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探索脐带沃顿胶作为软骨组织工程复合体前体的可行性初步研究

探索脐带沃顿胶作为软骨组织工程复合体前体的可行性初步研究

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作者：刘岸松中南大学

学位级别：硕士

目的：本课题通过了解脐带沃顿胶的组织形态和成分,分析沃顿胶是否可能作为一种新型的软骨组织工程复合体前体。方法：取足月健康新生儿新鲜脐带：1、结构研究将脐带分别做横行、纵行组织切片后,分别行HE染色并观察沃顿胶的微观形态、... 详细信息

目的：本课题通过了解脐带沃顿胶的组织形态和成分,分析沃顿胶是否可能作为一种新型的软骨组织工程复合体前体。方法：取足月健康新生儿新鲜脐带：1、结构研究将脐带分别做横行、纵行组织切片后,分别行HE染色并观察沃顿胶的微观形态、结构。另取脐带切成大小约5×1×1mm3的小块固定后,利用扫描电镜观察脐带沃顿胶表观形态结构;2、成分研究取新鲜脐带制备组织切片,通过PAS染色、Masson染色和免疫组化染色对切片分别染色并检测,观察染色后沃顿胶被染色的情况。另取新鲜脐带,去除脐带外膜及脐带动静脉,获得沃顿胶,经物理和化学消化的方法获得细胞混悬液,使用细胞计数仪对混悬液中的细胞进行计数,然后用CD29、 CD90、CD45三种细胞表面抗原标记混悬细胞液中的脐带间充质干细胞,使用流式细胞仪检测混悬液中满足CD29(+).CD90(+)、CD45(-)三个条件的细胞在所有细胞中所占的百分比,计算出脐带间充质干细胞在总的细胞中所占的百分比。结果：1、沃顿胶结构通过HE染色及电镜,发现脐带沃顿胶胶原纤维是以脐血管走向为中心的,靠近血管以纵行为主,靠近外膜以环形为主的编制状结构,由外膜至内侧血管,纤维结构由稀疏逐渐变得密集。沃顿胶纤维结构之间存在空隙。2、沃顿胶成分沃顿胶主要成分含有胶原纤维、糖胺多糖及细胞,胶原成分中含Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三种胶原,脐带沃顿胶中所含有的细胞数目为(2.04±0.59)×106cell/g。沃顿胶中脐带间充质干细胞在所有的细胞中所占的比例为(54.67±19.02)%。结论：脐带沃顿胶的结构和成分与软骨相似且初步满足软骨组织工程的要求,是可能的软骨组织工程复合体前体。

关键词：沃顿胶软骨组织工程复合体结构成分

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