检索结果-南通市图书馆

枣ZjERF53转录因子的转录激活分析及互作蛋白筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2023年第3期21卷 789-798页

作者：薛清屯沈兵琪张钟李新岗西北农林科技大学林学院杨凌712100 西北农林科技大学国家林业和草原局枣工程技术研究中心杨凌712100

乙烯应答因子广泛参与调控植物生长发育和非生物胁迫响应过程。本研究克隆了1个在枣(Ziziphus jujuba Mill.)果实成熟后期高表达的ZjERF53转录因子,对其进行了亚细胞定位、转录激活活性和互作蛋白筛选研究,以揭示其生物学功能。研究结... 详细信息

乙烯应答因子广泛参与调控植物生长发育和非生物胁迫响应过程。本研究克隆了1个在枣(Ziziphus jujuba Mill.)果实成熟后期高表达的ZjERF53转录因子,对其进行了亚细胞定位、转录激活活性和互作蛋白筛选研究,以揭示其生物学功能。研究结果表明:ZjERF53基因编码区序列全长为1155 bp,能在细胞核和细胞膜中表达;ZjERF53具有自激活活性,其转录激活功能区域位于蛋白序列C端;以无自激活活性pGBKT7-ZjERF53-N为诱饵,通过酵母双杂交技术筛选枣果实cDNA文库,共获得4个互作蛋白。本研究揭示了ZjERF53可能参与枣树抗病和抗旱等非生物胁迫响应,为解析ERF参与调控枣树生物学过程的分子机制提供了工作基础。

关键词：枣(Ziziphus jujuba Mill.) 乙烯应答因子转录激活酵母双杂交互作蛋白

大豆GmNAC120生物信息学分析及转录激活研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大豆科学 2023年第3期42卷 284-290页

作者：聂天明刘灿倪志勇于月华新疆农业大学农学院新疆乌鲁木齐830052 新疆农业大学生命科学学院新疆乌鲁木齐830052

NAC转录因子是植物中最大的特异性转录因子家族之一,广泛参与植物生长发育过程,在植物受到逆境胁迫应答后能够发挥重要的作用。为了解析GmNAC120基因的功能,本研究从大豆cDNA中克隆出了GmNAC120基因,采用生物信息学方法分析基因序列及... 详细信息

NAC转录因子是植物中最大的特异性转录因子家族之一,广泛参与植物生长发育过程,在植物受到逆境胁迫应答后能够发挥重要的作用。为了解析GmNAC120基因的功能,本研究从大豆cDNA中克隆出了GmNAC120基因,采用生物信息学方法分析基因序列及其编码蛋白质的特征和结构,采用酵母单杂试验分析编码蛋白的转录激活活性。结果表明:GmNAC120基因开放阅读框为1296 bp,共编码431个氨基酸,分子量为49.684 kD,等电点为4.91。GmNAC120蛋白序列3~153氨基酸位置为1个高度保守的NAC结构域。GmNAC120蛋白不存在信号肽,也不存在跨膜结构,属于亲水性蛋白,位于细胞核中。GmNAC120与野大豆中的NAC蛋白的亲缘性关系较近,氨基酸序列一致性高达99.54%。酵母单杂交试验证明GmNAC120基因具有转录激活活性。

关键词：大豆 GmNAC120 基因克隆生物信息学分析转录激活

油棕EgMYB111亚细胞定位、转录激活活性及表达特性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2024年

作者：周丽霞李睿吴秋妃曹红星冯美利李启黉赵志浩中国热带农业科学院椰子研究所热带作物生物育种全国重点实验室中国热带农业科学院

前期研究发现油棕EgMYB111在低温胁迫下超高水平表达，为进一步探究该基因调控油棕低温胁迫应答的分子机理，本研究克隆EgMYB111基因，并对其进行转录激活活性、亚细胞定位、顺式作用元件及表达特性分析。结果表明EgMYB111基因含有一个R... 详细信息

前期研究发现油棕EgMYB111在低温胁迫下超高水平表达，为进一步探究该基因调控油棕低温胁迫应答的分子机理，本研究克隆EgMYB111基因，并对其进行转录激活活性、亚细胞定位、顺式作用元件及表达特性分析。结果表明EgMYB111基因含有一个R2R3-MYB保守结构域，定位在叶绿体中，上游启动子区域含有多个与低温胁迫响应相关的顺式作用元件，转录激活活性分析表明EgMYB111的转录自激活活性较强。EgMYB111在低温胁迫24 h时的表达量最大，该研究表明EgMYB111受低温胁迫诱导，在油棕低温胁迫应答过程中起着重要的调控作用。

关键词：油棕 EgMYB111基因转录激活亚细胞定位表达分析

解脂耶氏酵母CRISPR/Cas系统的建立及同时实现转录激活和抑制

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

解脂耶氏酵母CRISPR/Cas系统的建立及同时实现转录激活和抑制

作者：李孟旭天津大学

学位级别：硕士

解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)是一种非常规产油酵母,由于其遗传背景较为清晰,抗逆性强,安全性高,已成为一种优势化学品生产平台。生物体内代谢网络十分复杂,为了调控细胞中的代谢反应,需开发多种合成生物学工具用于基因编辑和表... 详细信息

解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)是一种非常规产油酵母,由于其遗传背景较为清晰,抗逆性强,安全性高,已成为一种优势化学品生产平台。生物体内代谢网络十分复杂,为了调控细胞中的代谢反应,需开发多种合成生物学工具用于基因编辑和表达调控。近年来,CRISPR/Cas技术已被广泛应用以适应新一代微生物细胞工厂开发的需要。在本研究中,首先我们测试了之前并未在解脂耶氏酵母中开发应用的I型CRISPRi系统以及V型的CRISPR-Cas12j系统。首次测定了I型蛋白的抑制效果并且首次验证了Cas12j蛋白无法在解脂耶氏酵母中发挥基因编辑功能。然后我们将转录激活因子直接融合于d Cas蛋白在解脂耶氏酵母中建立了CRISPRa系统,比较了不同转录激活因子的激活效果,成功实现了基因的转录激活。结果表明三元转录激活因子VPR激活效果最佳,对内源启动子的激活倍数达到了1.8倍,并且应用于脂肪醇代谢通路,将产量提高至2.8倍。在此基础之上还成功构建了双sg RNA激活系统。除此之外,我们还首次在解脂耶氏酵母建立了基于scaffold RNA(sc RNA)的CRISPR调控系统,利用sc RNA招募转录调节因子用于基因的表达调控,并且还利用一个双招募系统实现了两个基因的同时转录激活和抑制。我们从d Cas蛋白、sc RNA结构以及转录激活因子三个方面设计并优化了CRISPRa sc RNA系统,最终实现了GFP基因高达7.24倍的激活。并且成功应用于脂肪醇合成基因的激活,将产量提高至736.2 mg/L。之后在利用招募系统成功实现内源基因抑制的基础之上,将同时激活和抑制应用于脂肪醇代谢通路,激活合成通路的同时抑制降解途径,使脂肪醇的产量提高至1.56倍,进一步增加到778.8 mg/L。综上所述,本研究扩充了解脂耶氏酵母的CRISPR工具,首次在解脂耶氏酵母中同时实现了基因的双向转录调控。为解脂耶氏酵母的合成生物学研究以及构建超级细胞工厂提供了新工具。

关键词： CRISPR 转录激活支架RNA 基因调控解脂耶式酵母

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

雌、孕激素受体的转录激活与调控（英文）

生理学报 2016年第4期68卷 435-454页

作者：辛启亮邱静涛崔胜夏国良王海滨中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室北京100193 中国科学院动物研究所干细胞与生殖生物学国家重点实验室北京100101

雌激素受体与孕激素受体都是类固醇激素受体这一进化上高度保守的转录因子家族的重要成员。当雌、孕激素受体分别与其配体在细胞浆中结合后进入核内,与靶基因上特异的DNA响应元件结合,并适时募集一些辅助转录因子,诱导特定基因转录表达... 详细信息

雌激素受体与孕激素受体都是类固醇激素受体这一进化上高度保守的转录因子家族的重要成员。当雌、孕激素受体分别与其配体在细胞浆中结合后进入核内,与靶基因上特异的DNA响应元件结合,并适时募集一些辅助转录因子,诱导特定基因转录表达,影响靶细胞的功能活动。雌、孕激素受体的转录活性还因其在蛋白翻译后所发生的不同修饰而改变。蛋白翻译后的修饰种类繁多。经典的修饰为丝/苏氨酸和酪氨酸残基的磷酸化修饰。近些年的研究发现,泛素化与类泛素化修饰对激素受体的稳定性、在亚细胞定位及其对辅助因子的募集等方面都发挥重要作用,并最终影响激素受体的转录活性。本文旨在对国内外近几年关于雌、孕激素受体的转录活性调控及其在早期妊娠中的生理意义进行综述,这将有助于理解雌、孕激素作用异常相关的女性生殖疾病。

关键词：雌激素受体孕激素受体翻译后修饰转录激活共辅助因子早期妊娠

扁蓿豆MrERF1的转录激活活性、亚细胞定位及表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

草业科学 2021年第6期38卷 1119-1127页

作者：雷雨晴张业猛王海庆中国科学院高原生物适应与进化重点实验室/中国科学院西北高原生物研究所青海西宁810001 中国科学院大学北京100049 青海省作物分子育种重点实验室青海西宁810001

乙烯应答因子(ethylene responsive factor,ERF)广泛存在于植物中,在植物生长、发育和逆境胁迫响应的调节中具有重要作用。本研究根据扁蓿豆(Medicago ruthenica)低温胁迫转录组测序信息,设计特异性引物,利用反转录聚合酶链式反应(rever... 详细信息

乙烯应答因子(ethylene responsive factor,ERF)广泛存在于植物中,在植物生长、发育和逆境胁迫响应的调节中具有重要作用。本研究根据扁蓿豆(Medicago ruthenica)低温胁迫转录组测序信息,设计特异性引物,利用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆了一个受低温胁迫诱导表达的ERF转录因子基因MrERF1。序列分析表明,MrERF1基因包含了一个948 bp的开放阅读框,编码由316个氨基酸组成的序列中含有一个高度保守的AP2结构域,具有典型的ERF转录因子特征。遗传进化分析表明其与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtABR1蛋白的同源性最高。构建表达MrERF1融合增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的载体,本氏烟草(Nicotiana benthamiana)叶片下表皮细胞瞬时表达结果证明Mr ERF1蛋白定位于细胞核。结果表明,构建pGBKT7-MrERF1载体转化AH109酵母感受态细胞具有转录激活活性。对MrERF1在不同组织中的表达分析发现,该基因在扁蓿豆的茎、叶、芽和花序中均有表达,但在根中不表达。进一步分析发现,MrERF1基因的转录与光周期和生物节律无关。此外,MrERF1的表达受高盐、干旱、水淹、低温和脱落酸(abscisic acid,ABA)诱导。本研究表明,MrERF1能够响应多种非生物胁迫,为进一步分析MrERF1的功能奠定了基础。

关键词：扁蓿豆 ERF转录因子亚细胞定位转录激活表达分析半定量反转录聚合酶链式反应非生物胁迫

日本结缕草ZjERF1的克隆、转录激活活性、亚细胞定位及表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

草业学报 2019年第6期28卷 56-65页

作者：滕珂张蕊檀鹏辉岳跃森范希峰武菊英北京草业与环境研究发展中心北京100097 北京林业大学草坪研究所北京100083

ERF转录因子是植物体内最大的一类转录因子之一,在调控植物生长发育和响应环境胁迫等方面发挥着重要的作用。研究利用RACE技术,从日本结缕草中克隆到ZjERF1基因(GenBank登录号为MH294481),开放阅读框为630 bp,编码209个氨基酸残基,含有... 详细信息

ERF转录因子是植物体内最大的一类转录因子之一,在调控植物生长发育和响应环境胁迫等方面发挥着重要的作用。研究利用RACE技术,从日本结缕草中克隆到ZjERF1基因(GenBank登录号为MH294481),开放阅读框为630 bp,编码209个氨基酸残基,含有1个高度保守的AP2结构域,属于典型的ERF转录因子。利用染色体步移技术,成功获得ATG上游1581 bp的启动子序列,生物信息学分析表明其中含有多个响应MeJA等激素和非生物胁迫的作用元件。为分析其转录激活特性,构建了pGBKT7-ZjERF1载体,转化Y2HGold酵母感受态细胞,结果表明其具有较强的转录激活活性。为探析其亚细胞定位情况,成功构建35S::ZjERF1:YFP载体,本生烟草瞬时表达结果证明ZjERF1定位于细胞核。为进一步研究ZjERF1的表达特征,利用实时荧光定量的方法进行了验证,结果表明:ZjERF1在日本结缕草茎中表达量最高,并且与叶片的衰老程度呈正相关性;此外ZjERF1的表达可受200μmol·L^-1 ET、10μmol·L^-1 MeJA和300 mmol·L^-1 NaCl处理的诱导,但受到20%PEG4000的抑制。研究表明ZjERF1是一个可参与多种信号转导途径的优良转录因子,为进一步探索ZjERF1基因的功能及其调控机制奠定了基础。

关键词：日本结缕草 ERF转录因子转录激活亚细胞定位表达分析

希瓦氏菌中CRISPR/dCas9-RpoD介导的同时转录激活和抑制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

希瓦氏菌中CRISPR/dCas9-RpoD介导的同时转录激活和抑制

作者：牛小龙天津大学

学位级别：硕士

电活性微生物(EAMs)通过细胞外电子转移(EET)途径与环境交换电子。EAMs的高效EET通常是多功能生物电化学系统在能源和环境领域实际应用的先决条件。ShewanellaoneidensisMR-1是EAMs中的模式菌之一，广泛用于EET机制和应用研究。而EET过... 详细信息

电活性微生物(EAMs)通过细胞外电子转移(EET)途径与环境交换电子。EAMs的高效EET通常是多功能生物电化学系统在能源和环境领域实际应用的先决条件。ShewanellaoneidensisMR-1是EAMs中的模式菌之一，广泛用于EET机制和应用研究。而EET过程与多种复杂的细胞活动有关，其中涉及大量基因。然而，由于缺乏转录激活工具，对多基因的同时调控既费时又费力，这阻碍了提高S.oneidensisEET效率的进展。因此，迫切需要在S.oneidensisMR-1中开发一种易于操作的多模式调节工具。　　在本文中，我们开发了一种基于CRISPR的多基因调控系统，用于同时激活（CRISPRa）和抑制（CRISPRi）S.oneidensis的基因。首先，通过筛选最佳激活蛋白并确定有效激活范围来实现基因的激活。其次，我们通过设计sgRNA靶向到基因开放阅读框，在dCas9携带着RpoD的情况下实现了转录抑制。第三，通过正交两条靶向不同位置的sgRNA实现同时基因激活和抑制。这种基于CRISPR的多基因组合调控系统成功地用于同时激活细胞分裂基因(MinCDE)和抑制细胞毒性基因(SO_3166)，将微生物燃料电池的功率密度提高2.5倍，有机污染物的降解速率提高2.9倍。这种易于操作、多功能的组合调控工具不仅填补了转录激活工具的空白，而且实现了S.oneidensisMR-1中多个基因的同时转录激活和抑制，为EET提供了一种简单灵活的多基因组合调控方法。

关键词：希瓦氏菌 S.oneidensisMR-1 多基因调控系统细胞分裂基因细胞毒性基因转录激活

环境内分泌干扰物对雌激素受体表达与转录激活的调控效应及分析技术

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

化学进展 2022年第10期34卷 2121-2133页

作者：任志华杨晓溪孙振东任婧桑楠周群芳江桂斌中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室北京100085 中国科学院大学资源环境学院北京100049 国科大杭州高等研究院环境学院杭州310024 山西大学环境与资源学院环境与健康研究中心太原030006

环境内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals, EDCs)种类繁多,来源复杂,环境污染普遍,对野生动物与人类造成了不同程度的暴露。EDCs可通过调控机体内分泌系统,干扰心血管、生殖、神经等多个系统的正常功能,从而引起机体代谢综合... 详细信息

环境内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals, EDCs)种类繁多,来源复杂,环境污染普遍,对野生动物与人类造成了不同程度的暴露。EDCs可通过调控机体内分泌系统,干扰心血管、生殖、神经等多个系统的正常功能,从而引起机体代谢综合征、肥胖症、神经毒性、生殖发育毒性和癌症等的发生发展。污染物调控雌激素受体(Estrogen receptors, ERs)产生内分泌干扰效应是当前EDCs研究的主要方向。本文围绕ERs的基本生理特征、ERs表达与转录激活的分析检测技术,及EDCs调控不同组织来源ERs的生物学意义进行系统综述,以期从ERs激动/拮抗效应的角度,为新型化学品的内分泌干扰效应筛选及分子机制解析提供科学思路。

关键词：新型污染物内分泌干扰效应雌激素受体不同种属转录激活