检索结果-南通市图书馆

作者：丁晓明天津医科大学

学位级别：硕士

目的1.以丝素蛋白(Slik Fibroin,SF)/羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)为材料,制备含软骨钙化层(Calcified cartilage layer,CCL)的仿生骨软骨支架,与不含CCL的骨软骨支架进行比较,评估其结构和理化性能,观察两种支架在软骨层和成骨层交... 详细信息

目的1.以丝素蛋白(Slik Fibroin,SF)/羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)为材料,制备含软骨钙化层(Calcified cartilage layer,CCL)的仿生骨软骨支架,与不含CCL的骨软骨支架进行比较,评估其结构和理化性能,观察两种支架在软骨层和成骨层交接部位的形态差别。2.分离培养兔脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs),并进行相关鉴定,评估含CCL的仿生骨软骨支架生物相容性,验证CCL作为软骨层和成骨层界面结构的隔离作用,为建立软骨和骨不同的生长微环境提供基础。3.支架软骨层和骨层复合ADSCs体外骨软骨诱导分化研究,探讨其作为骨软骨支架的可行性。4.观察含CCL的仿生骨软骨支架复合ADSCs对兔膝关节骨软骨缺损修复效果的影响,验证CCL和ADSCs在体内修复中起到的作用,探讨这一设计组合作为骨软骨组织工程理念的可行性。方法1.以SF/HA为材料,采用石蜡微球沥滤和定向结晶TIPS技术相结合的方式,制备一种具有创新性的含软骨钙化层的多相一体化仿生支架,通过体式显微镜、扫描电镜、micro-CT、X衍射和傅里叶红外光谱仪进行观察其结构特征,测定支架软骨层和成骨层的孔径、孔隙率、吸水率和压缩弹性模量。2.分离、培养及鉴定兔ADSCs,将第3代ADSCs接种到支架上,通过扫描电镜观察、Dead/Live染色、CCK8检测和组织学染色观察细胞在支架上的黏附、活性和增殖能力,采用Di O/Di I两种不同颜色的细胞荧光标记技术,验证CCL作为软骨层和成骨层界面结构的隔离作用。3.将第3代ADSCs接种到分离开的支架软骨层和成骨层上,分别给予特定的成软骨和成骨诱导培养。软骨层行蛋白多糖和II型胶原组织学、免疫组化染色及生化定量分析,PCR检测II型胶原、蛋白多糖和SOX9表达变化;成骨层钙结节和I型胶原组织学、免疫组化染色以及生化定量分析,检测I型胶原、骨连蛋白和骨桥蛋白表达变化。检测随诱导时间延长支架压缩弹性模量的变化。4.建立兔双侧膝关节骨软骨缺损模型,分别植入CCL组、Non-CCL+ADSCs组和CCL+ADSCs组,分别在术后4w、8w和12w时取材,进行大体观察评分、组织学和免疫组化评估、新生骨软骨组织的生化定量检测、新生骨组织Micro-CT扫描与评估及生物力学测试,评估两组兔膝关节骨软骨缺损修复效果,对比分析CCL和ADSCs在体内修复中起到的作用。结果1.含CCL的仿生骨软骨支架由层次鲜明的“透明软骨-CCL-软骨下骨”3部分组成,各层连接紧密。软骨层具有明显的取向微孔结构,分布均匀,孔径112.43±12.65μm,孔隙率高达90.25%±2.05%;成骨层三维大孔结构,连通性好,孔径362.23±26.52μm,孔隙率85.30%±1.80%。经压缩模量测试,支架软骨层的弹性模量为52.48±5.78k Pa,成骨层的弹性模量为54.93±5.44k Pa。***体外培养呈长梭形,接种到支架上,扫描电镜、Dead/Live染色CCK8和组织学结果显示细胞在支架上良好的黏附增殖活性,说明该支架具有良好的生物相容性。CCL有效地隔离了软骨层和成骨层间细胞的迁移混合,为建立软骨和骨不同的生长微环境提供基础。.3.经对应的诱导培养后,在软骨层上蛋白多糖和II型胶原含量升高,II型胶原、蛋白多糖和SOX9的表达水平出现明显的上调;成骨层I型胶原、骨连蛋白和骨桥蛋白表达水平、骨基质(钙和I型胶原)随诱导时间延长而增长。软骨层和成骨层的压缩弹性模量均出现明显提高。***+ADSCs组软骨再生情况较CCL组和Non-CCL+ADSCs组更好,主要体现在软骨表面平整度和完整度;CCL+ADSCs组新生软骨组织中GAG和II型胶原含量高于CCL组和Non-CCL+ADSCs组;CCL+ADSCs组深层新生骨组织分析、生物力学性能测试优于CCL组,与Non-CCL+ADSCs组无明显差异。结论含CCL的SF/HA仿生骨软骨支架模仿正常骨软骨组织的结构,具有良好的三维孔隙结构和生物相容性。CCL隔离软骨层和骨层,为成软骨和成骨分化提供差异微环境,支架各层均能够支持ADSCs进行对应的诱导分化。该支架复合自体来源的ADSCs有利于兔膝关节骨软骨缺损的修复,CCL的存在加速软骨组织的生长,ADSCs能够促进软骨和骨组织的生成。这一理念的验证为今后的骨软骨组织工程临床应用提供一定的可行性方案。

关键词：组织工程骨软骨丝素蛋白羟基磷灰石软骨钙化层脂肪干细胞兔膝关节

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

含软骨钙化层的仿生骨软骨支架联合脂肪干细胞构建组织工程骨软骨

含软骨钙化层的仿生骨软骨支架联合脂肪干细胞构建组织工程骨软骨

引用

第二十一届全国中西医结合骨伤科学术研讨会暨骨伤科分会换届大会

作者：丁晓明徐宝山杨强马信龙李秀兰张扬天津市天津医院微创脊柱外科

目的研制含软骨钙化层的仿生骨软骨支架并探讨其作为骨软骨组织工程支架载体的可行性。方法以丝素蛋白(SF)和羟基磷灰石(HA)为材料,采用定向结晶结合相分离/石蜡沥滤技术制备含软骨钙化层的仿生骨软骨支架。Micro-CT、扫描电镜观察支架... 详细信息

目的研制含软骨钙化层的仿生骨软骨支架并探讨其作为骨软骨组织工程支架载体的可行性。方法以丝素蛋白(SF)和羟基磷灰石(HA)为材料,采用定向结晶结合相分离/石蜡沥滤技术制备含软骨钙化层的仿生骨软骨支架。Micro-CT、扫描电镜观察支架层次结构,测定不同部分的孔径、孔隙率。分离培养兔脂肪干细胞(ADSCs),取第3代ADSCs与骨软骨支架体外复合培养,通过扫描电镜、Live/Dead染色、CCK-8检测,观察细胞在支架上的活性、生长形态、增值情况,评价支架生物相容性;支架软骨部分和骨部分分别接种DiO和DiI荧光标记后的ADSCs,观察软骨钙化层的隔离作用;将分离的软骨部分和骨部分接种ADSCs,分别给予相应的成软骨和成骨诱导液培养7d、21d,通过组织学染色、免疫组化和生化定量检测,分析软骨层蛋白多糖和Ⅱ型胶原的变化,以及成骨层钙沉积和Ⅰ型胶原的变化;RT-PCR检测软骨特定基因蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9和成骨特定基因Ⅰ型胶原、骨粘连蛋白和骨桥蛋白的表达情况;检测力学性能变化。结果 Micro-CT和扫描电镜示支架具有明显的3层结构,取向微孔结构的软骨层、致密的软骨钙化层和孔隙均匀连通的成骨层,各层间连接紧密牢固,软骨层孔径(112.43±1 2.65)μrn、孔隙率(90.25±2.05)%,成骨层孔径(362.23±26.52)μm、孔隙率(85.30±1.80)%;扫描电镜和H&E染色可见细胞均匀粘附在支架表面及内部,软骨层上细胞沿微孔结构取向生长,Live/Dead和CCK8检测显示细胞在支架上保持良好活性和增值能力;DiO/DiI荧光标记显示软骨钙化层阻止.ADSCs在软骨层和成骨层间迁移、混合,起到隔离微环境的作用;随着诱导时间延长,软骨层上ADSCs的蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9的表达能力明显提高,蛋白多糖和Ⅱ型胶原含量明显升高(P层Ⅰ型胶原、骨粘连蛋白和骨桥蛋白的表达能力明显提高,出现明显的钙结节以及大量Ⅰ型胶原(P软骨钙化层的SF/HA仿生骨软骨支架具有良好的三维孔隙结构和细胞相容性,支架软骨层和成骨层支持ADSCs的成软骨和成骨分化,软骨钙化层能够隔离不同的微环境,是软骨与骨组织工程结合的关键环节,模仿正常骨软骨复合组织的结构和成分,是构建组织工程骨软骨的理想支架载体。

关键词：组织工程骨软骨软骨钙化层丝素蛋白羟基磷灰石脂肪干细胞

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

实验性骨关节炎中关节软骨钙化层厚度测定及其意义

引用

中华骨科杂志 1996年第1期16卷 40-43页

作者：白希壮王星铎中国医科大学第一临床学院骨外科

作者借助髋关节骨关节炎（ＯＡ）实验动物模型、观察到：（１）关节软骨钙化层在负重区分布最厚，非负重区最薄。（２）ＯＡ严重度和钙化层厚度呈正相关，和软骨非钙化软骨厚度呈负相关。（３）ＯＡ病理发展过程中具有非钙化软骨层变薄... 详细信息

作者借助髋关节骨关节炎（ＯＡ）实验动物模型、观察到：（１）关节软骨钙化层在负重区分布最厚，非负重区最薄。（２）ＯＡ严重度和钙化层厚度呈正相关，和软骨非钙化软骨厚度呈负相关。（３）ＯＡ病理发展过程中具有非钙化软骨层变薄，钙化软骨层增厚，潮线前移等特征。该结果为分析ＯＡ病因及病理机制提供直接依据。

关键词：骨关节炎软骨钙化层厚度病理学

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实验性兔膝骨关节炎滑液引起正常关节软骨的形态学改变

引用

中华风湿病学杂志 2005年第5期9卷 287-290,i002页

作者：徐卿荣董英海陈顺乐智玲梅鲍春德顾越英杜蕙上海第二医科大学附属仁济医院骨科 200127 上海第二医科大学附属仁济医院风湿科 200127 上海第二医科大学附属仁济医院动物实验中心 200127

目的探讨内源性骨关节炎(osteoarthritis,O A)生物学致病因子对正常关节软骨的初始破坏作用。方法兔14只随机分为实验组和对照组。实验组切断一侧膝关节前交叉韧带,第12周晚期OA形成。抽取OA滑液随机注入自身一侧肘关节内(SF组),对侧肘... 详细信息

目的探讨内源性骨关节炎(osteoarthritis,O A)生物学致病因子对正常关节软骨的初始破坏作用。方法兔14只随机分为实验组和对照组。实验组切断一侧膝关节前交叉韧带,第12周晚期OA形成。抽取OA滑液随机注入自身一侧肘关节内(SF组),对侧肘关节注入等量生理盐水(N S组)。每周一次。对照组肘关节不注射任何液体。肘关节注射20周后SF组、NS组和对照组行大体、光镜和电镜观察。结果SF组、NS组和对照组肘关节关节软骨在大体上无明显区别。光镜下NS组和对照组关节软骨表面光滑,各层软骨细胞排列正常;SF组软骨细胞数量减少,移行层和放射层见到大量软骨细胞巢聚,出现双潮线,并且软骨钙化层增厚,非钙化层明显变薄。透射电镜下N S组和对照组软骨细胞形态大多正常,SF组软骨细胞发生退变和凋亡。扫描电镜下NS组和对照组软骨表面结构完整,SF组软骨表面出现表浅溃疡,胶原中断且排列紊乱。结论OA内源性生物学致病因子对正常关节软骨存在损害作用,但明显弱于力学因素。

关键词：关节软骨骨关节炎滑液形态学改变实验性膝关节前交叉韧带兔对照组软骨钙化层肘关节破坏作用致病因子生理盐水每周一次关节注射电镜观察细胞排列细胞数量细胞形态细胞发生结构完整实验组 SF NS 内源性

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：