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中国当代儿科杂志 2019年第9期21卷 930-935页

作者：孙永红雷晓燕陈星星崔维静刘璟甘肃省人民医院儿科

目的观察干扰素α(INF-α)对乙型肝炎病毒X (HBx)蛋白诱导的小鼠足细胞系(MPC5)凋亡的影响及其分子机制。方法以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平。将MPC5细胞分为对照组:正常条件下培养... 详细信息

目的观察干扰素α(INF-α)对乙型肝炎病毒X (HBx)蛋白诱导的小鼠足细胞系(MPC5)凋亡的影响及其分子机制。方法以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平。将MPC5细胞分为对照组:正常条件下培养的MPC5细胞;INF-α组:正常MPC5细胞与INF-α共培养;HBx组:HBx诱导的MPC5细胞;HBx+INF-α组:HBx诱导的MPC5细胞与INF-α共培养。不同实验条件下干预48 h后,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测足细胞裂孔隔膜相关蛋白(nephrin、CD2AP、synaptopodin)和细胞骨架相关蛋白(TRPC6)的mRNA及其蛋白的表达。结果 pEX-HBx转染MPC5细胞后48 h HBx mRNA表达最高(P 细胞凋亡率显著高于对照组、INF-α组和HBx+INF-α组(P 细胞凋亡,其机制可能与INF-α可调节HBx诱导的足细胞裂孔隔膜相关蛋白(CD2AP、nephrin、synaptopodin)和细胞骨架相关蛋白(TRPC6)的异常表达恢复正常有关。

关键词：干扰素α 乙肝病毒X 蛋白细胞凋亡足细胞系小鼠

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肾小球足细胞系的研究进展

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实用儿科临床杂志 2005年第1期20卷 71-72页

作者：范青锋丁洁北京大学第一医院儿科北京100034

足细胞足突间的裂孔隔膜是肾小球滤过屏障的关键组成部分 ,其成分的阐明使我们对蛋白尿发生机制的研究达到分子水平。足细胞是终末分化细胞 ,不再进行分裂增殖 ,足细胞系的建立为我们理解足细胞生物学及足细胞分子间作用和联系提供很好... 详细信息

足细胞足突间的裂孔隔膜是肾小球滤过屏障的关键组成部分 ,其成分的阐明使我们对蛋白尿发生机制的研究达到分子水平。足细胞是终末分化细胞 ,不再进行分裂增殖 ,足细胞系的建立为我们理解足细胞生物学及足细胞分子间作用和联系提供很好的研究平台。

关键词：肾小球足细胞足细胞系

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地塞米松对嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系保护作用的分子机制研究

地塞米松对嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系保护作用的分子机制研...

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作者：温跃强广州医学院

学位级别：硕士

目的借助小鼠肾小球足细胞系,观察嘌呤霉素(PAN)和地塞米松(DEX)对足细胞凋亡率和足细胞分子表达及分布的影响,探讨DEX保护足细胞的分子机制。方法体外培养足细胞,设立对照组、PAN刺激组和DEX干预组。对照组用含0.02% DMSO的RPMI 1640... 详细信息

目的借助小鼠肾小球足细胞系,观察嘌呤霉素(PAN)和地塞米松(DEX)对足细胞凋亡率和足细胞分子表达及分布的影响,探讨DEX保护足细胞的分子机制。方法体外培养足细胞,设立对照组、PAN刺激组和DEX干预组。对照组用含0.02% DMSO的RPMI 1640培养液培养,PAN刺激组加入PAN,DEX干预组同时加入PAN和DEX,处理后8h,24h和48h观察细胞形态并摄相,采用图像处理软件分析各组细胞形态及胞体面积的差别。采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率,RT-PCR、westernblot和间接免疫荧光染色检测各时间点podocin和CD2AP mRNA、蛋白表达量及分布变化。结果(1)正常足细胞呈星形,胞体大并伸出树枝样突起,相邻细胞间形成相互连接。PAN刺激后细胞胞体明显缩小(P细胞间连接,刺激后48h足细胞凋亡率明显升高(P细胞胞体明显大于刺激组(P足细胞凋亡率显著低于PAN刺激组,podocin和CD2AP mRNA表达及分布趋于正常水平,刺激48h后podocin蛋白表达量显著高于刺激组(P足细胞,抑制PAN对足细胞结构的损伤,降低细胞凋亡率,稳定足细胞特异性分子podocin和CD2AP的表达及分布,从而维持裂孔隔膜(SD)结构和功能的完整,发挥保护足细胞和抗蛋白尿的作用。

关键词：地塞米松(DEX) 嘌呤霉素(PAN) 足细胞系 podocin CD2AP 细胞凋亡

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嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系中podocin表达与分布的影响及其意义

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中华妇幼临床医学杂志（电子版） 2008年第5期4卷 8-11页

作者：温跃强于力温捷郝志宏陈蓉燕王丽娜广州医学院附属广州市第一人民医院儿科广州510180

目的Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)完整性的重要分子,其表达异常与大量蛋白尿的形成有关。本研究采用体外培养肾小球足细胞系,探讨足细胞损伤过程中,podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系。方法将体... 详细信息

目的Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)完整性的重要分子,其表达异常与大量蛋白尿的形成有关。本研究采用体外培养肾小球足细胞系,探讨足细胞损伤过程中,podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系。方法将体外培养的足细胞采用随机数字表法设立为实验组与对照组。实验组采用嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)刺激(剂量为50μg/mL),分别于8 h,24 h和48 h观察细胞形态、提取总RNA和细胞免疫组化观察podocin的分布。对照组用含10%FBS的RPMI 1640培养液培养。细胞图像应用Image J图像处理软件,计算实验组与对照组在上述各时间点200倍镜下随机选择的30个细胞的相对面积,半定量RT-PCR和间接免疫荧光法检测podocin mRNA表达和分布变化。结果对照组呈星形伸出树枝状突起,相邻细胞间形成相互连接。实验组细胞体缩小,足突回缩、消失,细胞间失去相互连接。上述各时间点两组间podocin mRNA表达比较,差异无显著意义(P>0.05)。Podocin在对照组呈细丝状均匀分布于细胞核膜、细胞质及细胞膜;在实验组主要沿细胞核膜呈点线样分布,刺激后8 h和24 h细胞质有少许分布,刺激48 h后出现细胞膜、细胞质分布缺失。结论Podocin分布异常与足细胞损伤密切相关,损伤早期即有变化;podocin分布异常是足细胞损伤过程中的重要分子效应。

关键词：足细胞系 podocin 嘌呤霉素

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