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农杆菌介导大豆子叶节转化系统的优化

中国农业科学 2008年第4期41卷 971-977页

作者：李文霞宁海龙吕文河李文滨东北农业大学农学院东北农业大学/国家教育部大豆生物学重点实验室

【目的】研究影响大豆(Glycine maxL.)子叶节外植体遗传转化的因素。【方法】以农杆菌转化系统为平台,用直接筛选法和延迟筛选法确定卡那霉素的筛选方法和浓度,以GUS基因的瞬时表达计算子叶节区GUS阳性率。【结果】延迟7d进行Km选择、... 详细信息

【目的】研究影响大豆(Glycine maxL.)子叶节外植体遗传转化的因素。【方法】以农杆菌转化系统为平台,用直接筛选法和延迟筛选法确定卡那霉素的筛选方法和浓度,以GUS基因的瞬时表达计算子叶节区GUS阳性率。【结果】延迟7d进行Km选择、筛选压力为75mg·L-1时选择效果最好;菌株培养阶段和侵染浓度分别在OD600为0.6和0.5时子叶节区GUS阳性率最高;黑农35、绥农14和合丰35为易感的大豆基因型;农杆菌菌株EHA101对大豆的转化能力好于LBA4404和AGL1;共培养培养基中添加的硫醇类化合物对T-DNA的转移有极强的影响效应。【结论】本实验方法可以优化农杆菌介导的大豆子叶节转化系统。

关键词：大豆子叶节农杆菌转化系统 T-DNA

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根癌农杆菌介导蓝猪耳转化系统的建立

园艺学报 2006年第1期33卷 105-110页

作者：李梅兰王小菁李洪清华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室广州510631

通过对影响根癌农杆菌介导蓝猪耳转化效果各种因素的研究，建立了蓝猪耳高效稳定的遗传转化系统。研究结果表明，农杆菌侵染叶片外植体效率最高；外植体预培养不利于农杆菌的侵染；乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化蓝猪耳的效率。另... 详细信息

通过对影响根癌农杆菌介导蓝猪耳转化效果各种因素的研究，建立了蓝猪耳高效稳定的遗传转化系统。研究结果表明，农杆菌侵染叶片外植体效率最高；外植体预培养不利于农杆菌的侵染；乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化蓝猪耳的效率。另外，菌液浓度、侵染和共培养的时间及再生的途径等均对转化效率有一定的影响。叶片外植体与农杆菌共培养后，经过抗性芽的诱导、根的再生，70d左右就可以获得抗性苗。抗性植株经GUS染色、PCR分析和Southem blot检测，外源基因已经整合到蓝猪耳基因组中，转化频率为7％-8％。

关键词：蓝猪耳根癌农杆菌转化系统菌液浓度

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金色链霉菌转化系统的优化

微生物学通报 2002年第5期29卷 14-17页

作者：孟春郭养浩叶勤石贤爱陈剑峰温藤陈春福州大学侨兴轻工业学院福州350002 华东理工大学生物工程学院上海200237

12 %的蔗糖浓度、 0 5 %甘氨酸、溶菌酶酶解 1h,是金色链霉菌原生质体制备的较优条件。采用麸皮再生培养基替代R2YE再生培养基 ,原生质体再生率、生长及筛选效果得到明显改善。P buffer介导的质粒转化效率高于T buffer,33%的PEG1 0 0 ... 详细信息

12 %的蔗糖浓度、 0 5 %甘氨酸、溶菌酶酶解 1h,是金色链霉菌原生质体制备的较优条件。采用麸皮再生培养基替代R2YE再生培养基 ,原生质体再生率、生长及筛选效果得到明显改善。P buffer介导的质粒转化效率高于T buffer,33%的PEG1 0 0 0是质粒转化金色链霉菌原生质的最适浓度。

关键词：金色链霉菌转化系统优化原生质体麸皮培养基质粒转化

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合成氨转化系统的节能改造

现代化工 2006年第z1期26卷 262-264页

作者：曾凤春张开仕四川理工学院化学系四川自贡643033 宜宾学院化学化工系四川宜宾644007

针对目前国内天然气合成氨装置的转化系统普遍存在燃料天然气消耗过大、热能浪费严重等问题,对合成氨装置转化系统进行了一系列节能技术改造。工业运行结果表明:改造后的转化系统,生产每吨NH3其燃料天然气消耗从350 m3降至200 m3,生产... 详细信息

针对目前国内天然气合成氨装置的转化系统普遍存在燃料天然气消耗过大、热能浪费严重等问题,对合成氨装置转化系统进行了一系列节能技术改造。工业运行结果表明:改造后的转化系统,生产每吨NH3其燃料天然气消耗从350 m3降至200 m3,生产能力从6万t/a提高至9万t/a,基本克服了原装置的弊端。

关键词：转化系统合成氨燃料天然气节能改造

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科技成果向现实生产力转化系统机制研究

科学学与科学技术管理 1999年第11期 24-26页

作者：李钢李林安徽省科委合肥工业大学

欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因转化系统的建立

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东北林业大学学报 2005年第6期33卷 43-44,54页

作者：张国财邹传山王志英东北林业大学哈尔滨150040

通过除菌抗生素的筛选试验、叶片对头孢唑啉钠的敏感试验、叶片对卡那霉素的敏感度试验、茎段对卡那霉素的生根敏感试验,成功建立了欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因的转化系统。转化时所选的除菌抗生素为注射用头孢唑啉钠;... 详细信息

通过除菌抗生素的筛选试验、叶片对头孢唑啉钠的敏感试验、叶片对卡那霉素的敏感度试验、茎段对卡那霉素的生根敏感试验,成功建立了欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因的转化系统。转化时所选的除菌抗生素为注射用头孢唑啉钠;除菌时,头孢唑啉钠的质量浓度为1000mg/L;在筛选转化体时,卡那霉素的临界质量浓度确定为30mg/L;确定了生根培养基中卡那霉素的临界质量浓度为20mg/L。欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因转化系统的成功建立为该杨树品种的基因工程提供了前提条件。

关键词：欧美杨108号敏感试验 Bt-ToxinC+蜘蛛杀虫肽基因转化系统

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番茄子叶外植体转化系统的优化

云南植物研究 2004年第1期26卷 118-120页

作者：江晓玲俞守义贺竹梅彭志强祁瑜第一军医大学热带军队卫生学系流行病学教研室广东广州510515 中山大学生命科学院生物工程中心广东广州510275

目的 :对番茄子叶外植体的转化进行优化 ,为进行转基因番茄的研究奠定基础。方法 :通过正交设计实验 ,以子叶外植体的存活天数为观察指标 ,分别对农杆菌稀释浓度、浸染时间和转化方式等条件进行优化。结果 :在子叶预培养 2d、活化农杆... 详细信息

目的 :对番茄子叶外植体的转化进行优化 ,为进行转基因番茄的研究奠定基础。方法 :通过正交设计实验 ,以子叶外植体的存活天数为观察指标 ,分别对农杆菌稀释浓度、浸染时间和转化方式等条件进行优化。结果 :在子叶预培养 2d、活化农杆菌稀释倍数约 30倍、侵染时间为 1 0min、共培养时间为 2d的情况下 ,子叶存活时间最长 ,抗性芽产生频率达 2 5 %。结论 :获得了高效的番茄子叶外植体转化系统。

关键词：番茄子叶外植体转化系统农杆菌