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趋化因子-8对高糖诱导人间充质干细胞损伤的保护作用

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中国老年学杂志 2018年第4期38卷 918-920页

作者：沈雷沙峰孙权张鹏孙石柱张晓东姚立杰李静平齐齐哈尔医学院解剖学教研室黑龙江齐齐哈尔161006

目的探讨趋化因子(CXCL)-8对高糖诱导人间充质干细胞(MSC)损伤的保护作用及机制。方法建立高糖(含30 mmol/L葡萄糖)培养模型;pcD NA3.1质粒转染MSC为CXCL-8-MSC组,仅转染pcD NA 3.1质粒者为pcD NA 3.1组,在CXCL-8-MSC组中添加Triciribin... 详细信息

目的探讨趋化因子(CXCL)-8对高糖诱导人间充质干细胞(MSC)损伤的保护作用及机制。方法建立高糖(含30 mmol/L葡萄糖)培养模型;pcD NA3.1质粒转染MSC为CXCL-8-MSC组,仅转染pcD NA 3.1质粒者为pcD NA 3.1组,在CXCL-8-MSC组中添加Triciribine为Akt抑制剂组。高糖培养条件下,利用CCK8细胞增殖实验、Western印迹或酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测各组MSC增殖的光密度值或Caspase-3、Akt、STAT3和血管内皮生长因子(VEGF)等蛋白的表达。结果高糖环境下,与pcD NA3.1组相比,CXCL-8-MSC组MSC增殖OD值明显升高,Caspase-3蛋白表达明显下降(P8-MSC组Akt、STAT3和VEGF蛋白含量明显高于pcD NA3.1组(P8-MSC组相比,Akt抑制剂组MSC增殖的OD值明显降低,Caspase-3蛋白表达明显升高(P8在高糖环境下,通过Akt-STAT3通路,促进MSC旁分泌VEGF等细胞因子,发挥对MSC的保护作用,对保护移植的MSC对抗糖尿病性损伤具有重要作用。

关键词：趋化因子-8 间充质干细胞高糖 Akt-STAT3通路

甲状腺相关眼病与血清中透明质酸及趋化因子-8水平的相关性研究

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甲状腺相关眼病与血清中透明质酸及趋化因子-8水平的相关性研究

作者：徐文双吉林大学

学位级别：硕士

目的：通过对甲状腺相关眼病(TAO)患者血清中透明质酸(HA)及趋化因子-8(CXCL-8)的表达水平进行检测,对二者与临床活动度评分CAS、NOSPECS评分、眼表功能进行相关性分析,以期待通过检测TAO患者血清中HA、CXCL-8的水平为TAO的活动度提供... 详细信息

目的：通过对甲状腺相关眼病(TAO)患者血清中透明质酸(HA)及趋化因子-8(CXCL-8)的表达水平进行检测,对二者与临床活动度评分CAS、NOSPECS评分、眼表功能进行相关性分析,以期待通过检测TAO患者血清中HA、CXCL-8的水平为TAO的活动度提供辅助诊断依据。方法:选择2017年11月-2018年9月期间于齐齐哈尔市五官医院眼科住院或门诊就诊被确诊为TAO的患者,通过CAS评分后将患者分为活动期组(215例)、非活动期组(203例),同时选择同期在齐齐哈尔市五官医院进行体检的208名符合入组标准的健康人作为对照组。分别收集三组研究人群的相关资料,分别统计临床活动度CAS、NOSPECS评分,并检测眼表功能指标,包括眼表疾病指数、泪液分泌试验长度、角膜荧光染色评分、下泪河高度、睑板腺缺失评分、泪膜破裂时间。同时使用采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测各组血清HA、CXCL-8的水平。使用t检验、方差分析、秩和检验、Pearson及Spearman等进行统计学分析。结果:(1)活动期组患者血清HA的表达水平(65.42±6.41)ug/L明显高于非活动期组(31.34±5.87)ug/L、对照组(30.22±6.08)ug/L,差异具有统计学意义(F=2256.88,P8的表达水平(0.513±0.096)ng/ml明显高于非活动期组(0.386±0.081)ng/ml、对照组(0.371±0.073)ng/ml,差异具有统计学意义(F=182.64,P8的表达水平在正常范围,二者之间的差异无统计学意义。(3)活动期组TAO患者的NOSPECS评分为(4.86±1.46),非活动期组TAO患者的NOSPECS评分为(1.35±1.14),两组NOSPECS评分之间的差异具有统计学意义,t=-27.29,P0,P8的表达水平与CAS评分之间均呈正相关(r>0,P0,P8的表达水平与NOSPECS评分之间均呈正相关(r>0,P0,P8)活动期与非活动期TAO患者血清CXCL-8水平与眼表疾病指数、角膜荧光染色评分、睑板腺缺失评分均呈正相关(r>0,P8两者的表达水平升高。2、活动期与非活动期TAO患者血清中HA、CXCL-8两者的表达水平均与TAO病临床活动期、眼表疾病指数、泪液分泌试验长度、下泪河高度、泪膜破裂时间、角膜荧光染色、睑板腺缺失评分之间有相关性。3、通过对血清中HA、CXCL-8两者的表达水平进行检测,可以作为对TAO患者的活动性、疾病严重情况及眼表功能评估的辅助诊断依据。

关键词：甲状腺相关眼病透明质酸趋化因子-8 相关性研究

宿主因子CXCL8介导多杀性巴氏杆菌毒素的细胞毒性研究

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宿主因子CXCL8介导多杀性巴氏杆菌毒素的细胞毒性研究

作者：李金峰四川农业大学

学位级别：硕士

多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida Toxin,PMT)是多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)产生的重要毒力因子。介导PMT细胞毒性的宿主因子及其机制尚不清,本研究旨在探究宿主细胞趋化因子-8(C-X-C motif chemokine ligand 8,CXCL8)介导重组多杀性巴氏杆菌毒素(Recombinant Pasteurella multocida Toxin,r PMT)的细胞毒性作用及机理。一、成功构建r PMT对猪肾细胞(Porcine kidney-15 cell lines,PK15)的细胞毒性模型。分别以0μg/m L、10μg/m L和30μg/m L的r PMT刺激PK15细胞36 h,接毒后细胞会变圆漂浮、轮廓模糊且间隙扩大,CCK-8法测定细胞存活率分别可达到108.31%、25.11%和10.39%左右,LDH总释放率分别可达到0.41%、19.85%和21.41%左右,且实验组与正常对照组相比细胞存活率和LDH总释放率均达到极显著差异(P因子CXCL8介导了r PMT对PK15的细胞毒性作用。依据构建的细胞毒性模型分别以0μg/m L和30μg/m L的r PMT刺激PK15细胞36 h后,转录组分析发现CXCL8是介导r PMT细胞毒性的关键宿主因子之一,随后利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了PK15ΔCXCL8细胞系,以0μg/m L、10μg/m L和30μg/m L的r PMT刺激PK15ΔCXCL8细胞36 h后发现细胞极少变圆、间隙无明显扩大、轮廓较为清晰但发生一定形变,CCK-8法测定细胞存活率分别为102.67%、127.95%和62.87%,LDH总释放率分别为0.34%、13.23%和17.12%,PK15ΔCXCL8细胞与PK15细胞相比具有明显的抵抗力,证实CXCL8介导了r PMT对PK15细胞的毒性作用。三、揭示了宿主因子CXCL8主要通过凋亡途径介导r PMT的细胞毒性。第1,cxcl8基因敲除后染毒,AO-EB染色显示凋亡细胞比例降低(P因子CXCL8主要通过凋亡途径介导r PMT的细胞毒性。

关键词：趋化因子-8 重组多杀性巴氏杆菌毒素细胞毒性

利肝隆联合异甘草酸镁治疗自身免疫性肝炎患者疗效及其对血清趋化因子水平的影响

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实用肝脏病杂志 2020年第6期23卷 821-824页

作者：王雨王楠王巧侠马清华潘新杰付建军西安交通大学医学院附属西安市中心医院消化科西安市710003 西安交通大学医学院附属西安市中心医院感染病科西安市710003

目的分析应用利肝隆联合异甘草酸镁治疗自身免疫性肝炎(AIH)患者的疗效及其对血清免疫球蛋白和趋化因子-8(CF-8)、CF-2和CF-9水平的影响。方法2017年7月~2019年5月我院感染病科和消化内科收治的AIH患者122例,采用随机数字表法将其分对照... 详细信息

目的分析应用利肝隆联合异甘草酸镁治疗自身免疫性肝炎(AIH)患者的疗效及其对血清免疫球蛋白和趋化因子-8(CF-8)、CF-2和CF-9水平的影响。方法2017年7月~2019年5月我院感染病科和消化内科收治的AIH患者122例,采用随机数字表法将其分对照组61例和观察组61例。在对照组,给予异甘草酸镁注射液治疗,观察组在对照组治疗的基础上给予利肝隆片治疗,两组均治疗3个月。采用ELISA法检测血清CF-8、CF-2和CF-9水平,采用免疫比浊法检测血清免疫球蛋白G(IgG)、IgM和IgA水平。结果在治疗结束时,观察组血清谷丙转氨酶(ALT)水平为(46.3±13.7)U/L,显著低于对照组[(82.5±14.2)U/L,P8)U/L,P8水平为(10.6±2.1)pg/mL,显著低于对照组[(15.8±3.3)pg/mL,P8±1.4)pg/mL,P816.4±311.6)mg/L,P814.1±225.1)mg/L,P8.6)mg/L,显著低于对照组[(749.7±231.9)mg/L,P8.0%,与对照组的4.9%比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用利肝隆联合异甘草酸镁治疗自身免疫性肝炎患者可抑制机体亢进的体液免疫反应,降低CF-8、CF-2和CF-9水平,显著改善患者肝功能,而不会增加用药后不良反应。

关键词：自身免疫性肝炎利肝隆异甘草酸镁趋化因子-8 治疗

A549肺癌细胞条件培养液促进人骨髓间充质干细胞的增殖和迁移

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解剖学杂志 2021年第1期44卷 13-17页

作者：姜杨王璐璐金海峰姚立杰张嵩刘丹阳李永涛张善强沈雷齐齐哈尔医学院解剖学教研室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院细胞生物学教研室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院组织学胚胎学教研室齐齐哈尔161006

目的:探讨A549肺癌细胞对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和运动的影响。方法:以提取A549肺癌细胞和BEAS-2B正常人肺上皮细胞上清液制备条件培养基,培养的hBMSCs分别为A549组和BEAS-2B组;2组均添50 nmol/L趋化因子-8(CXCL-8),分别为A54... 详细信息

目的:探讨A549肺癌细胞对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和运动的影响。方法:以提取A549肺癌细胞和BEAS-2B正常人肺上皮细胞上清液制备条件培养基,培养的hBMSCs分别为A549组和BEAS-2B组;2组均添50 nmol/L趋化因子-8(CXCL-8),分别为A549 C组和BEAS-2B C组,若同时添加100 nmol/L triciribine(Akt抑制剂)分别为A549 CT组和BEAS-2B CT组;A549组加入100 nmol/L triciribine为A549 T组。正常条件下培养的hBMSCs为对照组。ELISA检测细胞上清液中CXCL-8含量和hBMSCs裂解液Akt、P-Akt蛋白的表达。MTT实验、流式细胞仪和transwell细胞小室实验分别检测各组hBMSCs吸光度值(A490值)、细胞凋亡率和细胞迁移数目。结果:与BEAS-2B上清液相比,A549上清液中CXCL-8含量明显升高。各组hBMSCs的A490值、细胞凋亡率、细胞迁移数目、Akt和P-Akt蛋白表达等均具有显著差异,尤以A549 C组hBMSCs最明显。与A549 C组相比,A549 CT组hBMSCs的A490值和细胞迁移数目、Akt和P-Akt蛋白表达均降低,细胞凋亡率升高较显著。结论:A549细胞表达的CXCL-8能激活Akt通路,促进hBMSCs增殖和运动。

关键词：趋化因子-8 人骨髓间充质干细胞 Akt信号通路细胞迁移

不同浓度A549细胞上清液对人骨髓间充质干细胞迁移的影响

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中国医学创新 2020年第36期17卷 26-29页

作者：沈雷姜杨张善强金海峰姚立杰张嵩刘丹阳李永涛王璐璐齐齐哈尔医学院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:验证不同浓度A549细胞上清液对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)迁移的影响.方法:提取A549细胞上清液,以5%和25%条件培养基(CM)培养hBMSCs为5%A549-CM组、25%A549-CM组,正常培养的hBMSCs为对照组.Transwell细胞迁移实验检测各组hBMSCs划... 详细信息

目的:验证不同浓度A549细胞上清液对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)迁移的影响.方法:提取A549细胞上清液,以5%和25%条件培养基(CM)培养hBMSCs为5%A549-CM组、25%A549-CM组,正常培养的hBMSCs为对照组.Transwell细胞迁移实验检测各组hBMSCs划痕面积闭合率;Western blot检测各组hBMSCs中CXCL-8蛋白含量;ELISA检测各组hBMSCs的Erk、p-Erk和PI3K、p-PI3K蛋白的表达.结果:对照组、5%A549-CM组、25%A549-CM组hBMSCs细胞划痕闭合率逐渐升高,差异有统计学意义(P8蛋白表达明显增高(P<0.01).结论:A549细胞上清液能够激活hBMSCs内PI3K-Erk信号通路促进hBMSCs迁移.

关键词：趋化因子-8 人骨髓间充质干细胞细胞迁移 A549细胞