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家禽MSTN基因转录子的克隆及真核表达

东北农业大学学报 2012年第12期43卷 97-103页

作者：胡兰隋世慧沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110161

为了确定家禽中MSTN基因转录子的种类、序列及表达差异,对1日龄海兰鸡、白羽鸡和寿光鸡腿肌MSTN基因进行RT-PCR扩增、TA克隆、测序及SDS-PAGE分析。结果表明,海兰鸡、白羽鸡和寿光鸡鸡腿肌中均存在3种不同大小的MSTN cDNA;cMSTN-1由1 12... 详细信息

为了确定家禽中MSTN基因转录子的种类、序列及表达差异,对1日龄海兰鸡、白羽鸡和寿光鸡腿肌MSTN基因进行RT-PCR扩增、TA克隆、测序及SDS-PAGE分析。结果表明,海兰鸡、白羽鸡和寿光鸡鸡腿肌中均存在3种不同大小的MSTN cDNA;cMSTN-1由1 128 bp组成,海兰鸡与白羽鸡的cMSTN的序列相同,寿光鸡在第1 115碱基处由G变为A;cMSTN-2由985 bp组成,缺失了cMSTN-1的374～517 bp处序列;海兰鸡和白羽鸡的cMSTN-2与寿光鸡的cMSTN-2相比,均有5处碱基不同,而海兰鸡和白羽鸡只存在2处碱基不同;cMSTN-2在388～390 bp处出现UAA终止密码子;cMSTN-3由754 bp组成,缺失了374～748处的374个核苷酸,在上述三种家禽中cMSTN-3序列相同。转染成纤维细胞48 h后,pEGFP-N1-cMSTN-2表达蛋白质分子质量约为15 ku,而pEGFP-N1-cMSTN-3不表达。这是首次发现三个品种的鸡体内同时存在三种不同大小的MSTN基因转录子,该结果可为进一步确定MSTN基因的作用机理提供试验依据。

关键词： MSTN基因转录子家禽克隆真核表达

免疫球蛋白样转录子在胃癌患者外周血单个核细胞的表达水平及临床意义

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中华消化杂志 2014年第1期34卷 50-52页

作者：叶丽萍杨海登沈玲燕温州医科大学附属台州医院消化内科浙江省临海市317000

研究认为，宿主免疫系统和肿瘤细胞相互作用的结果可能是肿瘤发生发展的重要原因之一。免疫球蛋白样转录子（immunoglobulin—like transcript，ILT）是最近发现的一类HLA—I类受体家族，目前已发现有9个家族成员，在T淋巴细胞、B淋巴... 详细信息

研究认为，宿主免疫系统和肿瘤细胞相互作用的结果可能是肿瘤发生发展的重要原因之一。免疫球蛋白样转录子（immunoglobulin—like transcript，ILT）是最近发现的一类HLA—I类受体家族，目前已发现有9个家族成员，在T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和树突状细胞表面广泛表达，通过转导抑制性或刺激性信号发挥广泛的免疫调节作用。

关键词：免疫球蛋白外周血单个核细胞转录子临床意义胃癌患者肿瘤发生发展细胞相互作用免疫调节作用

鲤鱼(Cyprinus carpio L．)GH受体的分子克隆及其两种转录子的发现

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自然科学进展 2006年第9期16卷 1093-1100页

作者：孙晓凤郭琼林胡炜汪亚平朱作言中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室

应用反转录-PCR及RACE技术,从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因,其开放阅读框编码602个氨基酸,其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域,24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域．序列分析表明：无论... 详细信息

应用反转录-PCR及RACE技术,从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因,其开放阅读框编码602个氨基酸,其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域,24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域．序列分析表明：无论在基因水平还是蛋白质水平,鲤鱼GHR与鲫鱼GHR均具有较高的同源性．用一对基因特异性引物在研究二龄鲤鱼GHR的组织分布时发现：肝与其他组织的扩增产物大小不一致(肝组织中的约小100 bp),测序结果以及基因组PCR表明这是由于一个97 bp的内含子选择性剪切造成的．而以同样引物在4月龄鲤鱼各组织扩增的片段大小是一致的,且与二龄鲤鱼肝以外组织的扩增产物大小一致．鲤鱼GHR两种转录子的出现,系转录时发生拼接变化所致,推测是一种与发育有关的机制．采用半定量RT- PCR方法分析组织相对表达水平,结果显示：GHR在二龄鲤鱼鳃、胸腺、脑组织的表达水平明显低于4月龄鲤鱼．

关键词：生长激素受体(GHR) 分子克隆转录子表达分析鲤鱼

初发慢性髓系白血病bcr/abl融合基因转录子与临床关系的观察

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四川医学 2004年第3期25卷 260-262页

作者：孟文彤刘霆李建军史青向兵崔旭徐才刚黄杰四川大学华西医院四川成都610041

目的　研究初发慢性髓系白血病bcr/abl融合基因转录子类型与临床关系。方法　使用RT PCR对 5 1例初发CML患者进行bcr/abl融合基因转录子检测。结果　b3a2型患者血小板数高于b2a2型患者 ,但b3a2型患者WBC数低于b2a2型患者 (P 0 .0 5 ) ;b... 详细信息

目的　研究初发慢性髓系白血病bcr/abl融合基因转录子类型与临床关系。方法　使用RT PCR对 5 1例初发CML患者进行bcr/abl融合基因转录子检测。结果　b3a2型患者血小板数高于b2a2型患者 ,但b3a2型患者WBC数低于b2a2型患者 (P 0 .0 5 ) ;b3a2型和b2a2型患者比较AKP和Ph1染色体比例无差异 (P >0 .0 5 ) ;M bcr/abl阳性患者伴m bcr/abl阳性率为 47 0 % ,其中b3a2型患者有m bcr/abl融合基因转录子 14例 ,b2a2型患者有 10例。结论　b3a2型CML患者初发时更易有血小板升高表现 ,但b2a2型患者更易有WBC数升高的表现 ,较多的初发CML患者同时伴有m bcr/abl阳性。

关键词：慢性粒细胞白血病 bcr/abl融合基因转录子

双顺反子的MAVS转录子揭示在抗病毒免疫中存在一类截短变异体

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中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第3期21卷 292-292页

作者：郑青亮侯晋

细菌和病毒的mRNA一般都是多顺反子,通过对多顺反子的mRNA进行选择性剪切或选择性翻译,从而选择性去除或增加功能性结构域,最终调控蛋白的多样性和基因的功能。但是在哺乳动物细胞中是否也广泛存在多顺反子的mRNA,其是否能从单个mRNA表... 详细信息

细菌和病毒的mRNA一般都是多顺反子,通过对多顺反子的mRNA进行选择性剪切或选择性翻译,从而选择性去除或增加功能性结构域,最终调控蛋白的多样性和基因的功能。但是在哺乳动物细胞中是否也广泛存在多顺反子的mRNA,其是否能从单个mRNA表达多个蛋白并行使多种功能,是正在探索的问题。MAVS（mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS）是RIG-I和MDA5下游调控Ⅰ型干扰素产生的关键信号蛋白。首先作者在人的多种细胞系中发现MAVS存在相对分子质量分别为72 kD（FL MAVS）和50 kD（miniMAVS）的两种蛋白,分析发现miniMAVS并不是MAVS的转录异构体翻译的产物,也不是FL MAVS发生蛋白酶解的产物。核糖体谱实验发现,

关键词：抗病毒免疫转录子双顺反子 mRNA表达变异体 protein 调控蛋白截短

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RHD基因不同转录子表达载体的构建

中国实验血液学杂志 2012年第1期20卷 173-177页

作者：谢俊杰应燕玲许先国朱发明邵超鹏大连医科大学研究生院辽宁大连116044 深圳市血液中心输血医学研究所广东深圳518035 浙江省血液中心浙江杭州310006

RHD基因存在多种不同的另路剪接的转录子,本研究分别构建正常mRNA及DEL9和DEL89转录子的表达载体。从Rh(D)阳性新生儿脐血网织红细胞中提取总RNA,分别采用一步法和两步法RT-PCR获取完整目的转录子片段,然后分别克隆至pCR4 TOPO测序载体... 详细信息

RHD基因存在多种不同的另路剪接的转录子,本研究分别构建正常mRNA及DEL9和DEL89转录子的表达载体。从Rh(D)阳性新生儿脐血网织红细胞中提取总RNA,分别采用一步法和两步法RT-PCR获取完整目的转录子片段,然后分别克隆至pCR4 TOPO测序载体并测序验证和筛选。用正常RHD cDNA筛选质粒为模板,PCR扩增全长目的基因,然后亚克隆至pcDNA3.1/V5-His TOPO表达载体;DEL9和DEL89转录子直接克隆至表达载体,通过测序验证目的基因序列及插入方向。结果表明,序列分析证实了不同目的基因片段序列和方向正确,表明3种不同RHD转录子的表达载体构建成功。结论:RHD不同转录子表达载体已成功构建,为进一步研究Rh(D)抗原膜表达机理奠定了基础。

关键词： RHD基因转录子序列分析表达载体

一种快速mRNA差异显示技术及用于分离辐射诱导转录子

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生物化学杂志 1997年第6期13卷 622-625页

作者：周平坤孙国敬隋建丽孙志贤军事医学科学院放射医学研究所

介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速ｍＲＮＡ差异显示技术．其特点是不用同位素标记，操作简便，在普通琼脂糖凝胶电泳中就能分辨差异显示的ｃＤＮＡ带，便于ＤＮＡ回收和进一步重组克隆．用此方法成功... 详细信息

介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速ｍＲＮＡ差异显示技术．其特点是不用同位素标记，操作简便，在普通琼脂糖凝胶电泳中就能分辨差异显示的ｃＤＮＡ带，便于ＤＮＡ回收和进一步重组克隆．用此方法成功地分离到电离辐射诱导转录子．

关键词： mRNA差异显示转录子分离辐射诱导

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长链非编码RNA在肝癌中的表达及其功能

中华消化外科杂志 2012年第5期11卷 485-488页

作者：廖博懿周俭樊嘉王征胡捷复旦大学附属中山医院肝外科、复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

人类基因组中，参与编码蛋白的RNA仅占1／5，而4／5的转录子是非编码RNA（noncodingRNA，ncRNA）。长链非编码RNA（long noncodingRNA，lncRNA）是一类在基因组转录中不参与编码蛋白、长度超过200个核苷酸的转录产物，具备多种生物学功... 详细信息

人类基因组中，参与编码蛋白的RNA仅占1／5，而4／5的转录子是非编码RNA（noncodingRNA，ncRNA）。长链非编码RNA（long noncodingRNA，lncRNA）是一类在基因组转录中不参与编码蛋白、长度超过200个核苷酸的转录产物，具备多种生物学功能并在各种生物进程中发挥重要作用：如染色质修饰、转录、翻译、剪接、表观遗传学调控等^[1-4]。随着研究的深入，

关键词：非编码RNA 长链人类基因组生物学功能肝癌编码蛋白表观遗传学转录子

人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系

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广东医学 2007年第12期28卷 1894-1896页

作者：陈潮文刘序友杨冬华汤绍辉汕头大学医学院第一附属医院消化科 515041 暨南大学附属第一医院消化科广州510630

目的探讨人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系。方法应用半定量RT-PCR、PCR、直接测序分别检测7例正常成人肝组织、23例乙型肝炎病毒阳性肝癌组织IGF-Ⅱ基因P3,P4启动子特异的转录子表达及... 详细信息

目的探讨人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系。方法应用半定量RT-PCR、PCR、直接测序分别检测7例正常成人肝组织、23例乙型肝炎病毒阳性肝癌组织IGF-Ⅱ基因P3,P4启动子特异的转录子表达及p53基因突变状况。结果①绝大多数肝癌组织P3和P4mRNA表达量显著上调,平均值均明显高于正常成人肝组织(P转录调控机制之一。

关键词：肝肿瘤胰岛素样生长因子Ⅱ p53 基因启动子转录子