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转基因植株抗芜菁花叶病毒的鉴定

东北林业大学学报 2008年第12期36卷 93-94页

作者：马伟马玲姜波谢家全王宝秋黑龙江中医药大学哈尔滨150040 东北林业大学

为鉴定转基因大白菜T1代对芜菁花叶病毒是否具有抗病性,采用摩擦接种法,将毒源接种到转基因T1代各植株和对照品种上,经培养、观察并鉴定其病情指数。结果表明:转基因T1代植株各品种的发病率及病情指数明显低于对照品种,且都具有明显的... 详细信息

为鉴定转基因大白菜T1代对芜菁花叶病毒是否具有抗病性,采用摩擦接种法,将毒源接种到转基因T1代各植株和对照品种上,经培养、观察并鉴定其病情指数。结果表明:转基因T1代植株各品种的发病率及病情指数明显低于对照品种,且都具有明显的抗病性;经过统计分析表明,转基因T1代各品种的抗病性随着时间的增加,其抗病性有所减弱。

关键词：转基因植株芜菁花叶痛毒病情指数抗病毒

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转基因植株的分子检测方法概述

杂交水稻 2004年第3期19卷 1-4页

作者：朱飞舟陈立云何强湖南农业大学水稻科学研究所湖南长沙410128

从个体或组织水平、DNA水平、RNA水平和蛋白质水平概述了检测转基因植株的各种方法及应用情况 ,并作了简要评价。

关键词：植物基因工程转基因植株分子检测方法

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南荻遗传转化系统的建立及转基因植株的获得

高技术通讯 2001年第4期11卷 20-24页

作者：易自力周朴华储成才李祥田文忠王力曹守云唐柞舜湖南农业大学生物技术系长沙410128 中国科学院遗传研究所北京100101

建立了南荻愈伤组织高频诱导与再生系统及其转化愈伤组织的筛选系统 ,并通过本研究所建立的基因枪转化系统。

关键词：南荻基因枪轰击马铃薯蛋白酶抑制基因愈伤组织转基因植株

根癌土壤杆菌介导的水稻高效转化和转基因植株的高频再生

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Acta Botanica Sinica 2000年第11期42卷 1172-1178页

作者：黄健秋卫志明安海龙徐淑平章冰中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室上海200032

利用根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)介导的转化方法对 4个粳稻 (OryzasativaL .ssp .japonica)品种和 2个籼稻 (O .sativassp .indica)品种进行了转化。在对影响根癌土壤杆菌转化水稻效率的多种因素进行比较研究后 ,建立了根癌土壤杆菌介导的水稻高效转化和再生系统。将水稻成熟胚和未成熟胚来源的愈伤组织用根癌土壤杆菌EHA10 1/pGIH感染后 ,筛选出抗性愈伤组织并获得转化植株。其中抗性愈伤组织产生频率最高达 5 5 .1% (籼稻 )和 85 .2 % (粳稻 ) ,转化植株产生频率最高达 37.8% (籼稻 )和 6 9.0 % (粳稻 )。GUS染色、转基因植株总DNA的PCR和Southern杂交检测等结果表明 ,T_DNA上的外源基因已整合进了转基因植物基因组中。对转基因T1代水稻植株的遗传分析结果证明外源基因能稳定遗传给后代 ,且大多数株系的分离比符合 3∶1。该转化系统的建立为将外源有用基因导入水稻并高效稳定地表达奠定了基础。

关键词：水稻根癌土壤杆菌遗传转化转基因植株

农杆菌介导的高羊茅高效遗传转化和转基因植株再生(英文)

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植物生理与分子生物学学报 2005年第2期31卷 149-159页

作者：胡张华陈锦清吴关庭金卫郎春秀黄锐之王伏林刘智宏陈笑芸浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021

用带有质粒pDBA121(含hpt基因和bar基因)的农杆菌EHA 105转化高羊茅(Festucaarundinacea Schreb.)胚性悬浮细胞,建立了可重复的、高效的农杆菌介导的高羊茅遗传转化系统.商业用的除草剂Basta直接用于转化细胞的筛选.基因型、受体材料的... 详细信息

用带有质粒pDBA121(含hpt基因和bar基因)的农杆菌EHA 105转化高羊茅(Festucaarundinacea Schreb.)胚性悬浮细胞,建立了可重复的、高效的农杆菌介导的高羊茅遗传转化系统.商业用的除草剂Basta直接用于转化细胞的筛选.基因型、受体材料的类型、培养基成分和筛选剂影响农杆菌介导的转化频率.悬浮细胞的农杆菌转化效率为每克悬浮细胞再生2.85～10.9株转基因植株,大大高于基因枪法的高羊茅转化效率(2～5株).经PCR分析和Southern杂交检测表明,bar基因已整合进入高羊茅基因组,转基因植株Basta喷洒试验表明bar基因已成功地实现高水平的表达.此转化系统的建立为高效地将外源有用基因导入高羊茅并高效稳定地表达奠定了基础.

关键词：高羊茅根癌农杆菌遗传转化胚性悬浮培养细胞转基因植株

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基因枪法转化小麦及转基因植株的获得

高技术通讯 2000年第4期10卷 13-17页

作者：于晓红朱祯徐鸿林朱玉吴茜高越峰付志明肖桂芳安利佳李向辉中国科学院遗传研究所北京100101

应用基因枪法转化了小麦幼胚、成熟胚及胚性愈伤组织,成功地将携带有豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因以及选择标记潮霉素磷酸转移酶(Hpt)基因的质粒pBCAHpt导入小麦胚性愈伤组织。通过在选择培养基上严格筛选后获得潮霉素抗性(hygr)愈伤组... 详细信息

应用基因枪法转化了小麦幼胚、成熟胚及胚性愈伤组织,成功地将携带有豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因以及选择标记潮霉素磷酸转移酶(Hpt)基因的质粒pBCAHpt导入小麦胚性愈伤组织。通过在选择培养基上严格筛选后获得潮霉素抗性(hygr)愈伤组织,并进一步分化培养获得完整的小麦再生植株。PCR检测结果显示抗性愈伤组织和再生植株细胞内存在有目的基因序列。

关键词：小麦转化基因枪法潮霉素抗体转基因植株

同方期刊数据库

香石竹ACC氧化酶重复基因植物表达载体的构建及转基因植株的获得

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林业科学研究 2004年第1期17卷 1-5页

作者：余义勋包满珠孙振元华中农业大学园艺林学学院湖北武汉430070 中国林业科学研究院花卉中心北京100093

香石竹ACC氧化酶基因从核NDA中克隆之后,将其首先构建成正义及反义的单拷贝植物表达载体,在此基础上又同向插入一个ACO基因片段,从而获得ACO的正义重复基因和反义重复基因植物表达载体,所得载体已通过酶切分析和PCR鉴定。将该表达载体... 详细信息

香石竹ACC氧化酶基因从核NDA中克隆之后,将其首先构建成正义及反义的单拷贝植物表达载体,在此基础上又同向插入一个ACO基因片段,从而获得ACO的正义重复基因和反义重复基因植物表达载体,所得载体已通过酶切分析和PCR鉴定。将该表达载体导入根癌农杆菌LBA4404菌株,并转化香石竹品种Master、爱卡迪幼叶,经PCR检测和Southern杂交鉴定,获得了8株转化植珠。

关键词：香石竹 ACC氧化酶植物表达载体转基因植株重复基因切花

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枸杞转基因植株的再生

生物工程学报 1991年第3期7卷 220-223页

作者：王慧中黄发灿李安生邵启全牛德水中国科学院遗传研究所

本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导... 详细信息

本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导培养基上形成的愈伤组织转到选择分化培养基后能很快分化出芽点,继而长成完整的小植株。对再生植株的NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交表明:外源基因已整合到枸杞细胞的核基因组上,并能在植株水平表达出相应的性状。

关键词：枸杞转化转基因植株

根癌农杆菌介导的甘薯遗传转化及转基因植株的再生

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作物学报 2001年第6期27卷 751-756页

作者：高峰龚一富林忠平王小佳西南师范大学生命科学学院重庆400715 北京大学生命科学学院北京100816 西南农业大学园艺系重庆400716

以甘薯优良品种“新大紫”的茎尖培养再生植株为试材 ,经根癌农杆菌介导将甘薯块根贮藏蛋白启动子 (Sporamin promoter)调控下的 10 k D玉米醇溶蛋白基因导入到“新大紫”中 ,并获得了转化植株。甘薯品种“新大紫”再生植株的茎切段 ,... 详细信息

以甘薯优良品种“新大紫”的茎尖培养再生植株为试材 ,经根癌农杆菌介导将甘薯块根贮藏蛋白启动子 (Sporamin promoter)调控下的 10 k D玉米醇溶蛋白基因导入到“新大紫”中 ,并获得了转化植株。甘薯品种“新大紫”再生植株的茎切段 ,与携带有表达载体质粒 p SP10 Z的根癌农杆菌菌株 LBA4 4 0 4共培养后 ,在含 75 mg/ L 卡那霉素 (Kan)的筛选培养基上可产生抗性芽 ,最高频率达 6.2 %。其中 ,32 .1%的抗性芽可在含 10 0 mg/ L Kan的培养基上生根 ,从而形成转化植株。PCR和 PCR-Southern检测证实 ,10 k D玉米醇溶蛋白基因已导入并整合到甘薯品种“新大紫”的基因组中。

关键词：玉米醇溶蛋白基因根癌农杆菌转化甘薯转基因植株再生