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一种导致浙江地区蝴蝶兰软腐病发生的病原菌分离鉴定及品种抗性评价

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中国农业大学学报 2024年第8期29卷 109-119页

作者：任冬冬唐纪勇崔永一辛静静浙江农林大学园艺科学学院杭州311300

为明确浙江地区蝴蝶兰软腐病的病原种类以及不同蝴蝶兰品种对软腐病的抗病性差异,采用形态学、生理生化特性研究和系统发育学对蝴蝶兰软腐病进行病菌分离鉴定,应用离体叶片接种法评估不同蝴蝶兰品种抗病性。结果表明:(1)蝴蝶兰软腐病病... 详细信息

为明确浙江地区蝴蝶兰软腐病的病原种类以及不同蝴蝶兰品种对软腐病的抗病性差异,采用形态学、生理生化特性研究和系统发育学对蝴蝶兰软腐病进行病菌分离鉴定,应用离体叶片接种法评估不同蝴蝶兰品种抗病性。结果表明:(1)蝴蝶兰软腐病病原菌为革兰氏阴性菌,在营养琼脂培养基(不含葡萄糖)上菌落呈乳白色圆形或近圆形,在营养琼脂甘油锰培养基上菌落呈浅紫色,菌体呈杆状。(2)基于16S rRNA、dnaX、gapA和recA基因构建多基因联合系统发育树,结果表明菌株B与Dickeya fangzhongdai B16为同一分支。(3)对40个蝴蝶兰品种进行离体叶片抗软腐病评价,鉴定出1个高抗品种(‘ES L20’)、1个抗病品种、14个中抗品种、18个感病品种和6个高感品种。本研究鉴定出一种导致浙江地区蝴蝶兰软腐病的病原菌,提供了部分蝴蝶兰品种的抗软腐病信息,为深入研究该病害发生规律及防治,培育抗病品种提供理论依据。

关键词：蝴蝶兰软腐病病原鉴定 Dickeya fangzhongdai 抗性评价

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高效防治半夏软腐病生防菌的筛选及其生物防治效果研究

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南京农业大学学报 2024年

作者：张欣悦张华梦姚志鹏王莹陈雯蒋春号牛冬冬南京农业大学植物保护学院

[目的]本研究旨在从实验室现有的生防细菌菌库中筛选对半夏软腐病具有较高防治效果的生防菌株，为半夏软腐病的绿色防控技术提供新的菌株资源。[方法]通过平板拮抗从实验室保存的300株具有生防潜力的菌株中，筛选对半夏软腐病具有拮抗... 详细信息

[目的]本研究旨在从实验室现有的生防细菌菌库中筛选对半夏软腐病具有较高防治效果的生防菌株，为半夏软腐病的绿色防控技术提供新的菌株资源。[方法]通过平板拮抗从实验室保存的300株具有生防潜力的菌株中，筛选对半夏软腐病具有拮抗效果的菌株。进一步测定拮抗菌株的水解酶活和透明圈半径，通过对抑菌圈和透明圈半径进行统计赋值得到对半夏软腐病较高防治效果的复筛菌株。最后通过离体及温室防效试验验证复筛菌株对半夏软腐病的防治效果。[结果]初筛得到20株对半夏软腐病具有生防潜力的菌株，及其抑菌圈、透明圈半径大小，按照统计结果对20株菌株进行赋值，结果显示5YN8、XZ231和7Ze3赋值分数最高，分别为11.0分、11.0分和10.5分；经离体防效验证得到20株初筛菌株对半夏软腐病腐烂程度的不同影响，对比赋值大小及半夏块茎的腐烂程度发现建立的赋值体系与菌株的生防效果具有较好的相关性，即赋值分数越高，半夏块茎的生防效果越好；将筛选得到的赋值分数最高的三个生防菌株5YN8、XZ231与7Ze3进行温室防效验证，发现它们对半夏软腐病防治效果分别为85.01%、79.55%和79.62%，通过16S rRNA基因测序比对发现5YN8为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），XZ231和7Ze3均为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。[结论]5YN8、XZ231与7Ze3三株生防菌株能够有效防治半夏软腐病，具有潜在的应用价值。

关键词：半夏软腐病生防菌筛选菌种鉴定防治效果

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雪茄烟软腐病致病因子及防治措施

分子植物育种 2024年

作者：卢超唐旭兵裴卫华施竹凤孔垂思黄飞燕余磊方保沈俊儒昆明学院云南省都市特色农业工程技术研究中心云南香料烟有限责任公司云南省农业科学院农业环境资源研究所

国内雪茄烟市场广阔，国产雪茄烟发展迅速，种植规模也逐年增加，雪茄烟生产中细菌性病害的发生和危害已不容忽视。尤其，雪茄烟软腐病是感染性较强的细菌性病害，具有寄主范围广、病原菌体积小、生长速率快、防控难度大的特点，且易在... 详细信息

国内雪茄烟市场广阔，国产雪茄烟发展迅速，种植规模也逐年增加，雪茄烟生产中细菌性病害的发生和危害已不容忽视。尤其，雪茄烟软腐病是感染性较强的细菌性病害，具有寄主范围广、病原菌体积小、生长速率快、防控难度大的特点，且易在田间与真菌性疾病的暴发或互作，进而扩大影响，对雪茄烟产量和质量造成了严重威胁。本研究旨在探讨雪茄烟软腐病病原菌症状、寄主范围和分布区、致病因子以及相应的防治措施。通过分析归纳雪茄烟软腐病原菌的致病能力，发现果胶酶、纤维素酶和植物毒素是其主要的致病因子。基于这些致病因子，对雪茄烟软腐病的防治措施进行了一系列总结，包括植物检疫、农业防治、化学防治、纳米粒子、利用噬菌体进行生物防治、生物防治等。这些措施为控制雪茄烟软腐病提供了理论和实践基础。然而，需要进一步的研究来深入了解雪茄烟软腐病原菌的致病机制，并开发更有效和可持续的防治策略。

关键词：雪茄烟软腐病果胶杆菌致病因子防治措施

ZeWRKY69调控彩色马蹄莲抗软腐病的机制研究

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ZeWRKY69调控彩色马蹄莲抗软腐病的机制研究

作者：王迪河北科技师范学院

学位级别：硕士

彩色马蹄莲(Zantedeschia hybrida)是一种广受欢迎的高档观赏球根花卉,胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum,Pc)引起的软腐病是其生产中的限制因素。而分子生物学技术的发展为筛选并挖掘彩色马蹄莲自身抗性基因,进一步进行分子... 详细信息

彩色马蹄莲(Zantedeschia hybrida)是一种广受欢迎的高档观赏球根花卉,胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum,Pc)引起的软腐病是其生产中的限制因素。而分子生物学技术的发展为筛选并挖掘彩色马蹄莲自身抗性基因,进一步进行分子育种来创制新型的抗病新种质提供了可能。因此,本研究以彩色马蹄莲叶片感染Pc菌的抗性免疫响应为出发点,结合接菌不同时间转录组数据及加权基因共表达网络分析(Weighted gene co-expression network analysis,WGCNA),筛选出同时与内源激素水杨酸(Salicilic acid,SA)/茉莉酸(Jasmonic acid,JA)含量高度相关的WRKY家族转录因子ZeWRKY69作为主要研究对象。相关研究结果如下:(1)将全转录组中基因表达量与SA/JA含量进行WGCNA分析筛选出WRKY家族转录因子ZeWRKY69;荧光定量结果显示在接菌不同时间样品中ZeWRKY69显著上调,烟草亚细胞细胞定位显示ZeWRKY69定位于细胞核;ZeWRKY69稳定过表达烟草和瞬时过表达彩色马蹄莲均能显著提高它们对软腐病菌Pc的抗性;而通过病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术沉默ZeWRKY69会降低彩色马蹄莲对软腐病的抗性。(2)利用网站Plant CARE及JASPAR对ZeWRKY69启动子进行分析,发现该启动子上有TGACG元件,通过酵母单杂交、双荧光素酶报告基因系统、凝胶阻滞试验分别证明,JA/SA信号通路关键因子ZeMYC2/ZeTGA2均为ZeWRKY69的直接上游,且荧光素酶及其定量结果表明ZeMYC2/ZeTGA2激活ZeWRKY69的表达。(3)同时也对与ZeWRKY69高度相关的过氧化物酶家族基因ZePER27启动子进行分析发现该启动子上有W-box元件,进一步酵母单杂交、双荧光素酶报告基因系统、凝胶阻滞试验分别证明,ZeWRKY69能够直接靶向ZePER27。且荧光素酶及其定量结果表明ZeWRKY69激活ZePER27;瞬时沉默及过表达ZePER27产生与ZeWRKY69同样的表型,即过表达提高彩色马蹄莲对软腐病的抗性,沉默降低彩色马蹄莲对软腐病的抗性。综上所述,本研究发现并鉴定了一个彩色马蹄莲关键抗性响应转录因子ZeWRKY69,JA/SA信号通路关键因子ZeMYC2/ZeTGA2能激活ZeWRKY69的表达,ZeWRKY69进一步正向调控ZePER27的表达,从而影响彩色马蹄莲对软腐病的抗性。此研究结果为马蹄莲属植物及其它球根植物的抗性育种提供参考。

关键词：彩色马蹄莲软腐病水杨酸茉莉酸 ZeWRKY69

临渭区猕猴桃软腐病发生防治情况及其影响因素

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基层农技推广 2024年第7期 119-121页

作者：刘珠珠贺亚红罗振坚张聪合董晓梅田超渭南市临渭区农业技术推广中心渭南市农业技术推广中心

通过调查不同区域5个不同品种果园猕猴桃软腐病发生防治情况，分析其主要影响因素，以期为进一步科学防治提供参考。对果实近成熟期病果和贮藏期病果调查及果园防治情况进行调查，综合分析，导致陕西省渭南市临渭区猕猴桃软腐病发病的... 详细信息

通过调查不同区域5个不同品种果园猕猴桃软腐病发生防治情况，分析其主要影响因素，以期为进一步科学防治提供参考。对果实近成熟期病果和贮藏期病果调查及果园防治情况进行调查，综合分析，导致陕西省渭南市临渭区猕猴桃软腐病发病的影响因素主要有温度、湿度、品种、机械损伤。2022年猕猴桃软腐病果实近成熟期发生面积2.4万亩，病果率为0.91%，呈轻发生，贮藏期病果率为20.32%，呈中度发生，总病果率为20.62%，总体呈中度发生。由于软腐病主要在果实贮藏期表现软腐症状，很多果农对软腐病的防治不够重视，建议农业部门进一步加大宣传力度，引起果农对软腐病的重视，推广绿色防控技术，打造特色猕猴桃品牌，实现优果优价快销的良性循环。

关键词：猕猴桃软腐病发生防治影响因素

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不同菜心品种对软腐病的抗性鉴定

广东农业科学 2024年

作者：李桂花陆梦婷符梅郭巨先罗文龙骆善伟欧德意李光光广东省农业科学院蔬菜研究所/广东省蔬菜新技术研究重点实验室华南农业大学植物保护学院广州市农业科学研究院

【目的】近年来，随着菜心栽培面积扩大和重茬现象的出现，菜心病害逐年加重，其中软腐病是危害菜心的主要病害之一，严重影响产量和品质。通过接种软腐病病菌对菜心品种进行抗病性评价，以期筛选出抗病品种。【方法】采集具有典型软腐... 详细信息

【目的】近年来，随着菜心栽培面积扩大和重茬现象的出现，菜心病害逐年加重，其中软腐病是危害菜心的主要病害之一，严重影响产量和品质。通过接种软腐病病菌对菜心品种进行抗病性评价，以期筛选出抗病品种。【方法】采集具有典型软腐症状的菜心病样，通过组织分离、形态学和分子生物学方法进行鉴定，获得软腐病病菌。以52份不同菜心品种为试验材料，采用苗期喷雾接种法进行接种：用刀片在菜心茎部轻划2个约5 mm刀口，使用小型手持喷雾器将1×108CFU/mL菌液喷到伤口表面，接种完成后3 d，测定病情指数和软腐病分级，评价52个菜心品种的软腐病抗性水平。【结果】经组织分离得到分离物，经柯赫氏法则验证菌落形态特征、16S rDNA序列分析表明，菌株为菜心软腐病致病菌，在NA培养基上形成的菌落呈圆形、半透明、乳白色、中心突起、边缘平滑，能使菜心的组织腐烂，接种于菜心苗后叶片呈湿腐萎蔫症状。52份材料中，大多数菜心品种对软腐病的抗性存在显著差异，其中，高感材料35份、感病材料16份，整体而言，感病材料占98.1%；中抗材料1份（丰裕4号菜心）；无高抗或免疫品种。上述结果表明，52个菜心品种中抗软腐病的材料较少，这可能是广东省菜心软腐病发病较严重的原因之一。【结论】52个菜心品种中，软腐病感病材料占98.1%；中抗材料1份；无高抗或免疫品种。可为选育和推广抗软腐病的菜心品种提供科学依据。

关键词：菜心软腐病喷雾接种法病情指数软腐病分级抗性鉴定

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福鼎槟榔芋软腐病病原菌侵染机理研究

中文科技期刊数据库（全文版）农业科学 2024年第2期 49-52页

作者：陈丽华林志斌颜嘉琪郑艺靖阙玉林宁德师范学院生命科学学院福建宁德352000 福建省特色药用植物工程技术研究中心福建宁德352100 福建省福鼎市农业科学研究所福建宁德352000

福鼎槟榔芋因其独特外形和风味,深受消费者喜爱,但其种植过程中软腐病发病率高,严重影响产量。槟榔芋软腐病是由细菌侵染引起,目前侵染机理并不明确。本研究以患病的槟榔芋为材料,采用组织分离法、梯度稀释涂布法、形态学观察及生物学... 详细信息

福鼎槟榔芋因其独特外形和风味,深受消费者喜爱,但其种植过程中软腐病发病率高,严重影响产量。槟榔芋软腐病是由细菌侵染引起,目前侵染机理并不明确。本研究以患病的槟榔芋为材料,采用组织分离法、梯度稀释涂布法、形态学观察及生物学特征等方法分离到软腐病菌病原菌,并开展盆栽试验,探究槟榔芋软腐病侵染芋头的机理。研究结果显示,分离得到的病原菌,形态学观察结果与预期吻合,在离体和活体回接试验,表现出较强的致病性;盆栽试验发现,在槟榔芋顶芽和球茎机械损伤处,进行菌悬液伤口注射和流水灌溉处理,均会导致芋植株出现软腐病症,同时病原菌通过流水灌溉也会入侵根块组织,但病状相较于伤口入侵较轻。

关键词：槟榔芋软腐病侵染机理

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花魔芋软腐病原真菌分离鉴定

广西植物 2024年第2期44卷 333-344页

作者：李竹梅董坤张延安高永陈弘方萍萍雷红仙卢小倩褚洪龙曲靖师范学院生物资源与食品工程学院云南曲靖655011 云南省农科院富源魔芋研究所云南富源655500 曲靖师范学院云南省高校特色果酒技术创新与应用工程研究中心云南曲靖655011

魔芋软腐病是魔芋生产过程中的重要病害,也是限制魔芋产业发展的主要因素。目前,已有报道魔芋软腐病主要由细菌引起,鲜有真菌引起魔芋球茎软腐发病的报道。为明确云南曲靖市花魔芋(Amorphophallus konjac)软腐病的病原种类和侵染特征,... 详细信息

魔芋软腐病是魔芋生产过程中的重要病害,也是限制魔芋产业发展的主要因素。目前,已有报道魔芋软腐病主要由细菌引起,鲜有真菌引起魔芋球茎软腐发病的报道。为明确云南曲靖市花魔芋(Amorphophallus konjac)软腐病的病原种类和侵染特征,该研究通过组织分离法,对采集自云南曲靖市的花魔芋病样进行了真菌的分离,通过形态学结合基于ITS与LSU序列分析的分子鉴定方法对分离真菌进行鉴定,并根据柯赫氏法则进行致病性测定,并对鉴定出的病原真菌同魔芋软腐病原细菌进行了双回接试验分析。结果表明:(1)从形态学和分子水平鉴定了轮纹镰刀菌(Fusarium concentricum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和F.ambrosium 3种镰刀菌,1种毛霉属真菌(Mucor sp.),1种根霉属真菌(Rhizopus sp.),1种青霉属真菌(Penicillium sp.)和1种粉红螺旋聚孢霉属真菌(Clonostachys sp.)。(2)统计分析发现,轮纹镰刀菌的相对丰度最高,为45.45%。(3)柯赫氏法则检测发现轮纹镰刀菌具有致病性。(4)轮纹镰刀菌和病原细菌胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium aroidearum)双接种魔芋球茎发现软腐病发病更快,病变组织重量显著高于单接种轮纹镰刀菌或果胶杆菌处理。综上表明,魔芋软腐病可能是由真菌和细菌复合侵染引发。该研究结果为魔芋软腐病的防治提供了理论依据。

关键词：花魔芋软腐病病原真菌系统发育分析致病性

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云南两个花魔芋主产区软腐病害植株腐烂球茎中的菌群组成及特征

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微生物学报 2024年第7期 2434-2452页

作者：张绍智田庆红董坤杨丽萍殷减清张仲凯云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所永平县科技统计和成果转换中心云南省农业科学院富源魔芋研究所云南海萍农业开发有限公司

【目的】软腐病是侵染魔芋的主要病害，其危害性严重，广泛传播会导致花魔芋绝产，尚无有效防控措施。魔芋软腐病的发生及暴发性传播与病原菌及其菌群有较大相关性。本研究旨在明确云南2个主产区的软腐病害花魔芋球茎及其根际土壤中的... 详细信息

【目的】软腐病是侵染魔芋的主要病害，其危害性严重，广泛传播会导致花魔芋绝产，尚无有效防控措施。魔芋软腐病的发生及暴发性传播与病原菌及其菌群有较大相关性。本研究旨在明确云南2个主产区的软腐病害花魔芋球茎及其根际土壤中的主要致病菌和优势微生物种类，分析其菌群结构特征，从而为花魔芋软腐病害的防控提供支撑。【方法】研究采集云南富源和永平2个产区的花魔芋软腐病样品，应用Illumina Nova Seq 6000测序平台进行微生物宏基因组测序和分析。同时采用选择性培养基、多级纯化培养技术以及电镜超微形态解析，分别对病害腐烂球茎中的致病菌及优势菌类进行分离鉴定和观察验证。【结果】两个花魔芋主产区软腐病害植株球茎及土壤中的微生物都非常丰富，共检出107门2 502属15 721种微生物。这2个产区的花魔芋软腐病害主要致病菌均为胡萝卜软腐坚固杆菌(Pectobacterium carotovorum)，此病原菌与嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)的优势生长是2个产区软腐病害植株腐烂球茎中菌群的主要特征。此外，同产区的病害组织与土壤样品之间的菌群组成差异较大，但这2类样品中的优势菌群组成的区域性差异较小。【结论】两个花魔芋主产区软腐病害球茎组织中菌群与该区土壤菌群的相关性较低，土壤菌群区域性差异比相应的病害组织菌群区域性差异要大。因此，主要病原菌和共生菌的优势生长突破了产地差异影响，成为了病害组织菌群的主要特征，使得2个主产区软腐病害花魔芋球茎中的微生物生态系统具有高度相似性。

关键词：花魔芋宏基因组软腐病病原菌微生物群落