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转录因子gata-3靶向寡核苷酸“圈套”策略对哮喘小鼠的治疗作用

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江苏医药 2011年第24期37卷 2885-2888,F0002页

作者：李娟俞海国钱丽娟钱小青张雅媛郭翼红南京医科大学附属南京儿童医院免疫科 210009 东南大学附属中大医院儿科

目的探讨转录因子gata-3靶向寡核苷酸(ODN)"圈套"策略对哮喘小鼠气道炎症的治疗作用。方法 32只小鼠随机均分为四组:正常对照(A)组、哮喘模型(B)组、"圈套"ODN治疗(C)组和变异"圈套"(D)组。通过气道给药的方式,将gata-3靶向ODN及突变的... 详细信息

目的探讨转录因子gata-3靶向寡核苷酸(ODN)"圈套"策略对哮喘小鼠气道炎症的治疗作用。方法 32只小鼠随机均分为四组:正常对照(A)组、哮喘模型(B)组、"圈套"ODN治疗(C)组和变异"圈套"(D)组。通过气道给药的方式,将gata-3靶向ODN及突变的ODN转染至哮喘小鼠肺部,应用流式细胞术检测哮喘小鼠脾CD4+T细胞白细胞介素(IL)4、γ干扰素(IFN-γ)水平,ELISA法检测肺组织IL-5、IL-13表达,Western blot法检测肺组织gata-3蛋白表达,HE染色评价肺组织病理变化。结果 B组小鼠肺组织gata-3蛋白表达、IL-5和IL-13水平均较A组增加(P3水平减少,IFN-γ/IL-4比值增高(P0.05)。结论 gata-3靶向ODN"圈套"通过特异性阻断gata-3活性,有效地抑制Th2型细胞因子的产生,从而减轻哮喘小鼠气道炎症反应。

关键词：哮喘转录因子gata-3 “圈套”策略

转录因子gata-3和T-bet的表达失衡在复苏后急性肺损伤中的作用

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转录因子GATA-3和T-bet的表达失衡在复苏后急性肺损伤中的作用

参附注射液对转录因子T-bet/gata-3在猪复苏后心肌功能障碍中表达的作用

中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会

作者：顾伟李春盛殷文朋张健侯晓敏张达首都医科大学北京朝阳医院急诊科

目的证实转录因子gata-3和T-bet的表达失衡是否参与了猪心肺复苏后的急性肺损伤机制。方法26头猪随机分为假手术组(SHAM)(6只),复苏12h组和复苏24h组(各10只),建立室颤8分钟小型猪模型,用流式细胞术检测猪外周血淋巴细胞(PBL)中CD3+,CD4... 详细信息

目的证实转录因子gata-3和T-bet的表达失衡是否参与了猪心肺复苏后的急性肺损伤机制。方法26头猪随机分为假手术组(SHAM)(6只),复苏12h组和复苏24h组(各10只),建立室颤8分钟小型猪模型,用流式细胞术检测猪外周血淋巴细胞(PBL)中CD3+,CD4+和CD8+淋巴细胞亚群的分布,

关键词：心肺复苏急性肺损伤发病机理转录因子gata-3 T-bet蛋白表达失衡

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参附注射液对转录因子T-bet/GATA-3在猪复苏后心肌功能障碍中表达...

间充质干细胞治疗提升免疫性血小板减少症小鼠的血小板数并影响其外周血单核细胞中 T-bet 和 gata-3基因表达

中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会

作者：顾伟李春盛殷文朋侯晓敏首都医科大学北京朝阳医院急诊科

目的探讨参附注射液是否可以通过调节T细胞特异性转录因子gata-3和T-bet的表达失衡来减少复苏后的心肌功能障碍。方法经过8分钟的室颤和2分钟的基础生命支持,实验猪24头被随机分为3组,每组8头:分别给予参附注射液(1.0ml/kg)(SFI),肾上腺... 详细信息

目的探讨参附注射液是否可以通过调节T细胞特异性转录因子gata-3和T-bet的表达失衡来减少复苏后的心肌功能障碍。方法经过8分钟的室颤和2分钟的基础生命支持,实验猪24头被随机分为3组,每组8头:分别给予参附注射液(1.0ml/kg)(SFI),肾上腺素(0.02mg/Kg)(NE)和生理盐水(SA)中心静脉推注。分别在恢复自主循环(ROSC)

关键词：心肺复苏参附注射液转录因子gata-3 T-bet蛋白表达机理心肌保护

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第11期33卷 828-832页

作者：徐敏王椋刘国强鲁光丁慧芳邢健赵霞韩芳尚应辉胜利油田中心医院血液科东营257034

目的：探讨间充质干细胞（ MSC）对原发免疫性血小板减少症（ ITP）小鼠血小板数目的影响及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（ MWReg30单抗）的方法诱导BALB/c小鼠产生ITP后，取20只作为实验组，20只作为对照组。之后通过... 详细信息

目的：探讨间充质干细胞（ MSC）对原发免疫性血小板减少症（ ITP）小鼠血小板数目的影响及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（ MWReg30单抗）的方法诱导BALB/c小鼠产生ITP后，取20只作为实验组，20只作为对照组。之后通过鼠尾静脉给实验组小鼠注射MSC 2×107个/只。注射后5 d、7 d、14 d，测定实验组与对照组小鼠外周血血小板数；14 d时应用逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）检测小鼠外周血单个核细胞（ PBMC）中转录因子T-bet和gata-3 mRNA的表达；应用酶联免疫法测定Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果7 d、14 d后，注射MSC实验组小鼠血小板值[（588．0±81．6）×109/L、（623．0±78．9）×109/L]明显高于未注射MSC对照组[（317．0±90．1）×109/L、（288．0±87．8）×109/L]（P＜0．05）；14 d时，实验组PBMC中T-bet mRNA表达水平低于对照组[（0．04±0．03） vs （0．27±0．05）]（P＜0．05）；gata-3 mRNA的表达水平高于对照组[（0．14±0．04） vs （0．07±0．05）]（P＜0．05）；实验组Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平[（3．1±1．7） pg/ml、（3．2±2．1） pg/ml]明显低于对照组[（10．3±4．8） pg/ml、（16．3±5．7） pg/ml]（P＜0．05）；实验组外周血 Th2类细胞因子 IL-4、IL-10水平[（88．6±15．2） pg/ml、（38．3±11．8） pg/ml]明显高于对照组[（32．7±5．7） pg/ml、（22．1±3．4） pg/ml]（P＜0．05）。结论 MSC可以有效提升ITP小鼠的血小板数，机制可能与抑制了T-bet和gata-3的表达失常导致的Th1细胞极化有关。

关键词：间充质干细胞免疫性血小板减少症小鼠转录因子T-bet 转录因子gata-3

IL-18及其受体在特发性血小板减少性紫癜患者Th1类细胞优势应答中的作用

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中华血液学杂志 2009年第10期30卷 658-661页

作者：王谦杨晓静单宁宁侯明冀学斌王春燕朱效娟杨蕾张晓琳彭军马道新石艳山东大学齐鲁医院检验科济南250012 山东大学齐鲁医院血液科济南250012

目的探讨白细胞介素18（IL-18）及其受体（IL-18R）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者Th1类细胞因子优势应答中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测15例活动期和18例缓解期ITP患者外周血单个核细胞（PBMNC）中转录因子... 详细信息

目的探讨白细胞介素18（IL-18）及其受体（IL-18R）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者Th1类细胞因子优势应答中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测15例活动期和18例缓解期ITP患者外周血单个核细胞（PBMNC）中转录因子T-bet和gata-3mRNA的表达；应用ELISA法检测血浆中IL-18的变化；应用流式细胞术检测CD3^＋细胞和淋巴细胞表面IL-18R的表达。13名健康志愿者为正常对照。结果ITP活动期患者PBMNC中T-betmRNA表达水平（0．069±0．013）明显高于对照组（0．019±0．010）（P〈0．05），而gata-3mRNA的表达水平（0．002±0．001）明显低于对照组（0．005±0．002）（P〈0．05）；血浆IL-18和CD3^＋细胞表面IL-18R表达水平较ITP缓解期患者和对照组显著增高。ITP缓解期患者T-bet与gata-3mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05），T-bet／gata-3比例基本恢复正常，血浆中IL-18和CD3^＋细胞表面IL．18R的表达水平也基本恢复正常。结论ITP活动期患者表现为Th1优势应答，T-bet／gata-3比例明显失衡，T-bet／gata-3比例可作为ITP患者Thl类细胞极化的敏感指标；ITP活动期患者IL一18和IL-18R表达上调，可能为ITP患者的治疗提供一个新的治疗靶点。

关键词：紫癜血小板减少性特发性转录因子T-bet 转录因子gata-3 白细胞介素-18 受体白细胞介素18

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gata-3在放射性肺纤维化中的作用机制

中华放射医学与防护杂志 2011年第6期31卷 -页

作者：韩光张慧谢丛华周云峰 430071 武汉大学中南医院肿瘤放化疗科湖北省肿瘤生物学行为研究中心 430071 武汉大学中南医院肿瘤放化疗科湖北省肿瘤生物学行为研究中心湖北省肿瘤医院放疗科

目的通过建立小鼠放射性肺纤维化模型,了解转录因子gata-3及白细胞介素-13(IL-13)在放射性肺纤维化形成过程中的表达情况及其意义,为放射性肺纤维化的防治提供实验和理论依据.方法成年雌性C57BL/6小鼠63只,随机分作2组:对照组21只,不... 详细信息

目的通过建立小鼠放射性肺纤维化模型,了解转录因子gata-3及白细胞介素-13(IL-13)在放射性肺纤维化形成过程中的表达情况及其意义,为放射性肺纤维化的防治提供实验和理论依据.方法成年雌性C57BL/6小鼠63只,随机分作2组:对照组21只,不做任何处理；照射组42只,全肺单次照射12 Gy.于照射后1h、1、2、4、8、16和24周,取照射组及相同鼠龄对照组小鼠肺组织和血清,分别用HE和Masson染色在光镜下观察组织病理改变和胶原纤维沉积；用碱水解法测定羟脯氨酸含量；用实时定量RT-PCR法检测gata-3mRNA相对含量；用ELISA法测定血清中IL-13的含量；用Western blot法检测肺组织中gata-3的蛋白表达变化情况.结果光镜下,照射组小鼠肺组织较对照组组织学改变和胶原纤维沉积明显；测定羟脯氨酸含量显示,照射组小鼠肺组织中的羟脯氨酸含量较对照组明显增高(Z=3.142,P＜0.05)；蛋白和mRNA检测结果显示,较之对照组,gata-3和IL-13的表达在照射组中明显升高,特别是在肺组织尚未发生明显的纤维化组织学改变时(1～2周),照射组gata-3表达明显升高(t=6.50,6.33,P＜0.01),IL-13受gata-3调节,在照射后第16周表达最为明显(t =32.21,P＜0.01).结论转录因子gata-3可以通过诱导Th2免疫细胞因子IL-13的表达,参与放射性肺纤维化的形成.

关键词：放射性肺纤维化转录因子gata-3 白细胞介素-13(IL-13)

反义寡核苷酸和激素干预对哮喘小鼠gata-3表达的影响

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临床儿科杂志 2008年第1期26卷 58-61页

作者：刘丽成焕吉鲁继荣乔红梅傅文永刘晓丽吉林大学第一医院儿科吉林长春130021 吉化总医院一院儿科吉林吉林132021

目的探讨转录因子gata-3在支气管哮喘发病中的作用,评价反义寡核苷酸干预及吸入糖皮质激素对其调节作用。方法40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、激素治疗组(C组)及gata-3反义寡核苷酸治疗组(D组)4组。采用卵清... 详细信息

目的探讨转录因子gata-3在支气管哮喘发病中的作用,评价反义寡核苷酸干预及吸入糖皮质激素对其调节作用。方法40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、激素治疗组(C组)及gata-3反义寡核苷酸治疗组(D组)4组。采用卵清白蛋白致敏、激发建立哮喘小鼠模型,对小鼠血及支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞进行计数,并测定小鼠血清IgE含量;采用Western blot及RT-PCR技术检测治疗前后哮喘小鼠肺组织中gata-3蛋白和gata-3 mRNA的表达。结果通过小鼠行为学变化、血和BALF嗜酸性粒细胞计数、血清IgE水平以及肺组织病理切片鉴定模型成立。哮喘小鼠气道管壁及伴行动脉周围可见炎性细胞浸润、杯状细胞增生及平滑肌增厚。Western blot结果显示哮喘组小鼠肺组织gata-3蛋白表达增高,gata-3反义寡核苷酸治疗组和激素治疗组gata-3表达均下降,gata-3反义寡核苷酸治疗组较激素治疗组下降略明显,但差异无统计学意义。RT-PCR结果与Western blot结果一致。结论蛋白质水平及mRNA水平显示哮喘小鼠模型肺组织gata-3表达升高,激素和反义寡核苷酸干预可下调gata-3表达,可能是其抑制气道炎症形成的重要作用机制;应用反义寡核苷酸可能为哮喘治疗提供一种新的方法。

关键词：支气管哮喘转录因子gata-3 反义寡核苷酸激素

免疫性血小板减少症患者IL-18及IL-18受体的研究

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免疫性血小板减少症患者IL-18及IL-18受体的研究

作者：王谦山东大学

学位级别：硕士

研究背景：免疫性血小板减少症（idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP）是一种自身免疫性出血性疾病,该病特点是患者体内抗血小板抗体增多,血小板破坏过多而出血。其发病机制复杂,可能涉及T细胞、B细胞、巨核细胞、细胞因子、转... 详细信息

研究背景：免疫性血小板减少症（idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP）是一种自身免疫性出血性疾病,该病特点是患者体内抗血小板抗体增多,血小板破坏过多而出血。其发病机制复杂,可能涉及T细胞、B细胞、巨核细胞、细胞因子、转录因子等多因素错综复杂的关系,尤其是T细胞免疫在巨核细胞受抑和血小板破坏中发挥了关键性作用。早期研究的重点多集中于体液免疫异常,证明了血小板特异性抗体与血小板抗原结合后,致敏的血小板通过Fc受体被网状内皮系统吞噬破坏（特别是脾脏中的单核吞噬细胞）,从而引起血小板的减少。目前,随着研究的逐步深人多转向于细胞免疫异常,许多研究涉及到B7／CD28／CTLA-4和CD40／CD40L的共刺激信号,诱发了ITP患者Th1类细胞的过度极化。大多数观点认为Th1过度极化是导致ITP发生的重要机制,但也有相反或不一致的报道。当前ITP发病机制的焦点集中于Th1／Th2细胞之间的失衡,白介素18（IL-18）作为T细胞炎性介质强有力的诱导者,通过刺激Th1型反应,诱导严重的免疫紊乱。本研究通过检测Th细胞的上游基因T-bet （T-box expressed in cells）和gata-3 （gata binding protein-3）在ITP患者中的表达,首次利用T-bet/gata-3作为ITP患者Th1／Th2细胞失衡的敏感指标,验证了Th1类细胞因子在该病中的优势应答,并首次报道IL-18及IL-18R在其发病及治疗观察中的作用。研究目的：通过检测新诊断的ITP患者用药前后外周血白介素18（IL-18）和CD3+细胞表面IL-18受体α链（IL-18Rα）的表达,外周血单个核细胞中转录因子T-bet和gata-3 mRNA的表达;探讨IL-18及IL-18R在ITP患者Th1类细胞因子优势应答中的作用及发病中的效应机制。研究方法：以山东大学齐鲁医院门诊及住院治疗的18例新诊断的ITP为研究对象,应用逆转录聚合酶链反应（reverse transcriptase polvmerase chain reaction, RT-PCR）检测患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）中Th细胞上游基因T-bet mRNA和gata-3 mRNA的表达;应用ELISA检测血浆中IL-18的变化;应用流式细胞术检测CD3+细胞和总淋巴细胞表面IL-18R的表达;正常对照均为与试验组匹配的健康志愿者。主要结果：新诊断的ITP患者血浆中IL-18的含量为（468.57±141.62）pg／ml,显著高于对照组（P＜0.05）;CD3+细胞表面及淋巴细胞表面IL-18Rα的表达分别为（8.50±3.16）%和（9.16±2.98）%,两者之间无统计学意义,但两者均显著高于对照组（P＜0.05）;PBMCs中IL-18 mRNA、T-bet mRNA和gata-3 mRNA的表达分别为0.12±0.02、0.07±0.02和0.0039±0.0014, IL-18mRNA和T-bet mRNA显著高于对照组（RR=1.66和3.65, P＜0.05）,而gata-3 mRNA显著低于对照组（下调至正常对照的0.69倍,R＜0.05）, T-bet/gata-3比例显著增高。ITP缓解期T-bet mRNA与gata-3 mRNA表达水平与正常对照比较均无统计学意义（P＞0.05）,T-bet/gata-3基本恢复正常;血浆中IL-18和CD3+细胞表面IL-18R的表达也基本恢复正常。结论：IL-18与ITP的发生发展有关,新诊断的ITP表现为Th1细胞优势应答,T-bet/gata-3 mRNA明显失衡,T-bet/gata-3可作为ITP患者Th1类细胞极化的敏感指标;该研究首次从蛋白和基因水平说明IL-18和IL-18R可能上调了新诊断的ITP患者Th1类细胞的表达,通过调整T-bet/gata-3的比例,恢复Th1／Th2的平衡,有望为ITP的治疗提供一个新的策略或治疗靶点。

关键词：血小板减少性,免疫性转录因子T-bet 转录因子gata-3 白介素18 白介素18 mRNA 白介素18受体

小儿清肺止咳口服液对急性支气管炎模型小鼠肺组织gata-3、T-bet影响的研究

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小儿清肺止咳口服液对急性支气管炎模型小鼠肺组织GATA-3、T-bet...

作者：田新磊河南中医学院

学位级别：硕士

目的：制备能够较好复制小儿急性支气管炎病理的模型小鼠，运用现代分子生物学技术，测定小鼠肺组织转录因子gata-3和T-bet的含量，研究小儿清肺止咳口服液对小鼠肺组织转录因子gata-3和T-bet表达的影响，验证小儿清肺止咳口服液对急性... 详细信息

目的：制备能够较好复制小儿急性支气管炎病理的模型小鼠，运用现代分子生物学技术，测定小鼠肺组织转录因子gata-3和T-bet的含量，研究小儿清肺止咳口服液对小鼠肺组织转录因子gata-3和T-bet表达的影响，验证小儿清肺止咳口服液对急性支气管炎模型小鼠疗效，探讨小儿清肺止咳口服液对急性支气管炎的作用机制，为其临床应用提供可靠的实验室依据。方法：选用健康4周龄的昆明种小鼠80只（雌雄各半），随机将其分为模型组64只和正常组16只。采用烟雾刺激模型组小鼠的方法制备急性支气管炎小鼠模型，每天烟雾刺激2次（早晚各1次），每次30分钟，共计1周。造模成功后再将模型组小鼠随机分为5组：小儿清热止咳口服液阳性对照治疗组;小儿清肺止咳口服液高、中、低剂量治疗组;空白模型组。其中治疗组分别予小儿清肺止咳口服液高、中、低剂量和小儿清热止咳口服液进行灌胃治疗，空白模型组予等容量生理盐水灌胃。治疗1周后取所有小鼠肺组织，采用免疫组化法测定各组小鼠肺组织转录因子gata-3、T-bet的积分光密度。结果：1小鼠肺组织转录因子gata-3免疫组化结果：各治疗组及空白模型组与正常组相比均具有极显著差异(P0.05);小儿清热止咳口服液治疗组分别与小儿清肺止咳口服液高、中、低剂量治疗组相比，组间均具有极显著差异(P转录因子T-bet免疫组化结果：空白模型组、小儿清热止咳阳性对照组、小儿清肺止咳口服液低剂量治疗组与正常组相比均具有极显著差异(P0.05)，分别与小儿清热止咳口服液阳性对照治疗组相比均具有极显著差异(P转录因子gata-3的积分光密度较正常组升高，T-bet的积分光密度较正常组降低，提示急性支气管炎模型小鼠存在细胞因子平衡失调;2小儿清肺止咳口服液可以抑制急性支气管炎模型小鼠肺组织gata-3的表达，增加模型小鼠肺组织T-bet的表达，纠正二者表达的失衡，从而调节Th1和Th2细胞亚群的平衡来抑制气道炎症;3小儿清肺止咳口服液对急性支气管炎模型小鼠有较好的疗效，其作用明显优于对照组。

关键词：小儿清肺止咳口服液急性支气管炎转录因子gata-3 转录因子T-bet