量不超过15%,酸不溶性灰分含量不超过0.6%;醇溶性浸出物含量不低于14%。参照国家药典委员会对评价指标下限的规定,辣木叶粉异槲皮苷含量不低于2.39 mg/g。紫云英苷的含量不低于1.56 mg/g。重金属Pb,Cd,Hg,Cu,As含量均符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》重金属限量标准[4](重金属总量≤11.60μg/g,Pb≤1.54μg/g,Cd≤0.15μg/g,Hg≤0.13μg/g,Cu≤9.12μg/g,As≤0.65μg/g),农药残留测定方法按照中国药典[5]执行,附录BⅠ中辣木叶255项农药残留量均低于其检出限。2、辣木品质影响因素研究通过对不同产地土壤理化性质研究表明,CEC含量表现为元江1最高(26.49 cmol/kg),元江2最低(4.40 cmol/kg),辣木种植土壤的p H值在6.80.36,异槲皮苷和紫云英苷含量与土壤p H、CEC均呈现显著负相关,土壤有机质含量在10.48-37.21 g/kg,与药效成分不存在线性关系。辣木叶与叶柄成分组成相似,同一成分含量差异显著(p辣木不同部位的水分、灰分、脂肪、粗纤维、淀粉、总糖和蛋白质等营养成分,异槲皮苷和紫云英苷两种药效成分均存在显著差异,在辣木根、茎、叶、花、种子、种荚六个部位中,叶的灰分(10.05 g/100g)、蛋白质(32.03 g/100g)、异槲皮苷(3.35 g/100g)与紫云英苷(3.31 g/100g)含量最高。3、辣木产地加工技术研究辣木叶片的干燥过程主要是降速干燥。微波干燥用时最短为28 min,80℃恒温干燥次之为7 h。通过考察发现,阴干、真空干燥及50℃恒温干燥均能较好的保留辣木叶的营养成分与药效成分,同时50℃恒温干燥能有效的节约时间。经高温和微波杀青处理后再干燥,与直接干燥的辣木叶片比较,外观性状、营养成分和药效成分含量显著降低,高温杀青相比微波杀青具有升温快、受热均匀的特点。不同杀青方式对辣木叶片各指标成分含量的影响表现为,总黄酮和异槲皮苷含量均随杀青温度升高而降低,总酚与紫云英苷含量则表现为随着杀青温度升高而升高。微波高火10 min杀青下叶片总黄酮(68.57 mg/g)和总酚(10.59mg/g)的损失最少,但极易造成营养成分损失;而微波低火杀青方式则易降低总黄酮和总酚含量,辣木叶片最佳杀青工艺为微波中火5-10 min。4、辣木叶片保鲜贮藏技术研究室温保存下辣木叶极易腐烂,从第3天开始已开始出现褐变。而冷低温贮藏可以保存辣木叶超过16天。对冷藏状态下抽真空与不抽真空处理的辣木叶各指标成分对比分析发现,抽真空的过程极易造成叶片机械损伤,导致色度、含水率、可食率、呼吸速率、抗坏血酸含量的加速降低,从而加剧叶片腐败速度。通过对不同包装材料的考察发现,包装材料透气率越大越会促进叶片水分含量的降低,但是可以延缓褐变,至实验结束工艺5的色度值在7中工艺

关键词：辣木叶品质干燥杀青保鲜通便

响应面试验优化辣木叶多酚超声辅助提取工艺及其抗氧化活性

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食品科学 2016年第20期37卷 24-30页

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为研究辣木叶多酚超声辅助提取工艺,明确辣木叶多酚体外抗氧化活性,选取超声功率、超声时间、超声温度和料液比为考察指标,研究不同工艺参数对辣木叶多酚提取量的影响,并采用响应面法优化辣木叶多酚提取工艺。此外,研究辣木叶多酚还原... 详细信息

为研究辣木叶多酚超声辅助提取工艺,明确辣木叶多酚体外抗氧化活性,选取超声功率、超声时间、超声温度和料液比为考察指标,研究不同工艺参数对辣木叶多酚提取量的影响,并采用响应面法优化辣木叶多酚提取工艺。此外,研究辣木叶多酚还原力及其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除能力。结果表明,超声辅助提取辣木叶多酚最优工艺为:超声时间19.5 min、料液比1∶30(g/m L)、超声温度20.2℃、超声功率250 W。在此条件下,辣木叶多酚提取量为(25.14±0.46)mg/g。辣木叶多酚具有较强的体外抗氧化活性,其还原力、DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除能力分别达到同等质量浓度VC的81.25%、94.15%和75.05%。该研究为辣木叶多酚等生物活性成分高效制备与抗氧化剂的深度开发提供理论依据。

关键词：辣木叶多酚超声辅助提取响应面抗氧化