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基于全基因组和转录组的绿豆谷胱甘肽转移酶基因及其对镉胁迫的响应

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西北农业学报 2022年第6期31卷 703-717页

作者：张创娟程斌杨乐冷艳李师翁兰州交通大学生物与制药工程学院兰州730070

以绿豆为材料,运用生物信息学、转录组学和酶学等分析方法,对绿豆GST家族基因结构及其表达蛋白的特征进行分析,并检测镉(Cd)胁迫下GST基因表达谱和酶活性变化。结果表明,绿豆基因组中包含有93个GST基因,分为Tau、Phi、Lambda、Theta、Z... 详细信息

以绿豆为材料,运用生物信息学、转录组学和酶学等分析方法,对绿豆GST家族基因结构及其表达蛋白的特征进行分析,并检测镉(Cd)胁迫下GST基因表达谱和酶活性变化。结果表明,绿豆基因组中包含有93个GST基因,分为Tau、Phi、Lambda、Theta、Zeta、DHAR、EF1Bg、GHRs、mPGES2和TCHQD等10类,以Phi和Tau类基因数最多;不同类基因结构存在较大差异,Tau类和TCHQD类含有2个外显子,Phi类和GHRs类分别含3和5个外显子,其余基因外显子数目在6~10个。其中只有40个基因在绿豆中表达,31个基因在根、茎、叶中都有表达,6个基因选择性表达。Cd胁迫上调大多数基因的表达量,根、茎、叶中被显著上调的GST基因分别为10、8和4个,平均上调倍数为2.17、2.25和3.26;Cd胁迫显著升高根和茎中GST酶活分别达2.14和1.27倍,与基因表达量的变化一致。表明绿豆根中GST基因及其酶活在Cd胁迫响应中起最主要作用。研究结果为植物GST基因的进一步研究和在植物抗逆中生物技术应用提供了科学资料。

关键词：绿豆谷胱甘肽转移酶基因家族镉胁迫

谷胱甘肽转移酶μ基因缺失与肺癌发病的相关性研究

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中华结核和呼吸杂志 1995年第3期18卷 167-169页

作者：孙贵范皮静波郑全美郑美珍原田二下条信弘中国医科大学预防医学系中国医科大学保健科辽宁省肿瘤医院日本筑波大学社会医学系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对１７５例肺癌患者及１０４例正常对照者进行了谷胱甘肽转移酶μ（ＧＳＴμ）基因检测。结果发现，在肺场患者中，ＧＳＴμ基因缺失率达７１．４％，显著高于对照组的５１．９％。按病理分型分析表明... 详细信息

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对１７５例肺癌患者及１０４例正常对照者进行了谷胱甘肽转移酶μ（ＧＳＴμ）基因检测。结果发现，在肺场患者中，ＧＳＴμ基因缺失率达７１．４％，显著高于对照组的５１．９％。按病理分型分析表明，各种病理类型的肺癌ＧＳＴμ基因缺失率均高于对照组，尤以小细胞肺癌最高，达７７．５％。按吸烟及年龄对肺癌患者分层分析表明，吸烟与否与ＧＳＴμ基因分布无关，但低年龄组肺癌患者的ＧＳＴμ基因缺失率达８５．３％，显著高于高年龄组的６８．１％，上述结果提示，ＧＳＴμ基因缺失可能是肺癌发生的重要宿主因素之一。

关键词：谷胱甘肽转移酶基因肺肿瘤癌病因

不同苎麻品种镉胁迫下谷胱甘肽硫转移酶基因的表达特征

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分子植物育种 2022年第21期20卷 6975-6985页

作者：张英石朝艳汪娅梅揭雨成湖南农业大学苎麻研究所长沙410128 湖南省草类作物种质创新与利用工程技术研究中心长沙410128

为了研究苎麻BnGSTs基因在镉毒害过程中的表达模式,本研究以‘湘苎3号’苎麻转录组文库中的8个BnGSTs基因序列为研究对象,采用RT和Real-time PCR技术,以‘石阡竹根麻’、‘宜春红心麻’、‘富顺青麻’和‘中苎1号’为材料,分析这些BnGST... 详细信息

为了研究苎麻BnGSTs基因在镉毒害过程中的表达模式,本研究以‘湘苎3号’苎麻转录组文库中的8个BnGSTs基因序列为研究对象,采用RT和Real-time PCR技术,以‘石阡竹根麻’、‘宜春红心麻’、‘富顺青麻’和‘中苎1号’为材料,分析这些BnGSTs基因在镉胁迫条件下的表达特征。结果发现,BnGSTs1、BnGSTs2、BnGSTs4、BnGSTs6、BnGSTs7、BnGSTs8受镉胁迫积极响应,在根中呈显著增强趋势,表明它们可能与苎麻根抗镉胁迫机制有关;BnGSTs5受镉胁迫在根中表达减弱,暗示BnGSTs5通过抑制表达起作用;BnGSTs2和BnGSTs3的表达水平与苎麻体内的镉富集水平呈正相关,暗示BnGSTs2和BnGSTs3能够影响苎麻对镉的富集。8个BnGSTs基因的表达模式呈现基因型差异性,表明BnGSTs基因应答镉胁迫的表达模式存在基因型差异。

关键词：谷胱甘肽转移酶苎麻品种镉胁迫

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鸡肝脏谷胱甘肽转移酶的荧光光谱分析

光谱学与光谱分析 2007年第1期27卷 99-103页

作者：薛泽春程新胜杨丽文张现席征中国科学技术大学烟草与健康研究中心安徽合肥230052

谷胱甘肽转移酶是生物体内一种重要的解毒酶,排除外源和内源毒素,维护肌体的正常功能。文章从荧光角度研究了谷胱甘肽转移酶光谱性质,得到谷胱甘肽转移酶的三维荧光谱图,确定了色氨酸、酪氨酸的荧光峰,以及肽链骨架荧光峰。根据其峰位... 详细信息

谷胱甘肽转移酶是生物体内一种重要的解毒酶,排除外源和内源毒素,维护肌体的正常功能。文章从荧光角度研究了谷胱甘肽转移酶光谱性质,得到谷胱甘肽转移酶的三维荧光谱图,确定了色氨酸、酪氨酸的荧光峰,以及肽链骨架荧光峰。根据其峰位的红移或蓝移,以及在不同pH条件下氨基酸荧光峰强度、位置变化,推断谷胱甘肽转移酶构象变化以及色氨酸在酶分子中的位置。

关键词：谷胱甘肽转移酶三维荧光肽键色氨酸酪氨酸

谷胱甘肽转移酶T1和M1基因多态性及吸烟与结直肠癌关系的对照研究

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中华肿瘤杂志 2004年第11期26卷 645-648页

作者：陈坤蒋沁婷马新源姚开颜冷曙光俞维萍周海光浙江大学医学院流行病与卫生统计教研室杭州310031 浙江嘉善县肿瘤研究所中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所毒理室

目的　研究谷胱甘肽转移酶 (GSTs)M1、T1基因多态性与结直肠癌易感性的关系。方法12 6例结直肠癌患者和 343例随机抽样的正常对照者 ,应用多重聚合酶链反应 (PCR)方法检测其GSTM1和GSTT1基因多态性 ,采用非条件Logistic回归模型分析基... 详细信息

目的　研究谷胱甘肽转移酶 (GSTs)M1、T1基因多态性与结直肠癌易感性的关系。方法12 6例结直肠癌患者和 343例随机抽样的正常对照者 ,应用多重聚合酶链反应 (PCR)方法检测其GSTM1和GSTT1基因多态性 ,采用非条件Logistic回归模型分析基因型、吸烟情况与结直肠癌患病的关系。结果　GSTM1和GSTT1缺陷型基因型在对照人群中的频率分布为 5 5 .5 %和 2 0 .4 %。在GSTT1缺陷型基因型的人群中 ,GSTM1缺陷型患直肠癌风险是非缺陷型者的 9.74倍 (95 %CI为 1.13～83.85 )。现在吸烟者中 ,GSTM1缺陷型基因型患结肠癌的风险是非缺陷型者的 2 .2 2倍 (P >0 .0 5 ) ;GSTT1缺陷型基因型患结肠癌的风险是非缺陷型者的 4 .5 5倍 (95 %CI为 1.14～ 18.17) ,患直肠癌的风险是非缺陷型者的 4 .6 0倍 (95 %CI为 1.11～ 19.11)。结论　GSTM1和GSTT1缺陷型基因型有可能增加结直肠癌的危险性 ,其危险性主要表现在两者的联合作用上 ;环境暴露因素———吸烟和相关代谢酶多态性也表现出增加结直肠癌危险性的联合作用。

关键词：谷胱甘肽转移酶结肠肿瘤直肠肿瘤吸烟基冈多态性易感性

谷胱甘肽转移酶P1基因多态性与儿童ALL HD-MTX不良反应的关系

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中国肿瘤临床 2014年第21期41卷 1358-1362页

作者：任艳飞袁秀丽岳丽杰邹泽巧谢偲丁慧宋萍刘畅遵义医学院附属深圳市儿童医院儿科研究所广东省深圳市518026 遵义医学院附属深圳市儿童医院血液科广东省深圳市518026 遵义医学院附属深圳市儿童医院急诊科广东省深圳市518026

目的：研究谷胱甘肽转移酶P1（glutathione S-transferase pi，GSTP1）基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）使用大剂量甲氨蝶呤（high-dose methotrexate，HD-MTX）化疗后不良反应的关系。方法：应用巢式PCR（Nest PCR）、变性梯度凝胶电泳（denaturing gel gradient electrophoresis，DGGE）和DNA直接测序技术检测51例儿童ALL GSTP1基因型和等位基因分布频率，按美国国立癌症研究所的常规毒性判定标准（NCICTCAE）对HD-MTX不良反应进行统计分析。结果：筛查出3个GSTP1 SNPs位点即rs1695（A313G）、rs1138272（G439T）和rs4891（T555C）。rs1695/rs4891多态性位点包括32例（62.7%）野生型、16例（31.4%）杂合型和3例（5.9%）纯合型，rs1138272多态性位点仅包括1例（2.0%）杂合型和1例（2.0%）纯合型。3个SNPs位点等位基因频率分别为21.6%、2.9%和21.6%。GSTP1 rs1695/rs4891多态性位点中AG＋GG/TC＋CC基因型与外周血血红蛋白减少有关（OR=0.25，95%CI=0.06～1.00，P=0.049），GSTP1 rs1695/rs4891多态性位点中AG＋GG/TC＋CC基因型与高危组患儿胃肠毒性发生有关（OR=0.125，95%CI=0.02～0.78，P=0.026）。结论：GSTP1 rs1695/rs4891多态性与ALL儿童HD-MTX化疗后外周血血红蛋白降低以及中高危组ALL儿童发生胃肠毒性有关。

关键词：谷胱甘肽转移酶基因多态性急性淋巴细胞白血病甲氨蝶呤不良反应

谷胱甘肽转移酶基因多态、饮食暴露与结直肠癌关系的研究

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中华消化杂志 2004年第6期24卷 377-379页

作者：陈坤蒋沁婷俞维萍马新源姚开颜李其龙郑树浙江大学医学院流行病与卫生统计教研室杭州310031 浙江嘉善肿瘤研究所浙江大学肿瘤研究所

结直肠癌是常见消化道恶性肿瘤之一,谷胱甘肽转移酶(glutathione S-thransferases,GST)是体内重要的Ⅱ相解毒酶家系,参与如多环芳烃、杂环胺等致癌物质的解毒过程,GST Mu(GSTM1)和GST Theta(GSTT1)基因缺失会导致相应酶活性的降低[1].... 详细信息

结直肠癌是常见消化道恶性肿瘤之一,谷胱甘肽转移酶(glutathione S-thransferases,GST)是体内重要的Ⅱ相解毒酶家系,参与如多环芳烃、杂环胺等致癌物质的解毒过程,GST Mu(GSTM1)和GST Theta(GSTT1)基因缺失会导致相应酶活性的降低[1].本研究对象来自浙江省嘉善县,采用以人群为基础的结直肠癌随访队列,进行GSTM1和GSTT1基因多态性、饮食与结直肠癌易感性的病例对照研究。

关键词：结直肠癌谷胱甘肽转移酶饮食 GSTM1 GSTT1 暴露酶基因解毒酶多态酶活性

谷胱甘肽转移酶基因过量表达能加速盐胁迫下转基因拟南芥的生长

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植物生理与分子生物学学报 2004年第5期30卷 517-522页

作者：戚元成张世敏王丽萍王明道张慧河南农业大学生物技术与食品科学学院山东师范大学逆境植物重点实验室济南250014 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所

盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因(glutathione stransferase gene,GST)克隆到植物表达载体pROKⅡ35S启动子的下游,通过农杆菌介导,利用花絮浸泡法转化拟南芥。转化子在含有卡那霉素的培养基上经过筛选以后,将初步验证为阳性的转基因植株通过... 详细信息

盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因(glutathione stransferase gene,GST)克隆到植物表达载体pROKⅡ35S启动子的下游,通过农杆菌介导,利用花絮浸泡法转化拟南芥。转化子在含有卡那霉素的培养基上经过筛选以后,将初步验证为阳性的转基因植株通过PCR-Southern进一步证实。经过选育,筛选并分离到卡那霉素的抗性并且遗传稳定的T_3代纯合子转基因拟南芥品系。通过Northern杂交证实外源基因在转基因拟南芥中表达。在盐胁迫条件下,通过测量转基因植株(GT)和野生型植株(WT)的生物量和谷胱甘肽(氧化型:GSSG;还原型:GSH)发现:转基因植株的生物量较野生型有一定程度的提高;GSSG含量在转基因品系中比野生型的含量明显高。因此,过量表达GST能够提高转基因植株在盐胁迫条件下的生长,而且这很可能是由于还原型谷胱甘肽被氧化的结果。

关键词：谷胱甘肽转移酶盐胁迫拟南芥过量表达

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人谷胱甘肽硫转移酶的克隆表达及活性鉴定

浙江大学学报（医学版） 2014年第2期43卷 168-174页

作者：柴晓鹃胡海红余露山曾苏浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室浙江省抗肿瘤药物临床前研究重点实验室

目的：克隆表达人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1，用于研究化合物的代谢途径。方法：采用反转录PCR得到人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1基因全长cDNA。将测序正确的cDNA连接到pET-28 a阳性表达载体上并在大肠杆菌BL21（ ... 详细信息

目的：克隆表达人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1，用于研究化合物的代谢途径。方法：采用反转录PCR得到人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1基因全长cDNA。将测序正确的cDNA连接到pET-28 a阳性表达载体上并在大肠杆菌BL21（ DE3）中稳定表达。利用亲和色谱纯化表达得到重组酶，以2，4-二硝基氯苯为底物，测定340 nm波长处吸收度的变化，检测酶活性。结果：PCR产物与克隆载体pMD19-T连接后的质粒测序结果表明，目的基因的cDNA序列完全正确。表达质粒在大肠杆菌BL21（ DE3）中获得良好的可溶性表达，经镍离子亲和柱纯化后目的蛋白较纯，具有较好的催化活性。所表达的 hGSTA1、hGSTT1和hGSTP1酶比活性分别为17．55、0．02、18．75μmol· min-1· mg-1蛋白。结论：成功构建了人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1的原核表达系统，得到的重组酶可用于药物代谢研究。

关键词：谷胱甘肽转移酶生物合成克隆,分子基因表达色谱法,亲和基因扩增质粒逆转录聚合酶链反应