检索结果-南通市图书馆

畜牧兽医学报 1999年第3期30卷 262-266页

作者：吴红专刘福安华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病防治重点开放实验室

在传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆、鉴定的基础上［１］，进一步构建转移载体质粒，为ＩＬＴＶＴＫ基因缺失毒株的构建作准备，先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶｇａｌ线性化，再经ＥｃｏＲＩ不完全酶切，分离含ＳＶ４０... 详细信息

在传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆、鉴定的基础上［１］，进一步构建转移载体质粒，为ＩＬＴＶＴＫ基因缺失毒株的构建作准备，先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶｇａｌ线性化，再经ＥｃｏＲＩ不完全酶切，分离含ＳＶ４０立即早期启动子和增强子的４２Ｋｂ的ＬａｃＺ报告基因片段，并用Ｋｌｅｎｏｗ大片段补平，将克隆ＴＫ基因的载体ｐＴＫ用ＳｎａＢＩ处理，后用Ｔ４ＤＮＡ连接酶将以上两个片段平端连接成重组质粒，转化ＪＭ１０９，在Ｘｇａｌ、ＩＰＴＧ、Ａｍｐ、ＬＢ平板上筛选蓝色菌落，经琼脂糖凝胶电泳筛选到１２个阳性重组子，命名为ｐＰＴＫ，用ｐｓｔＩ和ＨｉｎｄＩＩ单酶切都得到了分子量为８１３Ｋｂ的质粒，进一步用狄高辛标记ＬａｃＺ基因片段作探针对ｐＰＴＫ进行打点杂交，结果均成阳性，证明了ＬａｃＺ基因已插入了ｐＴＫ，脂质体转染法也得到了蓝斑病毒，结果表明我们已成功构建了转移载体质粒ｐＰＴＫ。

关键词：传染性喉气管炎病毒 TK基因转移载体质粒 ILTV

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组杆状病毒的研究——Ⅱ.带标记的多角体转移载体质粒的构建

引用

中山大学学报(自然科学版)(中英文) 1989年第4期 114-116页

作者：王珣章谢伟东龙綮新中山大学昆虫学研究所生物工程研究中心

用大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因,杆状病毒ETL启动子和含多角体基因的病毒DNA片段构建了多角体转移载体质粒pEZGL,还对其特点进行了讨论。

关键词：杆状病毒苜蓿尺蠖转移载体质粒启动子

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

杆状病毒双基因表达载体转移质粒的构建

引用

病毒学报 1992年第3期8卷 283-286页

作者：王珣章谢伟东龙綮新苏德明钟江蒲蛰龙中山大学昆虫学研究所中山大学生物防治国家重点实验室复旦大学病毒学研究室

杆状病毒载体系统的建立和发展,是80年代真核基因表达研究领域的重大进展之一。为了弥补用传统的杆状病毒载体系统重组的病毒只能经注射感染幼虫的不足,我们构建了能将外源基因和多角体蛋白基因同时插入杆状病毒基因组中的转移载体质粒p... 详细信息

杆状病毒载体系统的建立和发展,是80年代真核基因表达研究领域的重大进展之一。为了弥补用传统的杆状病毒载体系统重组的病毒只能经注射感染幼虫的不足,我们构建了能将外源基因和多角体蛋白基因同时插入杆状病毒基因组中的转移载体质粒pSXIVVI^+X3系列,建立起除能保留传统系统高效表达外源基因的特点外,还具有包含体,能以口服方式大规模感染粉纹夜蛾(Tricoplusia ni)幼虫的杆状病毒载体体系。本文报道以上述质粒为基础的杆状病毒双基因表达载体转移质粒的构建。

关键词：杆状病毒转移载体质粒双基因载体

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE^-/gI^-/GFP^+缺失株的构建

引用

微生物学报 2003年第1期43卷 15-20页

作者：姜焱侯玉峰陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室南京210095 南京出入境检验检疫局南京210001

在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部... 详细信息

在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部分 ,并在下游引入一个多克隆位点 ,构建了缺失转移载体pgEI GFP。用DOTAP转染试剂盒将pgEI GFP转染了感染PRV SH的BHK 2 1细胞 ,待出现 80 %病变后收获病毒 ,并以蚀斑法得到纯化的缺失了gE gI重组病毒株。小鼠试验证实了缺失株的毒力有所下降。

关键词：伪狂犬病病毒上海株 PRV-SH gE^-/gI^-/GFP^+缺失株构建转移载体质粒绿色荧光蛋白(GFP)表达盒

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

含GFP报告基因的伪狂犬病病毒上海株gE-gI基因部分缺失株的构建

引用

农业生物技术学报 2002年第4期10卷 363-366页

作者：姜焱侯玉峰陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室南京出入境检验检疫局南京 210001 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室南京 210095

在伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上,进一步构建了转移载体质粒,为PRV-SH的gE-gI基因部分缺失毒株的构建作准备。将gI和gE基因克隆入pUC18中构建pgEI载体,利用gE基因中的酶切位点缺失掉gE基因... 详细信息

在伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上,进一步构建了转移载体质粒,为PRV-SH的gE-gI基因部分缺失毒株的构建作准备。将gI和gE基因克隆入pUC18中构建pgEI载体,利用gE基因中的酶切位点缺失掉gE基因5’端363 bp,并把绿色荧光蛋白(GFP)基因表达盒插入到缺失部分。通过酶切鉴定,表明GFP基因已插入到pgEI中,构建了含GFP的缺失转移载体pgEI-GFP。用DOTAP试剂将pgEI-GFP转染感染了PRV-SH株的兔肾(RK)细胞,待出现80％以上的细胞病变时收获病毒,并以GFP为标志,通过蚀斑法得到纯化重组病毒,命名为PFDE/DI。

关键词：伪狂犬病病毒 gE基因 gI基因转移载体质粒绿色荧光蛋白(GFP)

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：