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转录因子ap-2α对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及其机制

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肿瘤 2008年第9期28卷 776-779,785页

作者：王莹兰小琴李美宁解军张悦红程牛亮山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030001

目的:研究转录因子活化蛋白-2α(transcription factor activator protein-2α,ap-2α)对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用及其相关机制。方法:构建pcDNA3.1(+)-ap-2α重组质粒,利用脂质体分别介导重组质粒pcDNA3.1(+)-ap-2α和空质粒pcDNA3.1(+)转染SW480细胞,以正常SW480细胞作为空白对照;采用RT-PCR和Western印迹法检测转染48h后各组细胞中ap-2α的表达水平;采用电泳迁移率分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染重组质粒后SW480细胞表达的ap-2α是否具有DNA结合活性;用MTT法研究ap-2α基因转染24、48、72h后SW480细胞的增殖情况;采用流式细胞术分析各组的细胞周期变化,Western印迹法检测细胞内p21/WAF1的表达水平。结果:转染pcDNA3.1(+)-ap-2α重组质粒48h后,SW480细胞内ap-2αmRNA含量以及蛋白水平均显著升高,并且具有较强的DNA结合活性;MTT结果提示,转染ap-2α基因后SW480细胞增殖趋缓;细胞周期分析结果提示,转染ap-2α基因48h后G0/G1期细胞比例较正常细胞增加(Pap-2α基因48h后,SW480细胞内p21/WAF1表达增加。结论:ap-2α可抑制SW480细胞的增殖,其抑制作用很可能与激活p21/WAF1表达有关。

关键词：结肠肿瘤转录因子ap-2 细胞增殖基因表达

靶向转录因子ap-2的Decoy核酸对肿瘤细胞增殖的抑制作用

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第4期20卷 523-527页

作者：王雪根叶青陈武领冯莹韦策刘晖欧阳平凯南京凯基生物科技发展有限公司南京210009 南京工业大学制药与生命科学学院南京210009

ecoy核酸是与靶转录因子具有高亲和性的双链寡聚核酸 ,通过竞争性抑制转录因子与调控区域的结合 ,调控转录来改变下游基因的异常表达 ,从而抑制肿瘤恶性增殖 .用MTT比色法 ,体外筛选结合转录因子ap 2的decoy核酸药物 ,结果K2 0 6对多种... 详细信息

ecoy核酸是与靶转录因子具有高亲和性的双链寡聚核酸 ,通过竞争性抑制转录因子与调控区域的结合 ,调控转录来改变下游基因的异常表达 ,从而抑制肿瘤恶性增殖 .用MTT比色法 ,体外筛选结合转录因子ap 2的decoy核酸药物 ,结果K2 0 6对多种肿瘤细胞生长有显著的抑制作用 ,在异植人肿瘤细胞NCI H4 6 0的裸鼠模型中 ,静脉注射高中低三剂量组的decoy核酸K2 0 6 ,抑瘤率分别达 71 8%、6 4 4 %及 5 7 3% (V V) .通过凝胶阻抑试验 ,验证了K2 0 6与转录因子产生特异性结合 .

关键词：转录因子ap-2 decoy核酸转录调控肿瘤

转录因子 ap-2在泌尿生殖系统肿瘤中的研究进展

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国际肿瘤学杂志 2015年第7期42卷 548-550页

作者：谢宇范刚张健湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室长沙410081 中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院暨湖南省肿瘤医院泌尿外科

转录因子激活蛋白-2（ap-2）在肿瘤细胞的增殖、分化、癌变及化疗耐药方面扮演着重要角色。ap-2在不同泌尿生殖系统肿瘤组织中分别呈现出抑癌或促癌的双向调控效应。研究 ap-2在泌尿生殖系统肿瘤中的作用及作用机制可为相关肿瘤的诊治... 详细信息

转录因子激活蛋白-2（ap-2）在肿瘤细胞的增殖、分化、癌变及化疗耐药方面扮演着重要角色。ap-2在不同泌尿生殖系统肿瘤组织中分别呈现出抑癌或促癌的双向调控效应。研究 ap-2在泌尿生殖系统肿瘤中的作用及作用机制可为相关肿瘤的诊治提供新的思路和方向。

关键词：转录因子ap-2 泌尿生殖系统肿瘤

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转录因子ap-2与肿瘤的研究进展

实用医学杂志 2006年第8期22卷 972-974页

作者：林凯杨智勇王廷华昆明医学院第一附属医院神经外科 650032 昆明医学院神经外科研究所 650031

肿瘤的发生发展是一个多阶段、多步骤的病理过程,存在着一系列的分子变化,如细胞增殖分化、细胞周期调节、细胞凋亡、细胞黏附、细胞外基质分解及血管新生等,这一系列分子变化涉及到多个基因的转录及多个生长信号传导通路的调控.转录因... 详细信息

肿瘤的发生发展是一个多阶段、多步骤的病理过程,存在着一系列的分子变化,如细胞增殖分化、细胞周期调节、细胞凋亡、细胞黏附、细胞外基质分解及血管新生等,这一系列分子变化涉及到多个基因的转录及多个生长信号传导通路的调控.转录因子激活蛋白- 2( ap-2)作为一种核转录因子,通过信号传导关闭、开启、增强或减弱等控制靶基因表达,参与脊椎动物生长发育、细胞凋亡调节,病理状态下参与肿瘤的发生发展.研究发现 ap-2作为一种特殊序列的 DNA结合蛋白,越来越多的基因的转录受 ap-2的调控.在体部肿瘤的研究中发现 , ap-2参与肿瘤的发生、发展和侵袭转移.不同的肿瘤 ap-2表达水平不一,即 ap-2对肿瘤的发生发展具有'双向'作用,这一'双向 '作用视肿瘤的原发组织不同而不同.本文就近年来对 ap-2在肿瘤中的作用研究作一综述.

关键词：转录因子ap-2 体部肿瘤生长信号传导通路细胞凋亡调节靶基因表达 DNA结合蛋白发生发展细胞增殖分化细胞周期调节分子变化

TFap2A对肾小球硬化相关基因ADCK4转录调控机制的研究

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天津医药 2024年第5期52卷 449-453页

作者：张小田任献国南京医科大学附属逸夫医院儿科 211112

目的探索细胞中TFap2A对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)相关基因含aarF结构域的激酶4(ADCK4)的转录调控机制及TFap2A与ADCK4是否存在特定的结合区域。方法生物信息学分析肾小球硬化基因火山图,ADCK4及TFap2A表达水平的关系。JASPAR数据库预... 详细信息

目的探索细胞中TFap2A对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)相关基因含aarF结构域的激酶4(ADCK4)的转录调控机制及TFap2A与ADCK4是否存在特定的结合区域。方法生物信息学分析肾小球硬化基因火山图,ADCK4及TFap2A表达水平的关系。JASPAR数据库预测ADCK4基因转录起始位点-464 bp/+206 bp区域包含TFap2A转录因子结合位点;TFap2A siRNA浓度分别为5、10、15µmol/L,TFap2A过表达质粒质量浓度分别为50、100、300µg/L,通过双萤光素酶报告基因实验验证TFap2A对ADCK4基因启动子水平的调控作用。TFap2A siRNA及TFap2A过表达质粒转染细胞,实时荧光定量PCR检测TFap2A、ADCK4 mRNA表达,蛋白免疫印迹实验检测TFap2A、ADCK4蛋白表达。染色质免疫沉淀试验验证TFap2A与ADCK4启动子的特定区域结合。结果生物信息学分析显示FSGS肾组织中RNA-Seq RNA表达上调的基因273个,表达下调的基因219个;ADCK4与TFap2A表达水平呈正相关(Pap2A siRNA浓度为10、15µmol/L的ADCK4启动子相对萤光素酶活性增强,TFap2A过表达质粒质量浓度为100、300µg/L的ADCK4启动子萤光素酶活性降低(Pap2A能与ADCK4启动子的特定区域结合。结论转录因子TFap2A负向调控ADCK4基因表达,增加了调控足细胞重要基因的转录因子成员。

关键词：肾小球硬化症,局灶节段性转录因子ap-2 启动区,遗传转录调控含aarF结构域的激酶4

转录因子活化蛋白-2α对人脐静脉内皮细胞ECV304细胞凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活化的影响

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中华结核和呼吸杂志 2009年第12期32卷 931-934页

作者：李军利陈平中南大学湘雅二医院呼吸科长沙410011

【摘要】目的探讨转录因子活化蛋白-2α（ap-2α）对香烟提取物（CSE）所致半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase 3）的活化及人脐静脉内皮细胞株ECV304凋亡的影响。方法按照不同浓度CSE将ECV304细胞分为0．0％、2．5％、5．0％、10．0％... 详细信息

【摘要】目的探讨转录因子活化蛋白-2α（ap-2α）对香烟提取物（CSE）所致半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase 3）的活化及人脐静脉内皮细胞株ECV304凋亡的影响。方法按照不同浓度CSE将ECV304细胞分为0．0％、2．5％、5．0％、10．0％、15．0％、20．0％CSE组；再将5．0％CSE组按照不同处理时间分为0、6、12、18、24、36和48h组，按照不同转染腺病毒载体（Ad）分为Ad-ap-2α组、对照腺病毒载体（Ad-BgⅡ）组和对照组，按照不同转染基因及处理因素分为Ad—ap-2α＋5％CSE 24h组、Ad—BgⅡ＋5％CSE24h组及对照＋5％CSE 24h组。每组3例。采用腺病毒介导的转染、双苯甲亚胺染核和Western blot等方法观察过表达ap-2α对CSE诱导的ECV304凋亡和Caspase 3活化的影响。采用Bartlett法进行方差齐性检验，两组间比较用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，多个样本均数的多重比较采用LSD—t检验，多个样本率的比较采用χ^2检验。结果2．5％CSE组的细胞增殖能力（吸光度值为0．754±0．109）明显高于对照组（吸光度值为0．630±0．086），其余浓度组的细胞增殖能力逐渐下降，并呈浓度依赖的方式。随着5．0％CSE作用时间延长，细胞凋亡率从（5．0±1．0）％逐渐增到（72．6±12．1）％；转染24h时，ap-2α的蛋白相对含量的积分吸光度值（0．882±0．014）明显高于对照组（0．635±0．005）；过表达ap-2α使5．0％CSE诱导的细胞凋亡率从（7．5±0．9）％降至（0．9±0．4）％，Caspase 3蛋白相对含量从0．484±0．025降至0．300±0．020。结论ap-2α可以抑制ECV304细胞中CSE诱导的Caspase 3活化及细胞凋亡。

关键词：烟草内皮细胞细胞凋亡转录因子ap-2

转录因子激活蛋白-2α、雌激素受体-β和基质金属蛋白酶-9在扁平苔藓皮损中的表达

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中华皮肤科杂志 2011年第5期44卷 339-342页

作者：张紫燕白莉山西医科大学第一医院皮肤科太原030001

目的探讨转录因子激活蛋白-2α（ap-2α）、雌激素受体-β（ER-β）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓皮损中的表达及意义。方法选取30例扁平苔藓皮损和30例正常人皮肤组织，应用免疫组化SP法观察ER—β和MMP-9的表达，采用RT—PCR... 详细信息

目的探讨转录因子激活蛋白-2α（ap-2α）、雌激素受体-β（ER-β）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓皮损中的表达及意义。方法选取30例扁平苔藓皮损和30例正常人皮肤组织，应用免疫组化SP法观察ER—β和MMP-9的表达，采用RT—PCR和Western印迹法检测ap-2α、ER—β和MMP-9基因及其蛋白水平。结果扁平苔藓皮损中ap-2st、ER-β、MMP-9mRNA的相对表达水平为0．488±0．039、0．365±0．032和1．237±0．027，与正常组织相比，ap-2α、ER—β表达下降（P值均〈0．01），而MMP-9表达升高（P〈0．01）。Western印迹检测结果与RT—PCR相似，即ap-2st、ER-β蛋白表达下降（P值均〈0．01），而MMP-9表达升高。ap-2α的表达与ER—β的表达呈正相关（r=0．89，P〈0．01），与MMP-9的表达呈负相关（r=-0．91，P〈0．01）。结论ER-β表达的下调和MMP-9表达的上调可能是ap-2st表达下调引起调控下游靶基因异常所致，可能为扁平苔藓的发病环节之一。

关键词：扁平苔藓转录因子ap-2 雌激素受体β 基质金属蛋白酶9

转录因子激活蛋白-2α、雌激素受体-β和基质金属蛋白酶-9在扁平苔藓皮损中的表达

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转录因子激活蛋白-2α、雌激素受体-β和基质金属蛋白酶-9在扁平...

作者：张紫燕山西医科大学

学位级别：硕士

目的探讨转录因子激活蛋白-2α（ap-2α）、雌激素受体-β（ER-β）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓皮损中的表达及意义。方法病例组30例（男14例,女16例）,年龄15-72岁,平均（44±14）岁,均来自我院皮肤科门诊2... 详细信息

目的探讨转录因子激活蛋白-2α（ap-2α）、雌激素受体-β（ER-β）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓皮损中的表达及意义。方法病例组30例（男14例,女16例）,年龄15-72岁,平均（44±14）岁,均来自我院皮肤科门诊2008年1月-2009年5月期间经临床诊断和组织病理确诊的扁平苔藓患者。取材部位为躯干四肢典型皮损。所有病例近3个月内均未使用过糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,均无全身系统性疾病。健康对照组30例（男19例,女11例）,年龄11-60岁,平均（40±12）岁,来源于我院普外科和整形外科的正常人皮肤。本实验通过免疫组化实验首先观察ER-p和MMP-9表达的变化。为阐明其发生机制,进一步通过分子生物学方法证实,采用逆转录聚合酶链反应技术（RT-PCR）和Western印记法检测其上游转录因子ap-2α,以及ER-βMMP-9基因及其蛋白水平的变化。结果采用SPSS13.0统计软件,两组之间比较用两样本t检验,指标间用Pearson相关进行统计学分析,P＜0.05认为差异有统计学意义。结果与正常人皮肤组织相比,在扁平苔藓皮损中ap-2α和ER-β的表达明显下降（P＜0.01）,而MMP-9表达明显上调（P＜0.01）。ap-2α的表达与ER-β表达呈正相关（r=0.89,P＜0.01）,与MMP-9的表达呈负相关（r=-0.91,P＜0.01）。结论 1.与正常皮肤组织相比,在扁平苔藓皮损中可以观察到ap-2α表达下降、ER-β表达下降和MMP-9表达增高的现象;2.此现象发生的分子机制可能是LP通过某些尚未明了的机制导致ap-2α基因和蛋白水平的下调,使其下游靶基因ER-β表达下调和MMP-9表达上调,参与LP的发病;3.MMP-9表达增高可能参与了皮肤基底膜的降解;在雌激素分泌正常的情况下,ER-β的异常表达可能会参与疾病的发生发展,确切机制作用及其相互作用还有待进一步研究。

关键词：扁平苔藓转录因子ap-2 雌激素受体-β 基质金属蛋白酶-9

动脉导管未闭患儿TFap-2B基因突变的研究

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中华儿科杂志 2010年第12期48卷 900-904页

作者：陈轶维赵武李奋吉炜傅启华张志芳王剑上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心心血管内科 200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科 200127 蚌埠医学院附属第一医院儿科

目的发现我国动脉导管未闭（patent ductus arteriosus,PDA）患儿分子遗传方面缺陷,为PDA早期预防及遗传咨询提供支持.方法收集100例单纯性PDA患儿的临床资料和外周静脉血样本,以100名健康儿童为对照.应用聚合酶链式反应（polymerase ... 详细信息

目的发现我国动脉导管未闭（patent ductus arteriosus,PDA）患儿分子遗传方面缺陷,为PDA早期预防及遗传咨询提供支持.方法收集100例单纯性PDA患儿的临床资料和外周静脉血样本,以100名健康儿童为对照.应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增TFap-2B基因的全部外显子和外显子两侧部分内含子,并对扩增片段进行双向测序.应用BLAST程序将所测TFap-2B基因序列与GeneBank中的已知序列进行对比以检测基因突变.采用逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）对1例家族史阳性患儿及其家属共16人TFap-2B部分cDNA片段进行扩增,扩增产物直接进行双向序列测定.结果基因分析显示,在1例家族史阳性患儿及其患病亲属中,TFap-2B第3内含子剪接位点＋5位发生突变[intron3（＋5）G＞A],患儿TFap-2B基因部分cDNA巢式PCR扩增结果提示3号外显子完全缺失.此外,还发现了一个新的单核苷酸多态性,即转录起始点上游第34位的鸟嘌呤变为腺嘌呤,这个多态在PDA患者和健康对照组的频率分布差异有统计学意义（Z=-2.513,P=0.012）.结论 TFap-2B基因突变能够导致家族型PDA.

关键词：动脉导管未闭转录因子ap-2 突变