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蓖麻质膜水通道蛋白PIP1.3在仓鼠卵巢细胞中的转运功能

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植物生理学报 2014年第12期50卷 1880-1888页

作者：董乐戴聪杰王芳王云朱国立谢小宾许珊珊刘灿阳林婷泉州师范学院化学与生命科学学院福建泉州362000 内蒙古民族大学农学院内蒙古通辽028042 通辽市农业科学院内蒙古通辽028015

为研究蓖麻质膜水通道蛋白PIP1.3的转运功能,采用RT-PCR技术扩增基因PIP1.3的全长编码区c DNA序列(861 bp),将该序列亚克隆至真核表达载体pc DNA3.1/Myc-His A,酶切、测序分析表明,重组质粒pc DNA3.1PIP1.3-Myc-His阅读框架正确。将pc D... 详细信息

为研究蓖麻质膜水通道蛋白PIP1.3的转运功能,采用RT-PCR技术扩增基因PIP1.3的全长编码区c DNA序列(861 bp),将该序列亚克隆至真核表达载体pc DNA3.1/Myc-His A,酶切、测序分析表明,重组质粒pc DNA3.1PIP1.3-Myc-His阅读框架正确。将pc DNA3.1PIP1.3-Myc-His和连接氯离子敏感性绿色荧光蛋白突变体(EYFP-H148Q-V163S)的pc DNA3.1Hygro-EYFP-H148Q-V163S重组质粒稳定共转染至中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中,RT-PCR和Western blot分析表明,PIP1.3的m RNA和蛋白质在选定CHO细胞克隆中高表达。分别通过荧光法和同位素标记的14C-甘油摄入实验测定该CHO细胞对水分和甘油的通透性,结果表明,该CHO细胞表达的PIP1.3对水分子的转运能力很低,但能选择性转运甘油。

关键词：蓖麻质膜水通道蛋白真核表达转运功能

铅暴露对大鼠血脑脊液屏障通透性、分泌及转运功能的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2014年第2期28卷 188-193页

作者：王苗苗董亚楠闫立成曹福源吕志伟李清钊张艳淑河北联合大学公共卫生学院河北唐山063000 河北联合大学实验管理中心河北唐山063000 河北联合大学医学实验动物中心河北唐山063000

目的探讨铅暴露对血脑脊液屏障通透、分泌和转运功能的影响,为铅神经毒性机制研究提供依据。方法 SD大鼠分别饮用含有0.05%,0.1%和0.2%醋酸铅饮水8周(相当于醋酸铅80,160和320 mg·kg-1)。应用激光共聚焦免疫荧光法检测血清、脉络丛和... 详细信息

目的探讨铅暴露对血脑脊液屏障通透、分泌和转运功能的影响,为铅神经毒性机制研究提供依据。方法 SD大鼠分别饮用含有0.05%,0.1%和0.2%醋酸铅饮水8周(相当于醋酸铅80,160和320 mg·kg-1)。应用激光共聚焦免疫荧光法检测血清、脉络丛和脑脊液中铅含量;Morris迷宫测试潜伏期延长和穿台次数。股动脉灌注伊文氏蓝(EB)和荧光索钠(NaFI),检测脑脊液中EB和NaFI含量;应用激光共聚焦法进行脉络丛中紧密连接黏附分子(JAM)、闭合蛋白的表达分布;ELISA方法检测血清和脑脊液中甲状腺素运载蛋白和瘦素含量。结果染铅大鼠血清、脉络丛和脑脊液中的铅含量明显上升,尤其以CSF中铅含量的增加尤为显著。水迷宫数据显示,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠的潜伏期分别为52±12和(89±19)s,显著高于正常对照组的(28±7)s(P转运功能下降,这可能是铅致中枢神经系统损伤的机制之一。

关键词：铅血脑脊液屏障通透性分泌功能转运功能

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锌对红细胞膜转运功能影响的研究

营养学报 2001年第4期23卷 320-323页

作者：韩军花杨月欣门建华王竹中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所北京100050

目的 :　研究锌对红细胞膜离子转运功能的影响。方法 :　分体内和体外实验。雄性断乳期大鼠按体重随机分为低锌 (LZ)、正常锌 (NZ)和高锌 (HZ)三组 ,每组 1 0只 ,分别用锌含量不同的饲料 (2 .2 ,2 8和 1 2 8mg/kg diet)喂饲 4w,观察锌... 详细信息

目的 :　研究锌对红细胞膜离子转运功能的影响。方法 :　分体内和体外实验。雄性断乳期大鼠按体重随机分为低锌 (LZ)、正常锌 (NZ)和高锌 (HZ)三组 ,每组 1 0只 ,分别用锌含量不同的饲料 (2 .2 ,2 8和 1 2 8mg/kg diet)喂饲 4w,观察锌摄入量不同对大鼠红细胞膜上 Na2 /K2泵、COTS- 1、COTS- 2、Gardos和 RF等通道转运活性的影响 ;体外实验观察加入不同浓度锌 (0、5、1 0、5 0、1 0 0和 5 0 0 μmol/L Zn2 + )对人红细胞膜上这 5种阳离子转运通道活性的影响。结果 :　适宜的锌是保证 Na+ /K+ 泵、COTS- 2和 Gardos通道活性的关键因素之一 ,体内外过高或过低的锌均会抑制其离子转运功能 ,COTS- 1和 RF随锌浓度的升高转运活性增强 ,提示了其部分代偿功能。结论 :　锌对维持红细胞膜的正常离子转运功能有重要意义。

关键词：锌红细胞膜转运功能微量元素

生物人工肾小管体外构建及对氨基酸、钠离子、肌酐转运功能的研究

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中华肾脏病杂志 2004年第2期20卷 118-121页

作者：应旭旻王笑云沈霞南京医科大学第一附属医院肾脏科杭州市中医院肾内科210029

目的探讨体外构建生物人工肾小管(RAD)的方法及5h内RAD在体外对肌酐(Cr)、葡萄糖(Glu)、钠离子(Na+)和天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸的转运功能。方法采用猪肾近曲小管上皮细胞株(LLC-PK1)体外培养,然后植入FH66血液滤过器内腔继续... 详细信息

目的探讨体外构建生物人工肾小管(RAD)的方法及5h内RAD在体外对肌酐(Cr)、葡萄糖(Glu)、钠离子(Na+)和天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸的转运功能。方法采用猪肾近曲小管上皮细胞株(LLC-PK1)体外培养,然后植入FH66血液滤过器内腔继续培养两周构建RAD。测定RAD对Na+、Cr、葡萄糖及4种氨基酸的转运功能,并与未植入LLC-PK1的滤过系统做对照,并观察哇巴因、根皮苷对转运的特异性抑制作用。结果RAD组肌酐滤过率明显低于对照组(P转运功能,且能在5h内稳定维持。

关键词：生物人工肾小管 RAD 体外构建氨基酸钠离子肌酐转运功能生物医学技术

风湿性心脏病心肌细胞内肌浆网钙离子转运功能变化的机制

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中国循环杂志 1999年第1期14卷 41-43页

作者：于伟勇张宝仁朱家麟郝家骅陆方林中国人民解放军第二军医大学上海长海医院胸心外科上海市200433

目的：探讨风湿性心脏病（风心病）慢性心力衰竭时心肌细胞内肌浆网Ca2+转运功能变化的机制。方法：采用Westernblot法测定19例风心病患者（风心病组）和6例意外脑死亡者（对照组）心肌肌浆网钙泵蛋白和兰尼碱受体含量，同时采用草酸盐... 详细信息

目的：探讨风湿性心脏病（风心病）慢性心力衰竭时心肌细胞内肌浆网Ca2+转运功能变化的机制。方法：采用Westernblot法测定19例风心病患者（风心病组）和6例意外脑死亡者（对照组）心肌肌浆网钙泵蛋白和兰尼碱受体含量，同时采用草酸盐易化的肌浆网Ca2+摄取法测定两组心肌肌浆网的Ca2+摄取功能，采用测定“裸露”心肌束的咖啡因敏感性方法测定风心病患者心肌肌浆网的Ca2+释放功能。结果：风心病组钙泵蛋白和兰尼碱受体相对含量比对照组分别显著减少23％（P＜0．01）和10％（P＜0．05），心肌匀浆肌浆网Ca2+摄取量和摄取率也均显著低于对照组（P＜0．05～P＜0．01），并且风心病患者钙泵蛋白相对含量变化与肌浆网Ca2+摄取率变化呈显著正相关（r=0．81，P＜0．01），“裸露”心肌束的相对Ca2+释放速率变化也明显低于正常水平，且与兰尼碱受体相对含量变化密切相关（r=0．67，P＜0．05）。结论：风心病心肌细胞内肌浆网Ca2+摄取和释放功能下降的机制主要与肌浆网的Ca2+摄取和释放蛋白含量变化有关。

关键词：风湿性心脏病心肌细胞肌浆网钙离子转运功能

6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

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中国实验方剂学杂志 2011年第16期17卷 116-119页

作者：郭文峰杨伟鹏王怡薇王彦礼胡灿温鹏高小玲陈蔚文广州中医药大学脾胃研究所广州510405 中国中医科学院中药研究所北京100700 上海市高校中医内科学E-研究院上海中医药大学上海201203

目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物... 详细信息

目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:6-姜酚处理组Caco-2细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常对照组(P转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。

关键词： 6-姜酚肽转运载体1 转运功能环磷酸腺苷

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带3蛋白阴离子转运功能的研究进展

国外医学（输血及血液学分册） 1989年第5期12卷 286-290页

作者：夏前明毛宝龄钱桂生四川泸州医学院附院内科第三军医大学新桥医院

红细胞膜带3蛋白(band 3 protcin,简称带3)具有运输阴离子、钙离子、某些中性氨基酸、乳酸、丙酮酸和单糖等多种物质的功能,还具有血型糖蛋白、膜骨架蛋白和糖酵解酶等的亲和位点,功能广泛,日益受到重视。现就带3蛋白阴离子转运功能的... 详细信息

红细胞膜带3蛋白(band 3 protcin,简称带3)具有运输阴离子、钙离子、某些中性氨基酸、乳酸、丙酮酸和单糖等多种物质的功能,还具有血型糖蛋白、膜骨架蛋白和糖酵解酶等的亲和位点,功能广泛,日益受到重视。现就带3蛋白阴离子转运功能的研究进展作一综述。理化特性 1971年Fairbanks用SDS-PACE分离人红细胞膜蛋白,发现电泳谱第3带带宽而深染,分子量95KDa(80-102KDa)。鼠带3的一级结构已全部确定,共有929个氨基酸残基,带3约占红细胞膜蛋白的25-30%。每个红细胞上约有0.8-1.2×10~6拷贝带3单体,每个单体至少穿膜7次以上。Foxwcll等发现带3也是有核红细胞的一种成分,成熟红细胞膜上的绝大多数带3是中幼红细胞至网织红细胞阶段嵌入红细胞的。

关键词：红细胞带了蛋白阴离子转运功能

水稻qPC1基因启动子功能性变异位点的鉴定及其转运功能

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西南农业学报 2023年第12期36卷 2573-2582页

作者：彭波邱静彭娟何璐璐孔冬艳孙晓宇刘岩阿新祥靳可心孙艳芳庞瑞华周伟赵金会汪全秀信阳师范大学生命科学学院/大别山农业生物资源保护与利用研究院河南信阳464000 信阳市植保植检站河南信阳464000 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/农业部云南稻种资源观测实验站昆明650223

【目的】鉴定水稻种子中蛋白质含量的正调控基因qPC1启动子的功能性变异位点,开发qPC1基因分子标记,并解析其转运功能,为阐明qPC1基因的生物学功能及其利用qPC1基因进行分子育种提供理论依据。【方法】采用基因定点突变、水稻原生质体... 详细信息

【目的】鉴定水稻种子中蛋白质含量的正调控基因qPC1启动子的功能性变异位点,开发qPC1基因分子标记,并解析其转运功能,为阐明qPC1基因的生物学功能及其利用qPC1基因进行分子育种提供理论依据。【方法】采用基因定点突变、水稻原生质体瞬时转化技术和双荧光素酶报告法鉴定qPC1基因启动子功能性变异位点,利用缺陷型酵母互补试验以及水稻根部氨基酸的吸收试验解析qPC1的转运功能。【结果】相对于南洋占qPC1序列,珍汕97 qPC1启动子-7~-12 bp位置处6个碱基(CACAGA)的缺失将导致其启动子活性显著增加。对此设计对应的功能性分子标记PB13,并利用PCR技术在珍汕97与南洋占的重组自交系群体中进行验证。在缺陷型酵母互补试验中发现qPC1蛋白能够转运γ-氨基丁酸、瓜氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、精氨酸和谷氨酸等多种氨基酸,且发现qPC1能促进水稻根对多种氨基酸的吸收,并对苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、谷氨酸和酸性氨基酸具有较快的吸收与转运速率。【结论】水稻qPC1基因启动子区-7~-12 bp位置为其功能性变异位点,qPC1在酵母中能够参与多种氨基酸转运,且在水稻根中能促进氨基酸的吸收与转运,即qPC1蛋白可能是一种广谱性氨基酸转运蛋白。该试验结果为进一步全面阐明qPC1基因调控水稻种子中蛋白质含量的分子机制并利用qPC1基因进行优质水稻新品种的选育提供了重要信息。

关键词：功能性位点 qPC1基因转运功能启动子

理中汤对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

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中国实验方剂学杂志 2011年第10期17卷 108-111页

目的:观察理中汤对Caco-2细胞肽转运载体(PepT1)转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予理中汤处理,并设立空白及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glyc... 详细信息

目的:观察理中汤对Caco-2细胞肽转运载体(PepT1)转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予理中汤处理,并设立空白及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:理中汤处理组Caco-2细胞15,30,60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(4.52±0.57),(6.34±0.57),(7.29±0.64),(8.23±0.67)μmol/孔,高于空白对照组(P转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。

关键词：理中汤肽转运载体1 转运功能环磷酸腺苷