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广州市2012—2020年小儿轮状病毒腹泻与气压的关联

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中国学校卫生 2023年第9期44卷 1392-1395页

作者：李丽娟原皓何依伶郭巧芝赵丹洋陈琴广州市妇女儿童医疗中心医院中山大学附属第一医院

目的探究广州市不同气压水平暴露对小儿轮状病毒腹泻发病的影响,为提高公众对于高气压暴露后的风险干预提供参考。方法通过中国传染病网络报告系统和中国气象科学数据共享服务网收集2012—2020年广州市小儿轮状病毒腹泻的每日发病数及... 详细信息

目的探究广州市不同气压水平暴露对小儿轮状病毒腹泻发病的影响,为提高公众对于高气压暴露后的风险干预提供参考。方法通过中国传染病网络报告系统和中国气象科学数据共享服务网收集2012—2020年广州市小儿轮状病毒腹泻的每日发病数及同期气象数据,利用分布滞后非线性模型(distributed lag non-linear models,DLNM)分析小儿轮状病毒腹泻发病与气压的关联,进一步评估不同性别、年龄段人群在不同气压水平暴露后的风险。结果2012—2020年累计报告小儿轮状病毒腹泻发病共18587例,其中男童11662例(62.7%),6~轮状病毒腹泻发病风险最高(RR=1.50,95%CI=1.24~1.82,P轮状病毒腹泻发病风险较低(P值均0.05)。不同年龄亚组中,在所观测气压最大值暴露后,24~轮状病毒腹泻发病风险。未来应提高公众对于高气压暴露后的风险意识。

关键词：轮状病毒属腹泻发病率儿童

2016—2018年济南市生活污水轮状病毒A组分子流行病学特征分析

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中华预防医学杂志 2020年第10期54卷 1115-1120页

作者：杜海波林小娟刘姗姗纪峰陶泽新宋艳艳徐爱强山东大学齐鲁医学院公共卫生学院济南250012 山东省疾病预防控制中心免疫预防管理所济南250014 襄阳市疾病预防控制中心组织人事科 441000

目的:了解生活污水中的A组轮状病毒(RVA)的检出情况及分子流行病学特征。方法:本研究于2016—2018年3年期间,在济南市每月采集生活污水,获得的36份污水样本通过阴离子膜吸附洗脱法浓缩后,进行核酸提取,RT-PCR扩增RVA VP7和VP4基因片段,... 详细信息

目的:了解生活污水中的A组轮状病毒(RVA)的检出情况及分子流行病学特征。方法:本研究于2016—2018年3年期间,在济南市每月采集生活污水,获得的36份污水样本通过阴离子膜吸附洗脱法浓缩后,进行核酸提取,RT-PCR扩增RVA VP7和VP4基因片段,再经纯化、TA克隆和测序后,对所获得的序列进行基因定型、同源性分析和系统发生学分析。结果:36份污水样本中有31份检测出RVA G基因(检出率为86.1%),33份样本检测出RVA P基因型(检出率为91.7%)。共获得RVA序列536条,其中G基因型序列225条,分属于6个基因型,G9型别占比最多为92.4%(208条);获得P基因型序列311条,分属于4个基因型,优势型P[8]占50.1%(156条),P[4]次之为41.8%(130条)。系统发生学分析显示优势型别G9、P[8]在当地均存在多个传播链共循环。结论:本研究通过对济南市生活污水所获得的RVA相关序列进行型别、同源性、系统发生学特征的分析,进一步证实RVA环境监测可行且必要。

关键词：轮状病毒属分子流行病学环境监测

引起成人腹泻的新轮状病毒在原代人胚肾细胞上的培养和传代

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中华医学杂志 2002年第1期82卷 14-18页

作者：纪绍忠毕烨杨红彦杨凤蓉宋俊其陶小霞崔晓英中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所北京102206

目的　探讨用细胞培养系统在体外培养新轮状病毒 (RV)。方法　含新RV的病人粪便标本经高浓度胰蛋白酶 (10 0 μg/ml) 37℃作用 1h ,接种于原代人胚肾 (PHEK)细胞 ,37℃吸附 1h后 ,补加无血清含胰蛋白酶 (10 0 μg/ml)的DMEM ,37℃转鼓培... 详细信息

目的　探讨用细胞培养系统在体外培养新轮状病毒 (RV)。方法　含新RV的病人粪便标本经高浓度胰蛋白酶 (10 0 μg/ml) 37℃作用 1h ,接种于原代人胚肾 (PHEK)细胞 ,37℃吸附 1h后 ,补加无血清含胰蛋白酶 (10 0 μg/ml)的DMEM ,37℃转鼓培养 3d ,收获细胞培养液 ,冻融 1次 ,作为下一代培养的接种物 ,培养传代。用聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫荧光 (IF)、电镜 (EM)、免疫电镜 (IEM)等方法对细胞培养液进行病毒核酸、抗原及形态检查。结果　从 10份粪便标本中培养分离到 1株病毒 ,定名为J19。该病毒在PHEK细胞上稳定培养传代 (2 8代 ) ,其病毒核酸 (dsRNA)电泳图型与初始用于接种细胞的粪便标本中的dsRNA电泳图型完全一致 ,而与A、B、C组RVdsRNA电泳图型明显不同。J19株感染的细胞与病人恢复期血清呈IF阳性反应 ,与成人腹泻轮状病毒 (ADRV)腹泻病人恢复期血清、兔抗A组RV和兔抗ADRV血清均为IF阴性 ;EM和IEM在该病毒的细胞培养液中观察到 ,在形态上与初始接种物中病毒一样的轮状病毒颗粒 ,而且可被新RV腹泻病人恢复期血清凝集。结论　成功地从含新RV的成人腹泻粪便标本中分离培养出 1株轮状病毒———J19,并能在细胞稳定传代。J19株不属于A、B、C组RV ,而是一种新RV。关于新RV在细胞上培养传代 ,本文是第一次报?

关键词：腹泻轮状病毒属体外培养细胞培养原代人胚肾细胞

河北省卢龙地区2008-2009年度轮状病毒流行病学研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2010年第1期24卷 2-4页

作者：李丹地于秋丽齐顺祥谢赟章青崔淑娴段招军中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室北京100052 河北省疾病预防控制中心

目的了解河北省轮状病毒腹泻的流行情况.方法 2008年9月至2009年8月收集卢龙县儿童医院及妇幼保健院5岁以下腹泻住院患儿标本共426份,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测轮状病毒抗原,阳性标本用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）进行基... 详细信息

目的了解河北省轮状病毒腹泻的流行情况.方法 2008年9月至2009年8月收集卢龙县儿童医院及妇幼保健院5岁以下腹泻住院患儿标本共426份,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测轮状病毒抗原,阳性标本用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）进行基因分型.结果 426份标本中轮状病毒检出率为47.42%（202/426）.对202份轮状病毒阳性标本进行G/P分型,G3型是主要优势株,占57.9%（117/202）,其次为混合G型感染（16.3%）,G9型（14.9%）,G1型（7.9%）,G4型（1%）,G2型（0.5%）,P基因型最常见的为P[8]占58.4%,其次为P型混合感染占28.7%,P[4]（6.9%）,P[9]（1%）,最常见的G/P组合为G3P[8].结论轮状病毒是卢龙地区儿童腹泻住院的主要病原,G3P[8]为主要流行株,混合型在该地区多发,且G9血清型在该地区已经成为仅次于G3的第二大优势株.

关键词：轮状病毒属腹泻儿童,住院

轮状病毒G血清型和P基因型与腹泻严重程度的关系

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第2期21卷 144-146页

作者：张丽杰方肇寅曾光 Duncan Steele 江保民 Paul Kilgore 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所腹泻室北京100052 中国疾病预防控制中心 World Health Organization USA Centers for Disease Control and Prevention International Vaccine Institute

目的了解轮状病毒G血清型和P基因型与腹泻严重程度之间的关系。方法收集2001年8月至2003年7月4个监测点医院5岁以下住院腹泻儿童的粪便标本和临床信息，对标本进行轮状病毒检测和分型，根据Vesikari 20点评分法对轮状病毒腹泻患儿的严... 详细信息

目的了解轮状病毒G血清型和P基因型与腹泻严重程度之间的关系。方法收集2001年8月至2003年7月4个监测点医院5岁以下住院腹泻儿童的粪便标本和临床信息，对标本进行轮状病毒检测和分型，根据Vesikari 20点评分法对轮状病毒腹泻患儿的严重程度进行评分。结果当与P[8]基因型结合时，P[8]G1型和P[8]G3型患儿的严重程度评分分别为13分和12分，腹泻天数分别为6d和5d，G1型患儿中发热的比例高于G3型（97％与73％），而且发热患儿的最高体温G1型也高于G3型（39℃和38．6℃）。当与G3血清型结合时，P[4]G3和P[8]G3型腹泻严重程度评分无统计学差异，但P[4]型比P[8]型的腹泻天数长（分别为6．5d和5d），而P[8]型呕吐的最高次数比P[4]型多（分别为4次和3次）。结论当与P[8]型结合时，G1型腹泻比G3型腹泻严重。当与G3型结合时，P[4]和P[8]型腹泻严重程度评分无差异。

关键词：轮状病毒属血清分型基因型流行病学计量

急性轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第1期21卷 38-40页

作者：徐锦杨毅孙家娥丁韵珍苏犁云邵彩虹上海复旦大学附属儿科医院 200032

目的研究轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化。方法收集3岁以下因急性轮状病毒腹泻来复旦大学附属儿科医院就诊的小儿75例，以荧光定量RT-PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2，3、4、7、8 mRNA的表达情况。结果起病时间在3d... 详细信息

目的研究轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化。方法收集3岁以下因急性轮状病毒腹泻来复旦大学附属儿科医院就诊的小儿75例，以荧光定量RT-PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2，3、4、7、8 mRNA的表达情况。结果起病时间在3d以内的小儿外周血单个核细胞中TLR 2、3、4、7、8 mRNA的表达水平都有明显升高，P均〈0．05。其中TLR 2．3、8 mRNA表达在发病7d和14d时仍高于对照组，P均〈0．05。TLR 4 mRNA的表达在病情较重的息儿比较轻的患儿高，P〈0．05。结论多种TLR参与了轮状病毒引发的宿主免疫应答反应的启动和调节。

关键词：轮状病毒属单个核细胞受体,病毒

一起由水污染引起的儿童及成人A组轮状病毒腹泻暴发

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中华实验和临床病毒学杂志 2008年第2期22卷 104-106页

作者：李丹地莫兆军周开姣谢华萍李海崔淑娴章青靳淼虞结梅徐子乾张栋梁原新慧程卫霞王忠山方肇寅段招军吉林大学白求恩医学院吉林长春130021 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所广西壮族自治区疾病预防控制中心

目的确定2006年11月广西大新县大范围腹泻暴发性流行的病原及其分子生物学特点。方法进行流行病学个案调查和粪便标本的实验室检测，用ELISA试剂盒进行A组轮状病毒的检测，对检测阳性标本进行轮状病毒分型并对其中4份检测阳性轮状病毒的... 详细信息

目的确定2006年11月广西大新县大范围腹泻暴发性流行的病原及其分子生物学特点。方法进行流行病学个案调查和粪便标本的实验室检测，用ELISA试剂盒进行A组轮状病毒的检测，对检测阳性标本进行轮状病毒分型并对其中4份检测阳性轮状病毒的vP7全基因扩增。结果采集的64份腹泻患者粪便标本中共有30份检测为轮状病毒阳性，总阳性率为46．9％，此次暴发的流行病学和临床特征也符合轮状病毒腹泻特征，RT-PCR进行G／P分型显示为GIP[8]型轮状病毒，VP7氨基酸显示第68位氨基酸改变。结论GIP[8]型A组轮状病毒是此次腹泻暴发的病原。值得注意的是，此次A组轮状病毒暴发累及儿童和成人。

关键词：轮状病毒属腹泻疾病暴发流行基因型

中国轮状病毒非结构蛋白NSP4基因变异特征的分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2003年第1期17卷 10-14页

作者：王大燕王健伟徐倏燊温乐英毛宇荣于修平洪涛山东大学医学院济南250012 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

目的　研究我国轮状病毒流行株NSP4基因的变异特点。方法　对近年来从我国不同地区获得的 2 7份人轮状病毒流行株的NSP4基因用RT PCR进行扩增 ,克隆后进行全长cDNA序列分析 ,并利用Clustal× 1.8,TreeView3 2及DNAStar软件与参比株Wa、... 详细信息

目的　研究我国轮状病毒流行株NSP4基因的变异特点。方法　对近年来从我国不同地区获得的 2 7份人轮状病毒流行株的NSP4基因用RT PCR进行扩增 ,克隆后进行全长cDNA序列分析 ,并利用Clustal× 1.8,TreeView3 2及DNAStar软件与参比株Wa、KUN、AU 1、EW及来自GenBank的OSU、SA11、Hochi、US2 44、Bristol株的NSP4序列进行分析比较。采用PCR分型方法对VP7血清型进行鉴定 ,确定轮状病毒G型与NSP4基因型的关系。结果　氨基酸同源性比较表明 ,我国轮状病毒不同流行株NSP4之间同源性为 81.7%～ 99.4% ,据此可将 2 7株RVNSP4分为 2组 ,分别以Wa株和KUN株为代表 ,其中以Wa组为主。组内同源性分别为 92 .0 %～ 99.4%和 92 .0 %～ 98.9% ,组内变异率分别为 0～ 8 5 %及 1 2 %～ 8 5 %。两组间变异率达 16 6%～ 2 1 0 %。氨基酸进化树提示在Wa组内包括 3个亚组。轮状病毒G血清型与NSP4基因型之间的联系不确定。结论　我国流行株NSP4基因主要可分为Wa组和KUN组 ,在Wa组内可形成三个亚组 ,并且在高变区有特征性的氨基酸位点。

关键词：轮状病毒属蛋白质构象基因转变

含轮状病毒NSP3基因病毒样颗粒的构建和表达

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北京大学学报（医学版） 2012年第5期44卷 737-741页

作者：常乐张括张瑞谢洁红李金明王露楠北京协和医学院研究生院北京100730 卫生部北京医院卫生部临床检验中心北京100730

目的:通过改变MS2噬菌体衣壳蛋白RNA包装位点的亲和力,构建并表达含轮状病毒NSP3基因耐RNA酶的病毒样颗粒,并探讨其稳定性。方法:设计含PvuⅠ和KpnⅠ酶切位点的上、下游引物,扩增1 049 bp轮状病毒NSP3基因片段,并将包装位点-5位的U替换... 详细信息

目的:通过改变MS2噬菌体衣壳蛋白RNA包装位点的亲和力,构建并表达含轮状病毒NSP3基因耐RNA酶的病毒样颗粒,并探讨其稳定性。方法:设计含PvuⅠ和KpnⅠ酶切位点的上、下游引物,扩增1 049 bp轮状病毒NSP3基因片段,并将包装位点-5位的U替换为C,提高与MS2衣壳蛋白作用的亲和力。用PvuⅠ和KpnⅠ双酶切扩增的目的基因和pACYC-MS2表达载体,连接获得重组载体pACYC-MS2-NSP3,转化TOP10感受态细胞后用PCR验证阳性克隆并测序。阳性克隆转化BL21(DE3)细胞后表达含轮状病毒NSP3基因病毒样颗粒,用超声破碎、纯化获得表达产物,鉴定并讨论其稳定性。结果:成功构建pACYC-MS2-NSP3表达载体并获得了含轮状病毒NSP3基因病毒样颗粒,其可耐受DNA酶和RNA酶的降解,并在-20℃、4℃、室温25℃下10 d保持稳定。结论:通过改变MS2噬菌体衣壳蛋白RNA包装位点的亲和力,可以成功构建耐RNA酶的病毒样颗粒,本研究所构建的病毒样颗粒具有耐RNA酶的特性和良好的稳定性,为轮状病毒实时荧光定量逆转录-PCR的标准品和质控品的研究提供了一个可行的方法。

关键词：轮状病毒属基因,NSP3 病毒粒子核糖核酸酶类