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谷胱甘肽巯基转移酶对肿瘤化疗药物耐药的影响

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中华乳腺病杂志（电子版） 2013年第3期7卷 55-60页

作者：钱学珂廖宁广东省医学科学院广东省人民医院肿瘤中心乳腺科广州510080

肿瘤对化疗药物的内源性或获得性的耐药是目前肿瘤化疗失败的重要原因。耐药现象产生的原因有多种：多药耐药相关蛋白表达变化，药物代谢或摄取发生变化，药物靶标分子的突变、增殖或凋亡关键基因（如p53）的改变造成细胞逃避凋亡，药... 详细信息

肿瘤对化疗药物的内源性或获得性的耐药是目前肿瘤化疗失败的重要原因。耐药现象产生的原因有多种：多药耐药相关蛋白表达变化，药物代谢或摄取发生变化，药物靶标分子的突变、增殖或凋亡关键基因（如p53）的改变造成细胞逃避凋亡，药物解毒酶如谷胱甘肽巯基转移酶（glutathionine S—transferase，GST）的过表达等。本文就GST对肿瘤化疗耐药性的影响的相关研究作一综述。

关键词：谷胱甘肽巯基转移酶肿瘤抗药性

肠毒素大肠杆菌耐热肠毒素与谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白的制备和耐热肠毒素抗体测定

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中国免疫学杂志 2005年第8期21卷 617-618页

作者：郑继平刘向昕王令春王芃李淑琴张兆山军事医学科学院生物工程研究所北京100071

目的:弥补ST的弱抗原性,实现ST抗体测定。方法:采用生物工程技术,融合表达GST和带有前导序列的突变耐热肠毒素proSTm,制备ST融合蛋白,测定ST抗体。结果:测到了抗ST的血清IgG和黏膜IgA。结论:融合蛋白GST/proSTm能有效提高ST的抗原活性,... 详细信息

目的:弥补ST的弱抗原性,实现ST抗体测定。方法:采用生物工程技术,融合表达GST和带有前导序列的突变耐热肠毒素proSTm,制备ST融合蛋白,测定ST抗体。结果:测到了抗ST的血清IgG和黏膜IgA。结论:融合蛋白GST/proSTm能有效提高ST的抗原活性,可直接用于ST抗体测定。

关键词：耐热肠毒素谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白抗体测定

谷胱甘肽巯基转移酶基因型与儿童急性淋巴细胞白血病化疗相关毒副反应的关系

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中国小儿血液与肿瘤杂志 2010年第6期15卷 258-261,272页

作者：钱晓文高怡瑾朱晓华陆凤娟夏婕琪高帅陈笑韵复旦大学附属儿科医院血液肿瘤科上海201102

目的探讨谷胱甘肽巯基转移酶(GST)基因型与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗相关毒副反应的关系。方法随机抽取2003年1月-2008年12月间在复旦大学附属儿科医院血液肿瘤科接受化疗的80例ALL患儿,应用PCR方法进行GSTT1和GSTM1基因型检测,... 详细信息

目的探讨谷胱甘肽巯基转移酶(GST)基因型与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗相关毒副反应的关系。方法随机抽取2003年1月-2008年12月间在复旦大学附属儿科医院血液肿瘤科接受化疗的80例ALL患儿,应用PCR方法进行GSTT1和GSTM1基因型检测,分析GST基因型与诱导化疗和大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)化疗相关毒副反应的关系。结果检出GSTT1缺失基因型11例(13.8%),GSTM1缺失基因型27例(33.8%)。诱导化疗期中高危组GSTM1缺失基因型患儿肝损害发生率显著高于GSTM1非缺失基因型患儿(53.3%vs10.3%,P=0.011)。GSTT1和GSTM1基因型与标危组诱导化疗和HD-MTX化疗相关肝损害的发生无关,与化疗相关感染的发生也无关。结论 GSTM1基因型与接受较强烈诱导化疗的ALL中高危组患儿化疗相关肝损害的发生相关。

关键词：谷胱甘肽巯基转移酶基因型急性淋巴细胞白血病化疗儿童

谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性在原发性肝细胞癌人群中的研究

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中国实验诊断学 2012年第4期16卷 660-662页

作者：唐耘天李辛平刘天奇杨建荣罗建强梁中骁广西壮族自治区人民医院肝胆外科广西南宁530021

目的探讨原发性肝细胞癌人群中谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性与肝癌发生、发展的关系。方法我院2008年10月-2010年4月收治的原发性肝癌患者与健康体检者各150名,提取血样,利用多重PCR和限制性片段长度多态性检测法分别检测肝癌人群与体... 详细信息

目的探讨原发性肝细胞癌人群中谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性与肝癌发生、发展的关系。方法我院2008年10月-2010年4月收治的原发性肝癌患者与健康体检者各150名,提取血样,利用多重PCR和限制性片段长度多态性检测法分别检测肝癌人群与体检健康者的谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性,并进行对比分析。结果该肝癌人群中:谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性型别在病例和对照组研究对象中出现的频率无显著性差别,P>0.05;GSTM1-null、GSTT1-null、GST01-Ala140Asp、GSTP1-Ile105Val的多态性情况与该地区已有的报道一致。结论谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性与肝癌的发生、发展无明确的相关关系。

关键词：原发性肝细胞癌谷胱甘肽巯基转移酶基因多态性

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越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因的克隆及表达

吉林农业大学学报 2017年第4期39卷 423-431页

作者：刘禹姗陈丽邓宇蔡莉李亚东孙海悦吉林农业大学园艺学院长春130118

以越橘(Vaccinium L.)品种"北陆"为试材,采用反转录PCR克隆技术成功克隆越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因c DNA全长序列,获得一个完整的编码区c DNA序列,长为690 bp,编码229个氨基酸,将其命名为VcGSTU1(Gen Bank登录号KT601064)。经与谷胱甘... 详细信息

以越橘(Vaccinium L.)品种"北陆"为试材,采用反转录PCR克隆技术成功克隆越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因c DNA全长序列,获得一个完整的编码区c DNA序列,长为690 bp,编码229个氨基酸,将其命名为VcGSTU1(Gen Bank登录号KT601064)。经与谷胱甘肽巯基转移酶家族其他成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定VcGSTU1属于谷胱甘肽巯基转移酶Tau家族。生物信息学分析表明,该蛋白不稳定指数为28.80,属于稳定蛋白。预测该蛋白分子量为25.499 ku,等电位点为5.68。蛋白质序列同源比对发现其含有完整的GST-N-Tau和GST-C-Tau结构域。利用反转录PCR和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)2种方法分析谷胱甘肽巯基转移酶的表达模式,该基因在越橘的根、茎、叶芽、叶、花芽、绿果、粉果、蓝果、蓝果果皮、蓝果种子中均有表达,且在蓝果种子中相对表达量最高。

关键词：越橘花青素谷胱甘肽巯基转移酶基因克隆基因表达

与茶树中类黄酮化合物转运相关的谷胱甘肽巯基转移酶（GSTs）基因...

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作者：江涵安徽农业大学

学位级别：硕士

类黄酮化合物是一类重要的植物次生代谢产物,在植物细胞中,类黄酮化合物在细胞质不同位点合成,再转移至液泡或其它膜隔区中储存,谷胱甘肽酰基转移酶（Glutathione S-transferases,GST）在其中起重要作用。茶树的类黄酮生物合成途径已经... 详细信息

类黄酮化合物是一类重要的植物次生代谢产物,在植物细胞中,类黄酮化合物在细胞质不同位点合成,再转移至液泡或其它膜隔区中储存,谷胱甘肽酰基转移酶（Glutathione S-transferases,GST）在其中起重要作用。茶树的类黄酮生物合成途径已经较为清晰,然而涉及类黄酮转运蛋白尚未得到深入研究。本文围绕茶树GST开展研究,旨在为类黄酮转运提供理论依据。主要研究结果如下:1.利用生物信息学技术,从积累高含量花青素的茶树材料的转录组数据中,筛选获得三条相关的CsGST基因,并命名为CsGSTa,CsGSTb和CsGSTc。2.利用原核表达,获得到重组蛋白rCsGSTs。酶活检测结果表明,三个rCsGSTs均具有谷胱甘肽酰基转移酶活性。色氨酸的荧光淬灭实验显示,三个rCsGSTs能与供试类黄酮结合,表明它们对花青素有很强的亲和力。分子对接模拟结果表明,CsGSTa、CsGSTb和CsGSTc对接GSH和Q会发生结合位点重叠。MVD分值评估结果表明,GSTa、GSTb、GSTc与Cya的亲和力最强,其次是GSH。3.构建了植物异元表达载体,并转化拟南芥和烟草。结果表明,CsGSTa、CsGSTb和CsGSTc能互补拟南芥突变体TT19的表型。拟南芥突变体互补实验也证明,CsGSTs参与了拟南芥花青素和原花青素积累的调控。CsGSTs过表达的烟草花瓣中的花青素和黄酮醇含量均高于野生型烟草G28,特别是槲皮素-3-O-葡糖苷、山奈酚-3-O-葡糖苷、花青素-3-芸香糖甙。本氏烟瞬时表达发现,CsGSTs基因的表达定位在细胞质和细胞膜上。上述结果表明,茶树3个CsGSTs可能参与了茶树花青素、黄酮醇和原花青素的转运与积累。

关键词：茶树谷胱甘肽巯基转移酶类黄酮酶活性功能验证

双歧杆菌对人大肠癌HT_(29)细胞谷胱甘肽巯基转移酶基因的诱导表达

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中国微生态学杂志 2000年第1期12卷 17-18页

作者：唐立赵宝昌崔秀云大连医科大学微生态研究所大连116027 大连医科大学生化教研室

应用北杂交技术研究双歧杆菌对大肠癌HT29细胞谷胱甘肽巯基转移酶基因的诱导表达发现:双歧杆菌及其发酵过滤液在作用HT29细胞2小时后,谷胱甘肽巯基转移酶基因的mRNA分别提高1.4倍和1.3倍,提示诱导谷胱甘肽巯基转移酶基因的高效表达,阻... 详细信息

应用北杂交技术研究双歧杆菌对大肠癌HT29细胞谷胱甘肽巯基转移酶基因的诱导表达发现:双歧杆菌及其发酵过滤液在作用HT29细胞2小时后,谷胱甘肽巯基转移酶基因的mRNA分别提高1.4倍和1.3倍,提示诱导谷胱甘肽巯基转移酶基因的高效表达,阻断外来致癌物的亲核攻击可能是双歧杆菌抗肿瘤的一个分子机制。

关键词：双歧杆菌谷胱甘肽巯基转移酶诱导表达大肠癌

乳腺癌患者血浆多药耐药基因谷胱甘肽巯基转移酶活性分析及其临床应用

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临床医药实践 2009年第10期18卷 733-735页

作者：田学智范凝芳许慧娟山西省肿瘤医院山西太原030013

目的:通过对乳腺癌患者血浆样本中多药耐药基因谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性检测,掌握治疗过程中耐药信息的变化,为临床治疗提供参考依据。方法:采用生化反应方法,将血浆样本与化学试剂加在一起混匀,根据反应前后透光率的不同,计算每个... 详细信息

目的:通过对乳腺癌患者血浆样本中多药耐药基因谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性检测,掌握治疗过程中耐药信息的变化,为临床治疗提供参考依据。方法:采用生化反应方法,将血浆样本与化学试剂加在一起混匀,根据反应前后透光率的不同,计算每个样本GST活性。结果:治疗前GST活性平均为(842±606)nmol·min-1·mL-1,化疗3个周期后GST活性平均为(796±587)nmol·min-1·mL-1。有淋巴结转移与无淋巴结转移者相比较,治疗前GST活性差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌患者血浆GST活性测定,对乳腺癌化疗用药选择及预后具有参考价值。

关键词：多药耐药基因谷胱甘肽巯基转移酶乳腺癌

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人源内皮抑素在大肠杆菌中的可溶性表达

食品与发酵工业 2022年第16期48卷 1-10页

作者：张吉吴志勇朱玲玉辛瑜顾正华石贵阳张梁粮食发酵工艺与技术国家工程实验室(江南大学) 江苏无锡214122 江南大学生物工程学院江苏无锡214122

为高效制备人源内皮抑素(human endostatin,hEDN),解决其在大肠杆菌中的可溶性表达。该研究在大肠杆菌BL21(DE3)中分别构建了hedn单基因、融合标签共表达和融合表达系统,将重组菌在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalac... 详细信息

为高效制备人源内皮抑素(human endostatin,hEDN),解决其在大肠杆菌中的可溶性表达。该研究在大肠杆菌BL21(DE3)中分别构建了hedn单基因、融合标签共表达和融合表达系统,将重组菌在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导下进行摇瓶发酵,通过SDS-PAGE分析及串联飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight/ionization time of flight,MALDI-TOF/TOF)鉴定hEDN的表达情况。结果表明,在构建的重组菌中只有含有谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)促溶标签的重组菌株BL21(DE3)/pGEX-6p-1-hedn能成功实现hEDN融合蛋白的可溶性表达。进一步地,通过改变诱导温度、诱导时间、诱导剂IPTG浓度及加入诱导剂IPTG时间来优化hEDN融合蛋白的表达条件,最终确定hEDN融合蛋白的最佳发酵条件为20℃,8~12 h加入0.3 mmol/L IPTG诱导36 h。通过亲和层析(PrePack GSH Purose 4 Fast Flow预装柱)初步纯化得到hEDN融合蛋白,经重组PreScission蛋白酶(PreScission protease,PPase)酶切后得到分子质量约为22 kDa的目的条带,与hEDN理论分子质量相一致。该研究为人源多肽的可溶性表达与纯化提供了研究思路,同时对微生物发酵制备功能性多肽具有一定的借鉴意义。

关键词：人源内皮抑素可溶性表达融合标签谷胱甘肽巯基转移酶多肽