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转录激活蛋白-1与纤维化病变的关系

国际口腔医学杂志 2004年第S1期32卷 194-197页

作者：刘琳中南大学湘雅二医院口腔科

转录激活蛋白-1是一种重要的核内转录因子,外界刺激通过多种信号转导途径激活其表达,识别靶基因上的结合位点与之结合后启动基因的调控机制,使细胞产生对外界刺激的应激反应。多项研究提示转录激活蛋白-1参与细胞因子及胶原相关基因常... 详细信息

转录激活蛋白-1是一种重要的核内转录因子,外界刺激通过多种信号转导途径激活其表达,识别靶基因上的结合位点与之结合后启动基因的调控机制,使细胞产生对外界刺激的应激反应。多项研究提示转录激活蛋白-1参与细胞因子及胶原相关基因常表达的各种纤维化病变发病过程。

关键词：转录激活蛋白-1 细胞因子胶原纤维化基因调控

4-羟基壬烯醛引起支气管上皮细胞白细胞介素-8升高的机制及银杏内酯B的拮抗作用

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中华结核和呼吸杂志 2008年第5期31卷 372-377页

作者：于亮熊丽红冉丕鑫广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所 510182 深圳市第二医院急诊科

目的探讨4-羟基壬烯醛（4-HNE）引起人支气管上皮细胞（16HBE）前炎因子白细胞介素-8（IL-8）升高的机制，以及银杏内酯B对其的拮抗作用。方法实验分组为4-HNE（10μmol／L）组、银杏内酯B（100μmol／L）孵育＋4-HNE（10μmol／L）组... 详细信息

目的探讨4-羟基壬烯醛（4-HNE）引起人支气管上皮细胞（16HBE）前炎因子白细胞介素-8（IL-8）升高的机制，以及银杏内酯B对其的拮抗作用。方法实验分组为4-HNE（10μmol／L）组、银杏内酯B（100μmol／L）孵育＋4-HNE（10μmol／L）组和正常对照组3组，在刺激支气管上皮细胞0．5、2、4、8、12h后，检测细胞IL-8和IL-8mRNA的表达水平、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）1／2、转录激活蛋白-1（AP-1）的活性；观察MAP激酶（MEK）1抑制剂PD98059阻断ERK1信号转导途径后，对4-HNE引起的AP-1结合活性和IL-8生成的影响。检测上述3个实验组AP-1的结合活性。应用方差分析和t检验进行统计学处理。结果4-HNE组、银杏内酯B孵育＋4-HNE组、正常对照组刺激细胞4h后，细胞上清IL-8值分别为（98．3±4．2）、（88．2±5．3）和（65．3±6．2）μg／L；刺激12h后细胞上清IL-8值分别为（116．5±5．6）、（102．8±4．7）和（63．7±6．6）μg／L。4-HNE组0．5、2、4、8、12h的磷酸化ERKl水平高于对照组（t值为2．83—14．03，P均〈0．05）；4-HNE、银杏内酯B孵育＋4-HNE组、PD98059＋4-HNE组及正常对照组的AP-1结合活性差异有统计学意义（F值为21．49-194．16，P均〈0．01）。PD98059孵育2h，4-HNE作用2、4、8、12h后，IL-8表达和AP-1结合活性明显低于未用PD98059孵育4-HNE刺激组。银杏内酯B＋4-HNE组AP-1结合活性低于4-HNE组。结论4-HNE可以通过ERK1途径增强AP-1转录活性，促进支气管上皮细胞IL-8表达。而银杏内酯B可通过抑制AP-1活性，减少4-HNE引起的支气管上皮细胞IL-8的合成。

关键词：银杏内酯类白细胞介素8 4-羟基壬烯醛转录激活蛋白-1

秦艽与威灵仙组分配伍对类风湿关节炎大鼠的治疗作用

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中国临床药理学杂志 2023年第21期39卷 3139-3143页

作者：郭从嘉吴国泰高慧琴郑丽霞李飒王丽明郝倩莹甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730101 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃兰州730101

目的观察秦艽与威灵仙组分配伍对类风湿关节炎(RA)模型大鼠的治疗作用,探索作用机制。方法采用Ⅱ型胶原复制关节炎(CIA)大鼠模型,造模成功大鼠用随机数表法分为模型组、甲氨蝶呤组(0.38 mg·kg^(-1)甲氨蝶呤)、木龙组(5.06 mg·kg^(-1)... 详细信息

目的观察秦艽与威灵仙组分配伍对类风湿关节炎(RA)模型大鼠的治疗作用,探索作用机制。方法采用Ⅱ型胶原复制关节炎(CIA)大鼠模型,造模成功大鼠用随机数表法分为模型组、甲氨蝶呤组(0.38 mg·kg^(-1)甲氨蝶呤)、木龙组(5.06 mg·kg^(-1)木兰花碱+150.45 mg·kg^(-1)龙胆苦苷)、木獐组(5.06 mg·kg^(-1)木兰花碱+3.46 mg·kg^(-1)獐牙菜苷)、木獐苦组(5.06 mg·kg^(-1)木兰花碱+9.30 mg·kg^(-1)獐牙菜苦苷)、灵龙组(16.43 mg·kg^(-1)灵仙新苷+150.45 mg·kg^(-1)龙胆苦苷)、灵獐组(16.43 mg·kg^(-1)灵仙新苷+3.46 mg·kg^(-1)獐牙菜苷)、灵獐苦组(16.43 mg·kg^(-1)灵仙新苷+9.30 mg·kg^(-1)獐牙菜苦苷),另设正常组,每组8只,灌胃给药,每天1次,连续15 d。观察大鼠足跖肿胀度、关节炎指数(AI);以免疫组化法测定大鼠踝关节AP-1蛋白表达水平;以实时荧光定量聚合酶链反应法测定大鼠踝关节AP-1 mRNA表达水平。结果模型组、甲氨蝶呤组、木龙组、木獐组、木獐苦组、灵龙组、灵獐组、灵獐苦组大鼠足跖肿胀度分别为0.78±0.10、0.55±0.10、0.53±0.10、0.63±0.08、0.58±0.13、0.56±0.12、0.61±0.11和0.60±0.10;关节炎指数分别为3.13±0.17、2.08±0.39、2.25±0.30、2.38±0.42、2.25±0.46、2.46±0.40、2.33±0.47和2.13±0.35;甲氨蝶呤组、灵獐苦组上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P1,P1蛋白水平分别为0.10±0.01、0.28±0.02、0.12±0.01、0.23±0.03、0.19±0.02、0.15±0.01、0.17±0.02、0.15±0.01和0.12±0.01;AP-1 mRNA分别为1.00±0.02、2.92±0.03、1.11±0.02、2.12±0.04、2.43±0.04、1.34±0.02、1.55±0.04、1.70±0.04、1.18±0.03;与模型组比较,除木龙组大鼠踝关节AP-1蛋白表达水平外,各配伍组AP-1蛋白和mRNA均显著降低(均P1)。结论秦艽与威灵仙组分配伍对RA模型大鼠具有治疗作用,其机制与降低血清Bcl-2水平及抑制AP-1异常表达有关。

关键词：秦艽威灵仙组分配伍类风湿关节炎 B淋巴细胞瘤-2 转录激活蛋白-1

秦艽—威灵仙组分配伍对RA模型大鼠抗炎作用机制研究

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秦艽—威灵仙组分配伍对RA模型大鼠抗炎作用机制研究

作者：郭从嘉甘肃中医药大学

学位级别：硕士

目的:基于UNIFI数据库平台,运用超高效液相混合四极杆串联飞行时间质谱（UP LC-Q-TOF/MS）技术对秦艽、威灵仙水煎液中主要有效成分进行定性定量分析;探讨秦艽、威灵仙组分配伍对RA模型大鼠的抗炎效果及作用机制。方法:1.选择Waters Acq... 详细信息

目的:基于UNIFI数据库平台,运用超高效液相混合四极杆串联飞行时间质谱（UP LC-Q-TOF/MS）技术对秦艽、威灵仙水煎液中主要有效成分进行定性定量分析;探讨秦艽、威灵仙组分配伍对RA模型大鼠的抗炎效果及作用机制。方法:1.选择Waters Acquity UPLC BEH C色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相进行样品梯度洗脱,流速保持在0.4 m L·min,柱温恒定设置为45℃,进样体积0.5μL;采用装备电喷雾离子源（ESI）的Xevo G2-S-Q-tof飞行时间质谱仪在正负离子模式下分别扫描并采集数据。应用Masslynx 4.1及UNIFI软件进行数据处理,结合对照品、裂解规律、质谱数据、文献资料及化合物数据库进行信息匹配验证;以分子离子峰的峰面积对秦艽威灵仙混合煎煮液中主要有效成分进行含量测定。2.选取5～6 w龄SPF级SD大鼠72只,雌雄各半。除空白组外,其余均采用Ⅱ型胶原诱导复制胶原诱导型关节炎大鼠模型（CIA）。按随机数表法将造模成功的64只大鼠进行分组,包括模型组、甲氨蝶呤组(0.3750 mg·kg)、龙胆苦苷配伍木兰花碱组(150.5+5.061 mg·kg)、龙胆苦苷配伍灵仙新苷组(150.5+16.43 mg·kg)、獐牙菜苷配伍木兰花碱组(3.456+5.062 mg·kg)、獐牙菜苷配伍灵仙新苷组(3.456+16.43 mg·kg)、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱组(9.303+5.062 mg·kg)、獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷组(9.303+16.43 mg·kg),每组8只,共计9组。各组分别使用相应药液或生理盐水连续灌胃15天。实验中观察并记录各组大鼠一般状态、足跖肿胀度、关节炎指数评分（AI）;取材后,观测大鼠免疫脏器指数及血沉变化;苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠踝关节组织病理学变化;酶联免疫吸附技术（ELISA）检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、前列腺素E（PGE）、抗环瓜氨酸肽抗体（Anti-CCP Ab）含量;免疫组织化学技术（IHC）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠踝关节NF-κB、AP-1蛋白含量;实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-PCR）检测大鼠踝关节NF-κB、AP-1基因表达。实验所得数据均采用SPSS 25.0统计软件进行统计学分析。结果:1.化学成分定性鉴别:从秦艽单煎液中鉴定了13个成分,主要包含环烯醚萜苷类化合物10个,呫吨酮及色原酮类化合物2个,脂肪酸类化合物1个;从威灵仙单煎液中鉴定了26个成分,主要包含核糖-γ-内酯酮（D-ribono-γ-lactone）衍生物10个、酚酸类2个、单萜苷类2个、生物碱类1个、三萜皂苷类11个;从秦艽威灵仙混煎液中检出11个离子流强度高的成分,主要包括核糖-γ-内酯酮（D-ribono-γ-lactone）衍生物2个、环烯醚萜苷类5个、生物碱类1个、三萜皂苷类3个。混煎液中未发现全新成分。2.化学成分含量测定:实验测得,秦艽威灵仙混煎液中龙胆苦苷生药含量为143.3mg·g,獐牙菜苷为3.291 mg·g,獐牙菜苦苷为8.860 mg·g,木兰花碱为4.821mg·g,灵仙新苷为15.65 mg·g;秦艽单煎液中龙胆苦苷生药含量为87.30 mg·g,獐牙菜苷为2.192 mg·g,獐牙菜苦苷为7.442 mg·g;威灵仙单煎液中木兰花碱生药含量为3.713 mg·g,灵仙新苷为9.571mg·g。3.一般状态观察实验中,空白组大鼠精神状态良好,毛发滋润有光泽,饮食和大小便均正常。初次免疫时期,各造模组大鼠精神状况不佳,常侧卧喜聚集;加强免疫后,左后足跖显著肿胀呈紫红色,抗拒按压,不能接触地面,活动时常见前爪攀附拖行、跳跃等现象。经药物治疗后,各给药组大鼠精神状态好转,足跖肿胀逐渐消退,皮肤松弛柔软,足底破溃愈合,按压未见明显反抗,而模型组未见明显改善。4.足跖肿胀度结果加强免疫后,各造模组大鼠足跖肿胀度较空白组显著升高（P1）;经药物干预后,与模型组比较,各给药组足跖肿胀度均明显减轻,其中龙木组作用效果最显著（P1）。***评分结果加强免疫后,与空白组比较,各造模组大鼠的AI评分均有一定上升（P1）;经过药物治疗后,与模型组比较,各给药组足跖肿胀度均不同程度减弱,其中甲氨蝶呤组作用效果最显著,獐苦灵组次之（P1,P0.05）;与模型组比较,獐苦灵组大鼠脾脏指数降低,各组大鼠胸腺指数组间比较无差异;与獐木组比较

关键词：秦艽-威灵仙组分配伍类风湿关节炎核因子-κB 转录激活蛋白-1

IL-17通过Act1/TRAF6/MAPK激活AP-1上调心肌细胞MCP-1表达的机制研究

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IL-17通过Act1/TRAF6/MAPK激活AP-1上调心肌细胞MCP-1表达的机制...

作者：谢昕郑州大学

学位级别：硕士

自身免疫性疾病的发生和进展中出现的比较早的炎症性因子主要是IL-17,可以促进相对而言比较多的趋化因子的产生。单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)是与炎症的发生存在着密切关系的一种因子,在病毒性心肌炎(v... 详细信息

自身免疫性疾病的发生和进展中出现的比较早的炎症性因子主要是IL-17,可以促进相对而言比较多的趋化因子的产生。单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)是与炎症的发生存在着密切关系的一种因子,在病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)心肌组织中单个核细胞的浸润中发挥着重要的作用。在我们以往的研究中发现MCP-1可以通过其受体CCR2介导VMC心肌损伤,并且IL-17能够通过上调MCP-1的表达加重心肌细胞的损伤。然而IL-17上调心肌细胞MCP-1的表达机制目前还不是非常明确,通过阐明其发生机制,减少MCP-1的表达这将对缓解VMC的发生发展很有意义。启动子是在转录途径被激活后发挥着动员作用的DNA序列,与转录因子结合后在调节基因的转录方面有着举足轻重的地位。转录因子AP-1(Activator protein-1)是与炎症反应的发生过程中有着亲密关系的重要的一个核转录因子,一般是存在于基因的启动子上面的,在多种信号转导通路中发挥重要作用,近几年的研究备受关注。研究发现,IL-17可以与存在与不同细胞表面的受体IL-17R结合来激活AP-1,同时在一些细胞中激活的AP-1能够上调MCP-1的表达。但是在IL-17上调心肌细胞中MCP-1的表达是否涉及AP-1的激活,目前还不非常明白。IL-17与IL-17RA结合后可能触发下游的信号转导通路IL-17R-Act1-TRAF6,并且有研究发现在一些细胞中IL-17可以通过MAPK信号转导通路介导AP-1的活化从而刺激MCP-1的表达,但是,IL-17通过何种信号转导通路上调MCP-1的表达,目前其机制还不是非常明白。我们通过软件预测发现多种转录因子的结合位点存在于MCP-1的启动子上,如AP-1、NF-κB、SP-1等结合位点。鉴于此,我们推测IL-17与IL-17R结合后可能通过Act1/TRAF6/MAPK信号通路激活转录因子AP-1进而上调心肌细胞MCP-1的表达,从而介导VMC的进展,这对于病毒性心肌炎的发病机制的研究很有意义,也将为病毒性心肌炎的诊疗提供一个新的靶点。目的研究IL-17能否通过Act1/TRAF6/MAPK信号转导通路激活转录因子AP-1进而上调心肌细胞MCP-1表达。方法***/c小鼠的心肌细胞采用差速贴壁的方法进行分离,并对心肌细胞进行原代培养。2.设计含有心肌细胞MCP-1启动子的目的基因的特定引物,然后将启动序列与荧光素酶报告基因载体pGL3-basic结合,构建荧光素酶报告基因载体pGL3-MCP-1-Luc。3.双荧光素酶报告基因系统检测不同浓度的IL-17以及KCTD1、Act1siRNA、TRAF6 inhibitor、LY294002、SB203580通路分子抑制作用下pGL3-MCP-1-Luc荧光素酶的相对活性。*** blot检测IL-17作用不同时间下Act1、TRAF6、MAPK和c-jun磷酸化的表达情况。*** blot以及ELISA检测信号转导通路蛋白的小分子抑制剂或siRNA作用后,心肌细胞MCP-1以及AP-1小分子c-jun磷酸化的表达。***17.0软件建立数据库对结果分析。组间的对比采用单因素方差进行分析,实验组之间的对比采用单因素方差分析中的LSD-t检验进行两两比较,检验水准为α=0.05。结果1.荧光素酶报告基因载体pGL3-MCP-1-Luc的鉴定。经酶切电泳及测序确定载体构建成功;同时荧光素酶报告基因系统检测IL-17作用下pGL3-MCP-1-Luc荧光素酶的相对活性,结果显示:不同浓度(0、5、10、50、100ng/ml)的IL-17刺激报告基因载体pGL3-MCP-1-Luc,每组均与未加入IL-17的心肌细胞相比,荧光活性增加(P0.05)。***-17作用下心肌细胞Act1、TRAF6、p-p38和p-c-jun表达分析。IL-17作用于心肌细胞5min、15min和30min的结果表明,Act1、TRAF6、p-p38和p-c-jun含量随着时间的延长呈增加状态,与未加入IL-17前相比具有统计学意义(P<0.05)。***1/TRAF6/p38MAPK和AP-1的在IL-17上调心肌

关键词：病毒性心肌炎白介素-17 单核细胞趋化蛋白-1 转录激活蛋白-1 Act1/TRAF6/MAPK信号转导通路

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白（GILZ）与炎症反应关系的初步研究

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糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白（GILZ）与炎症反应关系的初步研...

作者：李波华中科技大学

学位级别：硕士

目的:初步探讨糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在炎症反应过程中的作用机理。方法:用无血清培养基分两组培养人单核细胞系THP-1细胞,其中一组加入地塞米松刺激,12小时后提取两组细胞总RNA和总蛋白,运用半定量逆转录-聚合酶链反应... 详细信息

目的:初步探讨糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在炎症反应过程中的作用机理。方法:用无血清培养基分两组培养人单核细胞系THP-1细胞,其中一组加入地塞米松刺激,12小时后提取两组细胞总RNA和总蛋白,运用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法在转录水平检测GILZ基因;运用蛋白质印迹(Western blotting)方法在翻译水平检测转录因子NF- B与AP-1的表达。收集10例临床创伤患者伤后24小时内的外周血,提取白细胞后分两组给予无血清培养基,并在其中一组加入地塞米松刺激,培养12小时后提取白细胞总RNA和总蛋白,运用半定量RT-PCR方法在转录水平检测GILZ基因;运用Western blotting方法在翻译水平检测NF- B与AP-1的表达。结果:在地塞米松刺激下,刺激组THP-1细胞和创伤患者外周血白细胞的GILZ mRNA表达水平比对照组升高(P1);刺激组的NF- B与AP-1蛋白表达水平低于对照组(P1),差异具有极显著性。结论:糖皮质激素可上调GILZ基因的表达;GILZ的高表达可以抑制转录因子NF- B与AP-1的活性,具有抗炎症反应作用。

关键词：糖皮质激素地塞米松糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白核转录因子- B 转录激活蛋白-1 全身炎症反应综合征

姜黄素防治慢性低O_2高CO_2大鼠肺动脉高压与c-Jun、c-Fos的关系研究

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中国临床药理学与治疗学 2005年第10期10卷 1118-1122页

作者：林全王良兴周向锋黄晓颖陈少贤温州医学院附属一院呼吸科浙江金华职业技术学院医学院

目的：研究姜黄素对慢性低O_2高CO_2大鼠肺动脉高压及肺动脉管壁c-Jun和c-Fos表达的影响。方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组、低O_2高CO_2组、低O_2高CO_2+姜黄素组(简称姜黄组)。采用图像分析、免疫组化和组织原位杂交技术等方法观... 详细信息

目的：研究姜黄素对慢性低O_2高CO_2大鼠肺动脉高压及肺动脉管壁c-Jun和c-Fos表达的影响。方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组、低O_2高CO_2组、低O_2高CO_2+姜黄素组(简称姜黄组)。采用图像分析、免疫组化和组织原位杂交技术等方法观察姜黄素对慢性低O_2高CO_2大鼠肺动脉压力、血管显微结构及肺动脉管壁原癌基因c-Jun和c-Fos表达影响。结果：血流动力学检测显示姜黄素组mPAP较低O_2高CO_2组明显降低(P＜0．01)，组间mCAP比较差异无显著性。光镜下姜黄素组肺细小动脉内弹力板扭曲、中膜平滑肌细胞增生及管腔狭窄程度均明显轻于低O_2高CO_2组。电镜下姜黄素组大鼠肺细小动脉内皮细胞结构基本正常，中膜平滑肌细胞增生较轻，胶原少见；外膜胶原纤维较低O_2高CO_2大鼠明显减少。免疫组化法发现肺细小动脉c-Jun和c-Fos平均吸光度值低O_2高CO_2组明显高于正常对照组(P＜0．01)，姜黄素组明显低于低O_2高CO_2组(P＜0．01)；原位杂交法显示肺细小动脉管壁c-Jun mRNA平均吸光度值姜黄素组显著低于低O_2高CO_2组(P＜0．01)。结论：姜黄素有抑制慢性低O_2高CO_2性肺动脉高压和改善肺血管结构重建的作用，下调c-Fos、c-Jun及其基因的表达，抑制血管平滑肌细胞的增殖可能是其重要作用机制。

关键词：姜黄素低氧慢性高碳酸血高血压肺性转录激活蛋白-1

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏AP-1和TGF-β_1表达的影响

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中国中西医结合肾病杂志 2010年第12期11卷 1057-1061,1138页

作者：王小琴向少伟唐庆湖北省中医院肾内科武汉430061 湖北中医学院

目的:探讨肾安提取液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏转录激活蛋白-1(AP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组(厄贝沙坦***-1.d-1)、肾安低、中、高剂量组(肾安... 详细信息

目的:探讨肾安提取液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏转录激活蛋白-1(AP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组(厄贝沙坦***-1.d-1)、肾安低、中、高剂量组(肾安提取液***-1.d-1、***-1.d-1、***-1.d-1),另设正常对照组,疗程4周。检测肾脏AP-1(western blot分析法)、TGF-β1mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白(western blot分析法)、纤连蛋白(免疫化学法)表达;并检测血糖、24h尿蛋白定量、血肌酐(Scr)、肾质量指数、肾小球硬化指数。结果:肾安各组及厄贝沙坦组肾脏AP-1和TGF-β1mRNA及蛋白表达较模型组明显降低(P蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数均较模型组明显改善(P0.05);模型组及各药物干预组间血糖差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾安提取液可延缓糖尿病肾病的发生发展,机制可能与抑制AP-1和TGF-β1的表达有关。

关键词：糖尿病肾病肾安提取液转录激活蛋白-1 转化生长因子-β1

罗格列酮对高糖环境中大鼠系膜细胞转化生长因子β_1抑制作用的研究

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中国药师 2010年第11期13卷 1577-1580页

作者：包艳贾汝汉李竞孙永林王颖武汉大学人民医院内分泌科武汉430060 武汉大学人民医院肾内科武汉430060

目的:观察罗格列酮对高糖培养基中大鼠系膜细胞转录激活蛋白-1(AP-1)活性及转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达的抑制作用,探讨罗格列酮对肾脏的直接保护作用及相关机制。方法:将大鼠系膜细胞分为对照组(C组,普通MEM培养基,含5.6 mmol·L^(... 详细信息

目的:观察罗格列酮对高糖培养基中大鼠系膜细胞转录激活蛋白-1(AP-1)活性及转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达的抑制作用,探讨罗格列酮对肾脏的直接保护作用及相关机制。方法:将大鼠系膜细胞分为对照组(C组,普通MEM培养基,含5.6 mmol·L^(-1)葡萄糖)、高糖组(H组,30 mmol·L^(-1)高糖MEM培养基)、甘露醇组(M组,24.2 mmol·L^(-1)甘露醇+C组)、大剂量罗格列酮干预组(RH组,H组+20μmol·L^(-1)罗格列酮)、小剂量罗格列酮干预组(RL组,H组+10μmol·L^(-1)罗格列酮);N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC-抗氧化剂)干预组(N组,H组+5 mmol·L^(-1)NAC)。48 h后,采用EMSA检测AP-1的活性,RT-PCR和ELISA法检测TGF-β_1 mRNA及蛋白含量。结果:对照组和甘露醇组AP-1和TGF-β_1的表达无明显差别,高糖组AP-1活性、TGF-β_1 mRNA及蛋白水平较对照组明显升高,采用NAC和罗格列酮(20μmol·L^(-1))干预后,两者表达均较高糖组明显下降。结论:罗格列酮可通过抑制AP-1活性而降低高糖所诱导的TGF-β_1表达,这可能是罗格列酮发挥直接肾脏保护作用的机制之一。

关键词：罗格列酮转化生长因子β1 转录激活蛋白-1