检索结果-南通市图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2003年第1期19卷 133-135页

作者：李会成李玉新金萍张聪乌垠陆军杨红麻彤晖黄百渠东北师范大学细胞与遗传学研究所长春130024

The apoe cDNA was amplified from four months old fetus liver tissue mRNA by RT PCR. It was inserted into the TOPO ○R vector, whose sequence is the same as that reported. The right apoe cDNA was inserted into pQe30 vector to construct pQe30 apoe recombinant expressed plasmid, which was expressed as a histidine tag fusion protein in *** strain BL21(De3) with higher level. The purified protein was gained by Ni NTA column. SDS PAGe showed that 34 kD protein was expressed. Western blot analysis showed a positive band at 34 kD.

关键词：载脂蛋白e3 克隆原核表达

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Apoe-ε4等位基因对遗忘型轻度认知障碍患者认知功能及静息态功能MRI影响的前瞻性队列研究

引用

中华放射学杂志 2020年第1期54卷 10-16页

作者：王晓妮孙宇陈观群盛灿李轩宇李瑜霞杜文莹王小琪夏明睿韩璎首都医科大学宣武医院神经内科北京100053 北京师范大学认知神经科学与学习国家重点实验室&IDG/麦戈文脑科学研究院 100875 首都医科大学宣武医院神经内科北京脑重大疾病研究院阿尔茨海默病研究所国家老年疾病临床医学研究中心国家老年疾病临床医学研究中心(宣武医院)-中国AD临床前期联盟 100053

目的采取前瞻性队列研究探讨Apoe-ε4等位基因对遗忘型轻度认知障碍(aMCI)患者认知功能和静息态功能MRI(rs-fMRI)的影响。方法2009年9月至2015年11月对16例携带Apoe-ε4基因的aMCI患者(aMCI-ε4组)和24例非携带Apoe-ε4基因的aMCI患者(a... 详细信息

目的采取前瞻性队列研究探讨Apoe-ε4等位基因对遗忘型轻度认知障碍(aMCI)患者认知功能和静息态功能MRI(rs-fMRI)的影响。方法2009年9月至2015年11月对16例携带Apoe-ε4基因的aMCI患者(aMCI-ε4组)和24例非携带Apoe-ε4基因的aMCI患者(aMCI-nonε4组)进行前瞻性研究。两组受试在基线期和随访期完成成套的神经心理测评和rs-fMRI影像数据采集。进一步对rs-fMRI数据采用基于种子点功能连接分析方法,以左侧内侧前额叶(mPFC)和后扣带回(PCC)为种子点,计算两组患者基线期和随访期种子点的全脑功能连接。对有差异的脑区进行两因素(随访时间和Apoe-ε4等位基因)重复测量方差分析。两组人群的痴呆转化率比较采用卡方检验,对功能连接和临床资料等计量资料进行正态分布分析,服从正态分布,采用双样本t检验,不服从正态分布,采用Mann-Whitney秩和检验。最后采用一般线性模型对有组间差异脑区的功能连接值变化与神经心理测评结果变化进行相关性分析,及与Apoe基因的交互效应。结果(1)基线期和随访期aMCI-ε4组记忆功能均显著低于aMCI-nonε4组,aMCI-ε4组随访期内转化率(14/16)高于aMCI-nonε4组(13/24,χ2=4.862,P=0.027);(2)两组人群基线期功能连接无显著差异,随访期aMCI-ε4组左侧后扣带回和左侧角回之间的功能连接(0.23±0.11)显著高于aMCI-nonε4组(-0.03±0.13,t=4.800,簇大小1944 mm3,P=0.004),左侧内侧前额叶和左侧角回之间的功能连接(0.33±0.21)显著高于aMCI-nonε4组(-0.08±0.18,t=5.040,簇大小1836 mm3,P=0.006);重复测量方差提示随访时间与Apoe-ε4等位基因的交互作用对左侧PCC(F=10.833,P=0.002)和左侧mPFC(F=7.280,P=0.010)与角回功能连接的影响有统计学意义;(3)aMCI-ε4组左侧内侧前额叶皮层与左侧角回间功能连接的变化与即刻回忆评分变化显著正相关(r=0.692,P=0.018),aMCI-nonε4组中未发现显著相关性(r=-0.198,P=0.417),交互效应显著(F=8.632,P=0.006)。结论Apoe-ε4基因加速了aMCI患者的认知功能下降,风险基因携带者较非携带者在AD病程晚期出现左侧角回和默认网络核心脑区之间功能连接的代偿性保留,提示功能连接破坏可能是Apoe-ε4促进AD病程进展的机制之一。

关键词：阿尔茨海默病认知障碍载脂蛋白e3 磁共振成像神经网络(计算机)

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转染人Apoe3基因对PC12细胞的抗氧化研究

转染人ApoE3基因对PC12细胞的抗氧化研究

引用

作者：赵瑞昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]本研究通过体外构建***3神经细胞模型,通过H202模拟氧化应激损伤,利用CCK-8检测细胞存活率、利用Hochest33258及流式细胞仪检测细胞凋亡情况,探究Apoe3对神经细胞抗氧化损伤的修复及其可能的作用机制。继而初步阐明Apoe3在继发性... 详细信息

[目的]本研究通过体外构建***3神经细胞模型,通过H202模拟氧化应激损伤,利用CCK-8检测细胞存活率、利用Hochest33258及流式细胞仪检测细胞凋亡情况,探究Apoe3对神经细胞抗氧化损伤的修复及其可能的作用机制。继而初步阐明Apoe3在继发性脊髓损伤中所发挥的重要作用。[方法]本研究选取大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)为神经细胞模型,10%DMeM高糖完全培养基培养。实验分成四组:①正常对照组(正常神经细胞培养);②H2O2组(正常神经细胞培养+H2O2损伤):③H202+空质粒组(转染peGFP-N1+H2O2 损伤);④H202+Apoe3 组(转染 peGFP-N1-H-Apoe3+H202 损伤)。通过G418筛选稳定表达Apoe3阳性克隆株,运用免疫印迹分析(Western-Blotanalysis)定量测定Apoe3蛋白是否稳定表达。阳性克隆株扩增培养后利用CCK-8细胞增殖-毒性检测试剂盒检测细胞存活率,运用Hochest33258试剂和流式细胞仪检测细胞的凋亡率。[结果]1.通过G418持续筛选2周后阳性克隆株出现,细胞能稳定传代,荧光显微镜下观察细胞绿色荧光分布均匀,Western blot验证Apoe3蛋白表达显著增加。2.扩增培养后的细胞利用CCK-8细胞增殖-毒性检测试剂盒检测发现与正常对照组比较H2O2组、H2O2+空质粒组、H202+Apoe3组细胞存活率降低(P0.05)。与H202组、H202+空质粒组比较,H2O2+Apoe3组细胞存活率显著升高(P33258荧光染色显示:正常PC12细胞核圆呈淡蓝色,细胞核完整,凋亡细胞的胞核呈强亮白色荧光,细胞核固缩,甚至破碎;其中正常对照组细胞凋亡很少,其他组细胞凋亡明显,但H202+Apoe3组凋亡细胞较H202组和H202+空质粒组明显减少。4.流式细胞仪检测细胞的凋亡率发现:正常对照组比较H2O2组、H202+空质粒组、H202+Apoe3组细胞凋亡率增加(P0.05),与H202组、H2O2+空质粒组比较,H202+Apoe3组细胞早期凋亡率降低(P0.05)。[结论](1)研究发现Apoe3蛋白能够提高氧化应激损伤后PC12细胞的存活率。提示Apoe3蛋白具有一定的抗氧化损伤能力。(2)Apoe3蛋白能有效的降低PC12细胞早期凋亡率,但是对于中晚期细胞凋亡没有明显的保护作用。提示Apoe3蛋白对于神经损伤修复发挥着正向保护作用。

关键词：载脂蛋白e3 脊髓损伤氧化应激

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Apoe4对大鼠在体海马LTP的影响及其NMDAR机制的研究

ApoE4对大鼠在体海马LTP的影响及其NMDAR机制的研究

引用

作者：王瑞锋山西医科大学

学位级别：硕士

阿尔茨海默病(Alzheimers's disease,AD)即老年性痴呆,是一种以慢性进行性不可逆记忆减退、认知障碍和人格改变为主要临床特征的神经系统退行性疾病。AD主要的病理学特征包括神经元变性脱失、细胞外老年斑形成、细胞内神经原纤维缠结等... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimers's disease,AD)即老年性痴呆,是一种以慢性进行性不可逆记忆减退、认知障碍和人格改变为主要临床特征的神经系统退行性疾病。AD主要的病理学特征包括神经元变性脱失、细胞外老年斑形成、细胞内神经原纤维缠结等。有病理研究发现,AD脑组织中的老年斑(senile plaques,SP)和神经原纤维缠结(neurofibrillarytangles,NFT)都有载脂蛋白e(apolipoprotein e,apoe)免疫活性。这就直接提示apoe与AD的病理发生有关。由此可见,apoe与AD的形成可能有比较密切的关系。载脂蛋白e属于载脂蛋白家族中的一员,具有运载脂质、促进髓鞘形成、树突生长、神经元修复及维持突触可塑性等重要的生理功能。人APOe基因存在多态性,即ε2、ε3、ε4,各基因型在人群中所占比例不同,其中ε3为最常见类型。大量流行病学调查结果显示APOeε4等位基因是迟发家族性AD和散发性AD的主要危险因素。海马长时程增强(long-term potentiation,LTP)是公认的研究学习和记忆机制的细胞模型之一,它是一种由高频(强直)刺激(high-frequency stimulation,HFS)作用于兴奋性突触传递通路诱发突触传递效能长时间增强的现象。鉴于海马是AD发病过程中最早和最易受累的脑区之一,海马LTP已被广泛用于AD发病机制研究。虽然已知载脂蛋白e与AD发病密切相关,但已有的关于载脂蛋白e各种亚型对海马LTP作用的研究结果互有矛盾,载脂蛋白e对海马LTP影响的潜在机制也不清楚。越来越多的科学证据提示谷氨酸受体介导的兴奋性神经毒参与了AD的发病。其中,N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartatereceptor,NMDAR)由于其对钙离子的高通透性使其在参与突触可塑性如LTP的形成中具有重要意义。鉴于以上分析,本研究拟通过急性侧脑室内注射重组人apoe4和apoe3并记录海马场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential,fePSP),观察不同亚型载脂蛋白e对大鼠海马CA1区在体LTP的作用及其可能的NMDAR机制。目的:探讨(1)apoe4对大鼠在体海马LTP诱导及维持的影响;(2)apoe4是否通过NMDAR机制影响LTP的诱导及维持。方法:(1)电生理手段记录大鼠在体海马CA1区场电位变化;(2)通过侧脑室注射给药观察重组人apoe4、apoe3对LTP诱导及维持的影响;(3)通过观察单独腹膜内注射NMDAR受体拮抗剂MK801及与apoe4联合使用后LTP的变化,观察apoe4是否通过NMDAR机制影响LTP的诱导及维持;(4)通过双脉冲易化(paired pulse facilitation,PPF)实验确定apoe4对LTP的影响是否经由突触前机制。结果:(1)脑室内注射apoe4、apoe3或腹腔注射MK801的预处理均不影响基础性突触传递。(2) apoe4预处理以剂量和时间依赖的方式对高频电刺激引起的海马在体LTP具有显著的抑制作用。给予HSF后1min、30min、60min,对照组fePSPs幅度分别增强至210.0±10.7%、167.7±5.9%和165.4±5.1%;0.5μg apoe4预处理30min并给与HFS后,fePSPs幅度分别降至192.1±8.6%、147.7±3.9%和145.6±3.9%(P＜0.01);1μg apoe4预处理30min使fePSPs幅度分别降至172.1±2.0%、129.3±5.1%和121.1±3.9%(P＜0.001);2μg apoe4预处理30min使fePSPs幅度分别进一步降至151.8±3.9%、108.0±4.3%和103.5±3.8%(P＜0.001)。同样使用1μg apoe4,随着预处理时间的延长,其对LTP的抑制作用也逐渐增强,在HSF后60min时,10min、30min和60min预处理组LTP值分别为142.5±4.3%、121.1±3.9%和101.0±2.6%(P＜0.01)。(3)与apoe4作用不同,apoe3对海马在体LTP未呈现明显影响。2μg apoe3预处理60min,HFS后1min、30min和60min的fePSPs幅度分别为211.6±8.8%、161.1±8.8%和159.5±6.7%(P＞0.05)。(4) apoe4预处理未影响PPF。(5) MK801单独作用显著抑制了海马在体LTP,但当与apoe4合用时并未进一步增强apoe4对LTP的压抑作用。1μg apoe4预处理60min,在HS

关键词：载脂蛋白e4 载脂蛋白e3 场兴奋性突触后电位长时程增强 N-甲基-D-天门冬氨酸受体海马

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：