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透析人体内葡萄糖的跨膜转运方式

生物学教学 2020年第4期45卷 68-70页

作者：龙秋月赵辉广东省深圳市宝安区新安中学深圳518101 广东省深圳大学师范学院附属中学深圳518054

本文对葡萄糖跨膜运输方式进行了系统梳理、概括,为高中生物学一线教师对“物质跨膜运输方式”一节内容的教学提供参考。

关键词：葡萄糖跨膜转运分类机制

PTD-BCR/ABL-OD融合癌蛋白的表达和跨膜转运

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中华血液学杂志 2005年第6期26卷 373-374页

作者：梁英民叶盛开贾洪霞林媛蒋姗姗吴绒丽周鹏杨曦张萍李军锋李军林韩骅第四军医大学唐都医院血液科西安710038 第四军医大学口腔医学院牙体病科第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室

寡聚化结构域(oligomerization domain,OD)是BCR/ABL融合蛋白N端的一个重要结构域,是2个单体通过N末端螺旋易位,然后在C末端螺旋间形成反向卷曲折叠形成二聚体,进而互相叠套形成四聚体.在几种不同类型的Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病(... 详细信息

寡聚化结构域(oligomerization domain,OD)是BCR/ABL融合蛋白N端的一个重要结构域,是2个单体通过N末端螺旋易位,然后在C末端螺旋间形成反向卷曲折叠形成二聚体,进而互相叠套形成四聚体.在几种不同类型的Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病(CML)患者中可以观察到这种四聚体的形成,它能介导BCR/ABL融合蛋白多聚体的形成,进而使无活性的ABL蛋白的酪氨酸激酶活化[1,2].因此,如果能够利用外源性的OD结构域蛋白干预内源性蛋白的聚合,从而达到抑制BCR/ABL蛋白激酶活化的作用.我们在以前工作的基础上,采用PCR扩增OD区基因片段,并在其N端融合蛋白转导结构域(PTD)基因后,构建原核表达载体,然后在大肠杆菌中进行表达.纯化表达的融合蛋白,并加入到培养的K562细胞中,对OD结构域蛋白在细胞中的作用进行了初步探讨。

关键词： PTD—BCR ABL—OD 癌蛋白表达跨膜转运

平行人造膜渗透性测定法研究黄芩苷磷脂复合物的跨膜转运

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华西药学杂志 2011年第6期26卷 528-529页

作者：李楠涂灵叶英杰杨明蒋学华成都中医药大学药学院四川成都611137 四川大学华西药学院四川成都610041 江西中医学院中药现代制剂教育部重点实验室江西南昌330004

目的采用平行人造膜渗透性测定方法研究黄芩苷、黄芩苷磷脂物理混合物、黄芩苷磷脂复合物的跨膜转运。方法取不同pH梯度的三种溶液作为供试品溶液,测定其透膜后接收板及供给板中黄芩苷的含量,计算表观渗透系数(Pe)。结果供给板中溶液为p... 详细信息

目的采用平行人造膜渗透性测定方法研究黄芩苷、黄芩苷磷脂物理混合物、黄芩苷磷脂复合物的跨膜转运。方法取不同pH梯度的三种溶液作为供试品溶液,测定其透膜后接收板及供给板中黄芩苷的含量,计算表观渗透系数(Pe)。结果供给板中溶液为pH7.4时,接收板中未能测到黄芩苷;pH5.8、4.5时,Pe未见显著性差异;pH3.6时,三者的Pe均高于pH5.8、4.5时的Pe。同一pH条件下,三者的Pe均无显著性差异。结论溶液呈碱性状态时,黄芩苷由分子状态转变成离子状态,从而导致透膜能力的下降;当溶液呈酸性时,三者达平衡状态后,其累计吸收量相似。

关键词：黄芩苷磷脂复合物平行人造膜渗透性测定法跨膜转运黄芩苷磷脂复合物

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植物质膜嵌入脂双层及其跨膜转运功能

科学通报 1994年第15期39卷 1416-1419页

作者：裴真明汤章城中国科学院上海植物生理研究所上海200032

研究跨膜转运的三种主要方法是:同位素示踪、荧光猝灭和电生理学测定.平面脂双层系统是用人工脂双层结合电测量来模拟生物膜离子通透的一种电生理学方法,可用于膜片钳技术较难进行的一些膜透性研究领域,如酶动力学、纯化通道蛋白的活力... 详细信息

研究跨膜转运的三种主要方法是:同位素示踪、荧光猝灭和电生理学测定.平面脂双层系统是用人工脂双层结合电测量来模拟生物膜离子通透的一种电生理学方法,可用于膜片钳技术较难进行的一些膜透性研究领域,如酶动力学、纯化通道蛋白的活力检测、难以进行膜片钳的小囊泡等.近几年来已经把叶绿体的类囊体膜、线粒体膜以及液泡膜等嵌入脂双层,并研究了这些膜的离子通透性,但这方面的工作还很少.

关键词：质膜脂双层跨膜转运植物

TAT蛋白转导结构域介导的BCR/ABL融合蛋白在小鼠体内的跨膜转运

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 421-424页

作者：梁英民蒋珊珊孙强刘利刘强陈任安李巧娥韩骅第四军医大学唐都医院血液内科西安710038 第四军医大学基础医学部遗传与发育生物学教研室西安710033

目的　探讨HIV 1反式激活蛋白 (TAT)的蛋白转导结构域 (PTD)介导的BCR ABL(TATPTD BCR ABL)融合蛋白在小鼠体内的跨膜转运和通过血脑屏障作用。方法　在大肠杆菌中表达PTD BCR ABL融合蛋白 ,经Ni NTA树脂亲合层析 ,纯化后的融合蛋白经... 详细信息

目的　探讨HIV 1反式激活蛋白 (TAT)的蛋白转导结构域 (PTD)介导的BCR ABL(TATPTD BCR ABL)融合蛋白在小鼠体内的跨膜转运和通过血脑屏障作用。方法　在大肠杆菌中表达PTD BCR ABL融合蛋白 ,经Ni NTA树脂亲合层析 ,纯化后的融合蛋白经小鼠尾静脉注射体内 ,用免疫组织化学方法对小鼠组织细胞内的PTD BCR ABL融合蛋白进行检测。结果　①表达和纯化了分子量为 2 3× 10 3的PTD BCR ABL融合蛋白 ;②在接受融合蛋白的小鼠肝、脾、肾及心肌组织的细胞内检测到了PTD BCR ABL融合蛋白 ;③接受融合蛋白的小鼠脑组织细胞中可以检测到融合蛋白的存在。结论　PTD可在体内介导较大分子量的融合蛋白进入组织细胞和通过血脑屏障。

关键词：蛋白转导组织细胞血脑屏障 TAT蛋白 BCR/ABL融合蛋白跨膜转运

葡糖转运蛋白1和葡糖转运蛋白2在槲皮苷和异槲皮苷跨膜吸收中的作用

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第3期32卷 192-200页

作者：李素云李峥高薇娜李敬来张振清郭长江首都医科大学附属北京世纪坛医院临床营养科北京100038 军事科学院军事医学研究院环境医学和作业医学研究所天津300050 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的比较槲皮素糖苷衍生物槲皮苷(Que)和异槲皮苷(IQue)在人小肠吸收模型单层Caco-2细胞上的吸收特征,以及葡糖转运蛋白1(GLUT1)和GLUT2在Que和IQue跨膜吸收中的作用,探讨槲皮素糖苷衍生物的跨膜吸收机制。方法采用单层Caco-2细胞,在腔... 详细信息

目的比较槲皮素糖苷衍生物槲皮苷(Que)和异槲皮苷(IQue)在人小肠吸收模型单层Caco-2细胞上的吸收特征,以及葡糖转运蛋白1(GLUT1)和GLUT2在Que和IQue跨膜吸收中的作用,探讨槲皮素糖苷衍生物的跨膜吸收机制。方法采用单层Caco-2细胞,在腔侧或基底侧加入Que或IQue 9.0和18.0 mg·L-1(终浓度,PBS配制),分别于30,60,90,120和150 min,用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法测定对侧PBS中Que或IQue的透过量及其代谢产物槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素生成量。为考察GLUT1和GLUT2在Que和IQue跨膜吸收中的作用,在Que或IQue 9.0 mg·L-1(终浓度)腔侧→基底侧转运过程中,在腔侧预先加入GLUT1和GLUT2特异性抑制剂根皮苷(PHL)和根皮素(Pt)2 mmol·L-1孵育15 min,再加入Que或IQue,分别于30,60,90,120和150 min,用HPLC-MS法测定基底侧Que或IQue的透过量。结果(1)在腔侧→基底侧和基底侧→腔侧双向跨膜转运中,Que和IQue 9.0和18.0 mg·L-1孵育30~150 min,均在对侧检测到二者原形,其透过量与孵育时间正相关,且18.0 mg·L-1组透过量>9.0 mg·L-1组(P跨膜转运中不同方向之间比较,Que和IQue 9.0和18.0 mg·L-1组腔侧→基底侧的透过量均显著高于基底侧→腔侧(P转运孵育90 min时,在腔侧检测到微量的异鼠李亭和柽柳黄素(转运中,在孵育120和150 min时均在对侧检测到微量槲皮素,但低于定量检测限微量槲皮素。IQue 18.0 mg·L-1组在腔侧→基底侧和基底侧→腔侧转运孵育90 min时,均在对侧检测到微量的异鼠李亭和柽柳黄素(转运中槲皮素检测结果与Que相同。(4)Que和IQue 9.0 mg·L-1腔侧→基底侧转运,在30~150 min内,PHL和Pt对Que和IQue跨膜转运均有明显的抑制作用(P转运的抑制率明显高于对IQue的抑制率(P跨膜转运过程中伴有广泛的代谢转化;GLUT1和GLUT2可能同时参与Que和IQue的跨膜转运,且GLUT2在Que跨膜转运中的作用更大,而GLUT1则在IQue跨膜转运中的作用更大。

关键词：槲皮苷异槲皮苷葡糖转运蛋白跨膜转运

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高对称结构纳米载体跨膜转运的分子模拟

军事医学 2019年第5期43卷 369-374页

作者：乔杨徐新喜李蓉赵秀国军事科学院系统工程研究院卫勤保障技术研究所天津300171 武警后勤学院防护医学教研室天津300309

目的研究具有高对称结构纳米载体的跨膜转运过程,对比不同结构纳米载体的直接跨膜优势。方法使用分子动力学中介观模拟常用的耗散粒子动力学方法,研究具有高对称结构(如正二十面体、正十二面体、截角八面体等)的纳米载体的直接跨膜过程... 详细信息

目的研究具有高对称结构纳米载体的跨膜转运过程,对比不同结构纳米载体的直接跨膜优势。方法使用分子动力学中介观模拟常用的耗散粒子动力学方法,研究具有高对称结构(如正二十面体、正十二面体、截角八面体等)的纳米载体的直接跨膜过程,并在3个粒径水平对其进行模拟验证。结果纳米载体的形状对跨膜转运过程有非常重要的影响,在几种常见的高对称结构中,正二十面体形状载体具有较好的穿透能力,正二十面体和正十二面体颗粒的易位过程比球形和椭球颗粒明显更流畅迅速;载体的体积效应规律并不明显,在模拟粒径范围内体积可能并不是影响载体易位的直接因素。结论纳米载体形状因素是影响跨膜转运过程的主要因素,粒径因素可能只起到间接的辅助作用。

关键词：纳米载体高对称结构跨膜转运分子模拟药物释放系统药代动力学耗散粒子动力学

有机阴离子转运体1和3在不同药性中药成分跨膜转运中的作用

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中国临床药理学杂志 2019年第4期35卷 372-376页

作者：王泽武卫党慈小燕崔涛张洪兵李亚卓谷元伊秀林刘睿刘昌孝天津中医药大学中药学院天津300193 天津药物研究院新药评价有限公司国家释药技术及药代动力学重点实验室天津300301 天津药物研究院有限公司天津300193

目的研究有机阴离子转运体1和3(OAT1、OAT3)在不同药性(苦、辛、酸、甘)中药成分的跨膜转运过程中的作用。方法建立OAT1、OAT3过表达单克隆细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3),通过100μmol·L^(-1)不同药性成分对OAT1、OAT3介导放射性标记探... 详细信息

目的研究有机阴离子转运体1和3(OAT1、OAT3)在不同药性(苦、辛、酸、甘)中药成分的跨膜转运过程中的作用。方法建立OAT1、OAT3过表达单克隆细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3),通过100μmol·L^(-1)不同药性成分对OAT1、OAT3介导放射性标记探针底物转运活性的影响,预测各药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用;测定不同药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用的半数抑制浓度(IC_(50));测定OAT1、OAT3过表达细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3)和空白对照(MDCK-Mock、S2-Mock)对不同药性中药成分的摄取情况,判断各药性成分是否为OAT1、OAT3的底物,从而预测OAT1、OAT3在不同药性成分跨膜转运中的作用。结果 100μmol·L^(-1)的辛味药和酸味药对OAT1和OAT3有较强的抑制作用,其中川陈皮素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT1抑制作用的IC_(50)分别是1. 86,2. 88,4. 58和10. 43μmol·L^(-1);欧前胡素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT3抑制作用的IC_(50)分别是3. 15,3. 39,3. 69和3. 93μmol·L^(-1)。与空白对照相比,OAT1转运体细胞对延胡索乙素、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力; OAT3对延胡索乙素、原阿片碱、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力。结论多数辛味药为OAT1、OAT3的转运底物,因此OAT1、OAT3对多数辛味药具有较强的摄取能力;而多数的酸味药为OAT1、OAT3的抑制剂,能够抑制OAT1、OAT3对其他底物的转运活性。

关键词：中药药性有机阴离子转运体跨膜转运抑制作用

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石斛酚、丁香酸的跨膜转运初步研究

石斛酚、丁香酸的跨膜转运初步研究

作者：胡小红广州中医药大学

学位级别：硕士

目的：研究石斛酚、丁香酸的跨膜转运分子机制,为新药创制提供药代动力学依据,为提高靶向细胞内药物浓度和药物靶向疗效奠定坚实的理论基础。方法：1.石斛酚、丁香酸的细胞靶向识别作用：以荧光标记的石斛酚和丁香酸为实验材料,分别与... 详细信息

目的：研究石斛酚、丁香酸的跨膜转运分子机制,为新药创制提供药代动力学依据,为提高靶向细胞内药物浓度和药物靶向疗效奠定坚实的理论基础。方法：1.石斛酚、丁香酸的细胞靶向识别作用：以荧光标记的石斛酚和丁香酸为实验材料,分别与人晶状体上皮细胞(HLEC)、人正常肝细胞(L-02)、人脐静脉血管内皮细胞(EA.hy926)、人肺癌细胞(A549)及人结肠癌细胞(SW480)孵育,比较各组细胞内的荧光强度,对荧光强度进行定量分析,来间接反映两种成分吸收进入细胞的量,进而判断石斛酚和丁香酸是否具有细胞靶向性。2. HLEC细胞内石斛酚、丁香酸吸收转运量的浓度依赖性考察：运用激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)观察HLEC细胞内石斛酚、丁香酸在不同作用浓度下细胞内的荧光分布及强度,探讨两种成分吸收转运进入HLEC细胞的量与其浓度的相关性。3. HLEC细胞内石斛酚、丁香酸吸收量的时间依赖性考察：运用LSCM观察HLEC细胞内石斛酚、丁香酸在不同时间段内细胞内的荧光强度,探讨两种成分吸收转运进入HLEC细胞的量与孵育时间的相关性。4.不同细胞转运抑制剂及特定温度对石斛酚、丁香酸吸收转移进入HLEC细胞的影响：将HLEC细胞与含不同转运抑制剂的培养基孵育2h后,用LSCM观察,比较各组细胞中的荧光强度差异,计算来给你做成分的吸收抑制率。类似的,考察石斛酚、丁香酸吸收转运进入HLEC细胞收温度的影响情况。确定石斛酚、丁香酸的跨膜转运作用方式。5.用原子力显微镜检测石斛酚、丁香酸跨膜运输过程中,HLEC细胞膜表面粗糙度及超微结构的变化。结果：1.石斛酚吸收进入HLEC细胞内的量明显大于EA.hy926细胞,只有少量进入L-02、A549和SW480细胞;丁香酸吸收进入HLEC细胞及L-02细胞内的量明显大于SW480细胞及EA.hy926细胞,仅有少量药物进入A549细胞。2.石斛酚作用于HLEC细胞后,随着浓度的增加细胞内的荧光强度也增强,石斛酚浓度为1μg/ml时HLEC细胞内的吸收量较大,与其它各组相比**P转运过程中HLEC细胞膜表面出现凹坑结构：石斛酚作用后,细胞膜表面出现直径150-300nm,深度40～60nm的小坑,表面粗糙度由17nm变为26nm,细胞膜表面主要突出径粒高度由320～350nm上升到420～450nm,细胞膜表面出现胞吞的凹坑结构。丁香酸作用后,细胞膜表面出现直径125～350nm,深度约45～75nm的凹坑,平均粗糙度由16nm变为28nm,细胞膜表面主要突出径粒高度由105nm上升到210nm,细胞膜表面出现胞吞的凹坑结构。结论：石斛酚、丁香酸均能靶向性识别HLEC细胞,且跨膜进入HLEC细胞主要分布于细胞质内,吸收转运存在时间及浓度依赖性。转运抑制剂及温度对石斛酚、丁香酸的吸收有较大抑制作用。石斛酚、丁香酸跨膜转运过程中HLEC细胞膜表面有凹坑出现。因此,石斛酚、丁香酸跨膜转运方式是主动的、通过能量及网格蛋白载体介导的胞吞作用途径。

关键词：石斛酚丁香酸跨膜转运靶向性 HLEC